磷酸甘油脱氢酶

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3-磷酸甘油酸脱氢酶促进丝氨酸合成在肿瘤进展中的机制

3-磷酸甘油酸脱氢酶促进丝氨酸合成在肿瘤进展中的机制

综 述?3-磷酸甘油酸脱氢酶促进丝氨酸合成在肿瘤进展中的机制崔畅婉,孙峥嵘Themechanismof3-phosphoglyceratedehydrogenasepromotingserinesynthesisintumorprogressionCUIChangwan,SUNZhengrongDepartmentofBiobank,ShengjingHospitalAffiliatedtoChinaMedicalUniversity,LiaoningShenyang110001,China.【Abstract】Upregulationofserinebiosyntheticpathwayactivityisadistinctcommonfeatureofmanycancers.3-phosphoglyceratedehydrogenase(PHGDH),thefirstrate-limitingenzymeinthispathway,ishighlyexpressedinmelanoma,breastandkidneycancer.PHGDHplaysanimportantroleintumorcellproliferation,metastasisandinvasion.Glycolysisintermediateproduct3-glycericacidphosphateoxidizedtohydroxypropionicacidphosphateunderPHGDHaction,andfinallysynthesizedserine.Serineconvertedtoglycineandthenplaysanimportantroleinthesynthesisofnucleotides,s-adenosylmethionine(SAM)andreducedglutathione(GSH).PHGDHisexpectedtobeanewtargetfortumortherapy.【Keywords】3-phosphoglyceratedehydrogenase,cancer,glucolysisModernOncology2021,29(05):0885-0888【指示性摘要】丝氨酸生物合成途径活性的上调是许多癌症明显的共同特征。

3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法

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3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC2215规格:100T/96S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体12uL×1支,4℃保存。

临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀,或根据比例现配现用;用不完的试剂4℃保存一周。

产品说明:GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。

GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+,340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。

试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后,8000g,4℃,离心20min,取上清,置冰上待测。

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

血清(浆):直接检测。

二、测定步骤:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,分光光度计蒸馏水调零。

生物氧化试题及答案

生物氧化试题及答案

生物氧化试题及答案细胞的线粒体和微粒体中,它是将氧化物质转化为水和ATP的主要过程。

在呼吸链中,氢和电子的传递有严格的方向和顺序。

NADH脱氢酶是一种黄素蛋白酶,可催化琥珀酸脱氢。

电子传递链各组分组成四个复合体,而NAD的作用是递电子和递氢。

电子传递链中,NADPH中的氢一般不直接进入呼吸链氧化,而在某些情况下电子传递不一定与磷酸化偶联。

电子传递链各组分组成四个复合体,其中1分子铁硫中心(Fe2S2)每次传递2个电子。

细胞色素体系中,能与CO和氰化物结合使电子不能传递给氧而使呼吸链中断的是细胞色素a3.NADH脱氢酶可以以NAD、FMN、CoQ或FAD为受氢体。

在生物氧化中,不起递氢作用的是泛醌。

β-羟丁酸彻底氧化为CO2、H2O和能量,其P/O比值约为3.在呼吸链中,各种细胞色素的吸收光谱不同,存在于线粒体和微粒体中。

泛醌能将2H游离于介质而将电子传递给细胞色素,而复合体I和II中含有以FMN为辅基的黄素蛋白。

总的来说,呼吸链是生物氧化的主要过程,其中氢和电子的传递有严格的方向和顺序,而NADH脱氢酶、细胞色素和泛醌等组分都扮演着重要的角色。

13.细胞色素氧化酶中除了含铁卟啉辅基外,还含有参与传递电子的()离子。

答案:D。

铜离子参与传递电子。

14.生物体内ATP的生成方式有多少种?答案:C。

有三种方式:磷酸化氧化、发酵和光合作用。

15.铁硫蛋白中的铁能可逆地进行氧化还原反应,每次可传递多少个电子?答案:B。

铁硫蛋白中的铁每次可传递两个电子。

16.下列不是琥珀酸氧化呼吸链成分的是()。

答案:D。

FA是琥珀酸氧化呼吸链成分之一。

17.1分子NADH+H经NADH氧化呼吸链传递,最后交给1/2O2生成水,在此过程中生成多少分子ATP?答案:___经NADH氧化呼吸链传递,最后交给1/2O2生成水,此过程中生成3分子ATP。

18.关于苹果酸-天冬氨酸穿梭系统的叙述错误的是()。

答案:B。

线粒体内的___先生成苹果酸再穿过线粒体膜进入胞质是正确的叙述。

甘油的氧化分解

甘油的氧化分解


22-磷酸甘油酸
生成一个NADH 生成一个ATP
2磷酸烯醇丙酮酸 2丙酮酸
生成一个ATP
COOH C==O
CH3
丙酮酸
CoASH
丙酮酸脱氢酶系
CO2
O
CH3-C-SCoA
乙酰CoA
NAD+ NADH+H+
此过程产生一个NADH,即2.5个 ATP
三羧酸循 环
O CH3-C-SCoA
CoASH
NADH
NAD+
草酰乙酸
柠檬酸
•柠檬酸 生成
三羧酸循环 (TCA)
顺乌头酸
苹果酸
H2O
草酰乙酸
再生
异柠檬酸
氧化脱羧
NAD+
NADH +CO2
延胡索酸
FADH2
FAD
琥珀酸 GTP 琥珀酰CoA
-酮戊二酸
NAD+
NADH +CO2
三羧酸循环中产生3个NADH,一个FADH2和一 个ATP。总计:3*2.5+1*1.5+1=10个ATP
制作人
甘油的氧化分解
CH 2OH ATP ADP CH 2OH NAD + NADH+H +CHOHFra bibliotekCHOH
甘油激酶
CH 2OH (肝 、 肾 、 肠 ) CH 2O
磷酸甘油脱氢酶
P
3-磷 酸 甘 油
CH 2OH CO
糖酵解 丙酮酸
CH 2O P 糖 异 生 糖 或 糖 原
磷酸二羟丙酮
消耗一个ATP产生 一个NADH,总计 1.5个ATP
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NCT-503_3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)抑制剂_1916571-90-8_Apexbio

NCT-503_3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)抑制剂_1916571-90-8_Apexbio

IC50: 2.5 μM for inhibiting serine synthesis from 3-phosphoglycerate in cells NCT-503 is a 3-phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH) inhibitor. In the canonical pathway of glucose-derived serine synthesis, Homo sapiens phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH) has been reported to catalyze the first, rate-limiting step. In vitro: NCT-503 was identified as an inhibitor of PHGDH and was found to be inactive against a panel of other dehydrogenases and showed minimal cross-reactivity in a panel of
参考文献: [1] Pacold, M. E.,Brimacombe, K.R.,Chan, S.H., et al. A PHGDH inhibitor reveals coordination of serine synthesis and one-carbon unit fate. Nature Chemical Biology 12(6), 452-458 (2016).
S=C(N1CCN(CC2=CC=C(C(F)(F)F)C=C2)CC1)NC3=NC(C)=CC(C)=C3
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3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC2210规格:25T/24S50T/48S产品内容:提取液:30mL×1瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存;试剂三:液体15µL×1支,4℃保存;临用前加入0.5mL蒸馏水充分混匀,或根据比例现配现用;用不完的试剂4℃保存一周。

产品说明:GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。

GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+,340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。

试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心20min,取上清,置冰上待测。

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

血清(浆):直接检测。

二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

3-磷酸甘油酸脱氢酶在肿瘤中的研究进展

3-磷酸甘油酸脱氢酶在肿瘤中的研究进展

3-磷酸甘油酸脱氢酶在肿瘤中的研究进展张晶;张淑兰【摘要】Phosphoglycerate dehydrogenase (3-PGDH or PHGDH) is the key enzyme of de novo serine biosynthesis. The PHGDH gene located in human chromosomes 1p12, which is highly expressed in normal tissue, especially for the nervous system function. Recently, it was shown that a part of intermediate metabolites of glycolysis flew to serine biosynthesis. It was found PHGDH gene amplification and over expression in some tumor, PHGDH regulated tumor cell proliferation, apoptosis and invasion. Cell metabolism of tumor is benefit to tumor oncogenesis and progression.The study found that silence PHGDH can inhibit tumor cell proliferation, invasion and increase cell apoptosis. And PHGDH may be a potential treatment target. In this paper, we will review briefly the studies on PHGDH, including structural features, biological function and the genesis and development effect in some tumor.%3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-PGDH或PHGDH)是丝氨酸合成途径的关键酶。

3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测方法的改良及应用

3-磷酸甘油醛脱氢酶活性检测方法的改良及应用

( 京 中 医药大 学 1 0 2 ) 北 0 0 9
摘 要 : 的 改 良 3磷 酸甘 油 醛 脱 氢 酶 ( P H) 性检 测 方 法 , 目 一 GA D 活 并探 讨 该 方 法 的 应 用 。方 法 在 经 典 血 清 GA D 检 测 P H 方 法基 础 上 , 据 该 酶 的 组 织 分 布 特 点 , 血 清 样 本 改 为 全 血 样 本 , 对 样 本 及 检 测 条 件 作 了进 一 步 的 改 良 。在 方 法 学研 究 的基 根 将 并 础 上 , 用 改 良后 的 方 法 分 别 检 测 正 常 鹌 鹑 、 嘌 呤 饮 食 诱 导 的模 型 鹌 鹑 、 常 大 鼠及 高 果 糖 饮 食 诱 导 的模 型 大 鼠 全 血 GA DH 运 高 正 P
Li a qn , nZ ii n, h n n uXi o ig Li h ja Z a g Bi g
( ii g Un v riy o ieeMe cn Bej n 0 0 9, ia Bejn ie st f Ch n s dii e, iig 1 0 2 Chn )
的 活性 。结 果 全血 与 血 清 G D 酶 促 反 应 时 间 曲线 类似 , AP H 变异 系数 均 小 于 1 。方 法 学 应 用 结 果 显 示 , 正 常 鹌 鹑 比 , 嘌 O 与 高
呤 饮 食 诱 导 的 模 型 鹤 鹑 在 高尿 酸 血 症 及 其 合 并 脂 、 代 谢 紊 乱 状 态下 ( O 10d 全 血 GAP 糖 6 ~ 4 ) DH 活 性 显 著 降 低 ; 正 常 大 鼠 比 , 与 高
关键 词 : 酸甘 油 醛 脱 氢 酶 ; 检 测 方 法 ; 全 血 ; 代 谢 性 疾 病 磷
D I 1 . 9 9 jis . 6 34 3 . 0 2 0 . 1 O : 0 3 6 /.sn 1 7 — 1 0 2 1 . 2 0 3 文献标识码 : A 文 章 编 号 :634 3 ( 0 2 0— 1O0 1 7 —10 2 1 )20 6一2
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SH2
NAD+
NADH
S
FMNH2 (Fe-S) FMN (Fe-S)
CoQ
CoQH2
2Cyt-Fe2+
2Cyt-Fe3+
1/2O2
O2-
(b、 c1、 c 、 aa3)
每2H通过此呼吸链可生成3分子ATP。
2、琥珀酸氧化呼吸链 琥珀酸 延胡索酸 FAD (Fe-S)b O2-
FADH2 (Fe-S)b
第五章 生物氧化
Biological Oxidation
学习目标
掌握线粒体内两条呼吸链的组成及功能 掌握生物氧化、氧化磷酸化、呼吸链的概念 熟悉ATP生成方式及影响氧化磷酸化的因素 了解生物氧化的特点及酶类
第一节
概 述
一、生物氧化 1、概念:物质在生物体内进行氧化称生物氧化, 主要是糖、脂肪、蛋白质等在生物体内的氧化 分解生成CO2 和 H2O并释放能量的过程。 2、部位: (1)线粒体 (2)内质网、微粒体、过氧化物酶体等。 3、意义:供给机体能量;转化有害废物。
受氢体, 生成H2O。
例:细胞色素氧化酶;黄嘌呤氧化酶等。
2、脱氢酶类:
(1)需氧脱氢酶类:催化底物脱氢后,以O2为直接 受氢体,生成H2O2。 (2)不需氧脱氢酶类(最重要)
催化底物脱氢后,不能以O2为直接受氢体 A、以NAD +或NADP +为直接受氢体,如乳酸脱氢酶等。 B、以FMN或FAD为直接受氢体,如琥珀酸脱氢酶等。
H H CONH 2
C CONH2 N R
+
+ H + e + H+
N R
+ H+
H 2H e
NAD(P)+
+2H -2H
NAD(P)H+H
H
H+
2、以FMN或FAD为辅基的脱氢酶 作用: 进行可逆的脱氢加氢反应。
黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD)
含核黄素(Vit B2 )
异咯嗪结构
黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD)
R-CH2-NH2 + CO2

2. –直接脱羧:
见于草酰乙酸的脱羧作用。

CH2-COOH

草酰乙酸脱羧酶
CH3

+ CO2
CO-COOH 草酰乙酸
CO-COOH 丙酮酸
3. -氧化脱羧: 见于丙酮酸的脱氢与脱羧作用。
丙酮酸脱氢酶系 CH3-CO-COOH + HSCoA CH3CO~SCoA + CO2
含核黄素(Vit B2 )
异咯3C N O N O NH
+2H -2H
H3C H3C N H O NH
还原型 核黄素(无色)
H N H N O
核黄素(黄色)
FAD/FMN
+2H -2H
FADH2/FMNH2
3、泛醌
(辅酶Q)的结构及作用原理 O CH3 CH3 H3C (CH2CH=C CH2)n H O OH3C O OH O CH3 +2H CH3 H3CO R R -2H H3CO O OH
丙酮酸
NAD+
NADH + H+
乙酰CoA
4. –氧化脱羧:
见于苹果酸的脱氢与脱羧作用。

CH2-COOH
苹果酸酶
NADP+
CH3 CO-COOH + CO2
CH-COOH
OH
NADPH + H+
苹果酸
丙酮酸
第三节 线粒体氧化体系
1、呼吸链的定义: 在线粒体内膜上,由递氢体和递电子体按 一定顺序组成的连锁体系,与细胞利用氧的呼 吸过程有关,通常称为呼吸链,又称电子传递 链。 2、呼吸链的功能:将代谢物脱的氢传递给氧生 成水,逐步放能,将ADP磷酸化生成ATP。
H3CO H3CO
(二)单电子传递体 1、铁硫蛋白类
Fe
2+
-e +e
Fe 3+
作用:将FMN或FAD中的电子传递给泛 醌。
铁硫蛋白
S
无机硫
S
半胱氨酸硫
2、细胞色素体系(Cyt) 1) Cyt的本质
细胞色素 = 酶蛋白 + 血红素
2) Cyt的分类
a组:a、a1、a2、 a3 …
30多种
一、呼吸链的组成
(一)递氢体
1、 以NAD+和NADP +为辅酶的脱氢酶 作用: 辅酶接受2H,传递给黄素蛋白。
NAD+和NADP+的结构
R=H: NAD+;
R=H2PO3:NADP+
NAD+(NADP+)和NADH(NADPH)相互转变
氧化还原反应时变化发生在五价氮和三价氮之间。
作用原理
H
CoQH2 CoQ
2Cyt-Fe3+
1 O2 2 (b、 c1、 c 、 aa3)
2Cyt-Fe2+
每2H通过此呼吸链可生成2分子ATP。
NADH氧化呼吸链
FADH2氧化呼吸链
三、呼吸链的作用
(一) H2O的生成
(二)ATP的生成
高能键与高能化合物
高能键:化学键水解时放出的能量>21KJ/mol 者, 用~表示 高能键包括高能磷酸键和高能硫酯键 高能化合物:含高能键的化合物
b组:b、b1~7、P450 … c组:c、c1、c2、 c3 …
3)Cyt的作用
2Cyt-Fe3++2e 2Cytaa3-Fe2+ +1/2O2 2Cyt-Fe2+ 2Cytaa3-Fe3+ +O2-
Cyt aa3 (细胞色素氧化酶): 呼吸链中直接将e传递给O2
二、呼吸链的类型
1、NADH氧化呼吸链
2、生物氧化与体外氧化的区别
生物氧化
反应条件 温 和 (体温、pH近中性) 反应过程 逐步进行的酶促反应 能量释放 逐步进行 (化学能、热能) CO2生成方式 有机酸脱羧 H 2O 需 要
体外氧化
剧 烈 (高温、高压) 一步完成 瞬间释放 (热能) 碳和氧结合 不需要
三、参与生物氧化的酶类 1、氧化酶类:催化底物脱氢后,以O2为直接
* 生物氧化的一般过程
糖原 三酯酰甘油 蛋白质 氨基酸
葡萄糖
脂酸+甘油
乙酰CoA
TAC
CO2 2H
ADP+Pi 呼吸链
ATP H2O
二、生物氧化的特点
体外氧化(燃烧)
常见的两类氧化反应: 生物氧化 1、生物氧化与体外氧化的共性 (1)氧化方式相同:都有加氧、脱氢、失电子。 (2)本质相同:即消耗的氧、生成的终产物(CO2 和H2O)、释放的总能量均相同。
3、其他酶类:
如:加氧酶,过氧化氢酶等。
第二节 生物氧化中二氧化碳的生成
一、基本方式: 有机酸脱羧 二、分类 (一)根据羧基位置分为 α-脱羧 β-脱羧 (二)根据是否伴有氧化分为 直接脱羧:不伴氧化 氧化脱羧:伴氧化
1. –直接脱羧: 见于氨基酸的脱羧作用。

氨基酸脱羧酶
R-CH-COOH NH2 氨基酸
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