培养基模拟灌装指导原则
培养基模拟灌装试验
风险： 风险：结合了发生危害的可
能性和危害的严重性
评估风险的参数
可能性
严重性
风险评估
可能性 最终灭菌的 无菌制剂 非最终灭菌 的无菌制剂
可探测性
严重性
风险
较小
很差
严重
大
较大
很差
严重
很大
定义
使用培养基模拟药品进行无菌灌封，对无 菌工艺进行验证。又称为“工艺模拟试 验”. • 目的
– 证明生产线采用无菌工艺生产无菌产品的能力 – 对人员进行资格确认 – 符合GMP的要求
试验前的准备工作
• • • • • • • • • • 设备确认 通风系统（HVAC）、水系统的验证 设备的清洗和消毒CIP,SIP 灭菌工艺验证 湿热、干热灭菌工艺 除菌过滤的验证 空气过滤器的完好性检测 容器/胶塞密闭性测试 人员培训 洁净室环境达到设计要求
关键因素八:灌装的持续时间
• 通常情况，培养基灌装的时间应该足够长，能够 包括所有的必需的干扰、生产中断，包括正常的 无菌操作如开始前的安装、重量或体积的调整、 改变设备或手动维修等，还包括更衣、暂停、换 班等，持续时间还应能反映出潜在的人员疲劳。 • 对于非常大的批量或较长的生产过程，通常使用 一些空白样品（空的或者灌水）以维持模拟试验 的动态环境。这些技术可以应用于持续多个工作 日的工艺验证，用于验证可以批准的最长的生产 周期。
关键因素五: 容器体积(2/2)
• 在最初的验证中，可以二次选用最大的容器（配 合一次最慢、一次最快的灌装速度），第三次选 用最小的容器（配合最快的灌装速度）。 • 在每年2次的再验证中，用其它规格尺寸的容器轮 转试验。 • 不能使用琥珀色的容器，而应该使用透明的容器， 保证可以目视检测到微生物的生长。
培养基模拟灌装指导原则
培养基模拟灌装指导原则
培养基灌装是指在无菌生产工艺验证中，以培养基替代实际生产介质，模拟实际产品灌装过程，以检验无菌生产线能否达到无菌保证水平。
无菌生产工艺是制药领域难度最大的工艺之一。
由于许多药品无法最终灭菌, 它们在进行配制、灌装等暴露作业时就必须尽可能避免被微生物污染。
而影响产品是否无菌的因素相当多, 诸如生产区的设计及其设备布局、生产时的环境状况、所有与生产相关的设备及物料的污染状况、人员操作和卫生状况等, 每一个环节对最终产品的质量都举足轻重。
对于培养基模拟灌装，各国颁布了各种法规和指南供参考，特别是针对培养基过程模拟过程中的风险评估，干扰操作的设计，缺陷样品处理，培养结果观察人员资质确认，执行后的清洁确认等等监管方比较关注的问题，结合实际遇到的案例进行部分探讨。
培养基模拟灌装验证
一、目的建立培养基模拟灌装验证的管理规程，确保培养基模拟灌装验证符合生产工艺及GMP要求。
二、适用范围适用于制剂车间生产的产品需要培养基模拟灌装验证的整个工艺过程，包括从部件、材料的灭菌准备，一直到完成灌装和容器密封的整个过程。
三、责任者制剂车间、生产部、公用事业部、质量控制部、物流部、质量保证部及验证部遵照执行。
四、缩写与定义1. 最差条件（worst case）在SOP范围内（或超出），由工艺参数的上、下限和相关因素组成的一个或一系列条件。
与理想条件相比时，最差条件使产品或者生产工艺失败的几率为最大，这样的条件不一定导致产品或生产工艺的失败。
2. 干预（Intervention）操作人员在无菌操作区域内的操作活动。
3. 正常干预（Inherent Interventions）在无菌工艺灌装过程中发生的正常的在计划中的活动（例如，设备安装、装量调节、胶塞的再补给、灌装容器的再补给、环境监测、取样等等）。
4. 纠正干预（Corrective Interventions）在无菌工艺灌装过程中的纠正或调整的活动，其不属于计划性。
（例如，灌装容器的破损、倒瓶、掉塞、更换灌装针、灌装设备维修）五、健康、安全和环境无六、程序1. 验证小组职责：1.1 验证部1.1.1 负责编制培养基模拟灌装验证管理规程。
1.1.2 协助起草并审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。
1.1.3 验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。
1.1.4 对验证过程中偏差、变更处理过程追踪。
1.2 质量保证部1.2.1 审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。
1.2.2 验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，负责验证过程中取样。
1.2.3 负责培养基模拟灌装验证环境监控，参与模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。
1.2.4 参与验证过程中偏差、变更处理。
培养基模拟灌装方案设计
培养基模拟灌装方案设计一、概述二、步骤1.准备灌装设备和材料确定所需的培养基配方和容量后，准备灌装设备和材料。
主要包括：培养基配方、培养基粉末、试剂和培养基组分、反应试剂（如pH调节剂）、称量器具、容器（如烧杯、烧瓶等）、搅拌器、灌装管和灌装器等。
2.精确称量和混合培养基组分根据培养基配方，用准确的称量器具称量所需的培养基粉末和试剂，并混合均匀。
在混合过程中可以使用搅拌器进行充分搅拌，以确保培养基组分的均匀分布。
3.调节pH值如果培养基需要调节pH值，可以在混合培养基组分的过程中添加相应的pH调节剂。
添加后，需要使用pH计进行测量，并进行适当的调整，直到达到所需的pH值。
4.灌装培养基将混合好的培养基转移到灌装器中。
根据所需的体积，选择合适的容器，并将灌装器的尖端放入容器中。
然后，开始慢慢地灌装培养基，直到达到预定的体积或液面位置。
5.测量和调整灌装量灌装完成后，使用准确的容量单位进行体积测量，并与预定的体积进行比较。
如果有差异，需要进行适当的调整，以确保灌装出的培养基的体积与预期相符。
三、操作要点1.精确的称量和混合是保证培养基质量的关键。
在称量过程中要采用准确的称量器具，并仔细记录每个组分的质量。
混合过程中要充分搅拌，以确保培养基组分均匀分布。
2.pH调节是根据配方需要进行的操作。
选择合适的pH调节剂，并使用pH计进行准确测量和调整。
3.灌装过程中要注意操作的轻柔和缓慢。
避免产生气泡和剧烈的液体运动，以免影响培养基的质量。
4.灌装完成后，要使用准确的容量单位进行测量，以确保灌装的培养基体积准确无误。
四、注意事项1.在操作过程中要遵循无菌操作的原则，确保培养基的无菌性和纯净度。
2.灌装管和容器要提前进行消毒和清洁处理，以防止细菌和其他污染物的污染。
3.及时检查和更换灌装设备的零部件，确保其正常运行和灌装的准确性。
4.每次使用灌装器前，要进行漏气测试，确保其正常工作和密封性能。
5.彻底清理和消毒工作区域和设备，以避免污染和交叉感染。
培养基模拟灌装试验
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
Environment 原料 环境
Personnel 人员
工艺验证
无菌检验
作业环节与风险
作业环节 灭菌 房间设计 环境监测 消毒 更衣 物品转移 无菌技术（灌封） 无菌装配 验证难易度 人员依赖程度 易 N/A 中等 难 难 难 难 难 低 N/A 可变 高 很高 高 很高 很高 相关风险 低 中等 高 高 很高 高 很高 很高
非最终灭菌制剂 的风险大不大？
我们如何做到上述的无菌保障水平
无菌生产工艺
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
无菌生产工艺
产品、容器和密封件分别进行灭菌，然后进行 灌封 在极高洁净环境下进行灌装和密封 产品在最终容器中不再做进一步的灭菌处理 对各个组成部分的灭菌工艺需要进行严格验证 和监控 在灌封前和灌封过程中的操作会带来污染风险
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
– 生产环境 • 洁净区 • 人员 – 药液制备和过滤 – 药液除菌过滤前的微生物负荷 – 过滤器完整性测试和验证 – 生产设备和内包装材料的准备和灭菌 – 灌装过程 – 无菌工艺过程验证
L/O/G/O
培养基模拟 灌装试验
无菌的概念
什么是无菌? 什么是无菌? –理论上：无菌＝没有任何活的微生物 理论上：无菌＝ 理论上 –实际上：我们无法证明产品中没有活微 实际上： 实际上 生物存在
无菌的概念
“无菌”的实际定义: 无菌” 实际定义: • • 经生长和繁殖证明无生物 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 概率上的无菌
关键因素六: 灌装体积
培养基模拟灌装方案
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案审批目录1. 介绍…………………………………………………………………………………………… ..42.目的 (4)3.范围 (4)4.职责 (4)4.1.生产部职责.................................................................................... 错误!未定义书签。
4.2.质量保证部职责 (4)4.3 质量控制部职责 (4)4.4.设备部、物资管理部门各职责........................................................... 错误!未定义书签。
5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..45.1.法规 (5)5.2.指南 (5)6.参考文件 (6)7.生产工艺描述 (8)7.1.工艺流程图 (8)7.2.模拟灌装验证流程图 (9)7.2.1模拟灌装过程流程图 (10)7.3.生产工艺过程描 (10)7.3.1 产品生产规模 (10)7.3.2 生产制度 (10)7.3.3 生产前检查 (11)7.3.4 操作前检查 (11)7.3.5 生产操作 (11)7.3.6 轧盖 (11)7.4.基本原理 (11)7.5.工艺： (11)7.6.人员： (12)7.7.设备和器具： (12)7.8.运行频次和周期 (12)7.9.运行数量 (12)7.10.模拟物料和培养基 (13)7.11.密闭和开放系统 (13)7.12.风险评估 (14)7.13.工艺风险分析 (16)7.14.模拟项目 (18)7.14.1 模拟灌装过程 (18)7.14.2 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 (18)7.14.3 模拟最多进入灌装间的人数 (18)7.14.4 人员干预 (18)7.14.5 模拟人员活动 (19)7.14.6 模拟最差条件 (19)7.15.灌装体积 (20)7.16.模拟培养基灌装样品的培养和检查 (20)7.17.人员 (21)7.18.工艺模拟 (21)7.19.取样计划 (22)7.20.培养基灌装产品的处理 (23)7.21.培养基模拟灌装清洁确认 (23)7.21.1 设备的清洁结构、取样位置及测试项目描述 (23)7.21.2 样品编号原则 (24)8.确认/测试项目 (24)9.偏差处理 (26)10.变更控制 (26)11.附件清单 (26)12.支持性附录清单 (26)13.测试报告 (26)1. 介绍培养基模拟灌装试验是用与实际生产工艺相同的生产环境、条件和操作方法，向模制瓶内灌装经除菌过滤的液体培养基，然后将此模制瓶在适当的条件下培养，确认无菌工艺规程的可靠性，提供产品无菌性的可信限度达到可接受合格标准的证据，充分验证无菌生产工艺的可靠性，同时评价生产操作人员的行为规范性。
培养基模拟灌装探讨
培养基模拟灌装探讨培养基灌装是微生物学和生物技术生产中必不可少的操作。
在制备培养基时，需要进行分装或灌装操作，以便存储和使用。
如果培养基灌装存在问题，可能会对实验结果产生负面影响。
培养基灌装的目的培养基灌装的主要目的是制备标准化、无菌的培养基，以便进行微生物生长和研究。
培养基通常使用液态、固态和半固态三种形式，其中液态培养基最常用。
在灌装培养基时，需要注意以下几个方面：1.充分计量：灌装培养基需要精确计量，以便制备标准化的培养基。
一般来说，采用电子秤或者容量瓶等计量工具。
2.选择适当容器：液态培养基需要使用密封性好的容器，避免外部细菌的污染。
同时采用无菌技术进行操作，使培养基不被污染。
具体容器样式包括考培氏烧瓶和培养皿等。
3.选择恰当灌装技术：常见培养基灌装技术包括倒入法、注射法和离心灌装法等。
倒入法适用于液态和半固态的培养基；注射法适用于液态和固态培养基；离心灌装法用于高度浓缩的培养基。
常见的问题与解决方法在培养基灌装的过程中，可能会出现一些常见问题。
下面我们来一一介绍这些问题及解决方法。
1. 灌装容器不够无菌导致污染在灌装液态培养基时，如果容器本身不够无菌，或者在灌装过程中净化技术不够，可能会导致灌装出的培养基污染。
这种情况下，可以在洁净室或者至少在有洁净工作环境的实验室操作，并采用适当的净化技术，如火焰消毒法和紫外线杀菌法。
2. 灌装过程中出现泡沫在灌装培养基的过程中，可能会出现空气泡沫。
空气泡沫不仅浪费培养基，而且可能也会影响培养基中微生物的生长情况。
解决方案包括在灌装前预先加热培养基、使用离心法或者去泡沫的添加剂，以消除泡沫。
3. 培养基灌装不充分培养基灌装不充分会导致不同培养基质量差异和生物学数据的不准确性。
可以通过修改培养基灌装技术、适当使用压力和检查实验室设备，确保灌装完全。
4. 培养基灌装过程中出现水珠水珠会在培养基灌装过程中出现，可能是因为容器表面有油或其他物质残留引起的。
可以使用纯水洗刷容器，并且可使用适当的洁净剂消除残余物质。
培养基模拟灌装试验管理规
1 主题内容与适用范围本文件规定了培养基模拟灌装试验的程序和要求。
本文件适用于培养基模拟灌装试验的管理。
2 引用标准《药品生产质量管理规范》2010年修订3 术语培养基模拟灌装试验（以下简称试验）：英文名称MFT——Media Fill Test的英文缩写，是用一种模拟替代物质来模拟整个无菌生产过程，在所得的模拟产品中加注培养基，再对所得的全部培养基样品进行无菌培养。
培养基模拟试验是无菌生产工艺的验证手段，是任何非最终无菌药品生产必须进行的一项验证。
最差条件：导致工艺及产品失败的概率高于正常工艺的条件或状态，即标准操作规程范围以内工艺的上限和下限。
但这类最差条件不一定必然导致产品或工艺的不合格。
4 职责4.1 生产部门负责试验方案的制定、组织实施、试验报告的撰写、偏差的报告等。
4.2 质监中心负责试验培养基的促生长试验、灌装物的培养等。
4.3 质量保证部负责试验过程的监督管理。
5 管理规定5.1 试验目的：规范公司培养基模拟灌装试验，评估无菌原料药和无菌制剂的生产工艺，为所生产产品无菌性的可信限度达到可接受的合格标准提供证据，证明其具有生产无菌原料药和无菌制剂的能力并具有可重现性，符合现行GMP要求和相关技术指南要求。
5.2 试验要求5.2.1 试验频次培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。
培养基模拟灌装试验按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。
单一规格品种再验证周期为半年，正常生产的多规格品种每一规格再验证周期为一年。
每位无菌操作人员每年至少参加一次成功的培养基模拟灌装试验。
空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。
5.2.2 试验批量及容器的数量、装量培养基灌装批量及容器的数量、装量应当足以保证评价的有效性。
批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量。
无菌原料药容器数量不少于被模拟产品的实际包装量，模拟物装量尽量接近实际值，不超过容器体积的70%，培养基装量应能满足微生物的生长；粉针制剂灌装数量每种规格不少于5000支。
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培养基模拟灌装指导原则
培养基灌装是指在无菌生产工艺验证中，以培养基替代实际生产介质，模拟实际产品灌装过程，以检验无菌生产线能否达到无菌保证水平。
无菌生产工艺是制药领域难度最大的工艺之一。
由于许多药品无法最终灭菌, 它们在进行配制、灌装等暴露作业时就必须尽可能避免被微生物污染。
而影响产品是否无菌的因素相当多, 诸如生产区的设计及其设备布局、生产时的环境状况、所有与生产相关的设备及物料的污染状况、人员操作和卫生状况等, 每一个环节对最终产品的质量都举足轻重。
对于培养基模拟灌装，各国颁布了各种法规和指南供参考，特别是针对培养基过程模拟过程中的风险评估，干扰操作的设计，缺陷样品处理，培养结果观察人员资质确认，执行后的清洁确认等等监管方比较关注的问题，结合实际遇到的案例进行部分探讨。