仿制药生物等效性试验设计--崔一民-北京大学第一医院

研究目的
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在中国男性健康受试者中评价XXX制药有 限公司生产与YYY制药有限公司生产A片剂 的生物等效性。
试验设计
本研究为开放、单剂量、双周期随机交叉设计； 计划入组24例，均为男性； 受试者于试验当日清晨按试验设计口服试验制剂 或参比制剂。于1周后交叉服用另一制剂。试验 结束后进行随访； 每周期分别于给药前及给药后第0.5、1、1.5、2、 3、4、6、8、10、12、16、24小时采集静脉血测 定血浆中A的浓度，计算药代动力学参数，判定 两种制剂是否生物等效。
入选标准
年龄在18～40周岁之间健康男性, 且同一批入 组受试者年龄相差不超过10岁； 体重指数(BMI)在19～24之间, 体重不应低于 50Kg； 自愿参加本试验并签署书面知情同意书。
排除标准
受试者在首次服用研究药物前30天内患有严重疾病（研究者认为没有 临床显著意义除外）；或有胃肠肝肾疾病患者；或有其他影响吸收、 分布、代谢和排泄等因素者； 有药物过敏史者； 受试者在筛选试验前2年内有药物滥用史或酗酒史（定义饮用酒精的量： 每日饮用酒精的量约为40g）； 饮用过量茶、咖啡和/或含有咖啡因的饮料者（＞8杯/天）； 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)、艾滋 病病毒抗体(Anti-HIV)中有一项呈阳性者； 实验室检查异常且研究者认为有临床意义的受试者； 收缩压≤90mmHg的受试者；卧位5分钟和站立后立即测定的血压值：收 缩压之差＞20mmHg，舒张压之差＞10 mmHg的受试者；
生物等效性临床试验的设计
受试者入选标准： 男性健康受试者，18～40 周岁。 体重指数（体重(kg)/身高(m)2 ）在正常范 围（19～24）内。 试验前签署知情同意书。
生物等效性临床试验的设计
通过直接提问和体检，有任何显著的临床疾病者。 临床上有显著的变态反应史、特别是药物过敏史者。 经研究前全面体检和实验室检查发现有任何显著的临床疾病者。 正在服用或在服第一剂研究药物前3周中曾服用任何处方药或非处 方药（每天3g以内扑热息痛除外）者。 在此研究给第一剂的日期前4个月内接受过任何试验性药物者。 喝酒每周超过28单位酒精（1单位＝285ml啤酒或25ml烈酒或1 玻璃杯葡萄酒）者。 每天吸烟超过10支或相等量的烟草者。 有证据表明其为药物滥用者。 在研究前一个月献过血，或打算在研究期间或研究结束后一个月内 献血或血液成分者。 研究者认为受试者有任何原因可能不会完成本研究者。
用法用量
采用随机的服药顺序，受试者在第一研究周期早 晨空腹单次口服试验制剂或参比制剂，在第二研 究周期交叉服用参比制剂或试验制剂，剂量均为 5mg，两次服药间隔至少1周。
生物等效性评价指标
主要判定指标：Cmax 和 AUC0-24h； 参考指标：AUC0-∞ 和 Tmax
生物等效性临床试验的设计
如何确定给药剂量？ 给药剂量一般应与临床单次用药剂量一致，不 得超过临床推荐的单次最大剂量或已经证明的 安全剂量。 受试制剂和参比制剂一般应服用相等剂量。 需要使用不相等剂量时，应说明理由并提供所 用剂量范围内的线性药代动力学特征依据，结 果可以剂量校正方式计算生物利用度。
BE研究适用范围 研究适用范围
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改变国内已上市销售药品的剂型，但不 改变给药途径的口服制剂或其他有关制 剂（化学药）。 已有国家药品标准的制剂（化学药）。 改变口服药物制剂处方或工艺的补充申 请 其他
BE研究方法
• 通常意义的BE研究是指通过测量不同时间点的 生物样本（如血浆或尿液）中药物浓度，获得 药物浓度-时间曲线来反映药物从制剂中释放吸 收到体循环中的动态过程。并经过适当的计算 得到曲线下面积（AUC）、达峰浓度（Cmax）、 达峰时间（Tmax）等参数后，通过统计学比较 判断两制剂是否生物等效。
等效判断标准
出现Tmax不等效，Cmax等效，AUC等效或 Cmax不 等效，AUC等效时，怎么看？ 目前比较肯定AUC 对药物吸收程度的衡量作用， 而Cmax、Tmax 依赖取样时间的安排，用它们衡 量吸收速率有时是不够准确的，不适合用于具 有多峰现象的制剂及个体变异大的试验。故在 评价时，若出现某些不等效特殊情况，需具体 问题加以具体分析。
生物等效性临床试验的设计
如何确定清洗期 ？ 设定清洗期是为了消除两制剂的互相干扰，避免 上个周期内的处理影响到随后一周期的处理中。 清洗期一般不应短于7个消除半衰期。
生物等效性临床试验的设计
如何设计取样点？ 取样点的设计对试验结果的可靠性及药代动力 学参数计算的合理性，均有十分重要的意义。 一般应兼顾到吸收相、平衡相（峰浓度）和消 除相。服药前应先取空白血样。一般在吸收相 部分取2～3 个点，峰浓度附近至少需要3个点， 消除相取3～5 个点。 采样持续应到受试药原形或其活性代谢物3～5 个半衰期时，或至血药浓度为Cmax 的1／10～1 ／20，AUC0-t/AUC0-∞通常应当大于80%。
BE研究的临床试验报告 BE研究的临床试验报告
生物等效性研究临床报告内容至少应包括以下内容 （1）实验目的； （2）生物样本分析方法考察的数据，提供必要的图谱； （3）实验设计和操作方法，包括全部受试者的资料、样本例 数、参比制剂、给药剂量、服药方法和采样时间安排； （4）受试者各时间点的药物浓度、药代参数和药时曲线； （5）采用的统计分析方法以及详细统计过程和结果； （6）服药后的临床不良反应观察结果，受试者中途退出和脱 落记录及原因； （7）生物利用度或生物等效性结果分析以及讨论； （8）参考文献。
8天
B组服对照药物
生物等效性临床试验的设计
为什么要做血药浓度达到稳态时的生物等效性 比较？ 比较？ 观察制剂的控释或缓释特性是否一致。
生物等效性临床试验的设计
受试者的例数？ SFDA指导原则：18~24例 根据统计学的把握度进行计算 对某些变异性大的药物可能需要适当增加 例数
生物等效性临床试验的设计
单剂量给药交叉试验设计
给药 出院 给药 出院 随访ຫໍສະໝຸດ Baidu
筛查 研究日 -7天
入院
入院
-1天
1天
3天
14天 15天 17天
20天
A组服试验药物
第 一 周 B组服对照药物 期
清洗期
第 二 周 期
B组服试验药物
A组服对照药物
单剂量给药平行试验设计
给药 随访 出院
筛查 研究日
入院
PK
-7天
-1天
1天
A组服试验药物
仿制药生物等效性试验设计
崔一民 北京大学第一医院 E-mail: cuiymzy@126.com
生物等效性（ ） 生物等效性（BE）的概念
生物等效性试验是指用生物利用度研究的方法， 以药代动力学参数为指标，比较同一种药物的相同或 者不同剂型的制剂，在相同的试验条件下，其活性成 分吸收程度和速度有无统计学差异的人体试验。 生物等效性试验在药物研究开发的不同阶段，其 作用可能稍有差别，但究其根本，生物等效性试验的 目的都是通过测定血药浓度的方法，来比较不同的制 剂对药物吸收的影响，也即药物不同制剂之间的差异 ，以此来推测其临床治疗效果差异的可接受性，即不 同制剂之间的可替换性。
BE研究中常用的软件 BE研究中常用的软件
• WinNonLin • DAS • 研究者可根据具体情况选择使用，但所用软件 必须经确证并应在研究报告中注明所用软件。
等效判断标准
• 采用主要药代参数经对数转换后以多因素方差 分析（ANOVA）进行显著性检验，然后用双 向单侧t 检验和计算90％置信区间的统计分析 方法来评价和判断药物间的生物等效性。
等效判断标准
关于方差分析 • 方差检验是显著性检验，设定的无效假设是两 药无差异，检验方式为是与否。 • 在P<0.05 时认为两者差异有统计意义，但不一 定不等效； • 在P>0.05时认为两药差异无统计意义，但并不 能认为两者相等或相近。
等效判断标准
关于等效检验 • 双向单侧t 检验及（1~2α）%置信区间法是目 前生物等效检验的唯一标准。 • SFDA规定：一般经对数转换后的受试制剂的 AUC0→t 在参比制剂的80％～125％范围，受试 制剂的Cmax 在参比制剂的70％～143％范围， 判断两药生物等效。 • 如有必要时，应对Tmax 经非参数法检验，如无 差异，可以认定受试制剂与参比制剂生物等效。
生物等效性临床试验的设计
普通制剂 随机、交叉、单剂量、两周期试验设计 控、缓释制剂 随机、交叉、单剂量和多剂量、两周期试验设计
生物等效性临床试验的设计
• 交叉设计是目前应用最多最广的方法。 • 把受试对象随机分为两组，按一定顺序处理， 一组受试者先服用受试制剂，后服用参比制剂； 另一组受试者先服用参比制剂，后服用受试制 剂。两顺序间应有足够长的间隔时间，为清洗 期。
生物样本中药物浓度测定
• 建立生物样本中药物浓度定量分析方法是进 行生物等效性研究的关键之一。 • 开始入选受试者前，应建立可靠的和可重现 的药物浓度定量分析方法。
方法学建立和考察的内容
• • • • • • 特异性； 标准曲线和定量范围； 定量下限； 精密度与准确度； 样品稳定性； 提取回收率。
各国等效判断标准比较
国家/ 国家/地区 中国 加拿大 EMEA 日本 WHO 美国 南非 AUC标准 AUC标准 90%可信限 90%可信限 80~125% 80~125% 80~125% 80~125% 80~125% 80~125% 80~125% Cmax标准 Cmax标准 90%可信限 90%可信限 70~143% None （点估计） 75~133% 某些药物更宽 Cmax的可接受范围可 能比AUC宽 80~125% 75~133%
受试者排除标准（举例）： 受试者排除标准（举例）
生物等效性临床试验的设计
为什么选择男性受试者？ 为什么选择男性受试者？ 消除性别间的差异。 避免受女性经期及妊娠的影响。
药代动力学参数的计算
• 在生物等效性研究中，其主要药代参数Cmax 和 Tmax 均以实测值表示，AUC0→t 以梯形法计算。 • 一般用非房室数学模型分析方法来估算药代动 力学参数，为什么？ 用房室模型方法估算药代参数时，采用不同的 方法或软件其值可能有较大差异。
生物等效性临床试验的设计
为什么采用一般采用交叉设计？ 对每位受试者都连续接受两次或多次的处理， 相当于自身对照，可以将制剂因素对药物吸收 的影响与其他因素区分开来，减少了不同试验 周期和个体间差异对试验结果的影响。
生物等效性临床试验的设计
可能出现的其它设计方案 在进行两种以上剂型比较时，也可以进行多 周期试验设计。 在试验药物的半衰期过长时，可进行平行试 验设计。
排除标准（ 排除标准（续）
受试者在首次服用研究药物前2周曾经吸过烟或服用过含有烟碱 的产品（包括但不限定是香烟、烟斗、雪茄烟、咀嚼用烟草、烟 碱片、烟碱口香糖），或在首次服用研究药物前1周内曾经饮酒 者； 在过去4周内采集全血≥200 ml或过去12周内采集全血≥400 ml或过 去2周内采集成分血（采集血清成分或血小板成分）者； 3个月内用过已知对脏器有损害的药物者；或在给予试验药物前2 周内有用药史者；或目前正在使用药物者； 在试验开始前2个月内参加过其他试验者； 不能和研究者很好沟通者（语言障碍、智力发育不良或脑功能受 损者）； 在紧急情况下不能取得联系者； 由研究者判断为不适合参加本试验的受试者。
如果试验药物是前药怎么办？ 如果试验药物是前药怎么办？ 原则上以原药为基础进行等效性研究。 在原药代谢很快、药代动力学参数变异大导 致血液浓度测定困难或受试者数目过大时可以 主要活性代谢产物为基础进行等效性研究。
生物等效性临床试验的设计
如何确定参比药物？ 如何确定参比药物？ 原则上选择国内已经批准上市相同剂型药 物中的原创药。 在无法获得原创药时，可考虑选用上市主 导产品作为参比制剂。
主要参考文献
化学药物制剂人体生物利用度和生物 等效性研究技术指导原则 (二○○五年三月)
举例： 片剂 片剂的生物等效性研究 举例：A片剂的生物等效性研究
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