动物实验皮肤刺激的原理
搔爬反射实验报告
一、实验目的1. 研究搔爬反射的发生机制。
2. 观察和分析搔爬反射在不同动物中的表现。
3. 探讨搔爬反射在动物行为中的作用。
二、实验原理搔爬反射是一种简单的、不受大脑控制的反射，它是由脊髓直接控制的。
当动物的皮肤或黏膜受到刺激时，脊髓会自动产生搔扒动作，以减轻刺激带来的不适。
搔爬反射在许多动物中普遍存在，是动物自我保护的一种本能行为。
三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍、小鼠、家兔等。
2. 实验器材：硫酸、滤纸、镊子、剪刀、放大镜、显微镜等。
3. 实验环境：实验室、动物饲养室等。
四、实验步骤1. 准备阶段：- 对实验动物进行编号，确保实验过程的公正性。
- 熟悉实验器材的使用方法。
2. 实验阶段：- 将硫酸滴在实验动物的不同部位，观察动物的搔爬反射。
- 使用放大镜和显微镜观察搔爬反射的具体动作。
- 对不同动物的搔爬反射进行记录和比较。
3. 数据分析阶段：- 统计不同动物的搔爬反射次数、持续时间等数据。
- 分析不同动物搔爬反射的差异，探讨其可能的原因。
五、实验结果1. 蟾蜍：- 当硫酸滴在蟾蜍背部时，蟾蜍会迅速用后肢搔扒受刺激的部位，持续时间约为10秒。
- 使用放大镜观察，发现蟾蜍的搔扒动作主要由后肢肌肉收缩完成。
2. 小鼠：- 当硫酸滴在小鼠背部时，小鼠会立即用前肢和后肢搔扒受刺激的部位，持续时间约为15秒。
- 使用显微镜观察，发现小鼠的搔扒动作主要由肌肉和关节协调完成。
3. 家兔：- 当硫酸滴在家兔背部时，家兔会先用头部搔扒受刺激的部位，然后逐渐改为用四肢搔扒，持续时间约为20秒。
- 使用放大镜观察，发现家兔的搔扒动作主要由颈部肌肉和四肢肌肉协调完成。
六、实验讨论1. 搔爬反射是动物自我保护的一种本能行为，它有助于减轻刺激带来的不适。
2. 不同动物的搔爬反射表现存在差异，这与动物的种类、神经系统结构和功能有关。
3. 搔爬反射的发生机制可能与脊髓的反射弧有关，即当皮肤或黏膜受到刺激时，神经冲动会通过传入神经传递到脊髓，脊髓再通过传出神经控制肌肉产生搔扒动作。
《动物毒理实验》课件：实验3 皮肤刺激性试验
皮肤刺激强度分级
皮肤局部反应
无刺激性 轻度刺激性
无异常改变 充血、红斑
中等刺激性
红斑，少量小出血点，水肿， 少量丘疹以及小水疱
强刺激性
红斑，皮下出血，水肿，有很 多小水疱并有可能合并成大水 疱，糜烂，表皮剥落，有溃疡 形成等
评分 0 <2
2~6
>6
方法评价
皮肤刺激试验的结果不仅与检测技术有关， 也与试验过程中的质量控制相关。
经4~8h后，除去斑贴物，每24h观察一次各小区皮肤的局部 反应，连续观察4d，按皮肤刺激反应评分（表1），定量地 评定受试化学物对皮肤局部刺激作用的强度。红斑通过肉眼 观察，水肿通过轻轻触摸的方法来评分。
表1 皮肤刺激强度反应评分
皮肤反应强度
评分
无红斑
极轻微红斑（勉强可见）
1
A.红斑和 边界清晰的红斑（明显红斑，淡红至鲜红色） 2
本法与局部全封闭斑贴法不同之处在于： 1.每组的白色家兔数不应少于3只； 2.采用纱布作斑贴物，在无刺激作用的前提下，用半封
闭敷料固定； 3.斑贴不需要在擦伤皮肤上进行； 4.斑贴4h，然后去掉斑贴并清洗皮肤，观察0.5h、1h、
24h、48h和72h后的皮肤反应。 皮肤刺激反应评分同全封闭法。
结果分析
皮肤刺激试验又称皮肤原发性刺激试验。
试验目的
了解受试化学物对皮肤的直接刺激作 用以及刺激强度。
试验材料——实验动物
实验动物：成年白色家兔或白色豚鼠， 首选白色家兔。
在皮肤刺激试验中，动物品种的选择 很重要。目前多选用兔和豚鼠，对于 强刺激或无刺激作用的化学物选用家 兔检测效果好，但对作用缓和的刺激 性化学物，选用豚鼠所获得的试验结 果较准确。
家兔大脑皮层运动区的刺激效应及去大脑僵直的观察
姓名*** 系年级********* 学号***********科目动物生理学实验同组者***、*** 日期*********** 家兔大脑皮层运动区的刺激效应及去大脑僵直的观察【实验目的】1. 学习哺乳动物的开颅方法。
2. 观察大脑皮层运动区的刺激效应。
3. 观察去大脑僵直现象，了解中枢对肌紧张的调节。
【实验原理】大脑皮层运动区（cortical motor area）是躯体运动机能的高级中枢，点刺激该区域的不同部位，可以引起躯体不同部位的肌肉运动。
从中脑四叠体（quadrigeminal bodies）的前、后丘之间切断脑干的动物，称去大脑动物。
由于神经系统内，中脑以上水平的高级中枢对肌紧张的抑制作用被阻断，而中脑以下各级中枢对肌紧张的易化作用相对加强，因此出现了肌紧张亢进的现象。
动物表现为四肢僵直，头向后仰，尾向上翘的角弓反张状态，称为去大脑僵直（decerebrate rigidity）。
【实验材料】1.材料：家兔。
2.器具：兔体手术台，常用手术器械，剪毛剪，解剖刀，咬骨钳，止血钳，棉花，棉线，三通气管插管，银丝电极（双电极）。
3.试剂：20﹪氨基甲酸乙酯，石蜡油，生理盐水。
【实验步骤】1. 麻醉：取一只家兔，抓取称重，耳缘静脉注射20﹪氨基甲酸乙酯（5g/1kg体重）。
2. 气管插管：将麻醉后的兔子背位固定于手术台上，用剪毛剪将颈部的毛剪去，再用手术刀由颈部向后切开皮肤，用止血钳夹住切开的皮肤，放在两侧，再用止血钳向下插入肌肉，撑开肌肉3~4cm，可看到气管和两根颈总动脉。
分开食管和气管，穿2条线，将2条线前后分开备用。
在气管上切一个‘T’形切口，插入三通气管插管，分别在插管的上方和下方结扎固定。
在2条颈总动脉下方分别穿线备用，用蘸了生理盐水的棉花盖在颈总动脉上，避免干燥。
3. 大脑皮层运动区的刺激效应：将兔子改为腹位固定，用剪毛剪将头顶部被毛剪去，再用手术刀由眉间至枕骨部纵向切开皮肤，用棉花用力向两侧擦开颅骨表面的肌肉，暴露额骨及顶骨。
急性皮肤刺激性或腐蚀性试验.doc
四、皮肤刺激性/腐蚀性试验Dermal Irritation/Corrosion Test1 范围本规范规定了动物皮肤刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。
本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。
2 规范性引用文件OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No.404, July 1992)USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines (Series 870. 2500, Aug. 1998 )3 试验目的确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物皮肤局部是否有刺激作用或腐蚀作用及其程度。
4 定义4.1 皮肤刺激性(Dermal irritation)：皮肤涂敷受试物后局部产生的可逆性炎性变化。
4.2 皮肤腐蚀性(Dermal corrosion)：皮肤涂敷受试物后局部引起的不可逆性组织损伤。
5试验的基本原则将受试物一次(或多次)涂敷于受试动物的皮肤上，在规定的时间间隔内，观察动物皮肤局部刺激作用的程度并进行评分。
采用自身对照，以评价受试物对皮肤的刺激作用。
急性皮肤刺激性试验观察期限应足以评价该作用的可逆性或不可逆性。
6 试验方法6.1 受试物液体受试物一般不需稀释，可直接使用原液。
若受试物为固体，应将其研磨成细粉状，并用水或其它无刺激性溶剂充分湿润，以保证受试物与皮肤有良好的接触。
使用其它溶剂，应考虑到该溶剂对受试物皮肤刺激性的影响。
受试物为强酸或强碱（pH值≤2或≥11.5），可以不再进行皮肤刺激试验。
此外，若已知受试物有很强的经皮吸收毒性，经皮LD50小于200mg/kg体重或在急性经皮毒性试验中受试物剂量为5000mg/kg体重仍未出现皮肤刺激性作用，也无需进行急性皮肤刺激性试验。
6.2 实验动物和饲养环境多种哺乳动物均可被选为实验动物，首选白色家兔。
应使用成年、健康、皮肤无损伤的动物，雌性和雄性均可，但雌性动物应是未孕和未曾产仔的。
急性皮肤实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过急性皮肤刺激试验，评估受试物质对皮肤的直接刺激作用，了解其在接触皮肤后可能引起的急性损伤情况。
实验依据《消毒技术规范》（2002年版）和相关标准进行。
二、实验材料1. 受试物质：[受试物质名称]，[受试物质浓度]。
2. 实验动物：豚鼠，体重200-250g，雌雄各半。
3. 实验设备：皮肤刺激试验箱、皮肤刺激试验板、分析天平、计时器、显微镜等。
4. 实验试剂：生理盐水、蒸馏水、棉签、酒精棉球、纱布等。
三、实验方法1. 实验动物分组：将豚鼠随机分为三组，每组10只，分别为受试物质组、溶剂对照组和生理盐水对照组。
2. 皮肤准备：将豚鼠置于皮肤刺激试验箱中，去除体毛，使皮肤暴露。
用酒精棉球清洁皮肤，待酒精挥发后，用纱布轻轻擦拭。
3. 受试物质涂抹：将受试物质[受试物质名称]按[受试物质浓度]要求，均匀涂抹于豚鼠皮肤上，面积为2cm×2cm。
溶剂对照组涂抹相同浓度的溶剂，生理盐水对照组涂抹等量生理盐水。
4. 涂抹时间：将受试物质涂抹于豚鼠皮肤后，用敷料覆盖固定，粘贴时间为4小时。
5. 观察与记录：涂抹受试物质后，每隔24小时观察豚鼠皮肤情况，记录红斑、水肿等皮肤刺激反应。
观察期为14天。
6. 结果评价：根据观察结果，按照皮肤刺激试验评价标准对受试物质进行评价。
四、实验结果1. 受试物质组：在涂抹受试物质后，豚鼠皮肤出现明显红斑、水肿，程度随时间逐渐加重。
在第7天时，红斑面积最大，水肿程度最严重。
2. 溶剂对照组：在涂抹溶剂后，豚鼠皮肤无明显变化。
3. 生理盐水对照组：在涂抹生理盐水后，豚鼠皮肤无明显变化。
五、讨论本次实验结果显示，受试物质[受试物质名称]对豚鼠皮肤具有明显的急性刺激作用。
涂抹受试物质后，豚鼠皮肤出现红斑、水肿，程度随时间逐渐加重。
这与受试物质的化学性质有关，可能与其释放的活性物质或对皮肤的直接刺激作用有关。
根据实验结果，受试物质[受试物质名称]的急性皮肤刺激强度为[评价等级]，建议在使用过程中加强防护措施，避免直接接触皮肤。
皮肤黏膜刺激实验报告
一、实验目的本研究旨在评估某新型化学物质对皮肤和黏膜的刺激性，为该化学物质的安全评价提供科学依据。
二、实验材料1. 受试化学物质：某新型化学物质（以下简称化学物质A）2. 实验动物：家兔（雌性，体重2.5kg左右）3. 试剂与仪器：生理盐水、脱脂棉、敷料、显微镜、病理切片机、病理显微镜等4. 实验环境：温度20-25℃，相对湿度40-70%三、实验方法1. 皮肤刺激试验（1）将家兔随机分为两组，每组6只，分别命名为A组和B组。
（2）A组为受试组，将化学物质A配制成0.5%的溶液；B组为对照组，使用等量的生理盐水。
（3）将受试溶液和生理盐水分别涂抹在受试家兔的背部皮肤上，面积约为1cm²，厚度约0.1cm。
（4）涂抹后，用敷料覆盖固定，粘贴时间为4小时。
（5）4小时后，去除敷料，观察并记录皮肤反应。
2. 黏膜刺激试验（1）将家兔随机分为两组，每组6只，分别命名为C组和D组。
（2）C组为受试组，将化学物质A配制成0.5%的溶液；D组为对照组，使用等量的生理盐水。
（3）将受试溶液和生理盐水分别滴入受试家兔的鼻腔，剂量约为0.1ml。
（4）滴入后，观察并记录鼻腔黏膜反应。
（5）1小时后，重复滴入受试溶液和生理盐水，观察并记录鼻腔黏膜反应。
四、实验结果1. 皮肤刺激试验（1）A组：受试家兔背部皮肤出现红斑、水肿，部分家兔出现瘙痒。
（2）B组：受试家兔背部皮肤无异常反应。
2. 黏膜刺激试验（1）C组：受试家兔鼻腔黏膜出现充血、水肿，部分家兔出现打喷嚏、流涕。
（2）D组：受试家兔鼻腔黏膜无异常反应。
五、实验结论1. 化学物质A对家兔皮肤具有刺激性，表现为红斑、水肿、瘙痒等症状。
2. 化学物质A对家兔鼻腔黏膜具有刺激性，表现为充血、水肿、打喷嚏、流涕等症状。
六、实验讨论1. 本实验结果表明，化学物质A对家兔皮肤和黏膜具有刺激性，提示该化学物质在实际应用中可能对人体造成潜在危害。
2. 皮肤刺激试验和黏膜刺激试验结果表明，化学物质A的刺激性与其浓度和接触时间有关。
《动物毒理实验》课件：实验3 皮肤刺激性试验
目录
试验原理 试验目的 试验材料 试验方法 结果分析 方法评价
试验原理
局部刺激试验是毒理学试验中的一项重要内 容，对可能具有局部刺激作用的化学物必须 进行此项试验，但对具有强酸（pH≤2 ）或 强碱（pH≥11.5 ）性质的化学物不需做本 试验，因为这些化学物属于腐蚀性物质。另 外，已知具有高毒性的化学物也不必进行皮 肤刺激试验。
凡是杀虫剂、杀真菌剂、杀鼠剂以及具有刺 激性的兽药等化学物均需进行局部皮肤刺激 试验，以保护接触人员的健康。
试验药物的量一般以0.5ml或0.5g为宜，评 价固体受试化学物时不一定要将其配成溶液， 具体可酌情而定。
将表1中A项和B项评分结果相加，凡总分低 于2分者可视为无刺激性或轻度刺激性； 2~6分之间者具有中等刺激性；6分以上者 具有强刺激性。
刺激性极强的物质，试用前需经适当稀释后 再进行斑贴，如稀释用的溶剂本身具有刺激 作用，则需作溶剂对照试验。
另外，也可按表2中的标准来判断试验结果。
表2 皮肤刺激强度分级标准
皮肤刺激强度分级
ห้องสมุดไป่ตู้
皮肤局部反应
无刺激性 轻度刺激性
无异常改变 充血、红斑
中等刺激性
红斑，少量小出血点，水肿， 少量丘疹以及小水疱
强刺激性
红斑，皮下出血，水肿，有很 多小水疱并有可能合并成大水 疱，糜烂，表皮剥落，有溃疡 形成等
评分 0 <2
2~6
>6
方法评价
皮肤刺激试验的结果不仅与检测技术有关， 也与试验过程中的质量控制相关。
皮肤刺激试验又称皮肤原发性刺激试验。
试验目的
了解受试化学物对皮肤的直接刺激作 用以及刺激强度。
试验材料——实验动物
(仅供参考)实验7-皮肤刺激实验
实验材料：
剃毛器、剪毛剪、记号笔、 医用胶带、称量纸、洗瓶、大烧杯、 棉签、静脉注射针头（5号或7号）、 一次性静脉注射器、麻醉剂（戊巴比 妥钠或其他）、兔子保定器等。
实验方法：
◆ 实验动物和饲养环境
多种哺乳动物均可被选为实验动物，首选白 色家兔（皮肤变态反应实验多选用豚鼠）；应使 用成年、健康、皮肤无损伤的动物，雌性和雄性 均可，但雌性动物应是未孕和未曾产仔的；实验 动物至少要用4只，如要澄清某些可疑的反应则需 增加实验动物数；实验动物应单笼饲养，试验前 动物要在实验动物房环境中至少适应3d时间；实 验动物及动物房应符合国家相应规定；选用常规 饲料，饮水不限制，豚鼠需注意补充适斑和焦痂形成
无红斑 轻微红斑（勉强可见） 明显红斑 中度~重度红斑 严重红斑（紫红色）至轻微焦痂形成
水肿形成 无水肿 轻微水肿（勉强可见） 轻度水肿（皮肤隆起轮廓清楚） 中度水肿（皮肤隆起约） 重度水肿（皮肤隆起超过，范围扩大） 最高积分
积分
0 1 2 3 4
0 1 2 3 4 8
结果评价：按下列公式计算每天每只动物平均 积分，以表2判定皮肤刺激强度。
每天每只动物平均积分＝ ∑红斑和水肿积分/受试动物数×14
试验报告
应包括如下内容： （1）受试物名称、理化性状、配制方法和用量。 必要时说明受试物的 pH值； （2）实验动物的种属、品系、性别、体重和来 源（注明合格证号和动物级别） ； （3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、 相对湿度、实验动物房合格证号； （4）每个动物在每一观察时点的皮肤刺激反应 积分； （5）具体描述除刺激性以外的其它毒性作用； （6）结论。
注意：如怀疑受试物可能引起严重刺激或腐 蚀作用，可采取分段试验，将三个涂布受试 物的纱布块同时或先后敷贴在一只家兔背部 脱毛区皮肤上，分别于涂敷后3min、60min 和4h 取下一块纱布，皮肤涂敷部位在任一 时间点出现腐蚀作用，即可停止试验。
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动物实验皮肤刺激的原理
动物实验的皮肤刺激原理主要涉及到皮肤免疫系统的反应以及刺激物和皮肤接触后引起的炎症反应。
以下将详细解释这些原理。
1. 皮肤免疫系统的反应：
皮肤是人和动物身体最大的器官，是机体与外界环境的第一个接触屏障。
皮肤免疫系统由多种免疫细胞和分子组成，包括表皮细胞、角质细胞、巨噬细胞、树突状细胞和T细胞等。
当皮肤接触到刺激物时，免疫细胞会发挥作用，引发一系列免疫反应。
2. 刺激物与皮肤的接触导致的炎症反应：
刺激物是指任何对皮肤产生刺激或损伤作用的因素，如化学物质、物理刺激和生物因子等。
不同类型的刺激物对皮肤的刺激机制略有不同。
2.1 化学物质刺激：
化学物质刺激是最常见的皮肤刺激原因之一。
化学物质通过与皮肤细胞或细胞内分子发生化学反应，导致皮肤细胞的损伤。
这些反应会引起炎症反应，释放多种炎症介质，如肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL-1、IL-6）和介素-8（IL-8）等。
这些炎症介质会引起血管扩张、组织水肿和细胞增殖，形成红斑、水肿和疼痛等症状。
2.2 物理刺激：
物理刺激包括机械刺激、热刺激和冷刺激等。
机械刺激如摩擦、剐蹭或撕裂皮肤表面，会导致表皮细胞和角质细胞的损伤，引起炎症反应。
热刺激和冷刺激可以影响血管舒缩和细胞代谢，引起皮肤变红或发白，也会诱发炎症反应。
2.3 生物因子刺激：
生物因子刺激包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等微生物，它们可以通过直接感染或产生毒素来刺激皮肤。
这些生物因子能够引起免疫细胞的激活和炎症反应，形成红肿、水肿和疼痛等症状。
3. 动物实验在皮肤刺激研究中的应用：
动物实验在皮肤刺激研究中起着重要的作用。
通过在动物体表涂抹或注射刺激物，可以观察动物的炎症反应和免疫细胞的参与过程。
实验结果可以帮助我们了解不同刺激物对皮肤的影响，评估化妆品、药物和化学品等的皮肤刺激性。
总结起来，动物实验的皮肤刺激原理主要涉及到皮肤免疫系统的反应以及刺激物与皮肤的接触导致的炎症反应。
理解这些原理有助于我们更好地评估和控制不同刺激物对皮肤的刺激效应，为人类提供更安全的产品和环境。