交叉配血试验标准化操作规程盐水法
交叉配血步骤
盐水介质配血法：
1、取洁净小试管两支，分别注明主侧、次侧。
2、主侧管分别加受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴。
次侧管加供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴。
混匀，3400转/min离心15秒。
轻轻摇动试管，观察结果。
凝聚胺配血法
1、取洁净小试管两支，分别注明主侧、次侧。
主侧管：病人血清2滴+献血者3%~5%红细胞悬液1滴
次侧管：病人3%~5%红细胞悬液1滴+献血者血清2滴
2、各加入LIM0.65ml，混匀后再加入Polybrene溶液2滴，并混合均匀，3400转/min离心15秒，弃上清，轻轻摇动试管观察是否凝集，如无凝集必须重做，最后加入Resuspending2滴，轻轻摇动试管混合并观察结果。
3、如果凝集散开，配血结果相合；如果凝集不散开，配血结果不相合。
交叉配血试验操作规程
交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有：试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白（抗人IgG）、标注笔等。
2.确保实验室实验台面整洁干净，并消毒工作区。
3.检查试剂有效期，避免使用过期试剂。
4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。
二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中，用离心机离心10分钟，以获得澄清的血浆。
2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置，每个孔位加1mL。
3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟，以充分吸附不特异抗体。
4.加入2mL盐水，搅拌均匀，离心5分钟，去除清液。
5.加入4mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。
6.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。
7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。
8.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。
9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。
10.重复步骤9，使红细胞悬浮，在离心后去除清液。
三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况，判断是否存在凝集现象。
2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。
四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜，保证操作者和实验样品的安全。
2.在操作前检查仪器和试剂的完好性，并遵循试剂的保存和使用说明。
3.严禁口饮、抽烟和进食，确保操作环境清洁。
4.实验后及时清洗仪器和工作区域，妥善处理废弃物。
5.确保实验室通风良好，防止有害气体和防护物质的浓度超标。
6.在实验操作过程中，严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。
以上是交叉配血试验的操作规程，包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。
按照规程进行操作，可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。
交叉配血试验标准操作规程
交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。
4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。
4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。
4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。
4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。
4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。
交叉配血标准操作规程
(二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵
育器（型号：DG THERM）、微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻
璃试管、生理盐水等
五、标本要求：
(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml,
在
3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。
待用。 (五)交叉配血： 主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或
血浆25uБайду номын сангаас ； 次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆
25ul。 (六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，
取出观察结果。 七、结果观察： (一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤：
(一)交叉配血前，先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机
离心9分钟左右，取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧，
撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支，分别配制患者和献血者红细胞悬液（浓度为1%）
之内
2+
80%（大部分）的红血球沉在微管的上端2/3
之内
3+
80%（大部分）的红血球沉在微管的上端1/3
之内
4+ DP（双 群）
H（溶 血）
凝集的细胞处于微管的顶部 红血球同时位于微管上部和微管底部
微管中液体出现透明红色
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程（抗人球蛋白法）一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料(一)试剂：抗人球蛋白检测卡（西班牙Diagnostic Grifols,S.A公司生产）(二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵育器（型号：DG THERM）、微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤：(一)交叉配血前，先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右，取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧，撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支，分别配制患者和献血者红细胞悬液（浓度为1%）待用。
(五)交叉配血：主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ；次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，取出观察结果。
七、结果观察：(一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可以输血(二)主侧或次侧出现凝集，细胞悬挂于卡的中间或上部，配血不相合，不可以输血(三)若输注血液为红细胞，则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
交叉配血试验标准化操作规程盐水法
落石出交叉配血试验标准化操作规程盐水法一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验;二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分;盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注;试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在;四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分;五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：%氯化钠注射液2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；3、批准文号：国药准字H；4、包装规格：500ml/瓶；5、贮藏条件；18-25℃避光保存;6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血EDTA抗凝剂:血液=1:10;2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程;3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时;4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定;八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；3、取洁净小试管10mmx60mm2支,1支标明主侧：受血者血清PS+供血者细胞DC；另1支标明次侧：供血者血清DS+受血者细胞PC;4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴;次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴;混匀,以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结果;冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断;5、结果判断：ABO同型配血,主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血;反之不能;九、质量控制1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格；2、每日做室内质量控制,且要求在控;3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,必要时应镜下观察红细胞形态;4、交叉配血标本应在2～8℃保存留一周,以备复查;十、生物参考区间相合；不相合;十一、注意事项与干扰因素1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血,必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血;2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；3、交叉配血试验血样,要求是输血前3天内的血样预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体;4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃～8℃保存7天；5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结；7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察;8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的同种抗体存在;9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在;10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例；11、血清或血浆中如含有溶血性抗体,则相应红细胞被溶解而不凝集,交叉配血结果阳性,如排除标本中补体干扰因素的影响,可来活后重新试验;12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体,应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别;十二、参考文献1、胡丽华主编,临床输血检验,第1版;中国医药科技出版社,2004；2、叶应妩,等主编,全国临床检验操作规程,第3版;东南大学出版社,2006,11；。
交叉配血操作规程
交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法，通过将两个不同的个体进行交叉配对，以获得具有理想遗传特征的后代。
下面是一份交叉配血操作规程，详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。
一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体，分别为雄性和雌性个体。
2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定，确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。
3.确定交叉配血的时间和地点，保持环境整洁，避免外部因素对实验造成干扰。
4.准备必要的实验器材和试剂，包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。
二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别：使用显微镜或基因鉴定方法，确认选定个体的性别。
2.打开个体体腔：以手术刀或麻醉剂等方法，在个体体腔中打开一个小孔，以便于之后的操作。
3.收集个体血液：用匀浆器缓慢吸取个体血液，将其置于培养皿中。
4.检查血液凝固情况：观察个体血液是否凝固，若已凝固则将其舍弃，重新收集血液。
5.将雄性血液与雌性血液混合：将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合，保持培养皿中的血液充分混合。
6.观察交配反应：观察混合后的血液是否发生凝集或聚集，若出现凝集或聚集现象，说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。
7.鉴定交配结果：使用显微镜或试纸等方法，对交配结果进行鉴定和记录。
8.存储交配后的血液：若需要保存交配后的血液供后续研究使用，将其分装于合适的容器中，并存放于低温环境中。
9.清理实验现场：将使用过的器材和材料进行清理和消毒，保持实验现场整洁。
三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行，以避免外部微生物对实验的污染。
2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中，以免造成血液的凝固或氧化。
3.操作过程中要注意个体的安全，减少对个体的伤害。
4.需要保持操作的准确性和规范性，避免实验中出现误差。
5.实验后要对结果进行及时记录和分析，以便下一步的研究。
6.学习和了解相关法规和伦理要求，确保在动物实验中符合相关规定。
交叉配血盐水介质法实验方法和步骤
交叉配血盐水介质法实验方法和步骤下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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落石出
交叉配
血试验标准化
操作规程（盐
水法）
一、目
的
为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对
全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法
采用盐水介质试管法； 三、原理
交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。
盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血
者输注。
试验通常包括：
主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；
次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；
自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。
四、适用范围
适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备
普通离心机；血型专用离心机；
六、试剂
1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液
2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；
3、批准文号：国药准字H20050061；
4、包装规格：500ml/瓶；
5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起二年；
七、检测样本要求
1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤
1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；
2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；
3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。
4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。
次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴。
混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果。
冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。
5、结果判断：
ABO同型配血，主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌，可以输血。
反之不能。
九、质量控制
1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩合格；
2、每日做室内质量控制，且要求在控。
3、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，必要时应镜下观察红细胞形态。
4、交叉配血标本应在2～8℃保存留一周，以备复查。
十、生物参考区间
相合；不相合。
十一、注意事项与干扰因素
1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血，必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血。
2、交叉配血标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；
3、交叉配血试验血样，要求是输血前3天内的血样（预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体）。
4、标本血液离体后要求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d，每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃～8℃保存7天；
5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；
6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗，则应用硫酸鱼精蛋白对抗，使样本凝结；
7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别，应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察。
8、抗体筛选试验阴性，而交叉配血结果阳性，提示有未检测明的同种抗体存在。
9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。
10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例；
11、血清或血浆中如含有溶血性抗体，则相应红细胞被溶解而不凝集，交叉配血结果阳性，如排除标本中补体干扰因素的影响，可来活后重新试验。
12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体，应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。
十二、参考文献
1、胡丽华主编，临床输血检验，第1版。
中国医药科技出版社，2004；
2、叶应妩，等主编，全国临床检验操作规程，第3版。
东南大学出版社，2006，11；。