waters 消耗品及色谱柱指南
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择
Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择2016-04-25 Bruce Lee生产高效液相色谱柱的厂家有很多，如Waters，Agilent，Phenomenex，Shimadzu，Thermo等，每家供应商又生产多个系列，导致市场上的液相色谱柱的可选择性极强。
目前实验室以及公司，企业使用最多的是Waters以及Agilent所生产的RP液相色谱柱。
Waters主要有Symmetry，Sunfire，XTerra，XBridge，XSelect，CORTECS以及Atlantis系列等，其详细分类以及键合相如下。
Figure 1 Waters Symmetry column familyFigure 2 Waters Sunfire column familySymmetry与Sunfire系列色谱柱使用高纯度硅胶（B型）作为固定相基质，摒除金属离子杂质对固定相Si-O键的促进水解作用，此外由于金属离子含量特别低，在对其表面键合选择性烃基或内嵌极性官能团烃基时，可通过配体添加量控制硅胶表面键合相的多少，因此其最大特点在于批次之间的重现性。
两个系列均采用封端技术，Sunfire C8与C18表面载碳量分别为12%和16%；SymmetryC8与C18载碳量均为12%，因此两个系列的C8色谱柱对于分析物的保留能力上没有本质的区别，而Sunfire C18色谱柱则相比Symmetry C18色谱柱，对于非极性比较大的分析物具有更强一些的保留能力，当然对于有机相的最低比例也相对比较高一些。
Symmetry C8 Prep与C18 Prep色谱柱的填料粒径为7 um，其设计用途为制备；Symmetry300 C18（孔径300埃，载碳量8.5%）与Symmetry300 C4（孔径300埃，载碳量2.8%）则是为生物大分子多肽以及蛋白质的分离，分析而设计。
Symmetry Shield RP 18内嵌极性官能团色谱柱，由于在靠近硅胶表面的极性官能团的存在，增加了硅胶表面的水分子浓度，改善了与水之间的浸润状况;因此可以允许使用极高水相作为分离，分析条件，而不会出现孔隙内去湿现象，对于分析碱性等大极性分析物而言，减少其保留能力，改善峰形，具有很高的方法重现性。
waters高效液相色谱系统操作规程(入门)
1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml 溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明1. 引言1.1 概述在生物医学研究和制药领域中，蛋白质是至关重要的研究对象。
为了更好地理解蛋白质的结构和功能，科学家们需要利用高效的色谱柱来进行分离和纯化。
Waters XBridge Protein BEH色谱柱作为一种先进的工具，能够提供快速、高效、稳定的蛋白质纯化解决方案。
1.2 文章结构本文将对Waters XBridge Protein BEH色谱柱进行详细介绍，并提供使用说明和操作技巧。
首先，我们将概述该色谱柱的基本情况，包括其结构和特点。
接着，我们将讨论该色谱柱的工作原理，并阐述其在不同应用领域中的优势和适用性。
然后，我们将详细介绍如何准备样品并装载到色谱柱中，以及如何设置合适的色谱条件来实现最佳分离效果。
最后，我们将介绍一些注意事项、常见问题解答以及安全须知与储存要求。
通过阅读本文，读者能够全面了解Waters XBridge Protein BEH色谱柱的使用方法，并能够在实验中取得准确可靠的结果。
1.3 目的本文旨在向用户提供关于Waters XBridge Protein BEH色谱柱的详细说明，帮助用户正确并高效地使用该色谱柱进行蛋白质纯化。
我们希望通过本文的阐述，读者能够深入了解该色谱柱的特点和应用领域，并能够根据具体实验需求，熟练掌握样品准备、色谱条件设置以及数据分析与结果解读等技巧，从而为自己的科研工作或制药生产提供有力支持。
2. Waters XBridge Protein BEH色谱柱2.1 色谱柱概述：Waters XBridge Protein BEH色谱柱是一种高性能液相色谱（HPLC）柱，主要用于蛋白质和肽段的分离和纯化。
该色谱柱具有独特的粒径和孔隙结构，能够提供出色的分离效果和样品回收率。
2.2 工作原理：Waters XBridge Protein BEH色谱柱采用亲水性强的氢化硅胶作为填料材料，通过调节流动相中溶剂成分和温度等条件，实现对不同蛋白质和肽段的选择性分离。
watershsst3色谱柱说明书
watershsst3色谱柱说明书Waters HSS T3色谱柱是一种高效液相色谱柱，被广泛应用于生命科学、制药、环境和食品分析等领域。
该柱具有优异的分离性能和稳定性，可用于分离复杂的混合物，提供准确和可靠的分析结果。
以下是关于Waters HSS T3色谱柱的详细说明：1. 柱材料：Waters HSS T3色谱柱采用高质量的硅胶材料制成，具有特殊的表面处理，能够提供优异的色谱性能和稳定性。
2. 柱尺寸：Waters HSS T3色谱柱的常见尺寸为4.6mm乘250mm，具有较大的分离能力和样品容量。
此外，还提供其他规格的色谱柱可供选择。
3. 分离性能：Waters HSS T3色谱柱具有极好的分离性能，可有效分离复杂样品中的成分。
其独特的柱底和柱壁结构可以增强样品和柱相之间的相互作用，提高分离效果。
4. 稳定性：Waters HSS T3色谱柱具有出色的稳定性和重现性，可持续运行大量样品分析而不产生漂移或降解。
柱底和柱壁的特殊表面处理使得该色谱柱不易受到污染和损害，有助于保持柱的使用寿命。
5. 应用范围：Waters HSS T3色谱柱广泛适用于各种样品类型的分析，包括有机化合物、天然产物、药物、代谢产物等。
它可用于定量和定性分析，以及结构鉴定和纯化工作。
6. 色谱条件：Waters HSS T3色谱柱适用于反相液相色谱和离子对色谱法。
在反相液相色谱中，可以使用不同的流动相和梯度条件来优化分离效果。
在离子对色谱中，可以添加离子对试剂来改变运行条件。
7. 包装和存储：Waters HSS T3色谱柱以高压不锈钢柱体包装，旨在保护柱底和柱壁免受损坏和污染。
柱体上标有批号和有效期，以便用户能够正确追踪使用日期和有效期限。
该色谱柱应存放在避光、干燥和温度控制的环境中，以确保其质量和性能。
总之，Waters HSS T3色谱柱是一种优质的色谱柱，具有卓越的分离性能和稳定性，适用于各种复杂样品的分析工作。
色谱柱的使用说明
1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
Waters紫外检测器及色谱柱技术参数
1紫外可见检测器（2489型）
1.1*波长、极性和灯源开关均可时间编程控制
1.2内置硝酸铒滤光片用于波长校准及校正，紫外光、可见光都可以校正。
用256.7nm、379.0nm、521.5nm及656.1nm共四个波长校正。
开机时
校准，随时可以进行校正
1.3*可变波长范围：190～700nm
1.4*检测通道：2个
1.5*光源：氘灯
1.6*波长准确度：±1nm
1.7*带宽：5nm
1.8*测量范围：0.0001～4.0000AUFS
1.9耐压：1000psi
1.10*基线噪音：±0.35x10-5AU，254nm在1mL/min（甲醇）
1.11基线噪音：双通道±1.0x10-5AU，230nm，280nm
1.12*漂移：1 x 10-4AU/hour
1.13*梯形狭缝的光路设计，从硬件上消除示差折光效应
1.14*具有操作面板，可以独立设定工作参数、显示运行状态
1.15*分析池：10mm池长
1.16*半制备流通池：3mm池长
2 色谱柱：C18色谱柱，4.6*150mm 1根，。
waters hss t3色谱柱说明书
waters hss t3色谱柱说明书摘要：一、Waters HSS T3 色谱柱简介二、Waters HSS T3 色谱柱的特点三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用五、Waters HSS T3 色谱柱的维护与保养正文：一、Waters HSS T3 色谱柱简介Waters HSS T3 色谱柱是一种高效、快速的液相色谱柱，由Waters 公司生产。
这款色谱柱采用了独特的HSS（High Speed Silica）技术，具有高柱效、高分辨率和快速分离等特点，广泛应用于药物分析、生物制药、环境监测等领域。
二、Waters HSS T3 色谱柱的特点1.高柱效：Waters HSS T3 色谱柱具有高柱效，可以提高分析速度和分离效果。
2.高分辨率：这款色谱柱的分辨率较高，能够对样品进行精细的分离和检测。
3.快速分离：Waters HSS T3 色谱柱采用了HSS 技术，可以实现快速分离，提高分析效率。
4.广泛的应用范围：这款色谱柱适用于多种样品的分析，包括药物分析、生物制药、环境监测等领域。
三、Waters HSS T3 色谱柱的应用范围Waters HSS T3 色谱柱主要用于药物分析、生物制药、环境监测等领域，可以对各种样品进行高效、快速的分离和检测。
四、Waters HSS T3 色谱柱的安装与使用1.安装：在安装Waters HSS T3 色谱柱时，需要先将色谱柱的两端用封口胶封好，然后将其插入色谱仪的进样口和检测器接口。
2.使用：使用Waters HSS T3 色谱柱进行分析时，需要按照以下步骤操作：（1）样品准备：将待分析的样品进行预处理，使其符合色谱分析的要求。
（2）样品进样：将样品溶液通过进样器注入色谱柱中。
（3）色谱分离：打开色谱仪的泵，使样品在色谱柱中进行分离。
（4）检测：分离后的样品通过检测器进行检测，得到色谱图。
waters CSH18色谱柱说明书
waters CSH18色谱柱说明书使用新鲜洁净的水与乙腈。
冲洗系统，确保系统干净，不含任何缓冲盐和污染物。
取用色谱柱时避免磕碰掉落。
将色谱柱入口端连接到系统上，柱出口端先不要连接，色谱柱身上有箭头标明正确流向。
在0.1ml、min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，然后在2分钟内将流速升至0.5ml、min。
当溶剂均匀的从柱出口端流出，停流速，将色谱柱出口端接到系统检测器上（这样可以避免气泡进入检测系统，并且可快速达到基线平衡）。
重启流速，按照步骤4的方法逐渐提高流速，至常规分析时所使用的流速。
参考柱效测试报告中的方法，使用该流动相条件平衡色谱柱，通常需要使用5--10倍柱体积的流动相，直至压力与基线稳定。
测试柱效。
如果没有柱效测试报告中的分析物，请联系沃特世化学消耗品部门寻求支持，使用合适的浓度与进样量。
柱效结果略低于柱效测试报告属正常情况。
如结果明显偏低、峰形拖尾，提示色谱柱和、或所使用的液相系统处于非理想状态，需要进行故障排查。
当使用2.1mm内径色谱柱时，建议优化系统以减少谱带展宽，包括：使用检测器微量流通池，减少进样器loop环体积，使用较小内径（如0.005或0.12mm）的系统管路。
并确保管路与色谱柱连接恰当、无死体积。
当使用小颗粒填料（如2.5um）短柱进行高效快速分离时，需要考虑以下因素：1、确保管路与色谱柱连接恰当、无死体积，尽量优化系统减少谱带展宽。
2、提高采样频率至10点、秒以上。
3、较小粒径的色谱柱产生的柱压较高，而较小粒径要达到最优色谱效率所需的线速度较高，请根据所用LC系统的实际情况调节流速。
4、可使用较高的柱温来补偿小颗粒造成的压力升高，例如40°C。
使用杂化颗粒反相色谱柱时，可使用45°C或更高。
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最佳柱床密度（OBD）制备柱------------------------------------------------------------------------------- 41 径向加压柱 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 48
氨基酸分析 --------------------------------------------------------------------------------------------------------- 57 多肽分析和纯化 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 58 蛋白质分离和纯化----------------------------------------------------------------------------------------------- 59 DNA/寡核苷酸分析和纯化------------------------------------------------------------------------------------- 62 MS及LC/MS消耗品-------------------------------------------------------------------------------------------------- 63
Oasis® HLB：用于酸性、碱性与中性化合物的亲水亲脂平衡 反相吸附剂
Oasis® MCX：用于碱性化合物的混合型强阳离子交换反相吸 附剂
Oasis® MAX：用于酸性化合物的混合型强阴离子交换反相吸 附剂 Qasis® MCX
Oasis® WCX：用于强碱性化合物（如季胺）的混合型弱阳离 子交换反相吸附剂
GPC色谱柱 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 51 生命科学 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 55
色谱柱硬件 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------- 66 样品瓶及附件 ------------------------------------------------------------------------------------------------------ 68
无硅醇基作用
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高效液相色谱柱及消耗品简要指南2008-2009
pka<～0 0.6meq/g
［ 样品前处理产品 ］
Oasis® HLB 化学技术
用于酸性、中性和碱性化合物的通用型吸附剂 独特的水可浸润性Oasis® HLB共聚物
Oasis® HLB是一种可满足所有SPE需要的亲水亲脂平衡的 水可浸润性反相吸附剂，它是由两种基本单体：亲水性的N －乙烯吡咯烷酮和亲脂性的二乙烯基苯按特定比例聚合构 成的。它以特别的“极性钩”为增强极性物的保留提供了 优异的反相保留容量。
降低离子抑制
Oasis® SPE产品可成功地除去在LC/MS/MS联用分析中导致 离子抑制的主要物质：磷脂和溶血磷脂。去除这些干扰物可 提高质谱的响应，从而降低最低定量限（LOQ）。
改善分析系统的性能
S P E技术的发展及自动化控制技术的采用，使S P E成为更 经济、更省时的样品前处理技术。它通过以下几个方面改 善了分析系统的性能：
Oasis®家族成员
● 1～35cc各种规格的Oasis® HLB，MCX，MAX，WCX，WAX， 固相提取小柱
● Oasis® HLB玻璃小柱 ● 96孔Oasis® HLB，MCX，MAX，WCX，WAX，提取板 ● 96孔Oasis® µElution HLB MAX，MCX WCX，WAX，提取板 ● Oasis®在线色谱柱 ● Oasis® µElution提取板
高效液相色谱柱及消耗品 简要指南
2008-2009
目录
样品前处理产品 ---------------------------------------------------------------------------------------------------1
Oasis® 固相提取产品 -----------------------------------------------------------------------------------------------2 Oasis® 2×4方法 ------------------------------------------------------------------------------------------------------6 Oasis® 96 孔提取板和Oasis µElution提取板 ------------------------------------------------------------------7 Oasis® 在线样品前处理柱 ---------------------------------------------------------------------------------------9 SiroccoTM蛋白沉淀板----------------------------------------------------------------------------------------------- 10 Sep-Pak®固相提取产品------------------------------------------------------------------------------------------- 11
ACQUITY UPLC®色谱柱及配套消耗品 ---------------------------------------------------------------- 13 高效液相色谱分析柱
XBridgeTM色谱柱----------------------------------------------------------------------------------------------------- 18 SunFireTM色谱柱 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 23 Atlantis®色谱柱 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 26 Symmetry®色谱柱 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 28 XTerra®色谱柱 ------------------------------------------------------------------------------------------------------- 31 Spherisorb®色谱柱 -------------------------------------------------------------------------------------------------- 34 Nova-Pak®色谱柱---------------------------------------------------------------------------------------------------- 35 µBondapak®色谱柱-------------------------------------------------------------------------------------------------- 35 专用色谱柱及应用----------------------------------------------------------------------------------------------- 36
● 采用质谱兼容溶剂将分析物引入系统 ● 延长分析色谱柱寿命，降低系统的停机和维护时间 ● 将离子抑制降低到最小程度，改善信号响应
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高效液相色谱柱பைடு நூலகம்消耗品简要指南2008-2009
［ 样品前处理产品 ］
高效液相色谱柱及消耗品简要指南2008-2009
［ 样品前处理产品 ］
为什么使用固相提取？
样品前处理是每种分析方法（如LC/MS/MS）都不可缺少 的关键步骤。据估计，分析实验室的大约60-80% 工作量和 运行成本都花费在进行仪器分析前的样品处理上。进行样
品前处理（尤其是进行固相提取）的重要意义，主要是源于 以下四方面考虑：去除基质干扰物、降低离子抑制、富集 目标分析物及改善分析系统的性能。