关于一起鼠伤寒沙门氏菌引起食物中毒的结案报告
一起鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒

【中图分类号】r595.7【文献标识码】a【文章编号】1005-2720(2010)10 - 115 - 02 【关键词】沙门氏菌;菌落;血清学;生化;效价2005年10月23日白山市松树镇大安村因食病死猪肉而引起29人食物中毒,经流行病学调查和病原学鉴定,证实为鼠伤寒沙门氏菌所致。
1 食物中毒情况2005年10月19日大安村退休工人岳某家一头猪病死,当即解体浸泡一天,21日煮熟,当天全家五口人食用,将剩下的肉盛在浸泡过生肉的盆里,第二天将剩下熟肉拿到车站居民区出售,买到熟肉的居民未经加热直接食用,进食熟猪肉者29人,进餐3小时后首次有人发病,30小时内29人全部发病,发病率100%,未食病死猪肉者末发现类似病人。
2 临床症状(1)发病潜伏期为3~30小时,高峰10~14小时。
(2)发病主要临床症状为高烧(多在38~40℃)头痛,恶心、呕吐、腹泻、水样便,多者13次,一般8~10次,无里急后重及脓血便。
3 细菌学检验3.1 增菌及分离培养,取上述样品分别接种在sf、mm增菌液置36℃和42℃24小时增菌培养,增菌后分别接种ss、emb平板经36℃24小时后发现有较典型的菌落。
见表1。
表1菌落生长特点培养基种类菌落生长特点ss 表面光滑、湿润,无色透明整齐,中等大小emb 无色透明,菌落较小,表面光滑,边缘整齐。
3.2 血清学鉴定将可疑菌落分别接种双糖和革兰氏染色,双糖经24小时培养后,取菌苔进行沙门氏菌血清学鉴定其结果,157号、158号菌株与沙门氏oa-f多价血清发生强凝集,盐水对照阴性与o0h凝集阳性,革兰氏染色为革兰氏阴性杆菌,未检出其它致病菌。
3.3 生化鉴定将157、158号菌分别进行生化鉴定试验,结果见表2.表2 157、158号菌生化鉴定试验结果生化种类菌号157158动力 ++葡萄糖 (+)(+)麦芽糖 --甘露醇 (+)(+)硫化氢 (+)(+)尿素 --甲基红 ++yip试验--枸酸盐 ++卫矛醇 ++赖氨酸脱羟 ++阿拉伯糖 ++木糖 ++鼠李糖 ++肌醇 ++3.4 患者血清凝集试验用分离菌株制成菌液与患者双份血清(第一次发病7天,第二次发病第15天)做成试管定量凝集试验第一次。
一起由鼠伤寒沙门氏引起食物中毒的实验室检测

一起由鼠伤寒沙门氏引起食物中毒的实验室检测孙延芳;张云仙【摘要】Objective To determine the poisoning causes by detecting and analyzing the pathogenic bacteria of food poison-ing events. Methods The suspected pathogenic bacteria were selected according to the epidemiology survey and clinical manifestations, and the collected samples were given etiological separation and identification according toGB4789.4-2010, GB4789/T.5-2012,GB4789.7-2013,GB4789.30-2010,GB/T4789 6-2003. Results The salmonella typhimurium was detected from 2 pieces of stool samples and 1 piece of food. Conclusion The reason of this food poisoning is that salmonella typhimurium contaminates food.%目的:对食物中毒事件病原菌进行检测和分析,确定中毒原因。
方法根据流行病学调查和临床表现,选择疑似病原菌,依据 GB4789.4-2010,GB4789/T.5-2012,GB4789.7-2013,GB4789.30-2010,GB/T4789.6-2003对采集的样品进行病原学分离和鉴定。
结果从2份粪便标本和1份食物中检出鼠伤寒沙门氏菌。
结论该次食物中毒为鼠伤寒沙门氏菌污染食物引起。
一起由鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒调查分析

0 引言2017年7月2日14时,承德市疾病预防控制中心接到某县疾控中心报告:该县某乡居民家中集体聚餐后发生腹泻,病程3天。
经现场流行病学调查,采集病人排泄标本、可疑食物和饮用水进行实验室检验,并结合发病患者的综合临床症状,认定这是一起由沙门氏菌污染事件造成群体性感染性腹泻,现将事件调查结果报告如下。
1 材料与方法1.1 病例定义按照感染性腹泻病例、食物中毒的诊断标准进行, 主要为腹泻每日≥3 次, 粪便性状不正常, 同时可伴有发热、呕吐、腹痛、食欲不振、恶心、全身不适等症状体征者, 均可列入此次疫情病例的调查范围。
1.2 现场流行病学调查按照现场流行病学调查方法和食品安全事故流行病学调查技术指南的要求, 调查组明确病例定义, 调查了该居民家中饮水和用餐, 同时考虑病例的发病时间、发病人数和临床检验资料、暴露的诱发危险因素和家庭周边有无相关疫情等。
1.3 实验室检测共采集呕吐物5份、排泄物3份、肛拭子5份、饮用水2份、剩余食物7份和食品汤料1份进行检测。
1.3.1 致病菌检测按照《霍乱防治手册(第六版)》、食品安全国家标准《GB4789-2010》等方法检测霍乱弧菌、志贺氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。
1.3.2 核酸检测采用荧光PCR法对可疑标本进行沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌的核酸检测。
试剂盒由上海之江生物技术有限公司提供。
1.3.3 水质公共卫生指标检测参照生活饮用水《GB5749-2006》的检测方法检测菌落总数、大肠菌群和大肠埃希氏菌。
2 结果2.1 基本情况该住户家中举行悼念其父白事活动,事毕邀请亲友在家中共进午餐,就餐人数19人。
2.2 临床症状共发病19 例,临床表现主要为黄绿色稀便或水样便腹泻(100%)、腹痛(100%)、恶心(63.2%)、呕吐(84.2%)、发热(100%),潜伏期12-24h,病程四到五天,患者大部分病情较重,给予抗生素、补液等治疗后预后良好。
1起鼠伤寒沙门菌食物中毒的调查分析

12 现场 卫 生 学 调 查 资料 .
员 均为 医务工作 者 , 自行 服药 治疗 , 均 没及 时到 医院就诊 而 留下
治 疗 证 据 ; 时 因 发 病 者 分 属 不 同 科 室 , 班 时 间有 差 别 , 期 同 上 初 也 没 意 识 到 是 因 食 物 而 引 发 , 成 报 告 时 间 太 晚 。 ) 餐 餐 次 复 造 2就 杂 。 就 餐 人 员 均 为 同 一 个 医 院 的 工 作 人 员 , 分 人 员 在 聚 餐 之 因 部
该餐厅从业人员 中有 2 O多人无健康检查合格证 明而上 岗; 在
凉菜间 , 生食 品与熟食 品混放 , 从业人 员个 人卫 生差 ; 在资料方面 , 食品原料采购索证资料 不齐。 5月 1 9日晚 , 该餐 厅共接待 1 0余起 散餐 , 10余人 ; 共 4 该起 事件 中 , 集体聚餐所点 1 个 菜品 、 7 饮料 中, 有6 个菜 品无其他散餐点用 , 均为热菜 。
难 以确 定 。 ) 4 中毒 菜品 无法确 定 。 该起 事件 中 , 体用餐 所点 l 集 7
种莱 品 、 料 中 , 6种菜 品无 其他 散餐 点用 且均 为热 菜 , 因 饮 有 但 未采 集到 剩余食 物 , 中毒菜 品无 法确 定 。 ) 对 5 可排 除 院内感 染 。
虽然 鼠伤寒沙 门菌也是一种 院 内感染致病 菌 , 但就餐者属 口腔类 专 科 医院 的医务 工作 者 , 分属 不 同科 室 , 病者 均为成 年人 , 且 发 预后 良好 , 传染病 的流 行余波 , 无 因此可 排除 院内感染 引发该事 件 的可能性 。 从 以上分析可 以看 出, 在调查食物中毒事件的过程 中, 缜密调 查分析 、 全面取证 留样对事件的定性判断至关重要 , 而发病者 的及 时报告也 相当重要 。 因此 , 调查 人员应 以高度 的责任感 , 妥善处理 好每一起食物 中毒事件 , 障人 民群众饮食安全。 保
一起由沙门氏菌引起的食物中毒情况报告

一起由沙门氏菌引起的食物中毒情况报告作者:苏芸来源:《中国社区医师》2018年第17期摘要食物中毒是人们在生活中较常遇见的一种意外事故,对人们的健康和生活产生严重的影响。
食物中毒可由多种因素引起,多种致病菌在其中发挥了重要作用。
本文介绍一起由沙门氏菌引起的食物中毒情况报告,为临床提供探讨。
关键词食物中毒;沙门氏茵;情况报告;食品安全民以食为天,食品安全关系到人民的生命财产安全。
我国人口基数大,消耗食物量十分惊人,但因食品安全监管制度不健全、硬软件条件差,食品卫生安全管理水平仍然差强人意,食品安全事件频发,食源性疾病严重威胁居民的生命健康[1]。
我国食源性疾病监测网报告显示,病原微生物是食源性疾病主要病因,交叉污染非常常见,沙门氏菌成为食物中毒中常见的病原微生物[2]。
2017年10月19日8:15,某站点接到一起某某医院疾控科电话报告称,该医院接诊了4例聚集性“急性胃肠炎”病例。
站点赶赴现场进行调查、采样、检验,确认为沙门氏菌引起的食物中毒,现将情况报告如下。
基本情况2017年10月18日0:30某学校陆续出现发热、恶心、腹痛、腹泻等症状的病例7例,于18日9:00-19日20:00陆续白行到某医院就诊。
其中门诊病例2例,住院病例5例;男5例,女2例;年龄16~ 18岁;潜伏期最短5~23 h,平均14 h。
经抗菌、补液或口服药物治疗后已全部康复出院。
食品卫生学调查经调查,7例患者日常一日三餐均在该校食堂就餐,用餐时间为早餐7:00,午餐12:00,晚餐18:30,无法详细提供10月15、16、17日(早、中)各餐次食品,10月17日晚餐为酸粉。
7例患者10月17日晚餐均在A日用品店食用酸粉,10月17日患者班内其他同学不在A日用品店食用酸粉者,均未发病。
10月17日A日用品店的酸粉为当天在学校外B丰色酸粉吧购买当天制作好的酸粉50份。
常温下存放在快餐盒内,出卖前未重新加热烧煮。
A日用品店的酸粉均卖完,B丰色酸粉吧当天晚餐食用的酸粉也已卖完,仅剩酸粉辅料牛肉、鱿鱼丝、鱼饼、鱼仔,餐具与加工工具都已清洗晾干。
一起由鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒

一起由鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒2007年6月30日,我市郊区某饭店发生一起食物中毒,后经流行病学调查、实验室诊断确认本次食物中毒系鼠伤寒沙门氏菌污染烧鸡所致。
现报告如下。
1 流行病学调查2007年6月30日,某饭店婚宴就餐人数267人,餐后99人发病,79人住院。
无年龄、性别差异。
患者潜伏期最短2 h,最长72 h。
多数患者初期恶心、头痛、头晕、发冷、全身无力,继而呕吐,剧烈腹痛。
腹泻一般6~10次以上,为黄绿色水样便。
体温38.5℃~41℃,多数经3~5 d对症治疗全愈。
2 检样剩余食品、呕吐物、便。
3 实验方法3.1 镜检将上述样品直接进行革兰氏染色及镜检,镜下可见革兰阴性杆菌及其他杂菌。
3.2 病原菌的分离鉴定按食品卫生微生物学检验[1]进行。
3.2.1 增菌及分离分别将上述检样进行前增菌,37℃培养24 h后再接种于各自的分离平板。
经培养后在血平板上未见溶血菌落,排除金黄色葡萄球菌的可能;在亚硫酸铋琼脂平板上有可疑菌落生长,菌落为深棕褐色,周围有黑色圈,对光观察有金属光泽,并为平板上的优势菌,镜检为G-阴性杆菌。
3.2.2 生化试验挑取可疑菌落接种TSI琼脂,培养后取斜面阴性、底层产酸、硫化氢阳性菌落,接种于21种革兰阴性杆菌新编码系列生化培养基,37℃24 h 培养,试验结果:ONPG-,精氨酸+,赖氨酸+,鸟氨酸+,柠檬酸盐+,硫化氢+,尿素-,IPA-,吲哚-,V-P-,明胶-,葡萄糖+,甘露醇+,肌醇+,山梨醇+,鼠李糖+,蔗糖-,密二糖+,苦杏仁甙-,阿拉伯糖-,氧化酶-。
编码值6704750,为沙门氏菌。
3.2.3 血清学鉴定用卫生部兰州生物制品研究所生产沙门氏菌属30种诊断血清进行沙门氏菌血清分型,其中O抗原A-F多价凝集,B群O抗原4凝集,H抗原i,2凝集,盐水对照不凝集,鉴定为鼠伤寒沙门氏菌。
4 讨论食物中毒中细菌性食物中毒居首位,而细菌性食物中毒又以沙门氏菌引起的中毒居多。
一起鼠伤寒沙门菌引起食物中毒流行病学调查
一起鼠伤寒沙门菌引起食物中毒流行病学调查调查某中学28名学生发生以腹痛、腹泻、恶心、呕吐为主要症状的胃肠炎发病原因。
方法采用流行病学调查方法对病例的发病时间和食物进食史进行分析,对患者肛拭子、食堂留样食品及餐具涂抹样品进行病原学检测。
结果所有发病学生均有校食堂共同进食史,罹患率11.11%(28/252)。
患者肛拭子沙门菌阳性检测率30%(3/10)。
结论这是一起由鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒。
[关键词] 鼠伤寒沙门菌;食物中毒;流行病学2007-07-07T8:00,四川省阆中市柏垭中心卫生院报告:从7月6日18:00至报告当时柏垭中学10多名学生因恶心、呕吐、腹痛和腹泻入柏垭中心卫生院治疗,根据医院接诊医生及防保医生初步调查,所有患病学生皆反应2007-07-06午餐所吃肉类有异味。
为核实疫情,了解是哪种疾病暴发以及引起暴发的原因,阆中市卫生局专业立即组织疾控、执法、检验、临床等专业人员[1]赶赴现场进行流行病学调查和微生物检测,现将调查情况报告如下。
1 对象与方法病例定义和选择:2007-07-06/09,具备以下1条症状的柏垭中学学生,判定为病例:①腹泻3次/d以上且有大便性状改变;②发热37.5.℃以上,并伴有腹痛、腹泻症状;③因腹痛/腹泻前往就诊者。
[2]对照的选择:按1:1.5随机抽取该校共同就餐而未出现上述任何1条症状的学生。
方法:对病例、对照进行问卷调查,内容涉及基本情况和7月6日午餐就餐情况,用EPI数据库对暴露因素进行分析。
同时对食堂从业人员就食品加工过程和就餐环境进行现场卫生学调查。
采集病例呕吐物及肛拭子,从业人员肛拭子,食堂加工、贮存炊具表面涂抹样品及留样食品。
依据GB/T4789.4.5.6.7.10.11.14-2003[3]标准及方法做肠道致病菌及食物中毒致病菌检测。
2 结果2.1 发病情况该校暑假共有高三8个班计355名学生在校补课,其中住校生284人,走读生71人。
鼠伤寒沙门氏菌集体食物中毒临床报告
l 材 料 和 方 法
( 永平 县 疾病预 防控 制 中心 , 南永 平 云 62 0 ) 7 6 0
[ 要 ]目的 : 一起 集体食 物 中毒进 行检 验分 析报 告 。方法 : 5 食物 中毒 者的食 用食 物 、 摘 对 对5 例 患者及 厨 师的 分泌 物进行 病 原 学分析 。 过 细 菌培 养 , 清学检 查鉴 定 细菌类 型 、 通 血 结果 : 中毒 者 的食 用食物 , 分泌 物均培 养 出鼠伤寒 沙 门氏 菌。结论 : 物 污染 经消化 道传播 仍 是 沙 门氏茵属 感 染的主要 途 径 , 食 注意食 品卫 生是 防止食
t e o o e t n y h p io e a 1 f h s -P in o l p ion d n t e h f d a e b t e os n d u( t e ‘ lo s f lJ os e a d h co k Hl ten ik o r P o s ld h p< up h tpe f a t i by ・ t e y n b cera
【 ywo d S l o e ab c r m; o o o ig c e ku Ke r s a n l a t i f d p i nn ; h e p J m l eu o s
20 年8 2 日,永 平 县 龙街 镇 普 渡村 阿利 碑 06 月 1
社 邵某 家办 生 日宴席 , 生 7 个 就 餐 者 中5 人 相 继 发 6 5
c l v t g b ce i a d e a n n ) )d S l l . s l:T l a e o u h e t o h l ( u h amo el a tru u t ai a tra n x mi i g I o e Ul Re u t i e t n f d a d t e s ( e iv b t e1 p t e S l n l b ce im i n h 。 1 e o r ol s a
一起丧宴引致鼠伤寒沙门氏菌食物中毒的调查报告
(1例 )发 热 (3例 ) 头 昏 (9例 ) Байду номын сангаас 痛 (0例 ) 乏 力 (2 8 , 8 、 7 、 8 、 6
例 )嗜 睡 (O例 )恶 心 (8 )呕 吐 (6例 )腹 痛 (6例 )腹 、 2 、 3例 、 4 、 8 、 泻 (6例 、~ 5次 / ) 症 状 。 有病 例 经 抗 生 素 治 疗 、 液 、 8 31 日 等 所 补 对症处理而痊愈 , 死亡。 无
20 0 6年 7月 6曰晚 泸 县 某 镇 一 村 民 为 其 病 故 父 亲 操 办
表 1 进 食 凉拌 菜与 未 进 食 者发 病 统 计
丧 宴 , 生 一 起 食 物 中 毒 , 流 行 病 学 调 查 、 床 表现 、 原 发 据 临 病
学 鉴 定 , 实 本 起 中毒 系 一 起 因 丧 宴 集 中 感 染 沙 门 氏 菌 ; 致 证 1 的 食物 中毒 , 报告 于 后 。 现 1 流 行 病 学 调 查 11 中毒 经 过 .
王 兵
( 县疾 病 预 防控 制 中心 , 川 泸 州 6 6 0 ) 泸 四 4 10
摘
要 目的 : 解 泸 县 某 镇 一村 民 为病 故 父 亲 操办 丧 宴 发 生 食物 中毒 的原 因 , 预 防 控 制 工作 提 供 科 学 依 据 。方 法 : 用 了 为 采
流 行 病 学 调 查和 实 验 室 按 国家 标 准 《 品 卫 生检 验 微 生物 部份 》 食 的检 测 方 法 。结 果 : 本起 丧 宴 进 餐 9 8人 , 物 中毒 8 人 , 食 6 罹患 率
为 8 . 无死亡。 77 %, 潜伏期最短 6时 3 , 0分 最长 3 , 9时 多分布在 1 ̄ 6时内 , 42 临床表现主要为恶寒 、 发热、 头昏、 头痛、 乏力、 嗜睡、
一起由鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒调查分析
一起由鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒调查分析摘要:目的:查明2015年我县发生一起因喜宴引发食源性疾病爆发的原因,总结经验教训,为预防控制提供依据。
方法:对就餐者和病例进行流行学个案调查、采集剩余食物、餐具、病人和食品从业人员肛拭进行实验检测,对现场调查资料应用描述性流行病学和卫生统计学方法进行分析。
结果:本起食物中毒引起发病48例,罹患率7.22%,从现场采集的样品中,检出6株鼠伤寒沙门氏菌。
结论:此次食源性疾病是由鼠伤寒沙门氏菌引起。
2015年5月4日,我县文圩镇屯治村多名村民因5月4日参加该村赖屋组赖XX喜宴后出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等消化道症状。
接报后,我中心对现场进行了调查处理和采样检测,根据流行病学调查、卫生学调查,结合临床表现及实验室检测结果,确认这是一起由鼠伤寒沙门氏菌引起食物中毒。
1、材料与方法1.1材料1.1.1实验菌株我中心2015年购自广东环凯的标准菌株鼠伤寒沙门氏菌ATCCA14028。
1.1.2培养基:亚硒酸盐煌绿增菌液(LSBG)、木糖赖氨酸胆酸盐琼脂平板(XLD),沙门氏菌显色平板(CAS),H相诱导软琼脂平板,沙门氏菌生化反应鉴定套装。
以上增菌液及平板和生化鉴定管均避光10°以下保存;在有效期内使用。
1.1.3试剂和仪器:血清有沙门氏菌分型诊断血清60种(宁波天润生物药业有限公司),数显电热培养箱2台。
1.2方法1.2.1爆发病例调查按照WS/T?13-1996《沙门氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》中的定义和流行病学调查程序进行。
1.2.26株爆发菌株由我中心实验室使用宁波天润的沙门氏菌诊断血清作鉴定。
玻片凝集属于直接抗原抗体反应的定性试验。
根据抗原抗体产生凝集颗粒的程度进行分级。
十:菌体抗原凝集颗粒细,背景浑浊不清;++:菌体抗原凝集颗粒粗实,背景浑浊;+++:反应过程快,菌体抗原凝集颗粒细而均匀,背景较清;井:反应过程快,菌体抗原凝集颗粒粗实,背景清亮。
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鼠伤寒沙门氏菌引起的一起食物中毒探讨
俞保社庐阳区疾病预防控制中心
沙门氏菌是一大群寄生于人类和动物肠道,其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性菌。
其种类繁多,少数能使人致病,其他可使动物致病,偶尔可传染给人。
主要引起人类伤寒、副伤寒以及食品中毒或败血病。
在世界各地的食物中毒中,沙门氏菌食品中毒常占首位或者第二位。
沙门氏菌菌型繁多,已确认的沙门氏菌有2 500 个以上血型。
在常规检测中,血清学作为诊断依据,但经常发生生化符合而血清不凝集的现象。
2012年5月25日市一院急诊科收治4名疑似因吃卤菜引起的食物中毒患者,标本检测出现此现象,具体处置如下。
【材料】:
基本情况:发病患者晚上就餐食物为某板鸭店购买的板鸭及家中自备的部分菜。
首发病例4小时后出现腹痛、腹泻、发热等不适症状,其余三人陆续出现发类似症状, 4人至合肥市某院急诊科就诊。
经流行病学调查:7人于在家就餐,餐后4小时左右陆续发病。
最早发病5月24日晚11:30左右(餐后4小时,最先发病的蒋志容据推断应该个体差异的问题对被污染的食物较为敏感,较早地出现了症状。
),最迟发病5月25日早晨8时左右(餐后约11时)。
发病统计时长约11小时。
样品采集:采集蒋某大便标本1份,胡某大便标本和肛拭子各1份,患者家中剩余板鸭1份、水果刀涂抹样1份,板鸭店砧板、刀具、容器、从业人员手的涂抹样及板鸭各1份共10份样品进行检测。
【实验室检验】:
前增菌:除便样和肛拭子外,样品称取25g放入盛有25mlBPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打90S。
样品为液态,直接进行培养,于36℃±1℃培养18h。
增菌:轻轻摇动培养过的样品混合物,移取5ml,转种于10mlTTB内;于42℃±1℃,18h~24h培养。
同时,另取5ml,转种于10mlSC内,于36℃±1℃,18h~24h培养。
分离:便样和肛拭子直接分离培养,取经TTB增菌液1环,划线接种
于一个BS琼脂平板和一个HE琼脂平板。
同时,另取SC增菌液1环,划线接种于一个BS琼脂平板和一个HE琼脂平板。
于36℃±1℃分别培养18h(HE琼脂平板)或48h(BS琼脂平板),观察各个平板上生长的菌落。
菌落特征:BS平板:可见黑色有金色光泽、棕褐色或灰色菌落,菌落周围培养基呈黑色或棕色,周围培养基不变;HE平板:见蓝绿色或蓝色菌落,多数菌落中心黑色或几乎全黑色;
生化试验
1. 接种生化培养基
自选择性琼脂平板上,分别挑取两个以上典型或可以菌落,接种到三糖铁琼脂,接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和对照管,并加入已灭菌液体石蜡3-4滴覆盖培养基表面。
于36℃±1℃培养18h~24h,必要时可延长至48h。
同时,直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基、甘露醇和山梨醇试验。
同时转种HE及半固体。
所有接种样于36℃±1℃分别培养18h~24h,必要时可延长至48h,按表3判定结果。
将已挑菌落的平板储存于2℃~5℃或温室至少保留24h,以备必要时复查。
2 生化结果观察与判断
2.1 在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内,沙门氏菌的反应结果见表2。
表2 可疑标本在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果三糖铁琼脂
赖氨酸脱羧酶试验培养基初步判断
斜面底层产气硫化氢
-++(-)+(-)+可疑沙门氏菌属注:+阳性, -阴性;+(-)多数阳性,少数阴性;+/-阳性或阴性。
表2说明,在三糖铁琼脂内斜面产酸,底层产酸,同时赖氨酸脱羧酶试验阴性的菌株可以排除,其他的反应结果均有沙门氏菌属的可能,同时也均有不是沙门氏菌属的可能。
2.2通过TSI反应中的H2S、靛基质试验、尿素琼脂(pH7.2)、KCN实验结果,
查表3将可疑反应分为A1、A2、A3。
2.3
表3 沙门氏菌属生化反应初步鉴定表
反应序号硫化氢
(H2S)靛基质pH7.2尿素
氰化钾
(KCN)
赖氨酸脱羧酶
A1 +---+
A2 ++--+
A3 ----+/-注:+阳性, -阴性;+/-阳性或阴性。
反应序号A1:典型反应判定为沙门氏菌属。
如尿素、氰化钾和赖氨酸脱羧酶3项中有1项异常,按表4可判定为沙门氏菌。
如有2项异常为非沙门氏菌。
表4 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表
pH7.2尿素氰化钾(KCN)赖氨酸脱羧酶判定结果
-
--甲型副伤寒沙门氏菌(要求血清学
鉴定结果)
-++沙门氏菌Ⅳ和Ⅴ(要求符合本群生
化特性)
+-+沙门氏菌个别变体(要求血清学鉴
定结果)
注:+阳性, -阴性。
反映序号A2:做甘露醇和山梨醇试验,沙门氏菌靛基质阳性变体两项试验结果均为阳性,但需要结合血清学鉴定结果进行判定。
反应序号 A3:做ONPG,ONPG阴性为沙门氏菌,同时赖氨酸脱羧酶阳性,甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。
ONPG试验结果为深黄色是阳性,淡黄色为阴性。
必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴别。
表5 沙门氏菌属各生化群的鉴别
项目ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅥ
山梨醇+++++-ONPG --+-+-
氰化钾---++-
(KCN)
卫矛醇++--+-
水杨苷---+--
丙二酸盐-++---
注:+阳性, -阴性。
如上述,本次标本检出沙门氏菌,血清学分型:在标本中检出2株可疑菌,血清凝集为:A-F多价,O4,H不凝集。
将标本转种营养琼脂斜面,36℃±1℃培养18h~24h后,重新进行血清凝集,Hi1,2凝集。
盐水对照不凝集。
【结果】
从上述反应表中,结合菌落特征,该菌株为沙门氏菌;经血清学凝集,为鼠伤寒沙门氏菌,血清型为O1,4,5,12 Hi1,2
【结论】
根据现场流行病学个案调查、患者发病的症状、实验室检查结果(从板鸭剩余物和患者蒋治容的大便样本中检测出鼠伤寒沙门氏菌)等情况来分析,此次事件结果判定为一起“鼠伤寒沙门氏菌引起的食物中毒”。
沙门氏菌血清学分型作为判断标本同源性的重要依据,当出现A-F多价不凝集时,应该判断是否有Vi存在(可使用营养琼脂),此时必须去除Vi抗原的影响。
具体方法是将待检菌做成浓菌液,放入100℃沸水中煮沸15-60分钟,目的是破坏Vi抗原,然后再挑取菌液做O多价血清;如果还是不凝集,才能判定为阴性。
当O多价凝集而H不凝集时,我们可以采用转钟营养琼脂斜面而后进行凝集,一般转钟1-2次基本上就可以得出结论。
附:检测报告、原始记录等。