多种质粒提取方法

多种质粒提取方法
多种质粒提取方法

从细菌中分离质粒 DNA 的具体操作

材料、设备及试剂

一、材料

含PBS的E.coliDH5α或JM系列菌株,1.5ml塑料离心管(又称eppendorf管),离心管架。

二、设备

微量取液器(20μl,200μl,1000μl),台式高速离心机,恒温振荡摇床,高压蒸汽消毒器(灭菌锅),涡旋振荡器,电泳仪,琼脂糖平板电泳装置和恒温水浴锅等。

三、试剂

1、LB液体培养基(Luria-Bertani):称取蛋白胨(Tryptone)10g,酵母提取物(Yeastextract)5g,NaCl10g,溶于800ml去离子水中,用NaOH 调pH至7.5,加去离子水至总体积1升,高压下蒸气灭菌20分钟。

2、LB固体培养基:液体培养基中每升加12g琼脂粉,高压灭菌。

3、氨苄青霉素(Ampicillin,Amp)母液:配成50mg/ml水溶液,-20℃保存备用。

4、溶菌酶溶液:用10mmol/LTris?Cl(pH8.0)溶液配制成10mg/ml,并分装成小份(如1.5ml)保存于-20℃,每一小份一经使用后便予丢弃。

5、3mol/lNaAc(pH5.2):50ml水中溶解40.81gNaAc?3H2O,用冰醋酸调pH至5.2,加水定容至100ml,分装后高压灭菌,储存于4℃冰箱。

6、溶液1:50mmol/L葡萄糖,25mmol/ L T r i s. Cl(pH8.0),

10mmol/LEDTA(pH8.0)。溶液Ⅰ可成批配制,每瓶100ml,高压灭菌15分钟,储存于4℃冰箱。

7、溶液Ⅱ:0.2mol/LNaOH(临用前用10mol/LNaOH母液稀释),1%SDS。

8、溶液Ⅲ:5mol/LKAc60ml,冰醋酸11.5ml,H2O28.5ml,定容至100ml,并高压灭菌。溶液终浓度为:K+3mol/L,Acˉ5mol/L。

9、RNA酶A母液:将RNA酶A溶于10mmol/LTris?Cl(pH7.5),

15mmol/LNaCl中,配成10mg/ml

的溶液,于100℃加热15分钟,使混有的DNA酶失活。冷却后用

1.5mleppendorf管分装成小份保存于-20℃。

10、饱和酚:市售酚中含有醌等氧化物,这些产物可引起磷酸二酯键的断裂及导致RNA和DNA的交联,应在160℃用冷凝管进行重蒸。重蒸酚加入0.1%的8-羟基喹啉(作为抗氧化剂),并用等体积的0.5mol/LTris?Cl (pH8.0)和0.1mol/LTris?Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上,因为酸性条件下DNA会分配于有机相。

11、氯仿:按氯仿:异戊醇=24:1体积比加入异戊醇。氯仿可使蛋白变性并有助于液相与有机相的分开,异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫。按体积/体积=1:1混合上述饱和酚与氯仿即

得酚/氯仿(1:1)。酚和氯仿均有很强的腐蚀性,操作时应戴手套。

12、TE缓冲液:10mmo/LTris?Cl(pH8.0),1mmol/LEDTA(pH8.0)。高压灭菌后储存于4℃冰箱中。

13、STET:0.1mol/LNaCl,10mmol/LTris?Cl(pH8.0),10mmol/LEDTA (pH8.0),5%TritonX-100。

14、STE:0.1mol/LNaCl,10mmol/LTris?Cl(pH8.0),1mmol/LEDTA (pH8.0)。

15、电泳所用试剂:(1)TBE缓冲液(5×):称取Tris54g,硼酸27.5g,并加入0.5MEDTA(pH8.0)20ml,定溶至1000ml。(2)上样缓冲液(6×):0.25%溴酚蓝,40%(w/v)蔗糖水溶液。

操作步骤

一、细菌的培养和收集

将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/mlAmp)中,37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5mlLB液体培养基(含50μg/mlAmp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。

二、质粒DNA少量快速提取

质粒DNA小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。

(一)、煮沸法

1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。

2、弃上清,将管倒置于卫生纸上几分钟,使液体流尽。

3、将菌体沉淀悬浮于120mlSTET溶液中,涡旋混匀。

4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml),涡旋振荡3秒钟。

5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。

7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。

8、取20ml进行电泳检查。

[注意]1.对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。2.煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。3.提取的质粒DNA中会含有RNA,

但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。

(二)、碱法

1、取1.5ml培养液倒入1.5mleppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。

2、弃上清,将管倒置于卫生纸上数分钟,使液体流尽。

3、菌体沉淀重悬浮于100μl溶液Ⅰ中(需剧烈振荡),室温下放置

5-10分钟。

4、加入新配制的溶液Ⅱ200μl,盖紧管口,快速温和颠倒eppendorf 管数次,以混匀内容物(千万不要振荡),冰浴5分钟。

5、加入150μl预冷的溶液Ⅲ,盖紧管口,并倒置离心管,温和振荡10秒,使沉淀混匀,冰浴中5-10分钟,4℃下12000g离心5-10分钟。

6、上清液移入干净eppendorf管中,加入等体积的酚/氯仿(1:1),振荡混匀,4℃下12000g离心5分钟。

7、将水相移入干净eppendorf管中,加入2倍体积的无水乙醇,振荡混匀后置于-20℃冰箱中20分钟,然后4℃下12000g离心10分钟。

8、弃上清,将管口敞开倒置于卫生纸上使所有液体流出,加入1ml70%乙醇洗沉淀一次,4℃下12000g离心5-10分钟。

9、吸除上清液,将管倒置于卫生纸上使液体流尽,真空干燥10分钟或室温干燥。

10、将沉淀溶于20μlTE缓冲液(pH8.0,含20μg/mlRNaseA)中,储于-20℃冰箱中。

[注意]1.提取过程应尽量保持低温。2.提取质粒DNA过程中除去蛋白很重要,采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好,要将蛋白尽量除干净需多次抽提。3.沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低温条件下放置时间稍长可使DNA沉淀完全。沉淀DNA也可用异丙醇(一般使用等体积),且沉淀完全,速度快,但常把盐沉淀下来,所以多数还是用乙醇。

(三)、Wizard少量DNA纯化系统

Promega公司的Wizard少量DNA纯化系统可快速有效的抽提质粒DNA,整个过程只需15分钟。提取的质粒可直接用于DNA测序、酶切分析和体外转录等。该系统中所含试剂和柱子可以用于50次1-3ml质粒培养液的分离和纯化,试剂包括10ml细胞悬浮液,10ml细胞裂解液;10ml中和液,

50mlWizard少量DNA纯化树脂,50ml柱洗液(使用前加95%乙醇至120ml)和50支Wizard微型柱。

1、1-3ml过夜培养细胞液4℃下12000g离心1-2分钟。

2、去除上清液,菌体细胞悬浮于200μl细胞悬浮液中,充分混合,并移入eppendorf管中。

3、加200μl细胞裂解液,颠倒离心管数次,直到溶液变清亮。

4、加200μl中和液,颠倒离心管数次。

5、4℃下12000g离心5分钟,取上清液于新的eppendorf管中。

6、加1mlWizard少量DNA纯化树脂,颠倒离心管数次以充分混匀。

7、取一次性注射器,取出注塞,并使注射筒与Wizard微型柱连接,用移液枪将上述混合液加入注射筒中,并用注塞轻推,使混合物进入微型柱。

8、将注射器与微型柱分开,取出注塞,再将注射筒与微型柱相连,加入2ml柱洗液,并用注塞轻推,使柱洗液进入微型柱。

9、取出微型柱置于eppendorf管中,离心2分钟以除去微型柱中的柱洗液。

10、将微型柱放在一个新eppendorf管中,加50μlTE(或水)于微型柱中,静止1分钟后,4℃下12000g离心20秒。

11、丢弃微型柱,将eppendorf管中的质粒DNA贮于4℃或-20℃冰箱。

[注意]树脂使用前应充分混匀,如有结晶,可将树脂用25-37℃水浴处理10分钟。

三、质粒DNA的大量提取和纯化

在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA,为此需要大量提取质粒DNA。大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化绝梯度离心法。

(一)、碱法

1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250ml,4℃下5000g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。

2、将细菌沉淀重新悬浮于50ml用冰预冷的STE中(此步可省略)。

3、同步骤1方法离心以收集细菌细胞。

4、将细菌沉淀物重新悬浮于5ml溶液I中,充分悬浮菌体细胞。

5、加入12ml新配制的溶液II,盖紧瓶盖,缓缓地颠倒离心管数次,以充分混匀内容物,冰浴10分钟。

6、加9ml用冰预冷的溶液III,摇动离心管数次以混匀内容物,冰上放置15分钟,此时应形成白色絮状沉淀。

7、4℃下5000g离心15分钟。

8、取上清液,加入50mlRNA酶A(10mg/ml),37℃水浴20分钟。

9、加入等体积的饱和酚/氯仿,振荡混匀,4℃下12000g离心10分钟。

10、取上层水相,加入等体积氯仿,振荡混匀,4℃下12000g离心10分钟。

11、取上层水相,加入1/5体积的4mol/LNaCl和10%PEG(分子量6000),冰上放置60分钟。

12、4℃下12000g离心15分钟,沉淀用数ml70%冰冷乙醇洗涤,4℃下12000g离心5分钟。

13、真空抽干沉淀,溶于500mlTE或水中。

[注意]1.提取过程中应尽量保持低温。2.加入溶液II和溶液III后操作应混和,切忌剧烈振荡。3.由于RNA酶A中常存在有DNA酶,利用RNA

酶耐热的特性,使用时应先对该酶液进行热处理(80℃1小时),使DNA酶失活。

(二)、Wazard大量DNA纯化系统

碱法大量提取DNA往往需要很长的时间.Promega公司的Wiazrd大量DNA纯化系统既简单又快速,只需要离心和真空抽干,这个系统可以从500ml 培养液中在3小时以内获得1mg以上的高质量的质粒DNA(200-20000bp)。该系统不需要酚和氯仿抽提,纯化后的DNA溶于水或TE缓冲液中,不含任何盐份,可以直接用于DNA序列分析和酶切反应,也可以用于在核酸酶抑制剂(如RNasin)存在的条件下进行体外转录反应等。该系统中含有的试剂和柱子可以用于10次100-500ml质粒培养液的分离和纯化,试剂包括:150ml细胞悬浮液,150ml细胞裂解液,150ml中和液,100mlWizard大量DNA纯化树脂,125mlWizard柱子洗脱溶液和10支Wizard带有存储离心管的柱子。

1、100-500ml细胞培养液置离心管中,22-25℃下5000g离心10分钟,所得细胞沉淀充分悬浮于细胞悬浮液中。

2、加15ml细胞裂解溶液并轻轻混合,可以反复倒置混合,但不能用涡旋振荡,细胞裂解完全时,溶液会变清,这一步需要20分钟。

3、加15ml中和溶液,立即反复倒置离心管数次,并使之混匀。

4、14000g,22-25℃离心15分钟。

5、小心地将上清液吸出并移至一个新离心管中。

6、加0.5倍体积的异丙醇,混合均匀,14000g22-25℃下离心15分钟。

7、弃上清,悬浮DNA沉淀于2mlTE缓冲液中。这一步中也许有的沉淀不能溶解。

8、加10mlWizard大量DNA纯化树脂溶液,并涡旋混合。

9、每一个样品,使用一支Wizard大量柱子,柱子的头插在真空器上(Promega产品,与此配套)。

10、将树脂/DNA混合液转入柱子中,真空抽取树脂/DNA混合液。

11、将树脂/DNA混合液抽干后,加13ml柱子洗脱溶液至离心管中,对管底部的树脂/DNA进行洗脱(柱子一边旋转一边加入洗脱液),并加入柱子中。

12、真空抽干所加入的洗脱。

13、再加12ml柱子洗脱液进柱子并抽干。

14、加入5ml80%乙醇漂洗柱中的树脂,柱子真空抽干后将柱子放入用户提供的离心管

中,2500rpm(1300g)离心5分钟。

15、取出柱子,真空抽干5分钟,再将柱子放入系统中所提供的离心管中,2500rpm(1300g)离心5分钟。

16、在柱子中加入1.5ml65-70℃预热过的灭菌重蒸水或TE,1分钟后2500rpm(1300g)离心柱子/离心管5分钟。

17、取出柱子,离心管中溶液即为提取的质粒DNA,可以直接放在离心管中,盖上盖子,储存在4℃或-20℃备用。

[注意]1.在使用之前,系统所提供的柱子洗脱液按1:1加入125ml95%乙醇。2.纯化树脂必须混匀后再用.

(三)、Sephrose2B柱纯化质粒DNA

碱法提取的质粒DNA即使用RNA酶处理,仍会含有少量RNA。当有些试验需无RNA污染的DNA制品时,则需进行进一步纯化。一般常用Sepharose2B 或Sepharose4B进行纯化,该方法具有快速,条件温和,重复性好,载体物质可以再利用等优点,因而已广泛用于质粒DNA纯化。

1、将Sepharose2B经含0.1%SDS的TE(pH8.0)平衡后上柱。

2、将至多1ml的DNA溶液铺在Sepharase2B柱上。

3、待DNA溶液完全进入柱内后立即在柱的上部连接含有0.1%SDS的TE (pH8.0)贮液瓶。

4、以1ml流出液为1份进行收集。

5、对每一管测定其OD260值,以确定哪些管中含有质粒DNA。通常质粒DNA在柱上流出的第一个峰中。

6、合并所有含质粒的洗脱液,用等体积的酚/氯仿(1:1)抽提,4℃下12000g离心2分钟,将上层水相转入新管。

7、加入2倍体积的冰冷无水乙醇,-20℃下沉淀10分钟,然后4℃下12000g离心10分钟,弃去上清液。

8、沉淀加70%乙醇洗涤,4℃下12000g离心10分钟,弃去上清液。

9、沉淀真空抽干,重新溶于TE或无菌水中。

[注意]在装柱过程中,要防止柱床中出现断裂或气泡现象,要使界面保持平整。对新装成的柱,应用含0.1%SDS的TE平衡,以使柱内的凝胶均匀。

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设计元素的提取

元素的提取:分类说明 1,奇妙的朋友 还记得小时候的《爱丽丝梦游仙境》,那些童年梦境中关于童话的幻想,那些坠入凡间的天使、迷雾重重的森林、美好亦或是黑暗。这一切,我们就算在脑海中畅想千万遍也无法在现实中呈现吧。可是,同样在乌克兰摄影师 Anita Anti 的脑海里深藏许久的超现实场景,她却最终用精心制作的服装,超凡脱俗的造型完美呈现了。这就是我们今天分享的超现实童话系列作品。 虽然它只是一幅摄影作品,似乎和我们的设计是没有关联,可事实不是这样的,设计和艺术是相同的。好的设计可以称作为艺术品,同样好的艺术品也可以称作为优秀的设计,下面为大家展示一下下面这几幅作品。 说实话看到上面一幅图片,你是什么感觉?是不是一阵肉麻的感觉,可是你仔细研究一下,那个美丽的女人身上的小点点是什么呢?那是刺,玫瑰是带刺的,这个女人好像就是这些玫瑰的化身,身上长满了刺,却美得不可方物。

这种奇妙的感觉是不是可以融入到我们的设计当中,把一些人们通常认为不可能变为有可能,这就是设计的奇妙。就如同这幅画一样你觉得看着好恶心,可就是忍不住多看她几眼,因为你已经被他吸引了,设计要的就是这种吸引,你有本事把人们的眼球,吸引到你的作品上来,你就赢了。 灵感不是说非要从什么优秀的设计上提取,当然我不是说那样不可以,但是我觉得想要快速的获得灵感,就应该多看一点奇妙的东西,无论他是图片还是实物,其实都可以。 2,女人的世界

都说女生爱漂亮衣服,爱华贵的首饰,爱漫无边际的幻想,谁说不是呢,女生天生就是爱漂亮衣服,爱精美的饰品。可是女人们为什么爱呢?这些东西没有足够的吸引力,女人们又怎会爱呢?请看下图。 这两张图片代表了两种不同的风格,一个浪漫多彩,一个青春活力。一句话形容就是都很带劲啊。我相信绝大多数的女生都会喜欢这二者。有些不错的的设计它的灵感它都是从一些简单的元素,比如说一个简单的符号,一些简单的色彩。从这些方面,他们就可以提取他们想要的灵感。不可否认,这也是取得灵感的方法,但是灵感的来源太多了,从哪里都可以获得灵感,所以我觉得这些漂亮的图片能找到灵感也是可以的,不能因为觉得稀奇就否认它这种形式的存在。 在本学期的ktv设计上,我曾想过走新中式的风格,可是我的这种形式的新中式,在大家常规的意识中好像从没有过,你们可能举得天马行空,但我举得这也是一个不错的主意。想必大家都听说过丝绸之路吧,我想把这次的设计就和丝绸之路紧紧的联系在一起,展示时间轮回中,进化的丝绸之路,暂且给取名为——戏说丝绸之路。

设计该如何借鉴传统元素

似乎大家对国风LOGO还是比较偏爱,也可能是比较易于上手的原因,但还是希望大家能更多尝试不一样的风格,尽力走出舒适区。这一篇我们聊聊上次没有细讲的部分,偏具象的传统元素到底该如何借鉴? 传统元素应用在设计LOGO时是不是只能照搬?很难做出稍具创意的?或者是不能做出现代的风格感觉?其实不然,传统元素借鉴得当的话。表现形式和气质都有非常大的可变弹性。不知道大家还记得再上一篇提及的传统元素的例子吗,如果说你想看到更多的传统元素的灵感来源直接搜“传统元素”就能看到更多。 直接提取法 直接提取法,顾名思义。直接提取传统元素中可以借鉴和应用的部分来设计LOGO即可。其中有可以完全直接照搬的,也有需要提取部分再设计的。 传统元素中图形化程度本身已经非常强的元素在合适的时候是可以直接描摹调整为logo的。显然这是难度最低的方式,你只需要找到合适的参考,照猫画虎即可。最常见的是提取古代字画中的元素形象,剪纸窗花艺术等本身图形化程度就已经非常高的元素。这类元素在合适的场景可以直接调整应用为LOGO。但是需要注意的是,如果是直接照搬的传统元素,一定是只能借鉴历史比较悠久的元素,避免版权问题。 特征叠加法

特征叠加法也是不难理解的,其实就是提取两到三个不同的传统元素通过合理的方式做加法。无论是外形的加法或者是内外的加法,只要满足整体性和美观度就基本能是一个及格的方案。 抽象型的元素结合难点在于一方面你需要提炼出元素,另一方面你也需要兼顾到元素之间的关系,才能使之成为一个整体。 场景组合法 场景组合法与上面的方法其实有所共通,都是通过不同元素的组合。但是不同点在于。场景组合法,是让元素成为一个场景,而叠加法则是让不同的元素成为一个整体。 少元素场景,也就是通过比较少的元素组合成一个小场景LOGO。这类LOGO需要注意,因为元素少,所以元素之间的关系需要具有整体性,不能显得空、散。而且元素也需要更加精致。多元素场景与少元素场景几乎一样,只是元素的多少不同而已。当元素比较多的时候,需要注意元素之间的主次关系以及整体性关系。 抽象重构法 好了。终于到了最难的部分,将无论是图片或者是图形的传统元素提取后,抓住其中关键的特征点,进行抽象重构,几乎已经跳出了传统元素再设计,但根源依旧是传统元素。当你使用这种方法时,就可以不受风格的局限了,即便是传统元素也能有新的甚至是现代的气质。

钪的提取方法研究设计

摘要 钪是一种稀土元素,在被发现后的相当长一段时间里,由于难于制得,钪的用途一直没有表现出来。随着对稀土元素分离方法的日益改进,如今用于提纯钪的化合物,已经有了相当成熟的工艺流程。获得了纯净的钪的化合物之后,将其转化为ScCl3,与KCl、LiCl共熔,用熔融的锌作为阴极进行电解,使钪就会在锌极上析出,然后将锌蒸去可以得到金属钪。这是一种轻质的银白色金属,化学性质也非常活泼,可以和热水反应生成氢气。本文综述了钪的分布情况以及钪的生产辅助原料、提取制备工艺。并对其进行了展望。 关键词:钪,提取,工艺技术,设备

前言 金属钪(Sc)是稀土金属类的重要产品之一。这是由于金属钪的物化性质与稀土金属很相似,所以科学家将其划归入稀土金属族内。但是,因为钪的独立矿物极少,主要分散于其它矿物中(如铝、铀、钛、钨、稀土、锡、钽和煤等矿物),且含量低,故科学家也称它为“稀散金属”,是典型的稀散元素。钪是由瑞典化学家尼尔森于1879年发现的。它属于元素周期表中第三副族,熔点1539℃,沸点2730℃,密度2.99 g/cm3,吸收中子截面积24靶。它的化学活泼性较强,在一定 外界条件作用下,可与氧生成氧化钪(Sc 20 3 ),又能与氢(H )、氟(F)、碘(I)及酸 碱等分别生成ScH 3、ScF 3 、ScI 3 、Sc 3 (S0 4 ) 2 、Sc(OH) 3 及ScCl 3 等产物。这些的 钪的化合物在应用中很有现实意义和较好的经济价值。近年来,钪及其化合物都不断引起人们的高度重视及关注,并加强研制和开发利用。钪主要分散于许多矿物中,含量少,矿物复杂,要分离提取及制取金属钪的工艺技术较难;又因制取金属量不多,价格昂贵,致开发利用进展缓慢,比其它金属应用较晚。但由于钪具有独有的特性,近20年来其在新型电光源材料、激光材料、合金添加剂和金属改性剂等方面获得了较好的应用。这些含钪的材料已在航天、核能、冶金,器件和军工新应用等方面发展较快,钪用量增大,前景看好。国外最早研制、生产、应用和销售金属钪是前苏联。它是开发利用金属钪的世界主力,于20世纪60年代开始研制Sc。目前俄罗斯继承了前苏联的传统,继续开拓金属钪,其产量大,质量好,销售量居世界之冠。

LOGO设计元素提取的常识

元素提取,是logo设计工作的一个资料与逻辑梳理过程,希望能对你有用哦。 一、关于LOGO设计元素提取的相关常识内容 企业相关元素提炼工作做的好不好直接影响logo设计的结果,这是做LOGO一直要遵循的定律。 你做菜不好吃,也许只有1%的可能是你买了不好的食材,但这1%的可能,足以毁了你整顿晚餐。而由于企业相关元素种类繁杂且互相交织,没有几万字说不清楚,所以今天只写关于logo设计的元素提取的常识,而“企业名称中的文字信息提取”、“企业名称中的名词元素提取”、“企业名称中的文化元素提取”等等,留在下几期。 [ 1/什么是LOGO设计的元素提取] 不管你是否了解logo设计元素提取是什么,不管你是不是一个logo设计新手,你做出了一个logo就一定会用到元素提取,就像你做菜一样,你总不能用马勺炒锅铲、用砂锅焖大碗?是的,你肯定不会,做饭离不开食材,做衣服离不开布料,做汽车离不开钢铁塑料玻璃等各种材料,针对于最后完成的成品,你加工过程中用到的所有原材料和配件等等就是元素了。 logo设计元素提取简单说就是为logo设计收集与企业相关的logo创作可用元素,以便在logo创作的时候可以丰富你logo的视觉表现力,这里有几个关键词,第一收集,第二与企业相关,第三创作可用,第四丰富你的视觉表现力,那这四条都是什么意思呢? [ 1-1/收集] 收集的意思就是寻找,并且要拿回来,并且放在一起,你只去找,而不拿回来那不叫收集,那叫浏览,所以收集元素,就是要去把你认为与企业相关的元素找到,并把图片拷贝到你的一个文件里,按元素的类别摆放整齐,这个非常重要哦。例如做一个“左右星光”的儿童模特培训机构logo,我的女儿就是小童模,下面放一个她在央视走秀的GIF视频,大家可以体验下儿童走秀的风采。针对这个项目就做了比较完善的素材收集整理工作,如下: A/品牌名称中的直接元素: A-1 中文:左右、左 A-2 英文:LEFT RIGHT、Left Right、LR、lr[注1]

[创意,图形,元素]浅谈传统主题创意图形元素的设计方法

浅谈传统主题创意图形元素的设计方法 随着时代的发展,新时代的青年们,可以接受新鲜的事物。他们在生活上与物质追求上,都已经有了自己的想法和习惯。而图形创意的本身消费者就是集中在20-30岁的青年艺术爱好者。 在设计的初期,我想的是如何能赋予我的作品一个主题,一个可以和大学生产生共鸣的主题。最后在与指导老师的沟通下,我决定以大学四年了为中心结构,大一到大四这四个阶段,每年都有不同的收获和体验。最初大一的离开家乡,独自进入陌生的环境。懵懵懂懂的接受新鲜的事物,以及不同于原先生活方式的各种冲击,进而不断地成长和进步。在不知不觉中已经成为了一名大二的学长,大二的我开始放任自己,激情的享受时间自由支配的权利。大三的我比以前有年龄上成长了许多,但是由于时间的消磨和自由放纵的堕落,浑浑噩噩的我又进入了迷茫的阶段。很快就到了大学的最后一年,才意识到时间不多了。然而四年的我们并没有将知识完整的填充自己,更多的是浪费时间。就像大梦初醒一般,开始疯狂的填充自己,身边的同学都有了自己的奋斗方向,来自身体最初的力量又被唤醒,重新的燃起了自己的斗志。树立起自己的奋斗目标,并为之努力。 这就是我的设计关键词:分离、新鲜、激情、自由、爱情、迷茫、伤感、斗志。 1 设计风格确定及纹样、材料、规格、结构及色彩的设计 1.1 创意图形的传统风格确定 在构图上,画面采用利用堆叠方式构成空间关系。几何图形在我国的表现方式有很多种,它的的拼接方式多样化,比如对称和延续以及重复。在形状上多以,圆形和方形为结构,在结构的内部用不同的元素重复旋转。因为每天时间都在流失,节气每年都在轮回,用一个传统的符号元素代表一个点,点慢慢的重复形成线,线不断地旋转形成面。 1.2 创意图形的传统纹样设计 在传统纹样上,更多的选自古典的建筑纹样、民间的剪纸艺术、手工纺织艺术、青花陶瓷纹样等。每一种形式都有自己的独特艺术风格,都是劳动人民按照自己本身的生活元素为基础提取而来。在典型的纹样上,青铜器、彩陶纹、瓦当纹案、汉画砖、图方胜盘长、其他纹样。再此为基础提取自己觉得可以用的元素,再加以设计和创新。 1.3 创意图形的材料色彩设计 在颜色选取上,因为元素本身就有自己本身的颜色,所以八个图形的背景颜色就选取与本身元素所含的颜色。但必须都是鲜艳的颜色,也就是纯色。因为在从图形排版、装裱方式上要打破传统,利用堆叠方式构成空间关系,与观众更近距离接触。所以红黄蓝此三原色为主要背景颜色。 1.4 创意图形的规格与结构设计

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