Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱
默克---HILIC柱介绍
affected during eluent optimization.
0
1
2
Retention Time (min)
Injection #1001
Injection #501
BSFBMTPEJTQMBZFE
PDUBOPMXBUFSQBSUJUJPODPFGGJDJFOU
Toluene 甲苯
Hexane 正己烷
2
3
Analyte LogP *
3PCVTU[XJUUFSJPOJDTPSCFOU 强劲的两性离子吸附剂
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate all types
通常都很小甚至是负值， normally characterized by a small or negative LogP value*
在反相色谱上保留很弱。 and have poor retention on reversed-phase columns.
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate
????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????
亲水作用色谱HILIC实用指南
指导与应用手册· 1亲水作用色谱 HILIC实用指南指导与应用手册2 · HILIC实用指南亲水作用色谱(HILIC)实用指南原著作书名:A Practical Guide to HILIC原著作者:Patrik Appelblad, Tobias Jonsson, Einar Pontén, Camilla Viklund and Wen Jiang中文版编辑：Wen Jiang (江文）ISBN 978-91-631-8370-6瑞典SeQuant AB出版, 地址: Box 7956, 907 19 Umeå, Sweden.版权所有© 2005-2008, SeQuant AB2008年2月第一版，第一次印刷，瑞典于默奥(Umeå)修订及额外资料可以在Merck SeQuant公司网页上找到，网址。
如有其它问题及信息反馈，请与info@联系。
HILIC实用指南–指导与应用手册引言本手册旨在介绍一种适用于分析强极性和强亲水化合物的液相色谱分析方法–亲水作用液相色谱(H ydrophilic I nteraction Li quid C hromatography，HILIC)。
主要介绍HILIC的基本理论和该分离模式下的一些实际问题，同时给读者介绍瑞典SeQuant 公司的ZIC ®-HILIC(硅胶基质)和ZIC ®-p HILIC(聚合物基质) 两性离子液相色谱柱(见图1)，以及使用这两种色谱柱分析不同类型亲水化合物的应用实例。
您也会从本手册中获得该类色谱和其他方面的色谱知识。
图1 ZIC ®-HILIC和ZIC ®-p HILIC两性离子固定相的官能团如果本手册不能解决您的HILIC 问题，SeQuant愿为你提供进一步帮助。
首先，建议您登陆SeQuant 公司网站主页()，从那您能找到关于我们产品的最新文献资料、应用报告和技术数据。
亲水多孔硅胶色谱柱
亲水多孔硅胶色谱柱柱床填充：亲水多孔硅胶（HILIC）色谱柱以其独特的分离机制在色谱领域得到了广泛的应用。
它是一种新型的色谱柱填充材料，能够有效地分离亲水性物质，广泛适用于分析和生物药物制剂的固定相。
亲水多孔硅胶填充物的独特性能使其在分析和制备中具有重要的应用价值。
亲水多孔硅胶色谱柱由一种多孔性硅胶基质组成，具有大的表面积和优异的亲水性能。
柱床填充物的多孔结构可以提供更大的分析表面积，使样品充分与固定相接触，有利于分析物的吸附和分离。
亲水多孔硅胶材料的亲水性能可以与溶液中的亲水性溶剂相互作用，从而实现分析物的选择性分离。
分离机理：亲水多孔硅胶色谱柱的分离机理是基于静电和极性相互作用的。
亲水性化合物在亲水多孔硅胶上发生吸附，而疏水性化合物则迅速通过柱床。
这种分离机理可以用于分离多种亲水性物质，如醇类、酚类、胺类等。
应用领域：亲水多孔硅胶色谱柱在药物分析、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用。
在药物分析中，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于分离和定量分析亲水性物质，如抗生素、植物提取物等。
在环境监测中，亲水多孔硅胶色谱柱常用于分离和测定水中的有机污染物，如酚类、抗生素、农药等。
在食品安全领域，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于检测食品中的添加剂、农药残留等亲水性物质。
优点：亲水多孔硅胶色谱柱具有以下几个优点。
首先，它的静电和极性相互作用机理适用于各种类型的亲水性化合物分离。
其次，亲水多孔硅胶色谱柱具有优异的选择性和分离效能，能够有效地分离复杂样品。
此外，亲水多孔硅胶色谱柱具有较大的样品容量和较好的重复性，可满足分析研究的需要。
总结：亲水多孔硅胶色谱柱是一种用于分离亲水性物质的重要工具，其独特的分离机理和优异的性能在多个领域得到了广泛的应用。
随着科学技术的不断发展和进步，亲水多孔硅胶色谱柱的分离效能和选择性还将进一步提高，为各种样品的分离和分析提供更好的解决方案。
亲水作用(Hilic)色谱简介,以及和正相色谱相、反相色谱比较
亲水作用（H i l i c）色谱，有时被称为“含水正相色谱”，有时又被称为“反反相色谱”，简单来说，是极性的固定相和极性的流动相组成，参考表1，在固定相方面，看似和正相色谱一样，那么，同一款色谱柱是否既可以用于正相色谱，又可以用于H i l i c色谱？在流动相方面，和反相色谱接近，那两种模式保留行为和流动相对保留的影响规律有什么差异？你对H i l i c色谱是否也疑惑重重？接下来让我们一起揭开亲水作用（H i l i c）色谱的神秘面纱吧。
表1 反相、正相、Hilic色谱对比一、Hilic简介1.1流动相在大多数的Hilic分离中，采用的流动相为含有少量水/缓冲液与有机相混合（典型的是乙腈），水的比例为3%-40%之间。
水的比例不低于3%是由于Hilic色谱的保留机理决定的，普遍认为Hilic色谱流动相中的水会被吸附到极性固定相的表面形成水膜，然后分析物在水膜和流动相之间进行液液分配作用，加上极性官能团和固定相之间的氢键作用力，离子官能团之间的静电作用力等，实现被分析物的保留。
水膜的作用非常重要，所以Hilic流动相中至少含有3%的水。
当水的比例大于40%时，保留一般很弱（k≈0）。
1.2固定相应用于Hilic色谱的固定相有：纯硅胶柱、氨基柱、二醇基柱、酰胺基柱等。
纯硅胶柱有固定相不易流失的优点，在使用CAD、ELSD和LC-MS检测器时，最受欢迎；氨基柱，在Hilic 色谱中的应用，特别适合碳水化合物（糖类）分离；二醇基柱，亲水性很好，可以提供不同的选择性。
二、Hilic和正相色谱相比2.1固定相的区别同样是Silica，NH2，Diol柱，与用于正相色谱中的色谱柱不同，专为Hilic色谱设计的色谱柱，可以用于水/有机物的流动相中，换句话说，Hilic色谱对固定相的耐水性要求更高，否则会因固定相的水解，出现基线噪音大、色谱柱寿命短等问题。
所以用于正相色谱中的色谱柱，不一定能用于Hilic色谱。
糖类化合物亲水作用色谱保留行为评价_傅青
松三糖（ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ），均 购 自 Ｄｒ．Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ Ｇｍ－ ｂＨ （Ａｕｇｓｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。称 取 适 量 的 标 准 品 用 ５０％（ｖ／ｖ）的乙腈水 溶 液 溶 解 配 制 成 混 合 标 准 溶 液 备用。 乙腈（Ｍｅｒｃｋ）、甲 醇 （Ｍｅｒｃｋ）、丙 酮 （Ｋｅｒｍｅｌ）均 为色谱纯；Ｍｉｌｌｉ－Ｑ 超纯水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。甲 酸 铵 和 甲 酸购 自 Ａｃｒｏｓ（Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，ＵＳＡ）。１００ ｍｍｏｌ／Ｌ 甲酸铵 缓 冲 溶 液：称 取 ６．３ｇ 甲 酸 铵 固 体 溶 入 １Ｌ 水中制得，并用甲酸将其 ｐＨ 值调至３．０。 药 材 及 样 品 处 理：取 干 燥 的 地 黄 药 材 ２５ｇ，粉 碎，用２５０ｍＬ 水 煎 煮 １２０ ｍｉｎ。 固 液 分 离 后，固 体 继续 用 ２５０ ｍＬ 水 再 煎 煮 ９０ ｍｉｎ。 合 并 两 次 煎 煮 液，喷雾 干 燥。 称 取 上 述 地 黄 干 粉 １０ ｍｇ，溶 于 １ ｍＬ 水 中，使 用 石 墨 化 碳 进 行 预 处 理［１８］，收 集 １５％ （ｖ／ｖ）的 乙 腈 水 溶 液 洗 脱 部 分，氮 气 吹 干 后，溶 于 ２００μＬ ５０％ （ｖ／ｖ）的 乙 腈 水 溶 液 中 ，备 用 。 １．２ 实 验 条 件 流 动 相：Ａ 相 为 乙 腈，Ｂ 相 为 水，Ｃ 相 为 １００ ｍｍｏｌ／Ｌ 甲酸铵 缓 冲 液 （ｐＨ ３．０）；考 察 有 机 溶 剂 影 响时将乙腈换为甲 醇 或 丙 酮；用 于 建 立 保 留 方 程 的 保留时间测定时使用 Ａ、Ｂ 两相，Ｂ 相 体 积 比 依 次 为 １０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％ 和 ４０％，预测 保 留 时 间时 Ｂ 相体积比为２２％；考察缓冲盐浓度影响时，Ａ 相体积比为 ７８％，Ｃ 相 体 积 比 依 次 为 ０、５％、１０％、 １５％ 和 ２０％；每 个 实 验 重 复 两 次；流 速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ；柱 温：３０ ℃；检 测 器：蒸 发 光 散 射 检 测 器 （ＥＬＳＤ），参 数 设 置 为 吹 扫 氮 气 压 力 为 ２．０７×１０５ Ｐａ，漂移管温度８５ ℃，增益值１０；保留因子（ｋ）：ｋ＝ （ｔＲ－ｔ０）／ｔ０，其中，ｔＲ 为溶质保 留 时 间，ｔ０ 为 死 时 间。 ｔ０ 的测定方法：流动相为１００％乙腈时，进样０．５μＬ 甲醇得到的保留时间。实验测得麦芽糖色谱柱的死 时 间 为 １．９１２ ｍｉｎ。
亲水作用色谱法（HILIC）的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用
亲水作用色谱法（HILIC）的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【摘要】亲水作用色谱法解决了大多数极性化合物的色谱分离问题，其已成为包括铂类抗癌药在内的许多极性化合物的色谱分离的首选。
亲水作用色谱法在极性化合物的分离与检测、药代动力学研究等的应用均日益广泛。
如何高效地完成亲水作用色谱的方法开发是药物分析科学家和药代动力学科学家都面临的重要问题，然而目前还没有专门的文献对此进行系统化的整理和研究。
本文以此为切入点，围绕亲水作用色谱法方法开发中的固定相选择、流动相筛选、pH值与洗脱的优化等方面，综述了亲水作用色谱（HILIC）的方法开发策略，以及其在铂类抗癌药分析中的应用。
【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2018(037)011【总页数】5页(P654-658)【关键词】亲水作用色谱;方法开发;极性化合物;铂类抗癌药【作者】秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【作者单位】中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;【正文语种】中文【中图分类】R917自1990年Alpert首次提出亲水作用色谱(HILIC)的概念，亲水作用色谱便受到了药代动力学科学家们的持续关注与应用研究[1-4]。
直至现在，新的HILIC固定相依旧层出不穷，亲水作用色谱的保留机制仍是色谱分离研究的热点[5-9]。
商业化的亲水作用色谱柱(HILIC)早在2003年初就进入研发阶段，目前市场上已有多种类型的亲水作用色谱柱，涉及的固定相类型也是非常多。
HILIC色谱柱介绍
亲水作用（HILIC）是近年来色谱领域研究的热点之一。
本文简介了HILIC的起源、定义、分离特点；比较了HILIC和反相色谱（RPLC）的选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术的特点，并对其使用中的进行了总结。
1. HILIC的概念亲水色谱（HILIC）是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。
它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。
而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（ESI-MS）的灵敏度。
2. HILIC的分离机制HILIC的分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换（3）偶极-偶极相互作用。
更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。
影响保留的主要因素普遍认为HILIC保留行为受到多种参数的影响，如固定相的官能团、有机改性剂的含量、流速、柱温、流动相缓冲体系的pH值、缓冲盐的种类和浓度。
影响样品在固定相上的保留行为的最主要因素都是流动相中有机相的比例，例如乙腈的含量的增加会显着增加样品的保留因子。
在HILIC分离模式中，溶剂洗脱能力由弱到强为：四氢呋喃<丙酮<乙腈<异丙醇<乙醇<甲醇<水, 流动相中水是最强的洗脱溶剂。
一般采用乙腈-水体系作为流动相，其中水相的比例为5%-40%以保证其显着的亲水作用。
如图1所示，将流动相中的水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性的减小，待测物在柱上的保留就会增强。
Figure 1. HILIC retention as a function of polar modifier. 100 mm length ACQUITY UPLC BEH HILIC column. Peaks: 1 = methacrylic acid, 2 = cytosine, 3 = nortriptyline, 4 = nicotinic acid.4. HILIC与RP-HPLC的比较传统的反相色谱（RPLC）对强极性和亲水性的小分子物质的保留和分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例的水相才能实现其保留，然而高比例的水相会导致一系列问题，比如固定相的反浸润和ESI-MS灵敏度的下降。
美国药典色谱柱型号对照之欧阳体创编
美国药典色谱柱型号对照下面是USP规定的编号所对应的色谱柱类型。
L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱L2：30～50mm表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱L4：30～50mm表面多孔薄壳型硅胶柱L5：30～50mm表面多孔薄壳型氧化铝柱L6：30～50mm实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱L14：10mm硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱L18：3～10mm全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。
能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱L27：30～50mm的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5mm，孔径80ÅL30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31:季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33:能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9mm球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150ÅL36:5mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40000MW的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43:硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44:多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46:季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球L1 Octadecyl silane chemically bonded to porous silica or ceramic. L1 十八烷基键合硅烷化学键合于多孔硅胶或陶瓷微粒，3-10u。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱，键合相为中性的酰胺基团。
在处理强极性化合物方面，Venusil HILIC色谱柱比反相C18色谱柱表现出更大的优势，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。
HILIC是一种亲水作用色谱模式，其洗脱是以化合物亲水性/极性增加的次序排列，典型的流动相是乙腈（40%--97%）－水（或挥发性缓冲盐），所以HILIC色谱具有和反相色谱互补的选择性，同时它可以使用更高挥发性的流动相，增加了HILIC色谱的LC/MS分析灵敏度，降低了分离的压力。
同时HILIC色谱摒弃了离子对试剂，极大的方便了制备色谱方法的开发。
Venusil HILIC色谱柱与传统的氨基柱和硅胶柱相比，Venusil HILIC色谱柱具有更好的重现性和寿命。
Venusil HILIC是是替代氨基柱和硅胶柱的最佳选择。
硅胶纯度>99.999%；pH适用范围2.0-8.0；孔径100Å
水溶性维生素分析（与硅胶柱比较）
另外，Venusil HILIC 由于其出色的亲水性用于测益母草中的盐酸水苏碱已经被中国药典所收录。
从化学结构上看，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱由于含有较多的极性基团（-OH、-NH2、-COOH）和孤对电子，水溶性特别强，因此普通的C18反相色谱柱已不能满足此类化合物的分析要求，最重要的原因即亲水性成分在C18柱上没有保留。
而丙基酰胺键合硅胶（HILIC)克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相，逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下，可以有效的保留极性化合物，是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式.
可用于奶粉中双氰胺检测！。