分子遗传学要点总结
分子遗传学总结
一、名词解释1、卫星DNA：在高度重复序列中，常有一些A T含量很高的简单高度重复序列，如螃蟹的卫星DNA区段，AT含量高达97%。
由于A T段浮力密度较小，因而在将DNA切断成数百个碱基对的片断进行超离心时，常会在主要的DNA带的上面有一个次要的DNA带相伴随，这就所谓卫星DNA（主带的AT含量为58%）2、基因家族：真核生物的基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的基因，这样的一组基因称为。
3、反义RNA：反义RNA通过互补的碱基与特定的mRNA结合，结合位点通常是mRNA上的S－D序列，起始密码子AUG和部分N端的密码子，从而抑制mRNA的翻译，人们称这类RNA为干扰mRNA的互补RNA，简称micRNA(mRNA-interferingcomplementary RNA)4、核酶：核糖核酸质酶，表示这类酶的化学本质是核搪核酸，是RNA所具有的催化性质。
5、CAAT框： GG（C/T）CAATCT，一般位于－75附近。
CAAT框的存在较为普遍，可能控制着转录起始的频率。
6、hnRNA核内不均一RNA（hnRNA）真核细胞转录生成mRNA的前体。
加工过程包括：5′加帽；3′端加尾；内含子的切除和外显子的拼接；分子内部的甲基化修饰作用；核苷酸序列的编辑作用。
6、基因组：一个物种的单倍体的染色体的数目称为该物种的基因组。
一个单倍体基因组的DNA含量总是恒定的，它通常称为该物种DNA的C值。
7、δ因子：酵母的Ty成分包括一组与非重复序列相间而散在分布的重复DNA序列。
每个Ty成分长6.3Kb，两端各有一段334bp长的同向重复序列，叫做δ成分。
??8、衰减子：一个受到翻译控制的转录终止子结构。
由于翻译作用的影响，衰减子后面的基因或者继续被转录，或者在衰减子处实现转录的终止即产生衰减作用。
衰减子系统是原核生物中一种调控手段，其调控的实质是以翻译手段调控基因的转录，也就是通过某种机制影响核糖体与RNA聚合酶在mRNA上的相对位置从而控制终止子的二级结构是否形成或形成的二级结构所持续的时间。
分子遗传学要点整理
Chapter 1: Genomes, Transcriptomes andProteomes1. 概述基因组（Genome）：指生物的整套染色体所含有的全部DNA或RNA 序列。
基因组是地球上每一物种具有的生物学信息的存储库。
基因组学（Genomics）：指研究生物的整个基因组，涉及基因组作图、测序和功能分析的一门学科。
基因组所包含的生物信息的利用需要酶及其他参与基因组表达过程中一系列复杂生化反应的蛋白质的协同活性。
基因组表达的最初产物是转录组，即那些含有细胞在特定时间所需生物信息、编码蛋白质的基因衍生而来的RNA分子的集合。
转录组由转录过程来维持。
基因组表达的第二个产物是蛋白质组，即细胞中那些决定细胞能够进行生化反应的所有蛋白质组分。
这是通过翻译过程来完成的。
2.1 Genes are made of DNA奥地利神父孟德尔1865年根据7个碗豆性状的实验提出了遗传因子假说，认为每个性状由遗传因子控制，并提出了遗传因子的分离与自由组合两大遗传规律。
证明基因由核酸 (DNA或RNA) 组成的3个著名实验：①肺炎双球菌的转化试验；DNA是遗传物质②噬菌体感染实验；只有DNA是联系亲代和子代的物质③烟草花叶病毒的感染实验。
RNA也是遗传物质2.2 The structure of DNAA. Nucleotides and polynucleotidesB. The model of double helixDNA 晶体X射线衍射图谱?为揭示DNA分子的二级结构提供了重要实验证据a. Watson and Crick (1953) 提出的DNA双螺旋结构模型："?DNA分子通常以右手双螺旋形式存在，两条核苷酸链反向平行，且互为互补链。
"?戊糖－磷酸骨架在分子的外铡，在分子表面形成大沟和小沟，碱基堆积于螺旋内部。
"?碱基间通过氢键相互连接，A 和T 以2个氢键配对， G和C 以3个氢键配对。
初中生物分子遗传学知识点归纳
初中生物分子遗传学知识点归纳分子遗传学是生物学中重要的一个分支，它研究的是生物体内基因的遗传、表达和变异。
在教授初中生物分子遗传学知识时，你可以按照以下顺序进行归纳：一、DNA的结构和功能DNA是分子遗传学的基础，它由核苷酸组成。
每个核苷酸由磷酸基团、五碳糖（脱氧核糖/脱氧核苷）和氮碱基组成。
DNA的功能在于储存和传递遗传信息。
本体应包括DNA的双螺旋结构、碱基配对规则以及DNA复制过程。
二、基因和基因组基因是生命的基本遗传单位，位于染色体上。
基因包含了编码特定蛋白质的DNA序列。
基因组指的是一个生物体内所有基因的集合，它决定了生物的遗传特征。
本体应包括基因的结构、基因的表达和基因突变。
三、转录和翻译转录是指DNA转录为RNA的过程，RNA则在细胞质中参与蛋白质的合成。
翻译是指RNA编码信息转化为氨基酸序列的过程。
本体应包括转录的概念、转录过程以及各类RNA的功能；翻译的过程、密码子的作用以及蛋白质的功能。
四、突变和变异生物体的遗传信息会发生突变和变异。
突变是指DNA序列的改变，可能是点突变、插入、缺失等。
变异则是指个体之间或同一基因不同等位基因之间的差异。
本体应包括突变的种类、突变的原因和突变对生物体的影响；变异的概念、变异类型和变异的作用。
五、遗传工程和基因编辑遗传工程是指利用基因技术对生物体进行基因的改变和转移，以获得所需的生物特征。
基因编辑则是对生物体的基因进行针对性修饰和调整。
本体应包括遗传工程的原理、遗传工程在医学和农业上的应用；基因编辑的方法、基因编辑技术在治疗遗传性疾病、改良农作物等方面的应用。
六、DNA指纹和DNA测序技术DNA指纹是利用DNA序列的差异对个体进行鉴定的技术。
DNA测序则是对DNA序列的测定。
本体应包括DNA指纹的概念、原理以及在司法鉴定和亲子鉴定中的应用； DNA测序的方法、海德尔格和苏打法测序的原理，以及基因组测序技术的发展。
七、植物克隆和动物克隆植物克隆是利用组织培养和无性繁殖的方法繁育植物；动物克隆是指通过细胞核移植等技术复制动物的过程。
高中生物分子遗传学知识点总结
高中生物分子遗传学知识点总结分子遗传学是现代生物学的重要分支，它研究的是生物生命活动的基础，也是基因功能和遗传信息传递的重要领域。
以下是高中生物分子遗传学的一些重要知识点总结。
一、DNA的结构和复制1. DNA的结构：DNA是由核苷酸单元组成的双螺旋结构，包含磷酸基团、五碳糖（脱氧核糖）、碱基（腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳥嘧啶）。
2. DNA的复制：DNA复制是指在细胞分裂过程中，通过酶的作用，将DNA的两条链分离后，以互补碱基配对的方式合成两条新的DNA 链。
二、RNA的结构和转录1. RNA的结构：RNA也是由核苷酸单元组成，但是它只包含单条链，其中糖骨架使用的是核糖。
2. 转录：转录是指将DNA模板上的遗传信息转化为RNA分子的过程。
在转录过程中，DNA的一部分被解开，形成一个可供RNA聚合酶进行配对合成的模板。
三、遗传密码和翻译1. 遗传密码：遗传密码是指RNA的核苷酸序列与氨基酸序列之间的对应关系。
共有64个密码子，其中61个密码子对应给定的氨基酸。
2. 翻译：翻译是指将mRNA上的核苷酸序列翻译成蛋白质的过程。
在翻译过程中，mRNA的信息被带有氨基酸的tRNA识别，最终形成多肽链。
四、基因表达的调控1. 甲基化：甲基化是一种通过在DNA分子上添加甲基基团来改变基因表达的方式。
甲基化可以抑制基因的转录，从而调控基因的表达水平。
2. 转录因子：转录因子是一类能够结合到DNA上的蛋白质，它们能够促进或抑制基因的转录。
转录因子的不同结合方式和组合可以导致不同的基因调控模式。
五、基因突变和遗传疾病1. 点突变：点突变是指DNA序列中一个单个碱基的改变，可能导致蛋白质结构的改变，进而导致遗传疾病的发生。
2. 染色体突变：染色体突变包括染色体结构的改变和数目的改变，可能导致严重的遗传病。
六、逆转录和重组DNA技术1. 逆转录：逆转录是指将RNA作为模板合成DNA的过程，由逆转录酶完成。
逆转录在病毒的复制和细胞中的转座子等过程中起到重要作用。
分子遗传学与基因检测知识点总结
分子遗传学与基因检测知识点总结1. 引言在现代生物学领域，分子遗传学和基因检测起到了至关重要的作用。
分子遗传学研究了遗传物质的结构、功能以及其在遗传信息传递中的作用；而基因检测则是利用分子遗传学知识和技术手段来检测个体的基因组，从而了解某些遗传疾病的风险、个体的遗传特征等。
本文将对分子遗传学和基因检测的相关知识点进行总结。
2. 分子遗传学知识点2.1 DNA结构与功能DNA是一个双链螺旋结构，由四种不同的碱基（腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳄鱼嘧啶）组成。
它在遗传信息的传递中起到了承载和复制的作用。
DNA分子通过碱基互补配对（A与T，C与G）实现了其遗传信息的传递和复制。
2.2 RNA的类型和功能RNA分为信使RNA（mRNA）、核糖体RNA（rRNA）和转运RNA（tRNA）等多种类型。
其中，mRNA是DNA的转录产物，作为模板参与蛋白质合成；rRNA则是组成核糖体的主要组分，参与蛋白质的合成过程；tRNA则将氨基酸运输到核糖体，参与蛋白质的合成和翻译。
2.3 基因表达调控基因表达的调控是指通过一系列调控机制控制基因的转录和翻译过程。
其中，转录水平的调控包括启动子的结合和转录因子的活化或抑制；翻译水平的调控包括调控tRNA的选择性和调控启动子中的小核仁RNA。
2.4 突变与遗传变异突变是指基因型或染色体结构的突然改变，是遗传变异的一种形式。
常见的突变类型包括点突变、插入突变、缺失突变和倒位突变等。
突变会导致基因编码的蛋白质发生结构或功能上的改变，进而可能引发遗传疾病。
3. 基因检测知识点3.1 基因检测的定义和意义基因检测是利用分子遗传学的知识和技术手段，对个体的基因组进行检测，以获取有关遗传特征、疾病风险等信息的过程。
基因检测可以帮助医生进行疾病的早期诊断、风险评估和个体化治疗等，对于遗传性疾病的防控具有重要意义。
3.2 基因检测的方法和技术基因检测方法包括PCR（聚合酶链式反应）、测序技术、核酸杂交等。
武汉大学分子遗传学笔记
武汉大学分子遗传学笔记(不断更新中)第一章绪论1.1 分子遗传学的含义1.不能把分子遗传学单纯地理解成中心法则的演绎*分子遗传学≠中心法则传统：分子遗传学=中心法则实际：分子遗传学≠中心法则，他首先是遗传学，其坚实的理论基础仍然是摩尔根的《基因论》中心法则只是对基因，性状及突变在核酸分子水平上的解释。
从中心法则到性状的形成仍然是一个复杂的甚至未知的遗传，变异与发育的生物学过程。
分子遗传学不仅盯住DNA/RNA，蛋白质，更要研究活细胞内与遗传便宜有关的一切分子事件。
分子遗传学≠核酸+蛋白质分子遗传学研究的对象是分子水平上的生物学过程-遗传与变异的过程。
它研究的是动态的生物学过程，而不是脱离生物体，在试管里孤立地研究生物大分子的结构与功能。
1992年，Nature 的主编J.Maddox 曾著文Is molecular biology yet a science？指出："现在有那么一些叫分子生物学家的人，他们的文章无视全部的动物，植物，也很少言及他们的生理学。
实验的大部分资料来自所谓的\'凝胶\'---""分子生物学在很大程度上变成定性的科学。
---如果事情只是简单的说明某个基因版本与某种遗传病相关，那么，分离这种片段（如电泳），然后测序足以。
"但是"以往的巨大成就表明，生命过程是由严格控制下进行的一些有序事件组成"他说："在人们长期为细胞生物学现象寻找定性的解释中，他们将会相信细胞只不过是一个充满了分子开关的袋子，他们作为分子传动器或开或关而出现在预定的事件序列中。
要真正在分子水平上了解遗传变异的本质，仅仅研究核酸或蛋白质的生物化学是不够的。
分子遗传学所研究的应该是细胞中动态的遗传变异过程，以及与其相关的分子事件。
所以不止是中心法则，核酸，蛋白质。
2.分子遗传学不是核酸及其产物（蛋白质）的生物化学分子遗传学是分子生物学的一个分支，或理解为狭义的分子生物学。
分子遗传学部分重点
典型的真核基因的结构——断裂基因（Interrupted gene）包括外显子序列、转录区前后对于基因表达具有调控功能的序列和外显子间的间隔序列(内含子)将基因组DNA在介质氯化铯（CsCl）中作密度梯度离心可以看到在一条主带以外还有一个或多个小的卫星带，这些在卫星带中的DNA即被称为卫星DNA，这种DNA的GC含量一般少于主带中的DNA，浮力密度也低。
高度可变小卫星DNA（可变数目串连重复序列，variable number of tandem repeat，VNTR），呈高度多态性，可作遗传标记微卫星DNA（短串联重复，short tandem repeat，STR呈高度多态性，可作遗传标记串联重复序列长度多态性（VNTR、STR）在人群中以孟德尔共显性的方式遗传可用于标记遗传物质（染色体）的在世代间传递基因簇与串联重复拷贝基因的区别：基因簇（gene cluster）：由一个祖先基因的复制和趋异形成，基因簇中每个基因成员间相似但不完全相同（DNA序列或表达谱），基因簇中可能存在假基因。
串联重复拷贝基因（如rRNA基因）每个拷贝转录产物完全相同，其产物如同由一个基因转录而来。
基因家族（gene family）：一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因。
同一家族中的成员排列在一起——基因簇更多时候分散在染色体的不同部位，具有各自的表达调控模式基因超家族（gene super-family）：一组由序列的同源性定义，通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。
决定同源的主要标准是核苷酸（氨基酸）残基的保守性不同成员间功能可以相关也可以不相关在进化过程中失去功能的基因成为假基因。
假基因特点：不能转录；转录后不能产生有功能蛋白产物两类假基因（pseudogene）基因复制产生假基因；反转录转座产生假基因（加工过的假基因，processed pseudogene）重组与转座是基因与基因组进化的主要动力，自然选择决定进化方向。
分子遗传学重点(可缩印)
1、基因：遗传信息的基本单位。
一般指位于染色体上编码一个特定功能产物(如蛋白质或RNA 分子等)的一段核苷酸序列。
2、核型：是指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征，包括染色体长度、着丝粒的位置、臂比值、随体的有无、次缢痕的数目及位置。
3、染色体分带：用特殊的染色方法,使染色体产生明显的色带(暗带)和未染色的明带相间的带型,形成不同的染色体个性,以此作为鉴别单个染色体和染色体组的一种手段。
5、染色体带型：经过显带技术处理后的染色体，显示出特征性的带纹。
每一条染色体都有固定的分带模式，即称带型。
6.操纵子：指几个功能上相近或相关的结构基因排列在一起，由一个共同的启动子、操纵子或其它调控序列来调控这些基因的转录。
包括这些结构基因和控制区的整个核苷酸序列就称为操纵子。
7.外显子：真核基因中与成熟mRNA、rRNA或tRNA分子相对应的DNA序列，为编码序列。
8、内含子：初级转录物中无编码意义而被切除的序列。
在前体RNA中的内含子也常被称作“间插序列9、转座子：一种复合型转座因子，这种转座因子带有同转座无关的一些基因，入抗药性基因，它的两端是插入序列，构成了“左臂”和“右臂”，两个臂可以是正向重复，也可以是反向重复。
这种复合型转座因子称为转座子。
10、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。
重叠方式：（1）基因套基因（2）部分重叠(3)三个基因重叠11、反转录转座子：指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。
12、C值：一种生物单倍体基因组所含的DNA总量，称为该物种DNA的C值。
在低等真核生物中，C值的大小与生物的形态结构的复杂程度有关。
而在高等生物中则不具有这一相关性。
这种现象称为C值悖理。
N值悖论：处于不同进化阶梯，复杂性不同的生物种属所具有的基因数目与其结构的复杂性不成比例的现象。
13、RNP:核糖核蛋白：由RNA核糖核苷酸和蛋白质组成。
SNP:单核苷酸的多态性:单核苷酸多态性是指在同一物种的不同个体基因组的等位序列上单个核苷酸对存在差别的现象。
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第一章1.理解Genomes, Transcriptomes 和Proteomes三个名词，并阐明它们在基因组表达过程中是如何联系在一起的；Genomes：基因组（Genome）：由德国汉堡大学威克勒教授于1920年首创，指生物的整套染色体所含有的全部DNA或RNA序列。
基因组是地球上每一物种具有的生物学信息的存储库。
基因组学（Genomics）：由罗德里克于1986年首创，指研究生物的整个基因组，涉及基因组作图、测序和功能分析的一门学科。
Transcriptomes：基因组表达的最初产物是转录组，即那些含有细胞在特定时间所需生物信息、编码蛋白质的基因衍生而来的RNA分子的集合。
•转录组中的RNA分子以及其他来自非编码基因的RNA都由转录过程产生。
•Proteomes：基因组表达的第二个产物是蛋白质组，即细胞中那些决定细胞能够进行生化反应的所有蛋白质组分。
•这些蛋白质是通过翻译那些组成转录组的mRNA分子而合成的。
•蛋白质组包括了在特定时间存在于细胞中的所有蛋白质。
阐明三者在基因组表达过程中是如何联系在一起的？•基因组所包含的生物信息的利用需要酶及其他参与基因组表达过程中一系列复杂生化反应的蛋白质的协同活性。
•基因组表达的最初产物是转录组，即那些含有细胞在特定时间所需生物信息、编码蛋白质的基因衍生而来的RNA分子的集合。
转录组由转录过程来维持。
•基因组表达的第二个产物是蛋白质组，即细胞中那些决定细胞能够进行生化反应的所有蛋白质组分。
这是通过翻译过程来完成的。
•The genome tells you what could be happened theoretically in the cell.•Transcriptome tells you what might be happened.•And the proteome tells you what is happening.2.掌握双螺旋结构的关键特征；Watson and Crick (1953) 提出的DNA双螺旋结构模型：➢DNA分子通常以右手双螺旋形式存在，两条核苷酸链反向平行，且互为互补链；➢戊糖－磷酸骨架在分子的外铡，在分子表面形成大沟和小沟，碱基堆积于螺旋内部；➢碱基间通过氢键相互连接，A和T以2个氢键配对，G和C以3个氢键配对；➢螺旋中相邻碱基间相隔0.34nm，每10个碱基对螺旋上升一圈，螺距为3.4nm，直径为2.37 nm。
3.正确区分编码RNA和功能性RNA；4.描述蛋白质结构的不同层次；蛋白质和DNA分子一样，是一个线性的无分支的多聚体。
蛋白质中的单体亚单位称为氨基酸。
氨基酸形成的多聚体或多肽在长度上很少超过2000个单位。
• a. primary structure氨基酸通过肽键连接成一条多肽链。
• b. secondary structure指多肽采取的不同构象，由不同氨基酸之间形成的氢键所稳定。
α螺旋；β片层• c. tertiary structure是将多肽链的二级结构组分折叠成为三维构型而形成的。
• d. quaternary structure两条或更多已形成三级结构的多肽链组合在一起形成一个多亚基蛋白质。
不是所有蛋白质都有四级结构5.掌握转录组学和蛋白质组学的一般研究方法，特别是SAGE技术、微阵列和基因芯片技术以及鉴定蛋白质相互作用的技术（噬菌体展示、酵母双杂交等）。
转录组研究的方法A. 通过序列分析研究转录组研究转录组最直接的方法是将其中的mRNA转变为cDNA，并对所有cDNA克隆进行测序，再与基因组序列进行比较分析。
还可以借助第二、三代测序技术直接对RNA进行测序。
基因表达系列分析（Serial analysis of gene expresion, SAGE）SAGE技术不是研究完整的cDNA，它产生长度12bp的短序列，每一条都代表了转录组中存在的一种mRNA。
技术基础：412=16,777,216 bp，真核mRNA平均1500 bp，412相当于11,000个转录物，这比最复杂的转录组中存在转录物数目还多，因此12bp序列能够代表某一种mRNA。
Bsm F1是一种不常见的限制性内切酶，它不在其识别序列内部，而是在识别位点下游10-14个nt处切割。
切下来的片段被收集起来，头尾相连以产生一个串联体，进行测序分析。
串联体中的各个标签序列信息被读取并与基因组中的基因序列比对，从而可以分析哪些基因被转录，表达水平如何。
B. 通过微阵列或芯片分析来研究转录组构成转录组的mRNA总体被反转录成一个cDNA的混合物，然后被标记，用于和芯片或微阵列杂交。
优点：可用于快速评估两个或多个转录组间的差异。
Microarray:玻璃片，尼龙膜(PCR产物或cDNA )DNA chip:玻璃片，硅片( 原位合成并固化的寡聚核苷酸)用不同的荧光来标记cDNA样品，微阵列与两个样品同时杂交，可以减少由于试验误差引起的差异。
蛋白质组研究的方法A. 蛋白谱（表达蛋白质组学）用来研究一个蛋白质组组成的特定技术。
蛋白谱基于两项技术：蛋白电泳和质谱a. 双向电泳：等电点:蛋白质的净电荷为零时溶液的PH值。
b. MALDI-TOF (基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)•用于鉴定蛋白组中的蛋白质，最多可以分析出50个氨基酸长度的多肽，因此一个蛋白质可以通过胰酶将其消化后进行测定。
•一旦多肽片段被离子化，多肽的质量/电荷比就可以通过它在质谱仪中从电离源到检测器的“飞行时间”来确定。
通过质荷比能够确认多肽片段的分子质量。
•计算机中含有一个由所研究的物种基因组编码的每一个蛋白质经胰酶消化后各个片段的预计相对分子质量的数据库，计算机通过比较数据库与检测到的多肽片段的分子质量来确认最可能的初始蛋白质。
B. 蛋白质印迹法（Western杂交）•Western杂交是将蛋白质电泳、印迹、免疫测定融为一体的特异性蛋白质的检测方法。
•其原理是：生物中含有一定量的目标蛋白。
先从生物细胞中提取总蛋白或目标蛋白，将蛋白质样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中，经SDS-PAGE电泳将蛋白质按分子量大小分离，再把分离的各蛋白质条带原位转移到固相膜（硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，接着将膜浸泡在高浓度的蛋白质溶液中温育，以封闭其非特异性位点。
•然后加入特异性抗体（一抗），膜上的目的蛋白（抗原）与一抗结合后，再加入能与一抗专一性结合的带标记的二抗（通常一抗用兔来源的抗体时，二抗常用羊抗兔免疫球蛋白抗体），最后通过二抗上带标记化合物（一般为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶，或用同位素或生物素标记）的特异性反应进行检测。
•根据检测结果，从而可得知被检生物细胞内目的蛋白的表达与否、表达量及分子量等情况。
C. 鉴定与某一蛋白质相互作用的蛋白质通过鉴定有相互作用的成对或成组的蛋白质能够获得基因组活性相关的重要数据。
构建蛋白质相互作用图谱被视为是连接蛋白质组学与细胞生物化学过程的一个重要步骤。
a. 噬菌体展示该技术采用了一种基于 噬菌体或某种丝状噬菌体的独特的克隆载体。
待测基因被插入载体后，它的蛋白质产物能与噬菌体外壳蛋白以融合形式表达。
使用噬菌体展示库来寻找与待测蛋白质相互作用的蛋白质的噬菌体。
b. 酵母双杂交激活因子（转录因子）：一类控制基因表达的蛋白质，包含DNA结合结构域和转录激活结构域。
双杂交系统使用缺乏某一报告基因相应激活因子的酿酒酵母菌株，此时报告基因是不表达的。
D. 蛋白质相互作用图谱也叫蛋白质相互作用网络，能展现一个蛋白质组中各成员间发生的相互作用。
第二章1.列举用于DNA操作的不同类型酶的特征及主要作用；(1)末端修饰酶：改变DNA分子末端，为连接实验的设计增加可操作空间。
A. 末端脱氧核糖核苷酸转移酶：属于模板非依赖的DNA聚合酶。
B. 碱性磷酸酶：去掉DNA分子5’端磷酸基团，从而阻止这些分子连接到其他分子上。
C. T4多聚核苷酸激酶：向DNA分子5’端添加磷酸基团，主要用于DNA分子的末端标记。
(2)DNA聚合酶:以现有DNA或RNA分子为模板合成DNA的酶，称为（依赖模板的）DNA聚合酶。
DNA聚合酶I (Kornberg聚合酶) : 5’→3’聚合酶功能5’→3’外切功能3’→5’外切功能Klenow聚合酶:用枯草杆菌蛋白酶处理DNA聚合酶I，可获得两个片段，大片段的分子质量约76 kDa，保留聚合酶活性和3’→5’外切核酸酶活性，又叫Klenow片段。
小片段的分子质量约34 kDa，具有5’→3’外切核酸酶活性。
(3)核酸酶:外切核酸酶和内切核酸酶(4)DNA连接酶:通过DNA连接酶可以将限制性内切核酸酶消化产生的DNA片段重新连接起来，或者连接到一个新的分子上。
T4 DNA连接酶：从T4噬菌体感染后的大肠杆菌细胞中提取。
2.说明三种类型的限制性内切酶切割DNA的方式；限制性内切核酸酶在特定的位置切割DNA分子：按限制性内切酶的组成、是否具有修饰酶活性以及切断核酸的情况不同，限制酶可分为三类：I型，II型和III型。
a. I和III型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的降解，但切割位置不固定。
b. II型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的降解（无修饰酶活性），且具有识别位点的专一性和切割位点的专一性，一般在识别序列内切割，不需要A TP提供能量，是重组DNA 技术中常用的限制性内切酶。
细菌中三种不同类型的限制-修饰酶3.区分平端与粘端连接，并说明如何提高平端连接的效率；粘性末端连接的高效率推动了将钝末端转变成粘性末端方法的发展。
•一种方法是将称为连接子（linker）或接头（adaptor）的小双链分子连接到钝末端。
•另一种方法是利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶进行同聚物加尾，即在钝末端的3’末尾一个接一个地添加核苷酸。
4.详述克隆载体的主要特征；质粒，噬菌体，人工染色体等，它们都含有复制起始位点。
A. 以大肠杆菌质粒为基础的载体pUC系列：pUC8，2.7kb，除了起始位点外，还携带氨苄青霉素抗性基因（pUC8的选择性标记）和lacZ’基因（编码 -半乳糖苷酶的一部分）。
某些大肠杆菌菌株具有一个修饰的lacZ 基因，该基因中缺失lacZ’部分。
B. 建立在大肠杆菌噬菌体基因组基础上的克隆载体最初尝试着发展能操作大片段DNA分子的载体集中在λ噬菌体上。
λ噬菌体存在两种感染周期：裂解性感染周期；溶源性感染周期λ噬菌体基因组大小为48.5 kb，其中有15 kb为随意区域，可以被删除而不影响噬菌体感染细菌的能力。
据此，目前发明了两种类型的载体：插入型载体：该载体中部分或全部随意DNA被删除，并在删切后的基因组内部的某些位点引入一个单一的限制性酶切位点。
用插入型载体进行克隆:λ噬菌体基因组是一个线性分子，但其两个末端具有12个核苷酸的单链突出，称为cos 位点。