巴豆生物碱对肺腺癌细胞凋亡的影响及机制研究

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巴豆的化学成分和药理活性研究进展

巴豆的化学成分和药理活性研究进展

巴豆的化学成分和药理活性研究进展金锋;张振凌;任玉珍;陈彦琳;杜杰;梁焕;周林;白宗利【摘要】巴豆为常用川产中药,主要含有巴豆油、蛋白质、二萜及其酯类、生物碱等成分,具有泻下、抗肿瘤、抗病原微生物、镇痛等多种药理作用.综述近年来巴豆化学成分和药理的研究概况,为更好地利用和开发巴豆提供依据.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)005【总页数】4页(P372-375)【关键词】巴豆;化学成分;药理作用【作者】金锋;张振凌;任玉珍;陈彦琳;杜杰;梁焕;周林;白宗利【作者单位】河南中医学院,河南郑州 450008;河南中医学院,河南郑州 450008;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600【正文语种】中文巴豆始载于神农本草经,为木部下品,又称猛子仁,刚子,巴菽、双眼龙等。

为大戟科植物巴豆Croton tiglium L.的干燥成熟果实。

主产于西南及福建、湖北、湖南、广东、广西等地,为较常用川产道地中药材,在四川从梁代开始由野生变家种,产量居全国之首,其中又以宜宾的产量最高,占全国产量的90%。

生巴豆味辛,性热;有大毒,归胃、大肠经。

内服泻下寒积,逐水消肿,祛痰利咽,外用蚀疮,可用于恶疮疥癣[1]。

因其毒性较大,多制成霜使用。

作者对国内外有关巴豆的化学成分和药理作用等方面进行了较为系统的综述,为更好地研究巴豆提供了科学依据。

综合文献报道,巴豆的化学成分研究主要集中在种仁上,种仁含脂肪油34%~57%,蛋白质约18%。

主要含二萜及其酯类、生物碱类及植物毒蛋白类[1]。

1.1 脂肪油类巴豆脂肪油为棕榈酸、硬脂酸、油酸、巴豆油酸、巴豆酸等组成的甘油酯。

油中含巴豆醇及16种巴豆醇双酯化合物,其中巴豆醇-12,13-二酯的含量约占巴豆油的4%;巴豆醇三酯的含量约占巴豆油的4%。

异甾体类生物碱的研究进展

异甾体类生物碱的研究进展

异甾体类生物碱的研究进展摘要:异甾体类生物碱是一类具有生理活性的物质,是许多药用植物的有效成分之一。

综述了近年来研究较多的百合科贝母属和藜芦属植物中异甾体类生物碱的研究进展,重点介绍了异甾体类生物碱化学结构特点及其药理作用,为异甾体类生物碱的深入研究提供参考。

关键词:西藜芦碱类;介藜芦碱类;药理作用异甾体类生物碱是甾体类生物碱按甾核的骨架分类的一种,有光学活性和显著的生理效应,如抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、止咳等。

其母核是由1,2苯芴和一个含氮杂环骈合而成的,主要分布在百合科贝母属和藜芦属植物中。

异甾体类生物碱由于具有一定的生理活性,在国内外已经引起了广泛的关注。

本文就近年来人们对异甾体类生物碱的研究概况作一综述。

1 异甾体类生物碱的结构分类异甾体类生物碱按化学结构特点可以分为西藜芦碱类(Cevine group)和介藜芦碱类(Jervine group)。

西藜芦碱类是由异甾核与喹喏里西啶骈合而成的六元环骨架,已发现的此类生物碱的A/B、B/C环均为反式,C/D环均为顺式,但D/E和E/F环的键合方式多有不同。

已分离出许多D/E和E/F键合方式不同的立体异构体,此类生物碱常以游离氨基醇的形式存在,环上羟基多为2~3个,其母核结构见 图1。

介藜芦碱类骨架与西藜芦碱类骨架的差别在于C18与氮原子之间无价键相连。

此类化合物大多数具有△5(6)、△12(13)结构,可分为有C17、C23氧桥者和无C17、C23氧桥者两型,前者在酸作用下可断裂形成异构化物。

其母核结构见图2。

1.1 西藜芦碱类西藜芦碱类生物碱主要分布于百合科贝母属植物和藜芦属植物中。

近年来,有人对其做了大量的研究,分离及鉴定了多种西藜芦碱类生物碱。

目前已经在贝母属植物中发现,贝母生物碱绝大部分属于异甾体类生物碱,约占86%[1]。

张建兴[2]等从浙贝母(FritiUaria thunbergiiMiq)中分离出7种西藜芦碱类生物碱。

徐东铭[3]等从平贝母(suriensis Maxim)中分离出3种西藜芦类生物碱。

巴豆苷药理作用及其机制的研究

巴豆苷药理作用及其机制的研究

WANG An-qi et al(College of Life Scicnce&Tchnology, Hcilongiang Bayi Agriculhual University, Daqing, Heilongjiang 163319)
Abstract Isoguanosine is an important alkaloid component in croton, which has the effects of cooling down, removing swelling, expelling phlegm and throat. It has been found that Isoguanosine can play a variety of pharmacological effects such as anti-cancer, anti-inflammatory, anti-arrhythmia, antiacute myeloid leukemia through a variety of ways. This paper reviews the pharmacological effects and mechanism of Isoguanosine. Key words Isoguanosine; Anticancer; Anti-inflammatory; Anti-arrhythmic; Antiacute myeloid leukemia
3 巴豆苷的抗心律失常作用 心 律 失 常(Cardiac dysrhythmia)
是由于窦房结激动异常、心脏冲动的起 源部位、频率节律、传导速度或激动次 序发生异常所导致的疾病。巴豆苷对抗 心律失常具有显著抑制心室肌细胞增 殖分化作用。Zhang H 等 [9] 通过检测巴 豆苷对家兔心室肌细胞的动作电位发 现,用 10、100、200 μmol/L 的 巴 豆 苷 对 心 室 肌 细 胞 进 行 干 预,不 同 浓 度 的 巴豆苷对心室肌细胞 INa.L(晚钠电流) 呈浓度依赖性抑制增长。Ren Z 等 [10] 通 过应用 Hill 方程研究发现,拟合形成巴 豆苷对 ICa.L(L—型钙电流)抑制百分 比的剂量—反应关系曲线,心室肌细胞 ICa.L 的 IC50 值 为 158.99 μmol/L。同 样复灌后的 ICa.L 基本恢复到原来的幅 度,实验结果表明,巴豆苷对 ICa.L 的 抑制增殖作用是可恢复的。Cao Z Z 等 [11] 研究发现,巴豆苷对 IKr(钾电流)有 显著的抑制增殖作用。以上实验证明巴 豆苷具有显著抑制心室肌细胞增殖分 化作用。

基于反向分子对接和网络药理学预测木兰花碱抗肿瘤的潜在作用机制

基于反向分子对接和网络药理学预测木兰花碱抗肿瘤的潜在作用机制
明末李中梓是中医大家、教 育 家 ,其著作《医宗必
读 》对 后 世 影 响 深 远 ,最早提出治疗肿瘤当分早中晚 三 期 ,治疗肿瘤有新制阴阳攻积丸、息贲丸等名方,在 这 些 治 疗 肿 瘤的方剂中都共同使用到巴 -0 2 -1 2
修 回 日 期 :2 0 2 1 -0 3 -0 6
202丨 第 二 十 三 卷 第 四 期 * Vol.2 3 N o .4
基于反向分子对接和网洛药理学预测
木兰花碱抗肿4 的潜在作用机喇*
s 唐 晓 龙 、 金 庆 江 ', 王 瑞 平 2, 王 鑫
滕 钰 浩 2, 汤 海 林 、
周 逸 群 ', 尹 浩 、 金 庆 雷
(1.苏 州 市 中 西 医 结 合 医 院 苏 州 215000; 2 . 江 苏 省 中 医 院 南 京 210009)
pathway、 Ras signaling pathway、 Metabolic pathways、 PPAR signaling pathway 等 信 号 通 路 参 与 抗 肿 瘤 的 作 用 。
结 论 通 过 对 木 兰 花 碱 治 疗 肿 瘤 潜 在 靶 点 的 挖 掘 ,我 们 推 测 ,其 可 用 于 治 疗 胰 腺 癌 、前 列 腺 癌 等 多 种 肿 瘤 ,
然而目前针对木兰花碱的研究大多局限于某一 作 用 靶 点 或 者 单 一 信 号 通 路 ,研 究 比 较 局 限 ,并且缺 乏 理 论 依 据 。 网 络 药 理 学 是 通 过 生 物 信 息 数 据 库 ,结 合了生物信息学、药 理 学 分 析 、计算生物学等多学科, 进 行 虚 拟 筛 选 药 物 作 用 疾 病 的 潜 在 靶 点 及 通 路 ,从整 体性和系统性角度初步预测药物作用疾病的可能作 用 机 制 的 学 科 ,目 前 网 络 药 理 学 参 与 了 很 多 中 医 药 研 究 项 目 的 前 期 预 测 ,被 广 泛 应 用 于 中 药 领 域 中 ,包括 中 药 新 药 研 发 、中 药 药 理 学 作 用 机 制 研 究 、中药质量 控 制 、组方配伍等|13—'反 向 分 子 技 术 是 以 小 分 子 化 合 物 作 为 研 究 对 象 ,在 与 蛋 白 质 数 据 库 中 的 已 知 蛋 白 自动对接,寻 找 小 分 子 化 合 物 潜 在 作 用 耙 点 ,除预测 潜 在 机 制 ,还可预测不良反应的蛋白靶点"91。本次为 了探索木兰花碱在人体抗肿瘤的作用靶点及潜在机 制 ,首次采用反向分子对接和网络药理学联合运用研 究木兰花碱抗肿瘤的潜在机制。

中药巴豆的功效与作用

中药巴豆的功效与作用

中药巴豆的功效与作用中药巴豆的功效与作用中药巴豆,学名乌头,属于毛茛科植物,是一种常见的中药材。

巴豆的种子富含乌头碱等活性成分,具有很多功效与作用。

在中医药领域,巴豆被广泛应用于治疗眩晕、偏头痛、癫痫等病症,具有较好的疗效。

本文将从巴豆的药理成分、药理作用、用途与应用等方面详细介绍巴豆的功效与作用。

一、巴豆的药理成分巴豆的主要活性成分是乌头碱。

乌头碱是一种刺激性有机碱,也是巴豆的主要毒性成分。

除了乌头碱之外,巴豆还含有皂甙、萜类化合物、多酚类成分等。

这些化合物共同作用,形成了巴豆的药理活性。

二、巴豆的药理作用1. 镇痛作用:巴豆可通过中枢神经系统的作用,发挥镇痛作用。

乌头碱能够通过抑制脑干的抑制性神经元来减少痛觉传入,从而起到镇痛的作用。

2. 抗癫痫作用:癫痫是一种在中枢神经系统中发生的干扰神经元兴奋和抑制平衡的疾病。

巴豆中的乌头碱能够通过调节神经递质的释放和抑制神经元兴奋来发挥抗癫痫作用。

3. 抗缺血作用:巴豆中的乌头碱能够扩张脑血管,增加脑血流量,改善脑缺血情况,从而发挥抗缺血作用。

4. 解痉作用:巴豆中的乌头碱能够通过抑制神经传导,减轻平滑肌的收缩,从而缓解痉挛症状。

5. 抗肿瘤作用:巴豆中的乌头碱具有抗肿瘤作用。

研究表明,乌头碱可以抑制肿瘤细胞的增殖和分化,从而发挥抗肿瘤作用。

三、巴豆的用途与应用1. 用于治疗头痛、眩晕等症状:巴豆的镇痛作用能够缓解头痛、偏头痛等症状。

巴豆中的乌头碱还可以改善脑缺血引起的眩晕症状。

2. 用于治疗癫痫:巴豆中的乌头碱能够抑制神经元的兴奋,发挥治疗癫痫的作用。

临床研究表明,巴豆具有较好的抗癫痫效果。

3. 用于治疗风湿病、痛风等关节炎性疾病:巴豆中的乌头碱能够缓解关节炎性疾病带来的关节炎疼痛和炎症。

4. 用于治疗神经症、抑郁症等精神疾病:巴豆的镇静作用能够缓解神经症、抑郁症等精神疾病症状。

5. 用于治疗肿瘤:巴豆中的乌头碱具有抑制肿瘤细胞增殖和分化的作用,可以作为辅助治疗肿瘤的药物。

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展朱学君;王译伟;张孝琴;王钦;张春;郭建敏【摘要】小檗碱又称黄连素,是一种异喹啉类季铵生物碱,具有抗菌抗炎、止泻、抗高血压、降血脂等作用.近年来研究发现小檗碱还有抗肿瘤的作用,而且毒副作用小,使得小檗碱在抗肿瘤研究方面前景更加广阔.但是小檗碱在肠道吸收较差,药理作用也还需要经临床研究进一步证实.近年来也有很多研究者对小檗碱的不同位点进行了结构修饰,期望得到水溶性更好,抗肿瘤活性更高的衍生物.本文就小檗碱及其衍生物的抗肿瘤机制的研究进展进行综述.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)017【总页数】4页(P3-6)【关键词】小檗碱;小檗碱衍生物;抗肿瘤机制;结构修饰【作者】朱学君;王译伟;张孝琴;王钦;张春;郭建敏【作者单位】西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000【正文语种】中文【中图分类】R914.5小檗碱来源于中国草本植物黄连和其他植物中,是一种异喹啉类季铵生物碱,分子式为[C20H18NO4]+,结构如图1,相对分子质量为336.37。

小檗碱为黄色针状结晶,游离的小檗碱可以溶于水,难溶于乙醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度也较小。

长期以来小檗碱被用作抗生素和抗菌剂,它有很多生物和药理活性,例如抗菌、免疫等活性[1]。

最近越来越多的研究表明,小檗碱的抗癌作用主要是因为它可以阻止并杀死癌细胞的扩散[2]。

小檗碱在体内均有一定程度的抗肿瘤活性,其抗肿瘤机制与直接的细胞毒作用,抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤转移等方面因素[3]。

在临床上,低剂量的小檗碱也被认为是无毒的[4],但由于小檗碱的脂溶性差,难以透过细菌的细胞膜,口服较难吸收,抗肿瘤活性无法完全发挥,限制了其临床应用范围。

巴豆的药理作用研究进展

巴豆的药理作用研究进展

巴豆的药理作用研究进展阎紫菲;朱彦霏【摘要】巴豆是我国传统的中药材,其分布和用途都很广泛,是一种颇具发展前景的药材.本文综合阐述了巴豆的多种药理功效,如抗菌抗炎、治疗精神病、抗癌作用与抑癌作用等多种药理功能,以期为巴豆的开发研究及生产应用提供理论参考.【期刊名称】《农技服务》【年(卷),期】2017(034)013【总页数】2页(P16,15)【关键词】巴豆;药理活性;药用植物【作者】阎紫菲;朱彦霏【作者单位】内江师范学院信息化建设与服务中心,四川内江 641100;内江师范学院生命科学学院,四川内江 641100【正文语种】中文抗生素是目前抗菌方面的主要药物,在传染病治疗方面也取得显著的效果。

但由于应用的不恰当,使得耐药菌株的不断出现,抗菌难度不断增加,也出现一些抗生素不良反应,而降低了抗生素的治疗效果。

严重地威胁着人类的健康。

随着化学药品的毒副作用不断出现,科学家们都正努力研制作用更强、更广、更安全的抗生素,但新抗生素的产生却跟不上耐药菌株的形成速度,且生化药品研制成本昂贵。

因此减少耐药菌株的生成和研制新的抗菌药物成了21世纪医学界的重要课题。

随之,人们的视线逐渐转到药用植物上来。

几千年以来,通过实践与不断地认识,药用植物在预防治疗感染性疾病方面有着悠久的历史。

并且,在现代的感染性疾病治疗方面发挥着积极的作用。

相对而言,药用植物的副作用小,极少产生抗耐药性。

在此情况下,药用植物抗菌药物的深入研究为防止感染提供了一定的启示。

因此研究药用植物抗菌活性对解决抗生素耐药方面有着重要意义。

从而药用植物提炼抗菌药物也逐渐受到国内外学者的重视。

巴豆始载于《神农本草经》,为木部下品。

主要产自西南、福建、湖北、云南、广东、广西等地。

为较常用川产道地中药材。

中医药上以果实为药,性热,味辛,功能破积、逐水、涌吐痰啖,有助于治寒结便秘,腹水肿胀,喉风喉痹,痈疽、恶疮疥癣,对结核、肝硬化腹水等起重要作用。

巴豆因其具较强的理化活性[1],通过GC-MS法测定了巴豆中的成分,主要有亚油酸、油酸、花生酸、棕榈酸、硬脂酸和亚麻油酸等。

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制
用不同浓度(0、5、20、100μmol/L)的大黄素作 用 H522细胞 48h,观察细胞的形态变化。收集细 胞,将细胞按照密度为 4.0×105 接种于 96孔板中, 于 37℃ CO2培养箱中培养 24h,进行细胞爬片,1X PBS清洗,用 4%的多聚甲醛固定 10min后,避光条 件下,加入 Tunel溶液于 37℃孵育 60min,最后加 入 DAPI溶 液 封 片。荧 光 显 微 镜 下 观 察 细 胞 形 态 变化。 1.2.5 Westernblot实验
用不同浓度(0、5、20、100μmol/L)的大黄素作 用 H522细胞 24h、48h与 72h。收集生长状态良 好的细胞,消化、清洗、离心,在 96孔板的每孔加入 2.5×103浓度的细胞,于 37℃ CO2培养箱中培养。 每个孔中加入 10μlCCK-8溶液,在培养箱中孵育 2h,使用酶标仪测量 450nm处的吸光度(OD),计 算比较不同浓度大黄素的细胞抑制率:抑制率 =[1 -OD大黄浓度组 /OD空白对照组]×100%。
采用 SPSS13.0软件进行统计分析,实验数据 用均数 ±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析 (ANOVA)方法对多组间实验数据进行分析比较,均 继以 LSD进行两两比较。P<0.05为差异有统计 学意义。
2 结 果
2.1 大黄素对 H522细胞增殖的影响 CCK8实验结果发现:不同浓度(5、20、100μmol/
1.2.3 流式细胞实验 用不同浓度(0、5、20、100μmol/L)的大黄素作
用 H522细胞 24h、48h与 72h。收集生长状态良 好的细胞,弃去原培养基,消化、清洗、离心,制成细 胞悬液,经 95%乙醇固定过夜,清洗,加入适量 An nexinV-FITC溶液与 PI染色液孵育 20min左右, 轻轻混匀,转 移 至 上 样 管 中,通 过 流 式 细 胞 仪 检 测 细胞的凋亡与细胞周期的变化。 1.2.4 Tunel免疫荧光实验
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巴豆生物碱对肺腺癌细胞凋亡的影响及机制研究武晓;刘凤娟;王鹏飞;张春玲【摘要】目的研究巴豆生物碱(CA)对肺腺癌细胞(A549)增殖和凋亡的影响,推测其抗肺癌作用机制.方法体外培养肺腺癌细胞(A549).用终浓度分别为0(对照组)、10、50、100 μg/mL的CA组处理A549细胞24h后,于相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等;MTT法检测细胞的生长活性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫法(ELISA)和RT-PCR法检测凋亡相关蛋白及基因Bcl-2、Bax的表达.结果 10、50、100 μg/mL的CA均能抑制A549细胞增殖,其抑制率与作用剂量相关.流式细胞术检测显示不同剂量CA作用于A549细胞24 h后,100μg/mL 的CA可引起细胞凋亡,其余剂量未见凋亡;100 μg/mL的CA组细胞凋亡率为(45.940±0.031)%,对照组细胞凋亡率为(3.450±0.012)%,差异有统计学意义(P<0.05).ELISA提示不同剂量CA作用于A549细胞24h后,100 μg/mL的CA组促凋亡蛋白Bax为8.940±0.211,较对照组(4.450±0.131)表达增加;抑凋亡蛋白Bcl-2为4.860±0.132,较对照组(7.390±0.181)表达减少,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR显示100μg/mL的CA组Bax mRNA为6.881±0.611,较对照组(3.417±0.461)表达增加;Bcl-2 mRNA为2.812±0.342,较对照组(4.243±0.731)表达减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CA能抑制A549细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bax蛋白及基因的表达上调和Bcl-2蛋白及基因的表达下调有关.CA 抗肺癌的作用机制可能通过Bax/Bcl-2途径促进肿瘤细胞凋亡,从而为临床治疗肺癌提供新的思路和途径.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2016(013)001【总页数】4页(P17-20)【关键词】巴豆生物碱;肺腺癌;凋亡;作用机制【作者】武晓;刘凤娟;王鹏飞;张春玲【作者单位】青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042【正文语种】中文【中图分类】R734.2近年来,大家开始对巴豆及其提取物的抗肿瘤作用进行研究。

巴豆生物碱(crotonic alkaloids,CA)具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

巴豆是一种流传于民间,用于抗癌的中草药偏方,为大戟科植物巴豆的干燥成熟种子,可生用、炒焦用或制霜用。

民间早已应用巴豆的提取物治疗恶性肿瘤,其提取物对胃癌、肝癌及甲状腺癌等多种肿瘤均具有治疗作用,其能缓解晚期胃癌患者的症状,减慢病程的进展,减少转移。

相关文献资料关于CA抗癌作用机制的研究甚少,鲜有报道。

查阅国内外文献,CA对于胃癌、卵巢癌、肠癌等均有抗癌作用,但尚未见有关抗肺癌作用的报道。

本实验采用体外肺癌细胞培养,研究CA对肺癌细胞(A549)增殖和凋亡的影响,初探CA对肺癌的治疗作用及有效作用机制。

1.1 试剂与耗材肺腺癌细胞株(A549细胞)取自青岛市中心医院肿瘤生物治疗中心。

DMEM培养液(美国Hyclone公司);胎牛血清(美国Hyclone公司);0.25%胰蛋白酶(美国Hyclone公司);DMSO(美国Hyclone公司);流式细胞术所需材料(中国森雄公司);RNAiso Reagent(购自Takara公司);琼脂糖、DNA Marker 2000、氯仿、异丙醇(上海生物工程有限公司);Loading Buffer (大连宝生物工程有限公司);内参GAPDH cDNA引物序列;Bax、Bcl-2引物序列(上海生物工程有限公司合成);逆转录试剂盒及PCR试剂盒(购自Fermentas中国公司);巴豆生物碱。

Bax:GAGGAACTGGACAGTAACATGGAGCT;CGGCCCCAGTTGAAGTTGC。

Bcl-2:GCCGGTTCAGGTACTCAGTCATC;GTCACCTTCACCGTTCCA。

GAPDH:GCACCGTCAAGGCTGAGAAC;ATGGTGGTGAAGACGCCAGT。

1.2 试验方法体外培养肺腺癌细胞(A549)。

用终浓度分别为0(对照组)、10、50、100μg/mL的CA组处理A549细胞24 h后,于相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等;MTT法检测细胞的生长活性;流式细胞仪(AnnexinV-PI染色)检测细胞凋亡率;酶联免疫法(ELISA)和RT-PCR法检测凋亡相关蛋白及基因Bcl-2、Bax的表达。

1.3 统计学方法采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理,计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2.1 MTT法检测不同剂量CA对A549细胞活性的影响不同剂量CA作用于A549细胞24 h后,对细胞活性均具有显著抑制作用,随着药物浓度增加,细胞活性受抑制逐渐增加,表现为剂量依赖关系。

见表1。

2.2 倒置相差显微镜下A549细胞形态学观察对照组A549细胞生长状态良好,漂浮细胞较少,胞浆丰富,胞核清晰可见,呈多角形,细胞排列不紧密,细胞间可见相互连接(图1A)。

CA组:10μg/mL的CA干预A549细胞24 h后,大部分贴壁细胞有完整的胞核和胞浆,小部分细胞皱缩成球(图1B);50μg/mL的CA干预A549细胞24 h后,可见许多漂浮细胞,贴壁细胞少见有完整的胞核和胞浆,大部分细胞呈齿轮形状,并且部分细胞皱缩成球(图1C);100μg/mL的CA干预A549细胞24 h后,可见大量漂浮细胞,贴壁细胞几乎无完整的胞核和胞浆,大部分细胞皱缩成球,已无正常细胞形态(图1D)。

2.3 AnnexinV-PI染色检测不同剂量CA对细胞凋亡的影响100 μg/mL的CA作用于A549细胞后24 h细胞凋亡率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

见表2。

表2 不同剂量CA对A 5 4 9凋亡率的影响(%,±s) 2.4 ELISA检测不同剂量CA对A549细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响与对照组比较,100μg/mL的CA组抑凋亡蛋白Bcl-2表达减少,促凋亡蛋白Bax 表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);其余剂量CA组差异无统计学意义(P>0.05)。

见表3。

2.5 RT-PCR法检测不同剂量CA对A549细胞Bcl-2、BaxmRNA表达的影响与对照组比较,100μg/mL的CA组Bcl-2mRNA表达减少,Bax mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);其余剂量CA组差异无统计学意义(P>0.05)。

见表4。

肺癌在中医古代文献中属于肺疾、肺痈。

肺癌的主要发病机制是正气不足和邪气入侵,其次为痰瘀。

若正气不足和阴阳失衡将会引起病原体火癌症毒素入人的肺部[1]。

肺功能差将会导致肺气阻塞、弥散损伤和弥散功能下降,血流停滞,干扰液体分布。

体液累积导致的痰液凝固,从而导致气血停滞和血瘀。

气滞血瘀和痰液、毒素积累逐渐导致肺功能损伤[2]。

肺癌是一种全身性疾病。

肺虚通常表现为气虚、阴虚和气血不足。

当西医治疗不能提供任何其他的治疗方案时,中医药常作为缓解终末期肿瘤症状辅助治疗手段[3]。

然而,中医药能在肿瘤的整个过程中发挥重要的预防和治疗作用。

众多研究资料表明,天然植物中存在具有治疗价值的抗癌成分[4],中药复方阿胶浆可显著提高小鼠在化疗和放疗后的造血功能[5]。

八珍汤能降低恶性卵巢瘤患者接受化疗后的胃肠道反应、白细胞减少、腹膜炎等和肝肾功能的发生率[6]。

四种中草药植物(白花蛇舌草、党参、地黄、黄芪)影响CYP3A4的活性和表达,其能够有助于抗癌药物的代谢[7]。

临床上,中药可以提高放疗患者的生存率并改善生活质量,并能减少放疗的毒性,如放射性炎症、白细胞缺陷和免疫功能紊乱。

近年来,中医药一直是一个公认有效的生物反应调节剂,可以调节肿瘤患者的非特异性免疫功能,缓解化疗或放疗不良反应[8]。

一些中药制剂,如华蟾素注射液、艾迪注射液及参芪扶正胶囊早已被证明作为辅助支持治疗肿瘤具有良好的作用,其可以减弱放化疗带来的毒副作用,同时提高疗效[9]。

因此,中医与现代相结合药物化疗和放疗等每一个阶段的治疗可以明显减轻临床症状,改善生活质量,延长预期寿命[10]。

这种治疗模式不仅较单独使用现代医学有显著优势,也是多学科综合疗法的趋势[11]。

最近的研究基于中医基础理论,应用中西医综合治疗放化疗引起的毒副作用。

如何从天然植物中特别是传统中药中寻找和筛选出具有预防和治疗肿瘤的活性药物,已成为医学界关注的焦点。

巴豆是一种流传于民间,用于抗癌的中草药偏方,为大戟科植物巴豆的干燥成熟种子。

可生用、炒焦用或制霜用。

主产于南方地区如四川、广东、云南等地。

全世界共有800多种,广泛分布于热带及亚热带等地区。

其性味辛、热,有大毒。

入胃、大肠、肺经。

具有逐水退肿、泻下寒积、祛痰、蚀疮等多种功效。

临床常用于便秘腹痛,体质壮实的水肿以及气急喘促、痰壅咽喉和疮脓熟而未破等证。

该属植物的主要成分包括巴豆油、巴豆树脂、生物碱、毒性蛋白、巴豆苷等,民间早已应用巴豆的提取物治疗恶性肿瘤,其提取物对胃癌、肝癌及甲状腺癌等多种肿瘤均具有治疗作用[12-14],其能缓解晚期胃癌患者的症状,减慢病程的进展,减少转移。

CA抗癌机制如下:①CA对膜系统分子动力学影响;②诱导肿瘤细胞凋亡[15-16];③诱导肿瘤细胞分化、逆转[17];④改变细胞胞浆结构,破坏癌细胞微管[18-20]。

本研究结果显示,10、50、100μg/mL的CA均能抑制A549细胞增殖,其抑制率与作用浓度相关;流式细胞术检测结果显示,不同剂量CA作用A549细胞24h后,只有100μg/mL的CA可引起细胞凋亡,其余剂量未见凋亡,多为坏死细胞;100μg/mL的CA组的细胞凋亡率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA结果提示,不同剂量(0、10、100μg/mL)CA作用A549细胞24 h后,与对照组比较,100μg/mL 的CA组促凋亡蛋白Bax表达增加,抑凋亡蛋白Bcl-2表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),其余剂量CA组差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示,100μg/mL的CA组BaxmRNA表达增加,Bcl-2mRNA表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),其余剂量CA组差异无统计学意义(P>0.05);由结果推测CA能抑制A549细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bax蛋白及基因的表达上调和Bcl-2蛋白及基因的表达下调有关。

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