RNA提取方法汇总
rna提取方法及原理
rna提取方法及原理RNA是一种生物大分子，具有非常重要的生物学功能，在生物研究中有着广泛的应用。
为了研究RNA的功能和结构，科学家们需要从细胞中提取出RNA。
本文将介绍RNA提取的几种常用方法及其原理。
一、酚/氯仿法酚/氯仿法是RNA提取的一种经典方法，它基于RNA和DNA的物理性质差异进行分离。
该方法的步骤如下：1. 细胞破碎：将待提取RNA的细胞或组织经过低温致裂，使细胞膜破裂释放出RNA。
2. 酚酸提取：加入酚酸溶液，与DNA形成两相体系。
RNA主要溶于上层的酚酸相中，而DNA则主要溶于下层的酚氯仿相中。
3. 氯仿提取：将上层的酚酸相与下层的酚氯仿相分离，得到含有RNA的上层液体。
4. 沉淀：通过加入异丙醇或乙醇使RNA沉淀，然后用冷乙醇洗涤并干燥沉淀，最后用水溶解得到纯净的RNA。
酚/氯仿法的原理是利用RNA和DNA的溶解度差异以及RNA在酚酸上层相中的亲和力较大，从而实现RNA的提取。
二、硅胶膜柱法硅胶膜柱法是一种常用的RNA提取方法，它使用硅胶膜柱与试剂盒结合，以实现RNA的高效提取。
该方法的步骤如下：1. 细胞破碎：将待提取RNA的细胞或组织破碎，并加入试剂使RNA不受降解酶的影响。
2. 结合：将破碎后的细胞溶液与硅胶膜柱结合，RNA结合到硅胶膜柱的表面。
3. 洗涤：通过洗涤剂洗去杂质和其他污染物，保留纯净的RNA在硅胶膜柱上。
4. 解吸：将洗涤后的硅胶膜柱加入含有RNase-free水的管中，使RNA从硅胶膜柱中解离。
5. 沉淀：通过加入异丙醇或乙醇使RNA沉淀，然后用冷乙醇洗涤并干燥沉淀，最后用水溶解得到纯净的RNA。
硅胶膜柱法的原理是利用硅胶膜柱的高亲和性和离心过滤来纯化RNA，同时通过试剂的作用保护RNA免受降解酶的影响。
三、磁珠法磁珠法是一种高效且易于自动化的RNA提取方法，它利用磁珠表面的化学基团与RNA分子进行特异性结合。
该方法的步骤如下：1. 细胞破碎：将待提取RNA的细胞或组织破碎，并加入试剂使RNA稳定。
rna的提取方法
rna的提取方法
1.细胞或组织的采集：采集样品时应尽量避免RNA的降解或污染，可使用RNase-free工具和试剂，避免手套和工作表面受到RNase污染。
2. 细胞或组织的破碎：可使用机械方法、化学方法或冻融法等
方法将细胞或组织破碎，释放RNA。
3. RNA的纯化：RNA的纯化可使用酚/氯仿法、商用RNA纯化试
剂盒等方法。
其中，酚/氯仿法是最常用的RNA纯化方法。
该方法利
用酚将RNA从DNA和蛋白质中分离，然后通过氯仿的密度梯度离心分离出RNA。
4. RNA的质量检测：RNA的纯化后，需要进行质量检测，以确保RNA的完整性和纯度。
可使用紫外线吸收法、琼脂糖凝胶电泳等方法进行检测。
5. RNA的保存：RNA的保存应避免RNA降解，需使用RNase-free 的保存液，如RNAlater等，或在零下80℃的冷冻库中保存。
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RNA提取方法总结
RNA提取方法总结这篇文章主要讲的是几种常用的RNA提取方法。
1、异硫氰酸胍氯化铯超速离心法原理：使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，经过起始密度为 1.78g/ml的氯化铯介质，进行密度梯度超速离心，RNA 沉淀于管底，而DNA与蛋白质在上清中。
使用这种方法，不但能得到高质量的RNA，而且能同时分离出细胞染色体DNA.本法对于冷冻时间长、细胞质和细胞核不易分离的组织标本以及富含RNA酶的组织细胞(如胰腺)的RNA提取尤其适合。
此法提取的RNA 的质量好和成功率高，已成为提取哺乳动物细胞RNA的常规方法。
其缺点是操作复杂、流程长，一次提取的样品数量有限。
2、盐酸胍-有机溶剂法本法有MacDonald 1987年在Strohman报道的方法基础上改进而成的，适用于没有超速离心及设备的情况下提取细胞总RNA。
它利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质，通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA，提取的RNA质量较好，但整个操作过程繁杂费时。
3、氯化锂-尿素法本法首先由Auffray报道，利用高浓度尿素变性蛋白质同时抑制RNA 酶，3mol/L LiCl选择性沉淀RNA。
其缺点是有时会存在DNA污染，LiCl 沉淀RNA会丢失一些小分子量的RNA，如5S RNA等。
优点是快速简捷，尤其适用于大量样品少量组织细胞的RNA提取，其质量可以满足Northern分析，Oligo(dT)提取mRNA，SI核酸酶或RNase保护实验等。
本法每提取107个细胞能提取总RNA约10 g。
4、热酚法本法主要用于少量细胞样品RNA提取，其产量不高，但简单易行。
5、快速提取法本法主要用于培养细胞，通过0.5%SDS裂解细胞，酚抽提去除蛋白质和DNA沉淀，快速纯化RNA。
6、细胞质RNA提取法本法主要适用于培养细胞，首先去除细胞核，然后用蛋白酶K消化蛋白质，酚/氯仿抽提去除蛋白质。
操作简单，同时能进行多个样品操作，多数步骤在室温下进行，提取的RNA质量较高，可满足体外无细胞翻译系统、cDNA合成、引物延伸以及核酸酶SI保护实验。
DNA和RNA提取方法及原理
DNA和RNA提取方法及原理DNA提取方法：1.酚/氯仿方法：这是最早应用的DNA提取方法之一，适用于绝大多数生物样本。
原理是利用酚酸抽提DNA，酚酸能溶解细胞膜和蛋白质，而DNA在酚相沉淀。
然后用氯仿提取，分离DNA与酚相中的蛋白质和RNA。
最后通过乙醇沉淀纯化DNA。
这种方法可以得到高质量的DNA，但操作过程相对繁琐。
2.硅胶基质法：硅胶基质可吸附DNA，该方法使用硅胶膜或硅胶粉末来固定DNA，通过洗涤去除杂质，最后用洗脱液从硅胶上洗脱DNA。
这种方法具有简便和高纯度的优点，适用于大规模提取DNA。
3.盐酸法：盐酸法以酸性条件下使DNA变为不溶性沉淀物的原理，通过加入盐酸将DNA沉淀下来，然后经过洗涤和乙醇沉淀纯化。
这种方法适用于提取纯度要求不高的DNA。
RNA提取方法：1.酚酸提取法：这是最常用的RNA提取方法之一、原理类似于DNA的酚/氯仿法，通过酚酸将核酸与蛋白质和其他杂质分离。
然后通过氯仿脱脂，去除酚相中的蛋白质，并且获得RNA水相。
最后通过乙醇沉淀纯化RNA。
这种方法适用于大多数样品，得到的RNA纯度较高。
2.硅胶基质法：与DNA提取类似，它也适用于RNA的提取。
通过硅胶膜或硅胶粉末结合RNA并洗脱，用洗脱液分离RNA与杂质。
这种方法适用于大规模提取RNA。
3.氯仿法：这是一种较为简便的RNA提取方法，它通过氯仿脱脂去除脂质和其他杂质，并且能够同时去除DNA。
最后用乙醇沉淀纯化RNA。
这种方法适用于需要较快速提取RNA的情况。
DNA和RNA提取的基本原理都是通过分离和纯化DNA或RNA与其他杂质的物质。
酚酸提取法和硅胶基质法同属于酚酸法，都是通过酚酸和氯仿来分离DNA或RNA与蛋白质和其他杂质。
其中酚酸能溶解细胞膜和蛋白质，并且DNA或RNA在酚相中沉淀，而蛋白质和RNA在氯仿相中溶解。
然后通过洗脱和纯化步骤，从酚酸相中提取DNA或RNA。
盐酸法与酚酸法不同，它是通过酸性条件下使DNA变为不溶性沉淀物来分离DNA与其他杂质。
不同组织总rna提取
不同组织总rna提取
总RNA是一种包含所有转录本的RNA样品，对于许多生物学研究非常重要。
不同组织中的总RNA提取方法可能略有不同，以下是一些常见的总RNA提取方法：
1. 经典酚/氯仿法：该方法适用于多种组织，包括动物和植物组织。
它利用酚和氯仿的不同溶解度将RNA从DNA和蛋白质中提取出来。
它需要耗时且冗长的样品制备步骤，但可以获得高质量的RNA。
2. Trizol法：该方法是一种常用的RNA提取方法，适用于多种组织和细胞类型。
它使用一种酚-胍-氯仿混合物将RNA从细胞和组织中提取出来。
这种方法比经典酚/氯仿法更快，也可以获得高质量的RNA。
3. 氯化锂法：该方法适用于小型样品和细胞类型，例如酵母细胞。
它使用氯化锂和酒精的不同溶解度来提取RNA。
这种方法需要较短的制备时间，但可能会影响RNA的质量。
4. 柱式RNA提取法：该方法使用酚/氯仿或Trizol提取RNA，
并通过硅胶柱纯化步骤来去除杂质。
这种方法可以获得高质量的RNA，并且适用于各种组织类型。
总之，不同组织中的总RNA提取方法略有不同，但通常都可以使用上述方法之一。
选择合适的方法取决于实验的具体需求和样品类型。
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rna的提取方法
rna的提取方法RNA的提取是从生物样品中获取RNA的过程，这个过程通常包括以下几个步骤：1. 样品收集：根据需求选择生物样品，如细胞、组织、血液等，并采用合适的方法收集。
2. 细胞破碎：通过细胞破碎，将细胞内的RNA释放到溶液中。
破碎方法包括机械破碎、超声波破碎、化学破碎等。
3. RNA分离：分离RNA和其他分子，如DNA、蛋白质等。
4. RNA纯化：将RNA纯化，去除杂质，获得高质量RNA。
纯化方法包括硅胶柱层析、离心管基质层析等。
下面详细介绍三种常用的RNA提取方法：1. 酚-氯仿法这种方法可用于组织和细胞的RNA提取。
首先使用酚将细胞或组织破碎，然后加入等体积的氯仿，混匀，使DNA和蛋白质沉淀于底部，RNA在上层水相中得到富集。
再通过异丙醇沉淀，将RNA分离出来。
最后，通过洗涤和纯化过程，得到高质量RNA。
酚-氯仿法是一种经济、简单和高收率的提取RNA的方法。
2. 硅胶柱纯化法该方法是一种高效、快速且高纯度的RNA提取方法，适用于多样品处理。
该方法使用硅胶柱将RNA分离，并消除DNA和酶的污染。
该方法能够从各种样本中提取高品质RNA，可用于测序、杂交和原位杂交等分子生物学应用。
3. 针头粘贴法这种方法是一种快速简单的RNA提取法，特别适用于某些免疫细胞和细胞样品。
利用针头从样品中取出细胞，将其粘贴在聚丙烯酰胺凝胶上，通过离心将RNA分配到凝胶上。
该方法提取RNA量小，但可以高度升质和纯化的RNA，是一种快速且相对简单的RNA提取方法。
总之，根据不同的实验目的，可选择适用于不同的RNA提取方法。
rna提取方法
rna提取方法RNA提取方法。
RNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它能够从细胞或组织中分离出RNA，并为后续的实验和分析提供可靠的样本。
在实验室中，有多种方法可以用来提取RNA，每种方法都有其特点和适用范围。
本文将针对常用的RNA提取方法进行介绍和比较，希望能为科研工作者提供一些参考和帮助。
一、酚/氯仿提取法。
酚/氯仿提取法是一种经典的RNA提取方法，它通过酚和氯仿的相分离特性来分离RNA。
首先，细胞或组织样本被加入到酚中，然后加入氯仿和异丙醇，最后进行离心分离。
这种方法简单易行，适用于大多数样本类型，但对RNA的纯度要求较高，且操作过程中需要注意避免RNA的降解。
二、硅基柱法。
硅基柱法是一种基于硅基质的RNA提取方法，它通过硅基柱的亲和吸附作用来富集RNA。
样本经过细胞裂解后，加入硅基柱柱子进行离心，然后通过洗脱步骤得到纯净的RNA。
这种方法操作简便，适用于高通量提取，但对样本量和纯度要求较高。
三、磁珠法。
磁珠法是一种利用磁珠颗粒来富集RNA的提取方法，它具有操作简便、高效快速的特点。
样本经过裂解后，加入磁珠颗粒进行混合，然后通过磁场分离得到RNA。
这种方法适用于多样本处理和自动化操作，但对磁珠颗粒的选择和配比要求较高。
四、酶法。
酶法是一种利用酶来选择性降解DNA而保留RNA的提取方法，它适用于需要高纯度RNA的实验。
通过加入DNA酶和蛋白酶K来去除DNA和蛋白质，最终得到纯净的RNA。
这种方法操作简便，适用于小样本和特定实验要求，但需要注意酶的活性和浓度控制。
五、TRIzol法。
TRIzol法是一种利用TRIzol试剂来提取RNA的方法，它通过酚-醇混合物和氯仿的相分离特性来富集RNA。
样本经过混合后，加入氯仿进行离心分离，最后得到RNA。
这种方法适用于多种样本类型，但需要注意操作过程中的酚和氯仿的使用安全。
综上所述，不同的RNA提取方法各有特点，科研工作者可以根据实验需求和样本特性选择合适的方法。
RNA的提取总结
一、总的RNA的提取基础知识：(1)DEPC：中文名为焦碳酸二乙酯。
分子式为C6H10O5，分子量为162.14。
是一种强烈的RNA酶抑制剂。
它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。
DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC,在搅拌器上搅拌至完全溶解，即看不到“油珠”为止，DEPC气味芳香浓烈，强挥发性，有毒，需在通风橱中操作。
(2)RNA分子：哺乳动物细胞有3种rRNA：28S、18S和5S。
一个典型的哺乳动物细胞含有10-5μg RNA，其中80～85％为rRNA，其余15～20％主要由各种类型的低分子量RNA组成(tRNA、核内小分子RNA等)，这些高丰度的RNA分子具有确定的大小和核苷酸序列、并能用电泳、密度梯度离心、阴离子交换或高效液相层析等技术分离纯化。
mRNA与上述RNA不同，其含量为细胞总RNA的1～5％，大小和核苷酸序列各不相同，从数百至数千碱基不等。
..多数真核细胞mRNA在其3端均有一poly(A）尾，使得mRNA可以通过挂有oligo(dT)-纤维素的亲和层析柱分离纯化，获得的异源性分子集群的总体，可编码细胞内所有的多肽。
RNA酶变性剂RNA酶：水解RNA。
•含有链内二硫键，使其能抵抗长时间的煮沸和温和变性剂。
另外，变性后可迅速折叠，目前，尚无RNA酶失活的简易办法。
•该酶不需要二价阳离子激活，难以被金属离子鳌和剂（EDTA）失活。
——只好避免污染！用强烈变性剂，如盐酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎，核蛋白由于其二级结构的破坏而从核酸上解离下来。
..RNA酶可耐受多种处理(例如煮沸)而不失活，但却会被4 mo1/L硫氰酸胍和β-疏基乙醇等还原剂所灭活。
因此可联用上述试剂，从组织中提取完整无损的RNA实验准备工作：器具和试剂的消毒..（1）尽可能使用无菌、一次性塑料制品，已标明RNase-Free且未开封过的塑料制品，不必再进行其他处理，对于国产塑料制品，应按下列方法进行处理：在一玻璃烧杯中注入含终浓度为0.1%DEPC的去离子水，将要处理的塑料制品浸泡其中12小时以上，弃DEPC水溶液，适温烘烤干燥已处理过的塑料制品，再经103.4kPa，121℃高压灭菌15分钟，70-80℃烘烤干燥即可使用..（2）所用的玻璃器皿，置于干燥烘箱中200℃烘烤2小时以上。
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绵羊
黄体
TRIzol
动物
绵羊痒螨兔亚种幼年
痒
螨
Trizol
动物
棉铃虫
虫体、中肠
Trizol
动物
棉铃虫、盲蝽
Trizol
动物
牡蛎
Trizol
动物
牡蛎
TRIzol
动物
牛
肌肉、皮脂、肠脂、乳 腺、血液
Trizol
动物
疟原虫
Trizol
动物
七鳃鳗
鳃、心
Trizol
动物
青蛤
Trizol
动物
人
癌细胞、间充质干细 胞、眼、肺动脉 壁、肺动脉壁
原核和真菌
灰霉菌
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原核和真菌
棘胞曲霉
Trizol
原核和真菌
假单胞菌
Trizol
原核和真菌
裂殖壶菌
Trizol
原核和真菌
农杆菌
菌体
Trizol
原核和真菌
桑黄
菌丝
Trizol
原核和真菌
桑黄菌丝
菌丝
TRIZol+注射器吹打
原核和真菌
嗜热链球菌
嗜热链球菌
Trizol
原核和真菌
嗜热真菌
菌丝
Trizol
植物
拟南芥
叶片、幼苗
Trizol
植物
苹果
叶片、果皮、果实
CTAB
植物
葡萄
叶片
CTAB+LiCl、Planteasy
植物
青花菜
蜜腺
CTAB+上清过柱（消化
DNA）
植物
榕树
雌花
CTAB+Licl过夜
植物
三七
根
药用植物提取法
植物
桑树
根、茎、叶、花芽
Trizol、天根试剂盒（花 芽）
植物
桑树
花芽
天根kit
植物
植物
茶树
叶片
TRIzol
植物
茶叶
芽头、叶片
Trizol
植物
柽柳
根
天根试剂盒
植物
赤拟谷盗
叶片
CTAB+LiCl
植物
赤霞珠
果皮
CTAB
植物
粗叶榕
雌花
CTAB
植物
大豆
根、叶、花、豆荚、荚 壳、种子
天根试剂盒
植物
丹参
根
CTAB
植物
灯盏花
叶片
天根试剂盒
植物
滇龙胆
叶片、根
天根试剂盒
植物
杜仲
叶片
CTAB
植物
短柄草
植物
生
叶片、地上茎
天根试剂盒
植物
石蒜
花
Planteasy+天根Dnase I
植物
柿子
叶片
CTAB+LiCl
植物
鼠尾藻
藻体
天根试剂盒
植物
水稻
整株幼苗、叶片、 幼穗
Trizol
植物
松萝凤梨
叶片
CTAB/Trizol
植物
桃
果肉
CTAB+Licl
植物
甜瓜
叶片
天根试剂盒
植物
豌豆蚜
触角
TRIzol
植物
微藻
悬浮细胞
沙冬青
花
CTAB
植物
沙棘
根、茎、叶、果实
Planteasy
植物
沙枣
根
天根试剂盒
植物
山核桃
果仁
CTAB+LiCl
植物
山核桃
种仁
Easyspin kit
植物
山核桃
胚乳
CTAB法+过柱（柱上消化
DNA）
植物
山金柑
组织、胚珠
天根试剂盒
植物
山银花
花蕾
Planteasy+RNA clean kit
植物
芍药
种子
CTAB
叶片
Planteasy+nteasy+天根DNase I
植物
番茄
花药、叶片
CTAB
植物
非洲菊
花瓣
CTAB
植物
甘薯
根、茎、叶、花
天根试剂盒
植物
高山栎
叶片
planteasy
植物
钩蝠蛾
Trizol
植物
狗牙根
根
TRIzol
植物
谷子
谷籽、种子
Trizol
植物
桂花
叶
TRIzol
原核和真菌
嗜热真菌
菌丝
Trizol
原核和真菌
嗜铁钩端螺旋菌
Trizol
原核和真菌
腾冲嗜热厌氧菌
Trizol
原核和真菌
突脐蠕孢菌
Trizol
原核和真菌
喜温硫杆菌
TRIzol
原核和真菌
蛹虫草
天根试剂盒
原核和真菌
叶片
天根试剂盒
植物
棉花
根
CTAB+LiCl
植物
水稻
穗
CTAB+LiCl
植物
玉米
根
天根试剂盒
植物
胡桃楸
叶片
天根试剂盒
植物
胡桃楸
果实
CTAB+LiCl
植物
麻核桃
叶片、果实
天根试剂盒
植物
白莲
胚芽胚根
天根试剂盒
植物
甜瓜
叶片
天根试剂盒
植物
草莓
叶片
天根
植物
水稻
茎叶
Trizol
植物
水稻
根
CTAB+LiCl
植物
葡萄
早银桂
叶
Trizol
植物
枣树
花、果实
异硫氰酸胍二步法 （花）、CTAB（果实）
植物
樟树
叶片
天根试剂盒
植物
栀子
叶
CTAB
植物
杉
根、叶
Planteasy
植物
苎麻
整株
Easyspin kit
植物
紫花地丁
混合组织碎片
天根试剂盒（HL）
植物
种子
种子
trizol
植物
核桃
叶子和芽
天根试剂盒
植物
鸭茅
trizol
植物
叶片
Trizol
植物
梨
花粉、 花柱、果肉、芽、 果皮
CTAB
植物
栎树
叶片
天根试剂盒
植物
莲花
胚芽、藕
天根试剂盒
植物
裂壶藻
菌体
天根kit
植物
柳穿鱼
叶片、雄蕊、雌蕊、花
粉
天根试剂盒
植物
柳树
枝条
Planteasy
植物
龙舌草
叶片
Trizol
植物
龙眼
果实、顶芽
天根试剂盒
植物
罗汉果
果肉
天根试剂盒
植物
马铃薯
叶片
TRIzol
植物
马蹄莲
植株
天根试剂盒
植物
马尾松
松针
天根试剂盒+RNA clean kit
植物
梅花
新芽
CTAB+Licl
植物
美人蕉
根
天根试剂盒
植物
棉花
叶片
天根kit/CTAB
植物
棉花
根、茎
CTAB
植物
木棉
根、茎、叶
天根kit+天根Rnase clean kit
植物
木薯
叶片
天根试剂盒
植物
苜蓿
叶子、芽
Planteasy
TRIzol
植物
乌桕
嫩叶
Trizol
植物
香蕉
果肉、果皮、叶片、根
天根试剂盒/异硫氰酸胍 二步法
植物
香蕉
嫩叶
planteasy
植物
香雪兰
花序
Planteasy+天根Dnase I处理
植物
小麦
茎秆、叶片、根、花蕊、 胚
天根试剂盒/Trizol
植物
小球藻
Trizol
Trizol
植物
小桐子
叶片、芽
天根试剂盒
果实
CTAB+LiCl
植物
梨
果实
CTAB+LiCl
植物
柑橘
叶片 花 果实
天根
植物
拟南芥
叶片
Trizol
植物
杜仲
果实/叶片/树皮
艾德莱试剂盒
植物
桦树
芽/叶片/形成层
天根
植物
陆地棉
叶片
天根
植物
鼠尾草
叶片
天根
植物
蓝靛果
果实
CTAB+LiCl
植物
油菜
种子/花蕊
TransZol Plant
植物
紫花苜蓿
叶子
planteasy
物种
提取成功物种
组织部位
提取方法
植物
白菜
胚
Planteasy
植物
白刺
根
天根试剂盒
植物
板栗
胚珠
CTAB+LiCl
植物
板栗
胚珠
CTAB+Licl