3-磷酸甘油醛脱氢酶 ,GAPDH
3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应
3磷酸甘油醛脱氢酶负协同效应1. 介绍3磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）是一种广泛存在于生物体中的酶，参与细胞内糖酵解途径中的关键步骤。
磷酸甘油醛脱氢酶催化的反应是糖酵解过程中产生ATP的关键步骤之一。
然而，近年来的研究发现，GAPDH在细胞内还具有许多其他功能，其中之一就是负协同效应。
负协同效应是指某一物质在存在其他物质的情况下，其活性或功能受到抑制或降低的现象。
在GAPDH中，负协同效应主要指的是当细胞内存在某些调控因子时，GAPDH的酶活性会受到抑制或降低。
这些调控因子可以是其他酶、蛋白质、小分子化合物等。
2. 负协同效应的机制目前，关于GAPDH负协同效应的机制还存在一定的争议，但已经有一些研究取得了重要的进展。
以下是一些目前已知的GAPDH负协同效应的机制：2.1. 蛋白质相互作用GAPDH可以与许多其他蛋白质发生相互作用，这些相互作用可能导致GAPDH的酶活性受到抑制。
例如，研究发现，GAPDH可以与肿瘤抑制因子p53相互作用，并抑制其转录活性。
此外，GAPDH还可以与一些转录因子相互作用，影响其转录活性。
2.2. 磷酸化修饰磷酸化修饰是细胞内常见的一种调控机制，可以改变蛋白质的结构和功能。
研究表明，GAPDH的酶活性可以通过磷酸化修饰发生变化。
一些研究发现，当GAPDH被磷酸化时，其酶活性会受到抑制。
磷酸化修饰可以通过激酶的作用进行，也可以通过磷酸酶的作用进行逆反应。
2.3. 产物抑制在糖酵解过程中，GAPDH催化磷酸甘油醛与NAD+反应生成磷酸甘油酸和NADH。
研究发现，当NADH的浓度较高时，它可以与GAPDH结合形成复合物，从而抑制GAPDH的酶活性。
此外，其他代谢产物，如ATP、ADP等，也可以通过类似的机制抑制GAPDH的酶活性。
3. 生理意义GAPDH负协同效应在细胞内具有重要的生理意义。
首先，通过调控GAPDH的酶活性，细胞可以控制糖酵解过程的速率，以适应不同的代谢需求。
高羊茅甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因FaGAPDH的克隆与分析
域功 能分析表 明两基 因编码 的蛋 白质 都具有 典型 的 Ｒ ｓ ｎＮＡ ｏｓ — Ｄ连 接折 叠和 Ｃ ｍａ 一末 端结 构域 。ＦＧ ＤＨ１ ａ ＡＰ
和 Ｆ Ｇ Ｐ ２蛋 白与禾本科 植物 的该基 因蛋 白产 物 比较发现 氨基酸 序列 的 同源 性都在 ９ ％以上 ，说 明两基 ａ Ａ ＤＨ ０ 因具有 高度 的保 守性 。 关键 词 高羊茅 ， 一磷 酸甘 油醛脱 氢 酶基 因， 隆 ３ 克
Ｃｌ ｎ ｎ ｎ ａ ａ ｔｒｚ ｔｏ ｆ Ｇｌ ｃ ｒ ｌ ｅ ｙ ｅ—— ｈｏ ｐ ａｅ Ｄｅ ｙ ｒ ｇ － ｏ ｉ ｇ ａ ｄ Ｃｈ ｒ ｃ ｅ ｉａ ｉｎ ｏ ｙ ｅ ａ ｄ ｈ ｄ — — ｓ ｈ ｔ ｈ ｄ ｏ ｅ－ ３Ｐ ｎ ｓ ｎｅ Ｇ ａ ｅＧｅ Ｈ ｌ Ｆｅ ｃ ｅ ｉ Ｔａｌ ｓ ｕ ｎ
研 究报告
Ａ ｔｅ Ｌｅｔ ｒ
高羊茅 甘 油醛 一 一 酸脱 氢 酶基 因 Ｆ Ｇ Ｄ 的克 隆与 分析 ３磷 ａ ＡＰ Ｈ
王 小利 １ 刘 晓 霞 李 晚忱 ｚ 吴佳 海 杨 义 成 陈伟 王 舒颖 ， ２
１ 贵州省草业研 究所， 阳， ５ ０ ６ ２四川农业大学玉米研 究所， 贵 ５００； 雅安， ２ ０ １ ６ ５ ０
ｑ ｎ ｅｏ ｕｅ ｃ ｆＧＡＰＤＨ ｅ ｒ ｍ ｌｕ ｐｅ ｅ ｎ ，ｔ ｕｌ—ｅ ｇ ｈ ｃ ｇ ｎｅｆｏ Ｌｏ ｉ ｍ ｒ ｎ ｅ Ｌ． ｗｏ ｆ ｌｌ ｎ ｔ ＤＮＡｓ ｏ ｆＧＡＰＤＨ ｅ ｓｗｅ ｅ ｃ ｏ ｅ ｒ ｍ ａｌ ｇ ｎｅ ｒ ｌ ｎ ｄ ｆｏ ｔ ｌ ｆ ｓ ｕｅｂ ｅ ｃ ｙ ＲＴ－ ＰＣＲ ｏ ｃ ｍｂｉ ｄ ｗｉ ＇ ｎｅ ｔ ３ＲＡＣＥ ｎ ＲＡＣＥ． ｅｔ ｏ ｎ ｗｌ ｌ ｎ ｄ ＧＡ ＤＨ ｅ ｓｗｅ ｅｄｅ ｉ ａ ｅ ｓ ｈ ａ ｄ ５＇ Ｔｈ ｗ ｅ ｙｃｏ ｅ Ｐ ｇ ｎｅ ｒ ｓｇ ｔｄ ａ ｎ
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2215规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12uL×1支，4℃保存。
临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。
甘油醛3-磷酸脱氢酶
甘油醛3-磷酸脱氢酶甘油醛3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种重要的蛋白质，它在生物体内起着重要的作用。
GAPDH存在于几乎所有生物种类，包括细菌、动物和植物。
它是一个由四个亚基组成的四聚体，每个亚基含有一个催化中心。
GAPDH可以在细胞内的糖酵解途径、Gluconeogenesis 途径和细胞凋亡中发挥重要的作用。
GAPDH在糖酵解途径中的作用是将葡萄糖转化为丙酮酸。
在这个过程中，GAPDH将葡萄糖分子氧化为葡萄糖6-磷酸酸，然后，葡萄糖6-磷酸酸进一步分解为丙酮酸和磷酸二羧酸，GAPDH就是催化葡萄糖6磷酸酸和磷酸二羧酸互相转化的关键酶。
这个过程同时释放了能量，产生ATP和NADH。
GAPDH还参与了细胞凋亡中的过程。
细胞凋亡是细胞程序性死亡的重要形式。
在细胞凋亡过程中，GAPDH通过与Siah1相互作用，促进了肿瘤坏死因子-α介导的细胞凋亡。
GAPDH与Siah1相互作用后，可以增强Cdk5激活的受体神经元1（NR1）的降解，从而加强细胞凋亡。
在Gluconeogenesis途径中，GAPDH的作用相当于磷酸甘油脱氢酶（G3PDH），它可以将丙酮酸还原为葡萄糖6磷酸酸，从而增加葡萄糖的储存量。
除此之外，GAPDH在细胞内通过与其他蛋白质的相互作用参与了很多其他的生物过程，例如运输、蛋白质合成等。
虽然GAPDH的作用十分重要，但是它也参与了一些其他非正常的生物过程中。
例如，当细胞受到压力时，会增加GAPDH的表达，这种过度表达会导致细胞的凋亡。
此外，GAPDH 还可以在疾病的发生发展中发挥作用。
例如，GAPDH的过度表达在癌细胞中广泛存在。
GAPDH还可以通过和其他蛋白质的相互作用参与神经性疾病的发生和发展。
综上所述，甘油醛3-磷酸脱氢酶（GAPDH）是一种常见的酶，参与了多种生物过程，包括糖酵解途径、Gluconeogenesis途径和细胞凋亡。
与此同时，GAPDH也参与了一些异常生物过程，包括癌症、神经性疾病等。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)试剂盒说明书
货号：MS2205 规格：100管/96样3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
测定原理3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3 二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化 1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD，340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH 活性的高低。
需自备的仪器和用品分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制提取液：100mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；试剂三：液体×1 支，4℃保存；样本的前处理1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（1）工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热10分钟；现配现用。
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA 试剂盒 使用说明书
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒使用说明书产品编号：D711286包装规格：48 TESTS / 96 TESTS声明：使用前仔细阅读本说明书。
只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途用于人血清、血浆或其他相关生物液体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗夹心酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。
测定样品中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶水平。
向预先包被了抗人甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体。
再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人甘油醛-3-磷酸脱氢酶浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶的浓度。
1 / 262 / 26原理图：试剂盒组成说明书1份1份封板膜5片5片预包被酶标板8孔X 6条8孔X 12条-20°C 标准品1瓶2瓶-20°C 标准品/样本稀释液SD120 mL X 1瓶20 mL X 1瓶2-8°C 浓缩生物素标记甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体（100X ）60 μl120 μl-20°C生物素标记抗体稀释液SD214 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C浓缩HRP 标记链霉亲和素（100X ）60 μl120 μl-20°C （避光）HRP标记链霉亲和素稀释液SD314 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C显色剂10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C （避光）终止液10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C浓缩洗涤液（25×）30 mL X 1瓶30 mL X 1瓶2-8°C需要而未提供的试剂和器材1.37°C恒温箱2.酶标仪（450 nm波长滤光片）3.精密移液器及一次性吸头4.去离子水或蒸馏水5.一次性试管6.洗板机或洗瓶，吸水纸注意事项1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
银杏GAPDH基因序列的初步克隆
银杏GAPDH基因序列的初步克隆潘伟明;刘文;杨妙贤;刘胜洪;梁红【摘要】3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是生物体内精酵解作用中的一个关键酶,由于其在细胞中表达量相对恒定而在植物研究中常被作为内源参照基因.在提取高质量银杏叶片总RNA的基础上,运用RT-PCR法对银杏GAPDH基因的部分序列进行了克隆.研究结果表明,使用SP提取法提取的银杏叶片组织总RNA质量高,28S RNA和18S RNA条带明亮清晰;用Oligo(dT)18为反转录引物,合成第一链,再利用GA PDH基因特异扩增引物进行PCR扩增,获得了银杏GA PDH基因的特异性cDNA片段,其长度大约为500 bp.GA PDH基因的成功克隆为半定量RT-PCR以及Real-time RT-PCR等技术在银杏分子生物学研究中的应用提供了内标参照物.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2010(037)008【总页数】3页(P196-198)【关键词】银杏;GAPDH基因;RT-PCR【作者】潘伟明;刘文;杨妙贤;刘胜洪;梁红【作者单位】仲恺农业工程学院科技处,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业工程学院生命科学学院,广东,广州,510225【正文语种】中文【中图分类】S664.3;Q7813-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceral-dehyde-3-phosphate dehyrogenase，GAPDH）是生物体内糖酵解作用中的一个重要的酶，该酶在NAD+和无机磷酸(Pi)的参与下，催化甘油醛－3-磷酸氧化和磷酸化，生成1，3－二磷酸甘油酸，从而促使糖酵解过程第一个ATP的产生[1]。
由于其参与了细胞的基本代谢过程,GAPDH基因被认为是一个持家基因(house-keeping genes)[2]。
3磷酸甘油醛脱氢酶糖无氧氧化
3磷酸甘油醛脱氢酶糖无氧氧化（最新版）目录1.3-磷酸甘油醛脱氢酶简介2.糖无氧氧化过程3.3-磷酸甘油醛脱氢酶在糖无氧氧化中的作用4.3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用5.结论正文3-磷酸甘油醛脱氢酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，简称 GAPDH）是一种参与糖酵解途径的酶，主要作用是在细胞溶酶体内进行氧化还原反应。
糖无氧氧化是一种在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸或酒精和二氧化碳的过程，这一过程在生物体内有着重要的生理意义。
本文将从 3-磷酸甘油醛脱氢酶的角度，探讨糖无氧氧化的过程及其应用。
在糖无氧氧化过程中，葡萄糖首先被磷酸化为葡萄糖 -6-磷酸（G6P），然后转化为果糖 -6-磷酸（F6P），接着果糖 -1,6-双磷酸（F1,6BP）产生，这个过程需要消耗一个 ATP 分子。
随后，F1,6BP 裂解为两个三磷酸甘油醛（3-phosphoglyceraldehyde，3-PGAL），此时 3-磷酸甘油醛脱氢酶发挥作用，将一个 3-PGAL 转化为磷酸二羟基丙酮酸（DHAP），同时产生一个 ATP 分子。
然后，DHAP 通过一系列反应转化为丙酮酸，最后生成乳酸或酒精和二氧化碳。
3-磷酸甘油醛脱氢酶在糖无氧氧化过程中起到了关键作用，它将一个不稳定的化合物 3-PGAL 转化为稳定的 DHAP，同时产生一个 ATP 分子，为细胞提供了能量。
此外，3-磷酸甘油醛脱氢酶还有其他功能，例如参与氧化应激反应、调控细胞生长等。
3-磷酸甘油醛脱氢酶在生物体内有着广泛的应用。
首先，由于其在糖无氧氧化过程中的关键作用，3-磷酸甘油醛脱氢酶可以作为研究糖酵解途径的重要靶点。
其次，3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性可以作为评估细胞状态的指标，例如在缺氧、氧化应激等条件下，3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性会发生变化。
最后，3-磷酸甘油醛脱氢酶还可以应用于生物医学领域，例如在肿瘤诊断、评估治疗效果等方面有着潜在的应用价值。