实验室常用的细菌作用及其选择
新人教版生物必修二 6.3探究抗生素对细菌的选择作用(共6页PPT)

探究抗生素对细菌的选择作用P115
实验结束后,应将耐药菌、培养基、纸片等进行高温灭菌处理
结果和结论
1.在培养基上是否由细菌生长?在放有抗生素纸片的区域呢? 2.在连续培养几代后,抑菌圈的直径发生了什么变化?这说明抗生素对细菌产生了 什么作用?
探究抗生素对细菌的选择作用P115
Байду номын сангаас讨论
1.为什么要从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌? 抑菌圈边缘生长的可能是耐药菌。
探究抗生素对细菌的选择作用P115 实验原理 一般情况下,一定浓度的抗生素会杀死细菌,但变异 的细菌可能产生耐药性。在实验室连续培养细菌时,如果 向培养基中添加抗生素,耐药菌有可能存活下来。
目的要求 通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长状况,
探究抗生素对细菌的选择作用。
探究抗生素对细菌的选择作用P115
2.你的数据结果是否支持“耐药菌是普遍存在的”这一说法? 支持
3.在本实验条件下,耐药菌所产生的变异是有利的还是有害的?你怎么理解变异是 有利的还是有害的?
在本实验条件下,一般来说是有利的。有利于生物在特定环境中生存和繁 殖的变异在此环境中就是有利变异。 4.滥用抗生素有什么后果? 促进耐药菌的产生。
材料用具
经高温灭菌的牛肉膏蛋白胨培养基及固体培养平板,细菌菌株(如大肠杆菌,金黄色葡 萄球菌等),含有抗生素(如青霉素、卡那霉素等)的圆形滤纸片(以下简称“抗生素 纸片”),不含抗生素的纸片,镊子,涂布器,无菌棉签,酒精灯,记号笔,直尺等
探究抗生素对细菌的选择作用P115 实验步骤
1.在培养皿底部画两条相互垂直的线,将 培养皿分区、标号①-④
2.涂布平板。
12 34
3.将不含抗生素的纸片和抗生素纸片分 别放在平板的不同位置。(控制变量)
环境微生物学试题(四)

环境微生物学试题(四)一、名词解释(每题1.5分,计30分)溶源菌复愈革兰氏染色螺旋体节孢子次生菌丝体鉴别培养基培养基碳氮比纯培养对数生长期基因间歇灭菌法生物圈生态系统生物固氮亚硝酸菌优势菌种挂膜法活性污泥挂膜法生物絮凝剂废气的微生物滴滤法生物增强技术二、是非题(每题1分,计10分)1.痘病毒是科学研究中已知的较小的一种病毒。
( )2.所的细菌的细胞壁中都含有肽聚糖。
()3.所有种类原生动物的繁殖都以无性生殖方式进行。
( )4.化能自养菌以无机物作为呼吸底物,以O2作为最终电子受体进行有氧呼吸作用产生能量。
( )5.被动扩散是微生物细胞吸收营养物质的主要方式。
( )6.为了进行新陈代谢反应,生物体内必须有一定量的水。
( )7.DNA分子的一个片段或一个区域通常称为一个基因。
( )8.大多数病毒两种基本的对称类型是螺旋对称结构和二十面体对称结构。
( )9.细胞的荚膜可通过荚膜染色法观察。
( )10.作为一种抗性机制,某些原生动物能形成高度有抗性的芽孢。
( )三、选择题(每题1分,计20分)1. 下列孢子中属于霉菌无性孢子的是。
(a)孢囊孢子(b)子囊孢子(c)卵孢子(d)接合孢子2. 巴斯德采用曲颈瓶试验来_______。
(a) 驳斥自然发生说(b) 证明微生物致病(c) 认识到微生物的化学结构(d) 提出细菌和原生动物分类3. 革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是______。
(a)肽聚糖(b)几丁质(c)脂多糖(d)磷壁酸4. 出芽繁殖过程______发生。
(a) 主要在病毒中 (b) 在形成分支的细菌中(c) 只在原生动物中(d) 在酵母菌中5. 所有下述特征皆适合原生动物,除了______之外。
(a)原生动物是单细胞的(b)原生动物表现为异养营养方式(c)许多种类原生动物有运动的能力(d)原生动物的细胞质中发现有叶绿素6. 实验室常用的培养细菌的培养基是______。
(a)牛肉膏蛋白胨培养基(b)马铃薯培养基(c)高氏一号培养基(d)麦芽汁培养基7. 硝化细菌属于______型的微生物。
川农环境微生物学期末复习题及答案

川农环境微生物学期末复习题及答案环境微生物学复习题一、名词解释1、发酵作用—是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物,同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。
2、农药安全系数—3、硝化作用-氨基酸脱下的氨,在有氧的条件下,经亚硝化细菌和硝化细菌的作用转化为硝酸4、转导—通过吻合噬菌体的媒介作用,将供体细胞内特定的基因(DNA片段)携带至受体细胞中,从而使受体细胞获得供体细胞的部分遗传性状的现象。
5、培养基—根据各种微生物对营养的需要,包括水、碳源、能源、氮源、无机盐及生长因子等按一定的比例配置而成的,用以培养微生物的基质6、好氧活性污泥—是由多种多样的好氧微生物和兼性厌氧微生物(兼有少量的厌氧微生物)与污(废)水中有机和无机固体物质混凝交织在一起,形成的絮状体或称绒粒。
7、质粒-原核生物细胞中,一种独立于染色体外,能进行自主复制的环状DNA分子。
8、P/H指数—P代表光能自养型微生物,H代表异氧性微生物,两者的比值即P/H指数,该指数反映水体污染和自净程度。
9、活性污泥与菌胶团-是一种绒絮状小泥粒,由好氧菌为主体的微型生物群以及胶体、悬浮物等组成的微生物集团。
颗粒大小约为0.02-0.2mm,表面积为20-100cm2/ml,相对密度约为1.002-1.006。
外观呈黄褐色,有时亦呈深灰、灰褐、灰白等色。
静置时,能凝聚成较大的绒粒而沉降。
它具有很强的吸附及分解有机物的能力。
菌胶团—好氧活性污泥(绒粒)的结构和功能的中心是能起絮凝作用的细菌形成的细菌团块。
10、反硝化作用-兼性厌氧的硝酸盐还原细菌将硝酸盐还原为氮气。
11、转化—受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段,并把它整合到自己的基因组里,从而获得供体细胞部分遗传性状的现象。
12、化能自养微生物—生长需要无机物,在氧化无机物的过程中获取能源,同时,无机物有作为电子供体,使CO2还原为自身有机碳化物。
二、选择题1、根据其在水中的存在及数量情况,B、大肠杆菌可作为粪便污染的指示菌。
实验室落菌的种类

实验室落菌种类摘要:归纳了组织培养中污染原因及不同污染原因所造成的表观现象,并概括了解决外植体引发污染的方法。
发现棒杆菌属( Corynebac2terium) 、肠杆菌属( Enterobacter) 、葡萄球菌属( S taphylococus) 、地霉属( Geot richum) 、曲霉属( Aspergillus) 、毛霉属( Mucor) 、根霉属( Rhizopus) 等常见的细菌和真菌是引起组培苗严重污染的主要菌类。
取样测试鉴定表明,大部分的微生物来源于无菌接种室内的空气、超净工作台鼓风机排出的气体。
研究了壳聚糖对该菌的抑制作用,探索了3 种分子量及其6 种浓度的壳聚糖对该菌的抑制效果。
壳聚糖对该污染菌有抑制作用,5 万和25 万分子量的抑菌效果高于3000 分子量,浓度越高,抑菌效果越好。
初步证实了壳聚糖对组培污染菌类有很好的抑制作用,在花卉组织培养污染防治方面具有应用价值。
关键词植物组织培养;污染;外植体;灭菌组织培养;污染;壳聚糖;抑制作用从德国植物生理学家Haberlandt1902 年提出设想到现在,植物组织培养的研究已有100 多年的历史,近几十年来植物组织培养技术发展最为迅速。
然而植物组织培养一些技术环节仍然存在不少问题,其中污染、褐化、玻璃化被认为是组织培养的三大杀手。
与褐化、玻璃化相比污染更易发生,给科研和生产实践带来巨大的危害。
因此采取有效的防控措施,降低污染发生的机率,是组织培养成功的重要保障。
在众多污染途径中,外植体携带微生物污染组织培养是最常见且不易解决的问题。
笔者通过对相关文献的分析,并结合实践,归纳了组织培养过程中引起污染的原因及各种污染的表观现象,提出解决外植体引发污染的措施。
1 污染的原因及其表观现象污染就是在组织培养过程中微生物进入培养体系,在外植体上、外植体周围的培养基以及培养基的其他部位生长。
由于植物组织培养过程中的温度、湿度、营养、pH 值等适宜微生物的生长,因此一旦微生物进入培养容器中就将快速繁殖,通过营养竞争、侵蚀植物材料、分泌有毒代谢产物等途径使植物材料发生病害或死亡,造成组织培养的失败。
细菌的培养法实验心得体会

细菌的培养法实验心得体会细菌的培养法实验心得体会细菌的培养法是微生物实验室中常用的技术之一,在研究细菌的生长、代谢、繁殖等方面起着重要的作用。
通过细菌的培养,我们可以了解细菌的特性和行为,为细菌相关研究提供实验基础。
在进行细菌的培养法实验后,我有以下一些心得体会。
首先,细菌的选取要慎重。
在实验中,选择适合自己研究目的的细菌株非常重要。
不同的细菌对培养条件的要求各不相同,所以需要根据自己的实验目的来选择合适的细菌株。
在选择细菌株时,要考虑到其特性、生长速度、适宜温度和培养基等因素。
同时,保证选取的细菌株纯度也是必须的,否则可能会影响实验结果的准确性。
其次,培养基的制备要注意卫生和配比。
培养基是细菌生长和繁殖的基础,因此制备培养基时要注意卫生。
实验操作时要注意手部卫生和实验器材的消毒。
在配比培养基时,要确保配方的准确性,以满足细菌生长的营养需求。
此外,培养基的pH值也是需要注意的,因为不同细菌对pH值有不同的适应能力,要根据细菌株的特性来调整培养基的pH值。
再次,培养条件的控制要严谨。
培养条件是影响细菌生长繁殖的重要因素,因此在进行细菌培养实验时要严格控制培养条件。
温度是培养条件中最基本的一个因素,要根据选取的细菌株来调整培养温度。
不同细菌对温度的适应范围不同,因此需要根据细菌株的要求来进行温度调控。
此外,光照、氧气和湿度等因素也需要进行适当的控制。
在培养箱中,要确保光照强度适中,避免细菌受过强光线的影响;氧气的供给要充足,但也要注意不同细菌对氧气的需求不同;湿度应该保持在适宜的范围内,过高或过低都会对细菌的生长产生不利影响。
最后,对培养结果的观察要仔细。
细菌的培养需要一定的时间,而在此期间要对培养结果进行仔细的观察。
细菌的生长状态、群落形状、色素变化等都是可以观察的指标。
需要注意的是,观察时要避免对细菌产生不必要的干扰,一些不必要的操作可能会导致细菌群落的破坏或质量的下降。
通过细菌的培养法实验,我对细菌的生长与繁殖有了更深入的了解。
2022年淮北师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)

2022年淮北师范大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)一、填空题1、放线菌的代表属有______、______、______、______等。
2、噬菌体的成斑率一般均大于______。
3、异型乳酸发酵的双歧杆菌途径的特点是2分子葡萄糖可产生______、______和5分子ATP。
4、生长因子主要包括______、______和______,它们对微生物所起的作用分别是______、______和______。
5、真菌菌丝有两种类型,低等真菌的菌丝是______,高等真菌的菌丝是______。
6、微生物在资源开发上具有良好的发展前景,表现在:______,______,以及______等等。
7、四氢叶酸分子由______、______和______三部分组成,它的合成过程可被两种抗代谢药物即______和______所抑制。
8、在工业防霉剂的筛选中,经常要用8种霉菌作为模式试验菌种,如______、______、______和______等。
9、微生物菌种保藏的原理是在______、______、______、______和______等环境条件下,使其处于代谢不活泼状态。
10、主要的免疫活性细胞有______、______、______、______。
二、判断题11、在G+细菌细胞膜上,是找不到磷脂酰胆碱的。
()12、含“C·H·O”的化合物,是化能异养微生物的碳源兼能源,故它在培养基中的含量是除水以外最高的。
()13、丙酮丁醇发酵是在好气条件下进行的,该菌是一种梭状芽胞杆菌。
()14、病毒几乎可以感染所有的细胞生物,但就某一种病毒而言,它仅能感染一定种类的微生物、植物或动物。
()15、存在于真核微生物细胞中的微体,通常都是过氧化氢酶体。
()16、在微生物的形态特征十分丰富的条件下,菌种鉴定就可完全依据这些特征来进行,例如真菌、放线菌和酵母菌等。
()17、厌氧罐技术对研究严格厌氧菌是一种既十分方便又极其合适的技术。
微生物学实验室常用试剂与培养基

微生物学实验室常用试剂与培养基第一节常用试剂及其使用方法一、诊断用纸片⑴杆菌肽纸片(0.04U/片):抑菌圈>10mm为敏感。
质控菌株: D群链球菌阴性, A群链球菌阳性。
⑵ SMZ纸片(1.25μg/片、23.75μg/片):出现抑菌圈即为敏感。
质控菌株:D群链球菌阳性, A群链球菌阴性。
⑶新生霉素纸片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm为敏感。
质控菌株:表皮葡萄球菌阳性,腐生葡萄球菌阴性。
⑷O129纸片、奥普托欣(Optochin)纸片:参见第五节《生化试验培养基》。
二、诊断用血清1.沙门菌属诊断血清⑴ A-F群O多价诊断血清。
⑵特异O群因子诊断血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10诊断血清。
⑶特异H因子诊断血清常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi 因子诊断血清。
2.志贺菌属诊断血清志贺菌属4种多价血清:痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志贺菌多价血清及分型血清(1~6型),宋内志贺菌诊断血清,鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。
3.致病性大肠埃希菌诊断血清肠致病性大肠埃希菌(EPEC)诊断血清,产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)诊断血清,肠出血性大肠埃希菌(EHEC)诊断血清O157: H 7。
4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清6.链球菌分类诊断血清7.肺炎链球菌诊断血清8.耶尔森菌诊断血清三、常用染色液1.革兰染色液⑴结晶紫溶液A液:结晶紫20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸铵0.8g,蒸馏水80 ml。
染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。
⑵碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。
将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。
最后补足水量。
也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。
探究抗生素对细菌的选择作用实验注意事项

在进行抗生素对细菌的选择作用实验时,需要注意以下几点:
1. 实验室安全:确保实验室环境的安全,遵守实验室操作规范,佩戴适当的个人防护装备,如实验手套和实验室外套。
2. 消毒操作:在进行实验前,对实验器材、培养基和培养皿进行彻底的消毒处理,以防止细菌的交叉污染。
3. 抗生素选择:选择适当的抗生素,确保其对目标细菌具有高效的杀菌作用。
可以参考已有的文献或实验室经验进行选择。
4. 抗生素浓度:确定合适的抗生素浓度,以确保能够有效地抑制或杀死细菌。
可以进行一系列浓度梯度的实验,以确定最低有效浓度。
5. 细菌培养条件:细菌的培养条件应符合其生长要求,包括适当的培养基、温度和氧气浓度等。
确保细菌在实验过程中能够正常生长。
6. 对照组设置:在实验中设置适当的对照组,如阳性对照(细菌在无抗生素存在下的生长情况)和阴性对照(无细菌存在
的培养基),以便对实验结果进行比较和分析。
7. 实验重复:进行足够的实验重复,以确保实验结果的可靠性和统计学意义。
建议至少进行三次独立实验。
8. 数据分析:对实验结果进行准确的数据记录和分析,包括细菌生长情况、抗生素浓度和细菌存活率等指标。
可以使用适当的统计方法进行数据处理和结果呈现。
9. 实验废弃物处理:实验结束后,将实验废弃物进行适当的处理,遵守实验室废物管理规定,以防止对环境和人体造成污染和伤害。
10. 文献参考:在进行实验前,建议查阅相关的文献和研究,了解已有的实验方法和注意事项,以便更好地设计和执行实验。
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第一篇:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG6:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1第二篇:JM110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。
常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。
大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。
而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。
而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。
E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化.第三篇:各种感受态细胞的区别用途特征Xl1-Blue菌株基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。
特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
用途:分子克隆和质粒提取。
BL21(DE3)菌株基因型:F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。
特点:该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。
T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合于非毒性蛋白的表达。
用途:蛋白质表达。
BL21(DE3)ply菌株基因型:F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。
特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。
此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。
适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
用途:蛋白质表达DH5α菌株基因型:F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZ ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–特点:一种常用于质粒克隆的菌株。
其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC 载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。
recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109菌株基因型:endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proA e14- [F ‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。
特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。
用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
第四篇:E.coli Electro-CellsE.coli Electro-Cell JM109制品名 TaKaRa Code 包装量价格(人民币元)E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300■ GenotypeE.coli JM109recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1,Δ(lac-proA/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]■细胞浓度1~2×1010 Bacteria/ml■保存-80℃■制品说明用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌,从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。
电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一,比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高,在转化少量DNA时,特别能发挥其特有的威力。
TaKaRa使用独自开发的菌体培养法,制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。
■细胞种类α-互补性选择宿主E.coli JM109E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F'编码的lacZΔM15的结合,显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。
利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。
因为具有F'质粒,除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外,也可作为M13载体DNA的宿主,调制单链DNA。
■质量标准使用10 pg的质粒DNA进行转化时:50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmidF'质粒的稳定性检测对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后,在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上,产生的白色菌落在1%以下。
50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。
--------------------------------BL21(DE3)pLysS细菌菌株BL21(DE3)pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。
BL21(DE3)pLysS对λDE3(1)是溶源性的。
λDE3含有T7噬菌体基因I,编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。
BL21(DE3)pLysS含有pLysS质粒,他携带编码T7溶菌酶基因。
在T7启动子控制下,T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。
包装:P9811 500μl第五篇:JM109,DH5a,BL21感受态有何区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。