Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择
waters 消耗品及色谱柱指南
最佳柱床密度（OBD）制备柱------------------------------------------------------------------------------- 41 径向加压柱 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 48
氨基酸分析 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 57 多肽分析和纯化 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 58 蛋白质分离和纯化----------------------------------------------------------------------------------------------- 59 DNA/寡核苷酸分析和纯化------------------------------------------------------------------------------------- 62 MS及LC/MS消耗品-------------------------------------------------------------------------------------------------- 63
Oasis® HLB：用于酸性、碱性与中性化合物的亲水亲脂平衡 反相吸附剂
液相层析法中色谱柱选择与操作技巧
液相层析法中色谱柱选择与操作技巧液相层析法（Liquid Chromatography，LC）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
在液相层析实验中，选择合适的色谱柱和掌握操作技巧是非常重要的，本文将探讨液相层析法中色谱柱选择与操作技巧的相关内容。
一、色谱柱的选择1. 相性选择在选择色谱柱时，相性是首要考虑因素之一。
色谱柱的相性应与待分离的化合物相匹配，以保证分离效果。
对于极性化合物，可以选择正相色谱柱，如C18柱；对于非极性化合物，可以选择反相色谱柱，如C8柱。
此外，还有其他特殊相性的色谱柱，如糖酒石酸柱、氨基酸柱等，可以根据需要进行选择。
2. 尺寸选择色谱柱的尺寸也是需要考虑的因素之一。
常见的色谱柱直径有2.1 mm、4.6mm等，长度一般为150-250 mm。
选择合适的柱尺寸可以提高分离效果和样品通量，同时也会影响分离时间和分辨率。
对于复杂的样品，可以选择细柱，如2.1mm×50 mm，以提高峰形和分辨率；对于样品量较大的情况，可以选择大柱径，如4.6 mm×250 mm，以增加样品通量。
3. 粒径选择色谱柱的粒径也是一个重要的选择因素。
粒径是指填充在柱中的固定相颗粒的直径，常见的有3 μm、5 μm、10 μm等。
粒径越小，表面积越大，分离效果越好，但也会带来较高的压力和较长的分离时间。
一般而言，对于常见的分析要求，5μm的粒径已足够满足分离要求；对于更高的分离要求，可以选择更小的粒径。
需要注意的是，选择不同粒径的柱时，需调整相应的操作参数，以保证分离效果。
二、色谱柱的操作技巧1. 前处理样品在液相层析实验中，样品前处理是一个非常关键的步骤。
样品中的杂质和干扰物会对分离效果产生不利影响，因此需要进行适当的前处理。
常见的前处理方法包括：固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）、液液萃取等。
前处理的目的是提取和富集分析物或去除干扰物，以提高检测灵敏度和分离效果。
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明1. 引言1.1 概述在生物医学研究和制药领域中，蛋白质是至关重要的研究对象。
为了更好地理解蛋白质的结构和功能，科学家们需要利用高效的色谱柱来进行分离和纯化。
Waters XBridge Protein BEH色谱柱作为一种先进的工具，能够提供快速、高效、稳定的蛋白质纯化解决方案。
1.2 文章结构本文将对Waters XBridge Protein BEH色谱柱进行详细介绍，并提供使用说明和操作技巧。
首先，我们将概述该色谱柱的基本情况，包括其结构和特点。
接着，我们将讨论该色谱柱的工作原理，并阐述其在不同应用领域中的优势和适用性。
然后，我们将详细介绍如何准备样品并装载到色谱柱中，以及如何设置合适的色谱条件来实现最佳分离效果。
最后，我们将介绍一些注意事项、常见问题解答以及安全须知与储存要求。
通过阅读本文，读者能够全面了解Waters XBridge Protein BEH色谱柱的使用方法，并能够在实验中取得准确可靠的结果。
1.3 目的本文旨在向用户提供关于Waters XBridge Protein BEH色谱柱的详细说明，帮助用户正确并高效地使用该色谱柱进行蛋白质纯化。
我们希望通过本文的阐述，读者能够深入了解该色谱柱的特点和应用领域，并能够根据具体实验需求，熟练掌握样品准备、色谱条件设置以及数据分析与结果解读等技巧，从而为自己的科研工作或制药生产提供有力支持。
2. Waters XBridge Protein BEH色谱柱2.1 色谱柱概述：Waters XBridge Protein BEH色谱柱是一种高性能液相色谱（HPLC）柱，主要用于蛋白质和肽段的分离和纯化。
该色谱柱具有独特的粒径和孔隙结构，能够提供出色的分离效果和样品回收率。
2.2 工作原理：Waters XBridge Protein BEH色谱柱采用亲水性强的氢化硅胶作为填料材料，通过调节流动相中溶剂成分和温度等条件，实现对不同蛋白质和肽段的选择性分离。
watershsst3色谱柱说明书
watershsst3色谱柱说明书Waters HSS T3色谱柱是一种高效液相色谱柱，被广泛应用于生命科学、制药、环境和食品分析等领域。
该柱具有优异的分离性能和稳定性，可用于分离复杂的混合物，提供准确和可靠的分析结果。
以下是关于Waters HSS T3色谱柱的详细说明：1. 柱材料：Waters HSS T3色谱柱采用高质量的硅胶材料制成，具有特殊的表面处理，能够提供优异的色谱性能和稳定性。
2. 柱尺寸：Waters HSS T3色谱柱的常见尺寸为4.6mm乘250mm，具有较大的分离能力和样品容量。
此外，还提供其他规格的色谱柱可供选择。
3. 分离性能：Waters HSS T3色谱柱具有极好的分离性能，可有效分离复杂样品中的成分。
其独特的柱底和柱壁结构可以增强样品和柱相之间的相互作用，提高分离效果。
4. 稳定性：Waters HSS T3色谱柱具有出色的稳定性和重现性，可持续运行大量样品分析而不产生漂移或降解。
柱底和柱壁的特殊表面处理使得该色谱柱不易受到污染和损害，有助于保持柱的使用寿命。
5. 应用范围：Waters HSS T3色谱柱广泛适用于各种样品类型的分析，包括有机化合物、天然产物、药物、代谢产物等。
它可用于定量和定性分析，以及结构鉴定和纯化工作。
6. 色谱条件：Waters HSS T3色谱柱适用于反相液相色谱和离子对色谱法。
在反相液相色谱中，可以使用不同的流动相和梯度条件来优化分离效果。
在离子对色谱中，可以添加离子对试剂来改变运行条件。
7. 包装和存储：Waters HSS T3色谱柱以高压不锈钢柱体包装，旨在保护柱底和柱壁免受损坏和污染。
柱体上标有批号和有效期，以便用户能够正确追踪使用日期和有效期限。
该色谱柱应存放在避光、干燥和温度控制的环境中，以确保其质量和性能。
总之，Waters HSS T3色谱柱是一种优质的色谱柱，具有卓越的分离性能和稳定性，适用于各种复杂样品的分析工作。
water高效液相色谱仪的使用说明
转载：《分析测试百科网》Waters 600型高效液相色谱仪操作规程一．开机前准备1．根据需要选择合适色谱柱。
2．在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。
二．开机1．打开所需仪器的电源开关，打开氦气阀门。
2．等各仪器自检通过后，开微机进入Windows NT，双击millog.exe，进入millennium 32工作站。
三．编辑仪器方法1．选择所需Project，run sample上击右键，选择所需仪器，联机。
2．点击instrument method 的edit，设置好各仪器参数。
3．保存所编缉的方法。
四．样品分析与采集1．点击set up，建立方法。
2．等待色谱柱、系统平衡，基线稳定后，设置好样品信息，点击Start，即开始样分析与数据采集。
五．报告输出1．在millennium 32界面点击Brown Project。
2．选择所需Project，选择所要处理的数据文件。
3．选择所要选用的报告格式，输出报告。
六．关机1．冲洗色谱柱，排出流路中可能有的缓冲液，并用双蒸水冲洗泵的柱塞杆。
2．泵停止，关闭氦气阀门。
3．退出工作站，关闭仪器电源。
4. 在记录本上记录使用情况。
注意事项：1. 所有的溶剂均选用HPLC级试剂。
2. 水相流动相需经常更换，防止长菌变质；如果流动相有缓冲盐，必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗。
3. 样品均用0.45um的滤膜过滤后才可进样。
4. 色谱柱用合适的溶剂保存，若为C18柱推荐用甲醇保存。
一、问：用HPLC液相色谱仪进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?答：关于漂移问题：1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡关于快速变化问题1、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书摘要：一、Waters HSS T3 色谱柱简介二、Waters HSS T3 色谱柱的特点三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用五、Waters HSS T3 色谱柱的维护与保养正文：一、Waters HSS T3 色谱柱简介Waters HSS T3 色谱柱是一种高效、快速的液相色谱柱，由Waters 公司生产。
这款色谱柱采用了独特的HSS（High Speed Silica）技术，具有高柱效、高分辨率和快速分离等特点，广泛应用于药物分析、生物制药、环境监测等领域。
二、Waters HSS T3 色谱柱的特点1.高柱效：Waters HSS T3 色谱柱具有高柱效，可以提高分析速度和分离效果。
2.高分辨率：这款色谱柱的分辨率较高，能够对样品进行精细的分离和检测。
3.快速分离：Waters HSS T3 色谱柱采用了HSS 技术，可以实现快速分离，提高分析效率。
4.广泛的应用范围：这款色谱柱适用于多种样品的分析，包括药物分析、生物制药、环境监测等领域。
三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围Waters HSS T3 色谱柱主要用于药物分析、生物制药、环境监测等领域，可以对各种样品进行高效、快速的分离和检测。
四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用1.安装：在安装Waters HSS T3 色谱柱时，需要先将色谱柱的两端用封口胶封好，然后将其插入色谱仪的进样口和检测器接口。
2.使用：使用Waters HSS T3 色谱柱进行分析时，需要按照以下步骤操作：（1）样品准备：将待分析的样品进行预处理，使其符合色谱分析的要求。
（2）样品进样：将样品溶液通过进样器注入色谱柱中。
（3）色谱分离：打开色谱仪的泵，使样品在色谱柱中进行分离。
（4）检测：分离后的样品通过检测器进行检测，得到色谱图。
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择2016-04-25 Bruce Lee生产高效液相色谱柱的厂家有很多，如Waters，Agilent，Phenomenex，Shimadzu，Thermo等，每家供应商又生产多个系列，导致市场上的液相色谱柱的可选择性极强。
目前实验室以及公司，企业使用最多的是Waters以及Agilent所生产的RP液相色谱柱。
Waters主要有Symmetry，Sunfire，XTerra，XBridge，XSelect，CORTECS以及Atlantis系列等，其详细分类以及键合相如下。
Figure 1 Waters Symmetry column familyFigure 2 Waters Sunfire column familySymmetry与Sunfire系列色谱柱使用高纯度硅胶（B型）作为固定相基质，摒除金属离子杂质对固定相Si-O键的促进水解作用，此外由于金属离子含量特别低，在对其表面键合选择性烃基或内嵌极性官能团烃基时，可通过配体添加量控制硅胶表面键合相的多少，因此其最大特点在于批次之间的重现性。
两个系列均采用封端技术，Sunfire C8与C18表面载碳量分别为12%和16%；SymmetryC8与C18载碳量均为12%，因此两个系列的C8色谱柱对于分析物的保留能力上没有本质的区别，而Sunfire C18色谱柱则相比Symmetry C18色谱柱，对于非极性比较大的分析物具有更强一些的保留能力，当然对于有机相的最低比例也相对比较高一些。
Symmetry C8 Prep与C18 Prep色谱柱的填料粒径为7 um，其设计用途为制备；Symmetry300 C18（孔径300埃，载碳量8.5%）与Symmetry300 C4（孔径300埃，载碳量2.8%）则是为生物大分子多肽以及蛋白质的分离，分析而设计。
Symmetry Shield RP 18内嵌极性官能团色谱柱，由于在靠近硅胶表面的极性官能团的存在，增加了硅胶表面的水分子浓度，改善了与水之间的浸润状况;因此可以允许使用极高水相作为分离，分析条件，而不会出现孔隙内去湿现象，对于分析碱性等大极性分析物而言，减少其保留能力，改善峰形，具有很高的方法重现性。
Waters HPLC色谱柱介绍
如何选择理想的 HPLC分析柱 HPLC分析柱©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation1如何看待色谱柱？色谱柱是液相色谱工作的最重要又最常使用的工具对工具了解越多，越有可能尽早选对合适的工具，使工作开展的更顺 利工欲善其事，必先利其器！©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation2沃特世价值所在： 技术能力+品质保障+专业服务Better traceability & control of the entire processWaters©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011• Manufactures under cGMP, ISO 9001 and ISO 13485 guidelines • Registered with FDA as a medical device manufacturer©2011 Waters Corporation 3概要如何认识色谱柱？ 如何认识色谱柱？ 沃特世色谱柱： 沃特世色谱柱：为色谱工作者的任务而设计 XBridge Atlantis SunFire XSelect UPLC—HPLC方法转换 HPLC—OBD 制备柱无优放大©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation4沃特世色谱柱： 专为色谱分析工作者所需而设计宽pH范围、耐受性最强、最通用的色谱柱增强极性化合物保留的专用硅胶色谱柱高容量、峰形柱效最优化的通用硅胶色谱柱宽选择性覆盖、LCMS方法开发的首选色谱柱©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation5应对耐受性、通用性的需求色谱工作者的需求： 工作者的需求：方法在高pH条件下！！ 方法在较高温度条件下！！ 耐受性？！ 通用性？！2.5, 3.5, 5, 10 µm柱效？！ 样品复杂难以分离？！ 需要各种键合相？ 需要各种柱规格？©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation6高pH耐受性对碱性化合物的分析特别有利 —分离选择性、方法耐受性与柱使用寿命©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation7XBridge： 基于第二代杂化颗粒技术BEH (Bridged Ethylene Hybrid)硅氧骨架中嵌入亚乙基桥- pH范围耐受更宽 - 机械强度更高 - 柱效佳U.S. Patent No. 6,686,035 B2©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011Anal. Chem. 2003, 75, 6781-6788©2011 Waters Corporation8增加化合物的保留并提高灵敏度： High pH Mobile phase2HIGH pH0.1% NH4OH3 6 1 4Morphine Morphine-3ß–o-glucuronide 10-hydroxymorphine5% 00.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60 3.80LOW pH0.1% HCOOHCompounds 1. % 10-hydroxymorphineMorphine-6ß–o-glucuronide6 4,5 2 1 32. 3.Morphine-3β-D-glucuronide Morphine-6β-D-glucuronide4. 5. 6. Morphine Morphine N-oxide 6-acetylmorphineMorphine N-oxide0 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60 3.80©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©20116-acetylmorphineMinutes©2011 Waters Corporation9XBridge —耐受性最强、最为广泛适用2.5, 3.5, 5, 10 µm 1.7 µm耐受性最强、最为广泛适 广泛适用的色谱柱第二代杂化颗粒技术 无以伦比的流动相pH、温度和压力的耐受范围 达到前所未有的柱效、峰形和稳定性水平 广泛的键合相选择，配合各种分析物所需 齐全的柱规格供应，满足各种规模需要©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL ©2011©2011 Waters Corporation103NH 3CH +17通过极性嵌入基团保留水 可完全兼容100%水相屏蔽硅醇基，对碱性化合物峰形更佳 提供与C18不同的选择性pH 7.0痢特灵(Furazolidone)原料药的杂质分析实例Ligand type:Trifunctional AmideParticle size:1.7, 3.5 µm Ligand density:7.5 µmol/m 2Carbon load:12% Endcap style:NonepH range:2-11Ligand type:UnbondedParticle size:1.7, 2.5, 3.5, 5 µm Ligand density:— Carbon load:— Endcap style:— pH range:1-9Minutes123321=0.26=0.25Reversed-PhaseXBridge C 18HILICXBridge HILIC1. 6-acetyl morphineHILIC 可以提供和反相不同的分离选择性应用于生物医药行业的：—肽的反相分析与分离纯化—小蛋白药物的反相分析—寡核苷酸的离子对反相分析与分离纯化杂化颗粒，无以伦比的流动相pH与温度的耐受性完整的方法与应用资料，整体方案专用柱，经肽谱、蛋白混标或寡核苷酸阶梯混标质控确保批次重现性工作者的需求：：解决色谱工作者的需求2.5,3.5, 5, 10 µm 适用于高pH方法！！耐受较高温度条件！！耐受性极佳！通用性好！柱效高！多种键合相、多种柱规格适应各种项目需要！色谱工作者的需求和问题：越来越多的极性化合物项目！ 极性化合物的保留难？！离子对试剂应用不便！峰形？！柱耐受性？！1. Thiourea2. 5-Fluorocytosine (B)3. Adenine (B)4. Guanosine-5'-monophosphate5. Thymine注：所示色谱柱性能比较情况，与具体操作条件相关，并不代表所有应用情况（法律申明）增强极性化合物保留的专用色谱柱—首选Atlantis T3反相保留反相保留极性化合物首选：提高保留，避免使用离子对试剂 提供pH 2-8全范围的完美峰形 低pH 条件下的耐受性强，柱寿命好积极应对色谱工作者的问题：增强对极性化合物的保留！ 简便的反相条件！ 峰形佳！ 柱耐受性好！ 广受认可与赞誉！色谱工作者的需求和问题：柱效？！柱容量？！载样量高？！中-低pH条件下碱性化合物拖尾严重？！ 样品杂质或相关物质分析及分离？！51V o 234Symmetry ®C 185 µm USP T f = 1.69N = 696151V o234以Amitriptyline （峰5）计算拖尾因子USP T f pH7条件下SunFire™C 185 µm USP T f = 1.26N = 8203MinutesZorbax®SB C18Luna®C18(2)SunFire™C 18Time (minutes)246810Conditions : 3 µm, 3.0 x 150 mm 28:72 乙腈/ 20 mM 甲酸; 0.7 mL/min; 30 °CSN NNOHCl在方法开发过程中，峰拖尾会对任何特定含量方法影响其分离度与灵敏度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择
2016-04-25 Bruce Lee
生产高效液相色谱柱的厂家有很多，如Waters，Agilent，Phenomenex，Shimadzu，Thermo等，每家供应商又生产多个系列，导致市场上的液相色谱柱的可选择性极强。
目前实验室以及公司，企业使用最多的是Waters以及Agilent所生产的RP液相色谱柱。
Waters主要有Symmetry，Sunfire，XTerra，XBridge，XSelect，CORTECS以及Atlantis系列等，其详细分类以及键合相如下。
Figure 1 Waters Symmetry column family
Figure 2 Waters Sunfire column family
Symmetry与Sunfire系列色谱柱使用高纯度硅胶（B型）作为固定相基质，摒除金属离子杂质对固定相Si-O键的促进水解作用，此外由于金属离子含量特别低，在对其表面键合选择性烃基或内嵌极性官能团烃基时，可通过配体添加量控制硅胶表面键合相的多少，因此其最大特点在于批次之间的重现性。
两个系列均采用封端技术，Sunfire C8与C18表面载碳量分别为12%和16%；SymmetryC8与C18载碳量均为12%，因此两个系列的C8色谱柱对于分析物的保留能力上没有本质的区别，而Sunfire C18色谱柱则相比Symmetry C18色谱柱，对于非极性比较大的分析物具有更强一些的保留能力，当然对于有机相的最低比例也相对比较高一些。
Symmetry C8 Prep与C18 Prep色谱柱的填料粒径为7 um，其设计用途为制备；Symmetry300 C18（孔径300埃，载碳量8.5%）与Symmetry300 C4（孔径300埃，载碳量2.8%）则是为生物大分子多肽以及蛋白质的分离，分析而设计。
Symmetry Shield RP 18内嵌极性官能团色谱柱，由于在靠近硅胶表面的极性官能团的存在，增加了硅胶表面的水分子浓度，改善了与水之间的浸润状况;因此可以允许使用极高水相作为分离，分析条件，而不会
出现孔隙内去湿现象，对于分析碱性等大极性分析物而言，减少其保留能力，改善峰形，具有很高的方法重现性。
此外，Sunfire Silica 色谱柱则是纯粹的高纯硅胶柱，作正相使用。
Sunfire以及Symmetry系列色谱柱是Waters比较早期一些的色谱柱，均使用高纯度硅胶作为固定相基质，对其表面键合之后，再进行封端处理；相较与HPT 第一代颗粒杂化技术而言，对于极性化合物特别是碱性化合物的分析能力就显得比较弱一些。
此外，其pH允许范围为2-8，相比采用HPT技术的Xterra系列色谱柱（pH允许范围1-12），对于pH的耐受性比较差一些。
Figure 3 Waters XTerra column family
Xterra系列色谱柱，采用第一代颗粒杂化技术（HPT），使用超纯四乙氧基硅氧烷与甲基三乙氧基硅氧烷作为起始物料合成甲基聚乙氧基硅烷，使得高纯度硅胶的每三个硅羟基就有一个被甲氧基化，再次交联与封端处理后，其表面硅羟基量减少了30%左右，且在合成杂化颗粒的同时完成封端，具有很高的批次重现性。
因此，对于pH的耐受性得到了极大的提高，可耐受pH1-12。
C18与RP18载碳量分别为15.5%与15%，RP8与Phenyl载碳量为13.5%与12%，粒径可选3 um，5 um以及10 um（制备用）。
C18，RP18，RP8载碳量与高纯硅胶基质Symmetry以及Sunfire保持一致，但对于极性化合物的分离，分析而言，明显提高其峰形对称性与分析方法重现性。
Phenyl色谱柱的加入，则是对C18以及C8烃基配体的一个显著补充，可提供不同于C18以及C8的选择性，特别适合含有苯环、萘等苯共轭结构的分析物，在疏水与氢键作用之外，还能与分析物起到pi-pi相互作用，对一些难分离样品（特别是医药）可实现高效，快速分离，分析。
其聚合物特性，质地与硅胶相比略软，具有耐压能力略弱，柱效相应略低
的缺点。
Figure 4a Waters XBridge column family
Figure 4b Waters XBridge column family
Figure 4c Waters XBridge-XP column family
XBridge色谱柱家族是Waters液相色谱柱的当家花旦，采用最新一代颗粒杂化技术（BEH），使用超纯四乙氧基硅氧烷与双（三乙氧基甲硅烷基）乙烷作为起始物料合成聚乙氧基硅烷。
与第一代杂化颗粒技术（HPT）相比，机械强度得到很大提高，Si之间额外的二乙氧基链接桥，使得该类型色谱柱的耐受低pH能力得到进一步提升（pH 1-12）。
其中，最常用的是三键键合的XBridge C18，C8，Phenyl柱，均采用封端处理，载碳量有所增加，分别为18%，13%，15%；单键键合TMS封端处理的Shield RP18，载碳量17%，粒径范围覆盖分析到制备。
酰胺柱的加入，有益于对极性化合物的分离，可明显改善峰形，而不用使用离液序离子或者离子对试剂。
Peptide C18 130埃，300埃以及C4 300埃色谱柱用于对多肽以及蛋白质类生物制品进行分离与分析。
Oligo C18用于对单糖，寡糖样品进行分析。
BEH技术XBridge XP系列色谱柱，与XBridge相比，差别在于粒径为2.5 um，可轻松实现HPLC与UPLC之间方法的有效转换。
Figure 5a Waters XSelect column family
Figure 5b Waters XSelect-XP column family
XSelect CSH色谱柱与XBridge色谱柱相比，区别在于前者固定相表面带有低密度的电荷，可增强对于带电化合物的保留能力，提高对化合物的载样量以及提
供对称的峰形。
其中五氟苯基柱在提供不同于C18，Phenyl柱的选择能力的同时，增大极性化合物的保留。
HSS型色谱柱，采用聚合物杂化颗粒，使用超纯四乙氧基硅氧烷单体进行聚合，得到纯度极高的合成硅胶。
其中HSS T3，HSS SB，HSS PFP，HSS CN色谱柱，为极性化合物的分离提供了多样化选择，其中T3采用低密度封端技术，后三种则不采用封端处理。
XSelect XP色谱柱，与XSelect相比，差别在于粒径为2.5 um，实现HPLC与UPLC之间方法的有效转换。
Figure 6 Waters CORTECS column family
CORTECS色谱柱固定相使用实心球技术，相比其他类型色谱柱具有快速分离，背压较低，柱内扩散较低的特点，也具有载碳量不足，载样量低的缺点。
实际使用量远不如其他类型的液相色谱柱。
Figure 7 Waters Atlantis column family
Atlantis色谱柱固定相使用高纯度硅胶作为固定相基质，对硅羟基进行特殊封端处理（裸露硅羟基适量但不完全封端）。
选择性C18链采用低密度键合，T3采用三键键合的方式，对低pH的耐受性得到增强，dC18色谱柱采用双键键合方式。
其最大特点是在RP模式下，完全100%兼容纯水相作为流动相，特别适合于增大极性分析物的保留时间。
此外，Hilic Slica色谱柱为亲水硅胶色谱柱，同样兼容100%水相，其使用方法与分离原理与经典RP色谱具有一定的区别。
选择合适的液相色谱柱是分析方法开发成功与否的关键，实际应用过程中可根据待分析样品的极性与非极性大小，复杂程度，待分析样品中各种组分的结构相似程度，分析方法开发的目的，选择合适的色谱柱。
Reference
Waters column mannual
更多更新内容，请关注微信公众号药物分析与工艺分析或搜索
Pharma_Analytical或扫描下方二维码，交流请加微信号Lindaring001。