多次完整皮肤刺激试验
皮肤刺激,皮内试验
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结果评价
按下列规定确定原发性刺激指数(PII)。 将每只动物在每一规定时间试验材料引起的
红斑与水肿的原发性刺激记分相加后再除以观 察总数(总数为6:2个计分类型和3个观察期)。 当用0.9％氯化钠注射液对照时，计算出对照 原发性刺激记分，将试验材料原发性刺激记分 减去该记分，即得出每只动物原发性刺激记分。 使用24h、48h和72h的观察数据进行计算。 试验之前或72h后的恢复观察数据不用于计算。 每只动物的记分相加后除以动物总数即为原 发性刺激指数。
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试验方法
试验前用75％的(V/V)乙醇擦拭背部去毛区域， 等变干后根据供试品的不同性状选用不同的 方法进行操作。 Nhomakorabea精选ppt
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粉剂或液体样品
取0.5g或0.5mL的试验材料，直接涂 抹到剃毛皮肤部位。 粉剂使用前用少量 的水制成糊状，有利于涂抹。
用25mm×25mm透气性好的敷料敷贴 涂抹样品的皮肤部位, •然后敷料外层用 纱布包裹，再用半封闭性包扎带固定敷 料和纱布4h以上。接触期结束后依次取 下包扎带、纱布及敷料, 对接触部位进行 标记,用温水清洗并擦干。
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试验动物
应使用清洁级健康、初成年的、未使用过 的试验用（新西兰）兔，雌雄兼用, 同一品系, 同一饲养条件，体重应不低于2kg。
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试验用兔的抓取固定方法
试验用兔比较驯服不会咬人，但脚爪较尖应避 免兔抓伤。进行刺激试验时，只需将兔抓牢或 按住即可，抓兔的方法是用右手把两耳轻轻地 拿在手心，抓住颈后部的皮厚处，提取兔，然 后用左手托住臀部，使兔的体重大部分落在左 手上，不能单提两耳、捉拿四肢、提抓腰部和 背部。
检测皮肤实验报告
实验名称：皮肤刺激试验实验日期：2023年11月15日实验目的：本实验旨在通过皮肤刺激试验评估受试物质对皮肤的可能刺激性，以判断其安全性。
通过本实验，我们可以了解受试物质对皮肤的潜在损伤，为产品的安全性评价提供科学依据。
实验原理：皮肤刺激试验是一种评估物质对皮肤刺激性的体外实验方法。
本实验采用经适当方法制备的动物皮肤，通过涂抹受试物质于皮肤表面，观察涂抹部位是否出现红斑、水肿等刺激性反应，从而判断受试物质的刺激性。
实验材料：1. 受试物质：某化妆品原料2. 动物：大白鼠（雌性，体重200-250g）3. 实验器材：皮肤刺激试验仪、玻璃滴管、剪刀、镊子、生理盐水、纱布、酒精棉球、敷料等实验方法：1. 选取健康大白鼠，雌性，体重200-250g，随机分为两组，每组5只。
2. 将动物麻醉，取腹部皮肤，用剪刀剪去毛发，清洁皮肤。
3. 将受试物质和溶剂分别稀释至适当浓度。
4. 将受试物质涂抹于动物腹部皮肤上，溶剂作为对照组。
5. 涂抹4小时后，用水或无刺激的适当溶剂清洗，去除残留物。
6. 每天连续涂抹1次，连续14天。
7. 涂布后每24小时观察一次结果，记录红斑、水肿等刺激性反应。
实验结果：1. 对照组：涂抹溶剂的动物皮肤未出现明显刺激性反应。
2. 试验组：涂抹受试物质的动物皮肤在第2天开始出现红斑，第4天红斑面积逐渐扩大，第7天达到最大面积，第10天红斑开始消退，第14天基本恢复正常。
讨论：根据实验结果，受试物质在涂抹于动物皮肤后，可引起局部红斑反应，但无水肿等刺激性反应。
这表明受试物质具有一定的刺激性，但在一定浓度范围内，其刺激性可被皮肤耐受。
结论：本实验结果表明，受试物质对动物皮肤具有一定的刺激性，但在一定浓度范围内，其刺激性可被皮肤耐受。
在实际应用中，应控制受试物质的浓度，以确保其安全性。
建议：1. 对受试物质进行进一步的研究，以确定其最适宜的浓度。
2. 对受试物质进行长期毒性试验，以评估其对动物皮肤的影响。
太极贴对家兔多次皮肤刺激试验的结果和分析
０引言太极贴以当归、干姜、冰片、生草乌、生川乌、麻黄、三七、红花、樟脑为原料，经加工而成，具有使用简便、有效、价廉特点，把药物贴敷于机体的相应穴位，使药物刺激穴位、疏通经络而调节机体的功能状态[1]。
在临床上用于治疗骨质增生，颈椎病，关节炎，肌肉疼痛，急、慢性扭、挫伤。
本文主要对太极贴的家兔多次皮肤刺激试验进行观察[2]，为临床用药安全及相关刺激性研究提供依据。
１材料1.1受试样品由某公司提供的太极贴(一种膏贴)。
1.2受试物处理把原样品剪成2.5cm×2.5cm大小用于试验。
1.3实验动物和饲养环境普通级日本大耳兔3只，体重2300—2500g，皮肤完好健康，由南昌龙平兔业有限公司提供，实验动物生产许可证号：SCXK（赣）2009-0001。
实验兔饲养在本疾控中心动物实验室，实验动物使用许可证号：SYXK(赣)2007-0001。
室温21.6—24.5℃，湿度40.0%～70.0%RH，单笼饲养。
２方法2.1实验方法实验前24h把动物背部脊柱两侧被毛剪去，每块面积约3cm×3cm，实验时将受试物2.5cm×2.5cm样品贴在一侧去毛区，另一侧为空白对照，在斑贴后4h，用水清洗，去除残留物。
每天斑贴一次,连续斑贴14天，每次斑贴后24h观察结果。
2.2评分与计算按《消毒技术规范》（2002年版）中皮肤刺激反太极贴对家兔多次皮肤刺激试验的结果和分析ＲｅｓｕｌｔｓａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＤｅｒｍａｌＩｒｒｉｔａｔｉｏｎＴｅｓｔｏｆＴａｉＣｈｉＳｔｉｃｋｅｒｓｏｎＲａｂｂｉｔ＇ｓｋｉｎ肖岗夏芝璐曾立爱谌乐礼蔡宏丁晟Xiao Gang Xia Zhilu Zeng Liai Shen Yueli Cai Hong Ding Sheng（江西省疾病预防控制中心，江西南昌330029）（Jiangxi Province Center for Disease Control and Prevertion，Jiangxi Nanchang330029）摘要：目的：对太极贴进行动物多次皮肤刺激试验，为其提供使用前安全性评价。
化妆品多次皮肤刺激性试验结果分析
化妆品多次皮肤刺激性试验结果分析分析化妆品多次皮肤刺激性试验结果,了解化妆品对动物皮肤的刺激作用,并进行安全性的评价。
方法按《化妆品卫生规范》中的“皮肤刺激性/ 腐蚀性试验”方法进行检测。
结果2010年共对269份化妆品进行了多次皮肤刺激性试验,总合格率为98.14%。
除防晒类和芳香类，其他化妆品的合格率均为100 %。
国产化妆品合格率为100 % ,进口化妆品的合格率为97.38%。
所有受检样品中,无刺激性的占84.76% ,轻刺激性的占13.38%,中刺激性的占1.86%。
结论大部分化妆品对动物皮肤不具刺激性，表明有较高的安全性，但任有一部分化妆品具有不同程度的刺激性,即具有潜在危害性。
卫生毒理随着化妆品在生活中的广泛的使用，其使用的安全性显得越来越重要。
为了保证化妆品的质量，在起投入市场前必须对其进行安全性检测。
化妆品可用于人体表面任何部位（皮肤、毛发、指甲、口唇等），但在安全使用化妆品时首先表现在皮肤。
多次皮肤刺激性试验是反映受试物对皮肤的慢性积累刺激性作用，是评价化妆品卫生质量的一项重要的毒理学指标。
根据《化妆品卫生规范》（2007）对2010年送检的269份化妆品进行了多次皮肤刺激性试验，结果分析如下。
1 材料和方法1.1 样品来源及处理2010年由化妆品生产企业或经销企业委托本中心检验的化妆品，其中国产化妆品105份，进口化妆品297份。
液体受试物一般不需稀释，直接使用原液。
若受试物为固体，应将其研磨成细粉状，并用水或其它无刺激性溶剂充分湿润，以保证受试物与皮肤有良好的接触。
使用其它溶剂，应考虑到该溶剂对受试物皮肤刺激性的影响。
特殊产品如染发类、育发类等按其使用说明书中规定的比例和方法配制后用于试验。
1.2 试验动物由四川省实验动物专委会养殖场提供的日本大耳白兔，雌雄各半，体重2.0-2.5kg，动物合格证号：SCXK(川)2008-14，普通级。
动物采用单笼饲养，动物房使用许可证号SYXK[川]2008-043、开放系统，温度18～-28℃，相对湿度40%～-70%。
皮肤刺激,皮内试验
药包材：
铝质软胶管：取试样5 支，向每支加入标示 容量的0.9％氯化钠注射液，振荡5分钟后， 合并提取液备用。
一般材料：取平整部位表面积600cm2剪碎， 加入氯化钠注射液100mL，70℃放置24小时 后取出冷却备用。精Fra bibliotek课件13
0.9％氯化钠注射液及其浸提液
将浸提液滴到25mm×25mm的4层纱 布块上(每块约0.5mL), 按下图所示部位 敷贴于动物背部两侧。将滴有0.9％氯化 钠注射液的纱布块敷贴在对照接触部位。
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皮内刺激试验
简述
评价材料通过皮内注射浸提液产生刺激 反应的潜在性。
应排除的试验材料
任何对皮肤、眼、粘膜组织有刺激的材 料或产品, 如具有腐蚀性的强酸或强碱材 料(pH≤2或≥11.5)不应再进行本试验。
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试验材料与仪器
天平
精度 0.01或0.1g
供试品称量用
精度 0.1或1mg
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试验方法
试验前用75％的(V/V)乙醇擦拭背部去毛区域， 等变干后根据供试品的不同性状选用不同的 方法进行操作。
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粉剂或液体样品
取0.5g或0.5mL的试验材料，直接涂 抹到剃毛皮肤部位。 粉剂使用前用少量 的水制成糊状，有利于涂抹。
用25mm×25mm透气性好的敷料敷贴 涂抹样品的皮肤部位, •然后敷料外层用 纱布包裹，再用半封闭性包扎带固定敷 料和纱布4h以上。接触期结束后依次取 下包扎带、纱布及敷料, 对接触部位进行 标记,用温水清洗并擦干。
试剂称量用
精度 50g
试验用兔称量用
兔固定装置、手术剪刀、推子、称量瓶、 吸管、移液管、注射器（2mL）、注射 针（5＃、8＃）、烧杯、压力蒸汽灭菌 器。
揭秘化妆品安全性评价技术(六)——化妆品的皮肤刺激／腐蚀性及试验方法
不考 虑进 行皮 肤 腐蚀 试验 ： 根据 ①
结构 与活性 关 系或理 化特 性推 断可
能具 有皮 肤 腐 蚀 性 的物 质 ， 强碱 如
或 强 酸 类 ， Ｈ≤２０ Ｐ Ｐ ．或 Ｈ≥１ ． １５： ② 经 急性 经皮 毒性试 验 显示具 有很
品用途 在指 南原 则 下调整 产 品的皮 肤 接触 时间、 涂抹剂 量、 间隔时间和 重 复接触次数 。
染 毒 剂 量 达 ２ ０ ｍｇ ｋ － 未 产 生 ０ ０ ／ｇ － Ｂ仍 ， Ｊ 皮 肤 刺 激 体 征 的 物 质 。对 于 非 腐 蚀 性 物 质 也 只 有 必 要 时 才 进 行 体 内皮 肤 刺激试 验。
三 ◆ 内人体皮肤 麓 激试验 体
人体皮 肤 贴斑试验 包括单次 、 多
除 了上 述 常 规 的 皮 肤 斑 贴 试 验 外 ， 有几 种 改进 的试 验 方法 用于 还 特 殊 用 途 化 妆 品 的 检 测 。皮 肤 划 痕
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ＣＨ１ ＮＡ ＣＯＳＭＥＴＩ ＣＳ ＲＥ ＥＷ Ｖｌ
强 系 统毒 性 的物 质 ； 经 腐 蚀 性试 ③
验 的 替 代 试 验 （Ｉ Ｅ 法 、 肤 模 型 ￣Ｉ Ｒ ： Ｔ 皮 试验 ） 的其 中一 种 方 法 证 明具 有 腐 蚀
摘 要 ： 帙 莉 激 性 是 日常 使 用 化 妆 品最 常 见 的 不 良 反 应 之 一 。 扶 鹩 激 皮 皮
性试验 是化 妆品原料及 产品安全 性评 价 的主要 项 目。 传统 皮肤 莉激试 验采 用 实验动物 进行。 近年来 。 多种 替代动 物试验的体外模 型被开发和应 用，
性 的物质 ； 急性经 皮毒 性试验 中， ④
试 验 是一种 用受损 皮肤 评估 化妆 品
(仅供参考)实验7-皮肤刺激实验
实验材料：
剃毛器、剪毛剪、记号笔、 医用胶带、称量纸、洗瓶、大烧杯、 棉签、静脉注射针头（5号或7号）、 一次性静脉注射器、麻醉剂（戊巴比 妥钠或其他）、兔子保定器等。
实验方法：
◆ 实验动物和饲养环境
多种哺乳动物均可被选为实验动物，首选白 色家兔（皮肤变态反应实验多选用豚鼠）；应使 用成年、健康、皮肤无损伤的动物，雌性和雄性 均可，但雌性动物应是未孕和未曾产仔的；实验 动物至少要用4只，如要澄清某些可疑的反应则需 增加实验动物数；实验动物应单笼饲养，试验前 动物要在实验动物房环境中至少适应3d时间；实 验动物及动物房应符合国家相应规定；选用常规 饲料，饮水不限制，豚鼠需注意补充适斑和焦痂形成
无红斑 轻微红斑（勉强可见） 明显红斑 中度~重度红斑 严重红斑（紫红色）至轻微焦痂形成
水肿形成 无水肿 轻微水肿（勉强可见） 轻度水肿（皮肤隆起轮廓清楚） 中度水肿（皮肤隆起约） 重度水肿（皮肤隆起超过，范围扩大） 最高积分
积分
0 1 2 3 4
0 1 2 3 4 8
结果评价：按下列公式计算每天每只动物平均 积分，以表2判定皮肤刺激强度。
每天每只动物平均积分＝ ∑红斑和水肿积分/受试动物数×14
试验报告
应包括如下内容： （1）受试物名称、理化性状、配制方法和用量。 必要时说明受试物的 pH值； （2）实验动物的种属、品系、性别、体重和来 源（注明合格证号和动物级别） ； （3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、 相对湿度、实验动物房合格证号； （4）每个动物在每一观察时点的皮肤刺激反应 积分； （5）具体描述除刺激性以外的其它毒性作用； （6）结论。
注意：如怀疑受试物可能引起严重刺激或腐 蚀作用，可采取分段试验，将三个涂布受试 物的纱布块同时或先后敷贴在一只家兔背部 脱毛区皮肤上，分别于涂敷后3min、60min 和4h 取下一块纱布，皮肤涂敷部位在任一 时间点出现腐蚀作用，即可停止试验。
硝酸咪康唑搽剂多次皮肤刺激性试验及皮肤过敏试验研究
Pharmacy Information 药物资讯, 2019, 8(1), 16-28Published Online January 2019 in Hans. /journal/pihttps:///10.12677/pi.2019.81003Study of the Skin Irritation and SkinAllergenic Effect of Miconazole NitrateLinimentHui Tian, Fanzhong Sun, Wenxiang Yang, Bolin Fan, Jinming Zhang*Hubei Provincial Key Laboratory for Applied Toxicology, Hubei Provincial Center for Disease Control andPrevention, Wuhan HubeiReceived: Jan. 2nd, 2019; accepted: Jan. 11th, 2019; published: Jan. 18th, 2019AbstractObjective: To study the skin irritation and skin allergenic effect of miconazole nitrate liniment.Methods: Multiple dosing skin irritation test was carried out with rabbit model, and skin sensiti-zation experiment was observed with guinea pig. Results: Miconazole nitrate liniment had mild ir-ritation on the normal skin and the wounded skin, and no allergic response was induced in guinea pig. Conclusion: Miconazole nitrate liniment is relatively safe for external use in animals. These animal experimental results provide experimental basis for clinical medication.KeywordsMiconazole Nitrate Liniment, Irritation, Allergy硝酸咪康唑搽剂多次皮肤刺激性试验及皮肤过敏试验研究田辉，孙凡中，杨文祥，樊柏林，张金明*湖北省疾病预防控制中心，湖北省应用毒理重点实验室，湖北武汉收稿日期：2019年1月2日；录用日期：2019年1月11日；发布日期：2019年1月18日摘要目的：对硝酸咪康唑搽剂皮肤的刺激性和致敏性进行了动物实验观察。
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多次完整皮肤刺激试验
中国科学院广州化学研究所分析测试中心
卿工---189--3394--6343
手和皮肤消毒剂：除按第一类、第二类或第三类消毒剂的要求进行毒理学试验外，还必须进行完整皮肤刺激试验。
如果偶尔使用或间隔数日使用的消毒剂，采用一次完整皮肤刺激试验；如果每日使用或连续数日使用的消毒剂，采用多次完整皮肤刺激试验。
接触皮肤伤口的消毒剂，还必须增做一次破损皮肤刺激试验；接触创面的消毒剂，应增做眼刺激试验。
使用过程中，必需接触皮肤的其它消毒剂，也应增做完整皮肤刺激试验。
根据消毒剂的成分，估计可能有致敏作用者，还需增做皮肤变态反应试验。
一、检测项目
多次完整皮肤刺激试验。
二、检测依据
中华人民共和国卫生部. 《消毒技术规范》（2002年版），皮肤刺激试验，多次完整皮肤刺激试验。
三、检测结论
在本试验条件下，*****公司送检的样品（对新西兰兔多次完整皮肤刺激强度为是否具有刺激性。
(本页以下无正文)
四、检测方法
多次完整皮肤刺激试验
（1）试验前动物皮肤准备同2.3.3.3.1 （1）。
（2）次日将受试物[浓度同2.3.3.3.1 (2)]0.5ml（g）涂在一侧皮肤上，另一侧涂溶剂作为对照，在涂抹后4h，用水或无刺激的适宜溶剂清洗，除去残留物。
每天涂抹一次，连续涂抹14d。
在每次涂抹后24h观察结果，按表2-11评分。
为了便于受试物的涂抹和结果观察，必要时应剪毛。
对照区的处理方法同试验区。
2.3.3.4 评价规定
2.3.3.4.1一次皮肤刺激试验
在各个观察时间点，按照表2-11对动物的皮肤红斑与水肿形成情况进行评分，并分别按时间点将3只动物的评分相加，除以动物数，获得不同时间点的皮肤刺激反应积分均值(刺激指数)。
取其中最高皮肤刺激指数，按表2-12 评定该受试物对动物皮肤刺激强度的级别。
2.3.3.4.2多次皮肤刺激试验
按下列公式计算每天每只动物平均积分（刺激指数），并以表2-12判定皮肤刺激强度。
∑（每只动物14d的红斑和水肿总积分）
每天每只动物平均积分=
受试动物数×14
表2-11 皮肤刺激反应的评分标准
皮肤刺激反应皮肤刺激反应评分
红斑形成：
无0
勉强可见 1
明显 2
严重 3
紫红色红斑，并有焦痂 4
水肿形成:
无0
勉强可见 1
皮肤隆起，轮廓清楚 2
水肿隆起约1mm 3
水肿隆起超过1mm 4
表2-12 皮肤刺激强度分级
皮肤刺激指数刺激强度级别
0～＜0.5 无刺激性
0.5～＜2.0 轻刺激性
2.0～＜6.0 中等刺激性
6.0～8.0 强刺激性
涉及地区：广东省、浙江省、福建省、海南省、云南省、广西省、贵州省、新疆省、四川省、重庆市、西藏省、湖南省、江西省、湖北省、上海市、北京市、天津市、安徽省、江苏省、甘肃省、宁夏省、内蒙古省、黑龙江省、吉林省、辽宁省、山东省、陕西省、山西省、河南省、河北省。