第二章基因工程习题答案

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基因工程(第二章答案)

基因工程(第二章答案)

第二章基因工程工具酶一、解释下列名词1、Restriction and modification(限制与修饰)宿主特异性地降解外源遗传物质(DNA)得现象称为限制。

外源遗传物质通过甲基化等作用避免宿主得限制作用称为修饰。

2、 Matched ends(or cohesive end)(匹配末端或粘性末端)识别位点为回文对称结构得序列,经限制酶切割后,产生得相同得,互补得末端称为匹配粘端,亦即粘性末端3、 Blunt ends平末端。

在回文对称轴上同时切割DNA得两条链,产生得没有碱基突出得末端称为平末端。

4、Star activity星星活性。

在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似得序列,这个改变得特殊性称星星活性。

5、 KlenowfragmentKlenow 片段。

KlenowDNA聚合酶就是E、col iDNA polymerase 经蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)裂解而从全酶中除去5’——3’ 外切活性得多肽大片段,而聚合活性与3'-—5' 外切活性不受影响.6、Reverse transcriptase反转录酶。

即依赖于RNA 得DNA 聚合酶,它有5’--3'合成DNA 活性,但就是无3’——5'外切活性。

7、Terminaltransferase(末端转移酶)8、Ligase连接酶。

催化DNA 5' 磷酸基与3' 羟基之间形成磷酸二酯键,将两段核酸连接起来得酶。

9、T4polynucleotide kinase(T4多聚核苷酸激酶)催化ATP得γ-磷酸基转移至DNA或RNA 得5' 末端。

10、Alkaline phosphatase(碱性磷酸酶)催化除去DNA或RNA 5' 磷酸11、S1 nuclease Sl核酸酶.可降解单链DNA 或RNA ,产生带5'磷酸得单核苷酸或寡核苷酸双链;对dsDNA,dsRNA ,DNA:RNA杂交体不敏感。

基因工程课后习题答案

基因工程课后习题答案

基因工程课后习题答案基因工程课后习题答案基因工程是一门涉及生物学、遗传学和生物技术的综合学科,它的发展和应用在医学、农业、环境保护等领域具有重要意义。

在学习基因工程的过程中,我们常常会遇到一些习题,下面是一些常见的基因工程课后习题及其答案,希望能对大家的学习有所帮助。

1. 什么是基因工程?基因工程是利用生物技术手段对生物体的基因进行操作和改变的过程。

它包括了基因的克隆、重组、转染和编辑等技术,旨在实现对基因组的精确控制和改造。

2. 请简要介绍基因克隆的步骤。

基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。

其步骤主要包括:DNA提取、DNA片段的切割、载体DNA的准备、DNA片段的连接、转化和筛选等。

3. 什么是重组DNA技术?重组DNA技术是指将来自不同生物体的DNA片段进行切割,然后通过连接酶将其重新组合成新的DNA分子的过程。

重组DNA技术的应用广泛,可以用于基因克隆、基因表达、基因治疗等领域。

4. 请简要介绍PCR技术。

PCR(聚合酶链反应)是一种体外扩增DNA的技术。

它通过不断重复DNA的变性、退火和延伸等步骤,可以在短时间内大量复制目标DNA序列。

PCR技术在基因工程中被广泛应用于基因克隆、基因检测和DNA测序等方面。

5. 什么是基因编辑技术?基因编辑技术是指通过直接对基因组进行修改,实现对目标基因的精确编辑和改造的技术。

目前最常用的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统,它可以实现高效、精确和经济的基因编辑,对于研究基因功能和治疗基因相关疾病具有重要意义。

6. 基因工程在医学领域有哪些应用?基因工程在医学领域的应用非常广泛,包括基因治疗、药物生产、疫苗研发等方面。

例如,通过基因工程可以将治疗性基因导入患者体内,用于治疗遗传性疾病和癌症等疾病;还可以利用基因工程技术生产重组蛋白药物,如胰岛素和生长激素等。

7. 基因工程在农业领域有哪些应用?基因工程在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和农业有害生物的控制。

基因工程课后习题答案

基因工程课后习题答案

基因工程课后习题答案基因工程,也称为遗传工程,是一种通过直接操作生物体的基因来改变其遗传特性的技术。

这项技术在医学、农业、工业和环境科学等领域有着广泛的应用。

以下是一些基因工程课后习题的答案:1. 基因工程的定义:基因工程是利用分子生物学技术,将外源基因插入到宿主生物体的基因组中,使其表达出新的或改变的遗传特性。

2. 基因工程的基本步骤:- 目标基因的获取:通过PCR扩增、基因克隆等方法获得目标基因。

- 基因载体的构建:将目标基因插入到合适的载体中,如质粒、病毒等。

- 转化:将构建好的载体导入到宿主细胞中。

- 筛选:通过抗生素抗性标记等方法筛选成功转化的细胞。

- 表达:在宿主细胞中表达目标基因,产生所需的蛋白质或性状。

3. 基因工程在农业中的应用:基因工程可以用于培育抗虫、抗病、抗旱、耐盐碱等性状的作物品种,提高作物的产量和质量。

4. 基因工程在医学中的应用:- 生产药物:利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物。

- 基因治疗:通过修复或替换缺陷基因来治疗遗传性疾病。

5. 基因工程可能带来的伦理问题:基因工程可能引发生物安全、生物多样性丧失、基因歧视等伦理问题,需要在实施过程中进行严格的伦理审查和监管。

6. 基因工程的安全性问题:基因工程产品可能存在潜在的食品安全和环境安全问题,如转基因作物可能对非目标生物产生影响,需要进行长期的环境影响评估。

7. 基因工程的未来发展趋势:随着基因编辑技术如CRISPR-Cas9的发展,基因工程将更加精准和高效,有望在治疗遗传病、提高作物产量等方面发挥更大的作用。

8. 基因工程的法律和政策:不同国家和地区对基因工程的法律和政策不同,需要遵守当地的法律法规,确保基因工程的安全和合法性。

通过这些习题答案,学生可以更好地理解基因工程的基本概念、技术流程、应用领域以及面临的挑战和未来发展。

基因工程习题及答案

基因工程习题及答案

第二章习题一、单选题1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指( B )A.I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶E. RNAase2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。

B. 它们的识别序列完全相同。

C. 它们的切割方式可以相同,也可以不同。

D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样,但切割位点间的序列一样。

E. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。

3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是( A )A. 37℃B.30℃C.25℃D.16℃E.33℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。

B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。

C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP,S-腺苷蛋氨酸能促进反应,但不是绝对需要。

D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性,II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。

E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点,具有高度精确性。

5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )A. 1/44B. 1/66C. 1/64D.1/46E. 1/1066. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后,可能会阻碍限制酶的酶解活性。

B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。

C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。

D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液,是由于磷酸根会抑制限制酶反应。

E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用,所以酶切反应中常加入一定量的BSA。

基因工程(第二章答案)

基因工程(第二章答案)

第二章基因工程工具酶一、解释下列名词1.Restriction and modification(限制与修饰)宿主特异性地降解外源遗传物质(DNA)的现象称为限制。

外源遗传物质通过甲基化等作用避免宿主的限制作用称为修饰。

2. Matched ends(or cohesive end)(匹配末端或粘性末端)识别位点为回文对称结构的序列,经限制酶切割后,产生的相同的,互补的末端称为匹配粘端,亦即粘性末端3. Blunt ends平末端。

在回文对称轴上同时切割DNA 的两条链,产生的没有碱基突出的末端称为平末端。

4. Star activity星星活性。

在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。

5. Klenow fragment Klenow 片段。

Klenow DNA 聚合酶是E.coli DNA polymerase 经蛋白酶(枯草杆菌蛋白酶)裂解而从全酶中除去5'--3' 外切活性的多肽大片段,而聚合活性和3'--5' 外切活性不受影响。

6.Reverse transcriptase反转录酶。

即依赖于RNA 的DNA 聚合酶,它有5'--3' 合成DNA 活性,但是无3'--5' 外切活性。

7.Terminal transferase(末端转移酶)8.Ligase连接酶。

催化DNA 5' 磷酸基与3' 羟基之间形成磷酸二酯键,将两段核酸连接起来的酶。

9.T4 polynucleotide kinase(T4多聚核苷酸激酶)催化ATP 的γ-磷酸基转移至DNA 或RNA 的5' 末端。

10.Alkaline phosphatase(碱性磷酸酶)催化除去DNA 或RNA 5' 磷酸11.S1 nuclease Sl 核酸酶。

可降解单链DNA 或RNA ,产生带5' 磷酸的单核苷酸或寡核苷酸双链;对dsDNA ,dsRNA ,DNA:RNA 杂交体不敏感。

第二章基因工程习题答案

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第⼆章基因⼯程习题答案基因⼯程课程习题选择题001 基因⼯程操作的三⼤基本元件是【A】I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体AI + II + IIIBI + III + IVCII + III + IVDII + IV + VEIII + IV + V002 根据当今⽣命科学理论,基因⼯程的⽤途是【E】I 分离纯化基因 II ⼤量⽣产⽣物分⼦ III 构建新型物种 IV 提⾼基因重组效率A I + II + III B I + II + IVC I + III + IVD II + III + IVE I + II + III + IV003 根据基因⼯程的定义,下列各名词中不能替代基因⼯程的是【A】A基因诱变B分⼦克隆C DNA重组D遗传⼯程E基因⽆性繁殖004 基因⼯程的单元操作顺序是【B】A增,转,检,切,接B切,接,转,增,检C接,转,增,检,切D检,切,接,增,转E切,接,增,转,检005 下列有关基因的叙述,错误的是【A】A蛋⽩质是基因表达的唯⼀产物B基因是 DNA 链上具有编码功能的⽚段C基因也可以是 RNAD基因突变不⼀定导致其表达产物改变结构E基因具有⽅向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产⽣的,其⽣理意义是【D】A修复⾃⾝的遗传缺陷B促进⾃⾝的基因重组C强化⾃⾝的核酸代谢D提⾼⾃⾝的防御能⼒E补充⾃⾝的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】ABacillus amyloliquefaciensBEscherichia coliCHaemophilus influenzaeDProvidencia stuartiiEStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸⼆酯键将两段 DNA ⽚段连接在⼀起,其底物的关键基团是【D】A 2' -OH 和 5' -PB 2' -OH 和 3' -PC 3' -OH 和 2' -PD 3' -OH 和 5' -PE 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA ⽤ M 酶切开,则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA ⽚段中,能直接与载体拼接的是【D】M NA A/AGCTT T/TCGAAB C/CATGG ACATG/TC CCC/GGG G/GGCCCD G/GATCC A/GATCTE GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分⼦⽣物学的叙述,错误的是【B】A质粒是共价环状的双链 DNA 分⼦B天然质粒⼀般不含有限制性内切酶的识别序列C质粒在宿主细胞内能独⽴于染⾊体 DNA ⾃主复制D松弛复制型的质粒可⽤氯霉素扩增E质粒并⾮其宿主细胞⽣长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】A穿梭质粒B表达质粒C探针质粒D整合质粒E多拷贝质粒012 下列各常⽤载体的装载量排列顺序,正确的是【A】A Cosmid > λ-DNA > PlasmidBλ-DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ-DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNAEλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 ⽬前在⾼等动物基因⼯程中⼴泛使⽤的载体是【C】A质粒 DNAB噬菌体 DNAC病毒 DNAD线粒体 DNAE叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因,那么与之相匹配的筛选⽅法是在筛选培养基中加⼊【D】A半乳糖B葡萄糖C蔗糖D5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷(X-gal )E异丙基巯基- b - 半乳糖苷(IPTG )015质粒是基因⼯程中最常⽤的运载体,它的主要特点是【C】①能⾃主复制②不能⾃主复制③结构很⼩④蛋⽩质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦016 双脱氧末端终⽌法测定DNA 序列是基于【A】ADNA 的聚合反应BDNA 的连接反应CDNA 的降解反应D特殊的DNA 连接酶E聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种⽅法中,能有效区分重组⼦与⾮重组⼦的是【E】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选BI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III018鸟枪法克隆⽬的基因的战略适⽤于【A】A原核细菌B酵母菌C丝状真菌D植物E⼈类019 cDNA 第⼀链合成所需的引物是【D】APoly ABPoly CCPoly GDPoly TE发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的⼴泛运⽤成为可能,这是因为【D】ATaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物BTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物CTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性DTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ETaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进⾏021 为了利⽤PCR 技术扩增下列染⾊体DNA ⽚段上的虚线部分,应选⽤的引物顺序是【D】AI + IIBI + IIICI + IVDII + IIIEII + IV022 构建基因⽂库⼀般使⽤的载体是【E】I 质粒IIλ-DNA III CosmidAIBIICIIIDII + IIIEI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】A密码⼦B复制⼦C启动⼦D内含⼦E外显⼦024 启动⼦的特征之⼀是【B】AGC 富积区BTATA BoxC转录起始位点D长度平均1 kbE含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】A阻遏蛋⽩B启动⼦C操作⼦D终⽌⼦E增强⼦026包涵体是⼀种【E】A受体细胞中难溶于⽔的蛋⽩颗粒B⼤肠杆菌的亚细胞结构C噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒D⽤于转化动物细胞的脂质体E外源基因表达产物的混合物027 外源基因在⼤肠杆菌中以融合蛋⽩的形式表达的优点是【E】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋⽩能抗蛋⽩酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离AIII BI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III028 第⼆代基因⼯程是指【C】A途径⼯程B代谢⼯程C蛋⽩质⼯程DRNA 基因⼯程E细胞器基因⼯程029 基因⼯程菌中重组质粒的丢失机制是【C】A重组质粒渗透⾄细胞外B重组质粒被细胞内核酸酶降解C重组质粒在细胞分裂时不均匀分配D重组质粒杀死受体细胞E重组质粒刺激受体细胞提⾼其通透性030利⽤⽑细管作⽤原理,将凝胶电泳分离后的DNA⽚段转移⾄硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进⾏分析的技术是【D】AWestern 印迹转移技术BNorthern 印迹转移技术C基因的表现型分析法DSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中.mRNA必需⾸先与核糖体相结合才能进⾏蛋⽩质合成。

智慧树知到《基因工程》章节测试答案

智慧树知到《基因工程》章节测试答案

智慧树知到《基因工程》章节测试答案第一章9、生物工程的上游技术是()基因工程及分离工程基因工程及发酵工程基因工程及细胞工程基因工程及蛋白质工程答案: 基因工程及蛋白质工程第二章1、下列()克隆载体对外源DNA的容载量最大?质粒YAC黏粒λ噬菌体答案: YAC2、K1enow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了()的活性。

5’→3’合成酶3’→5’外切酶5’→3’外切酶转移酶答案: 5’→3’外切酶8、双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()DNA的聚合反应DNA的连接反应DNA的降解反应特殊的DNA连接答案: DNA的聚合反应9、已知某一内切酶在一个环状DNA上有4个切点,当用此酶切割该环状DNA,可以得到()个片段。

5432答案: 410、下列()克隆载体对外源DNA的容载量最大?质粒黏粒酵母人工染色体λ噬菌体质粒答案: 酵母人工染色体11、有关PCR的描述下列哪项不正确:()是一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增的产量按 Y=m(1+X)n扩增的对象是氨基酸序列答案: 扩增的对象是氨基酸序列12、同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是()L-DNA>cccDNA>OC-DNAOC-DNA>cccDNA>L-DNAcccDNA>L-DNA>OC-DNAL-DNA>OC-DNA>cccDNA答案: cccDNA>L-DNA>OC-DNA13、将外源基因导入真核细胞的过程称()转染转导感染转化答案: 转导14、限制性内切酶的命名遵循的一定原则()种名种名,菌株号或生物型属名菌株号答案: 种名,菌株号或生物型15、因工程中常作为基因载体的一组结构是()质粒、线粒体、噬菌体质粒、噬菌体、动植物病毒染色体、叶绿体、线粒体细菌、噬菌体、动植物病毒答案: 质粒、噬菌体、动植物病毒16、能使X—gal变蓝的条件是()有α—片段α—受体片段同时具有α—片段和α—受体片段同时具有β—片段和β受体片段答案: 同时具有α—片段和α—受体片段17、用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是()抗性标记选择分于杂交选择RNA 反转录免疫学方法答案: 抗性标记选择18、当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时,不会明显影响存活能力()75%~90%60%~75%75%~105%105%以上答案: 75%~105%19、关于遗传物质的转移的主要方式,下列不是的是()转变转化转导转染答案: 转变20、关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义,下列哪种说法是正确的?()来自噬菌体,用于复制病毒DNA来自细菌,有防御病毒侵染的意义来自噬菌体,具有抗微生物作用来自酵母菌,参与DNA复制答案: 来自细菌,有防御病毒侵染的意义21、DNA重组过程中连接常用的温度是()15℃50℃80℃100℃答案: 15℃22、DNA重组过程中酶切常用的温度是()0℃37℃80℃100℃答案: 37℃第三章1、下列不是大肠杆菌表达元件的是()复制子终止子核糖体结合位点启动子答案:2、大肠杆菌感受态CaCl2转化法中在()温度下水溶液中热击处理37℃42℃57℃100℃答案:8、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是()重组质粒渗透至细胞外重组质粒被细胞内核酸酶降解重组质粒在细胞分裂时不均匀分配重组质粒杀死受体细胞答案:9、分子克隆中用T载体主要是与下列哪种产物连接()单酶切产物双酶切产物同裂酶产物PCR产物答案:10、()可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解,或使表达的蛋白正确折叠,从而达到维护目的蛋白的目的。

《基因工程》习题及参考答案

《基因工程》习题及参考答案

《基因工程》习题及参考答案一、习题:1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类?35. 什么叫印记基因?36.什么叫遗传漂变?37.人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的?38.人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么?40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合,然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中,进行体细胞克隆。

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基因工程课程习题选择题001 基因工程操作的三大基本元件是【A】I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体AI + II + IIIBI + III + IVCII + III + IVDII + IV + VEIII + IV + V002 根据当今生命科学理论,基因工程的用途是【E】I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率A I + II + IIIB I + II + IVC I + III + IVD II + III + IVE I + II + III + IV003 根据基因工程的定义,下列各名词中不能替代基因工程的是【A】A基因诱变B分子克隆C DNA重组D遗传工程E基因无性繁殖004 基因工程的单元操作顺序是【B】A增,转,检,切,接B切,接,转,增,检C接,转,增,检,切D检,切,接,增,转E切,接,增,转,检005 下列有关基因的叙述,错误的是【A】A蛋白质是基因表达的唯一产物B基因是 DNA 链上具有编码功能的片段C基因也可以是 RNAD基因突变不一定导致其表达产物改变结构E基因具有方向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是【D】A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力E补充自身的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】ABacillus amyloliquefaciensBEscherichia coliCHaemophilus influenzaeDProvidencia stuartiiEStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起,其底物的关键基团是【D】A 2' -OH 和 5' -PB 2' -OH 和 3' -PC 3' -OH 和 2' -PD 3' -OH 和 5' -PE 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA 用 M 酶切开,则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中,能直接与载体拼接的是【D】M NA A/AGCTT T/TCGAAB C/CATGG ACATG/TC CCC/GGG G/GGCCCD G/GATCC A/GATCTE GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分子生物学的叙述,错误的是【B】A质粒是共价环状的双链 DNA 分子B天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列C质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制D松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增E质粒并非其宿主细胞生长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】A穿梭质粒B表达质粒C探针质粒D整合质粒E多拷贝质粒012 下列各常用载体的装载量排列顺序,正确的是【A】A Cosmid > λ-DNA > PlasmidBλ-DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ-DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNAEλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【C】A质粒 DNAB噬菌体 DNAC病毒 DNAD线粒体 DNAE叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【D】A半乳糖B葡萄糖C蔗糖D5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷(X-gal )E异丙基巯基- b - 半乳糖苷(IPTG )015质粒是基因工程中最常用的运载体,它的主要特点是【C】①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦016 双脱氧末端终止法测定DNA 序列是基于【A】ADNA 的聚合反应BDNA 的连接反应CDNA 的降解反应D特殊的DNA 连接酶E聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种方法中,能有效区分重组子与非重组子的是【E】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选AIBI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III018鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【A】A原核细菌B酵母菌C丝状真菌D植物E人类019 cDNA 第一链合成所需的引物是【D】APoly ABPoly CCPoly GDPoly TE发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能,这是因为【D】ATaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物BTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物CTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性DTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ETaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进行021 为了利用PCR 技术扩增下列染色体DNA 片段上的虚线部分,应选用的引物顺序是【D】AI + IIBI + IIICI + IVDII + IIIEII + IV022 构建基因文库一般使用的载体是【E】I 质粒IIλ-DNA III CosmidAIBIICIIIDII + IIIEI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】A密码子B复制子C启动子D内含子E外显子024 启动子的特征之一是【B】AGC 富积区BTATA BoxC转录起始位点D长度平均1 kbE含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】A阻遏蛋白B启动子C操作子D终止子E增强子026包涵体是一种【E】A受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒B大肠杆菌的亚细胞结构C噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒D用于转化动物细胞的脂质体E外源基因表达产物的混合物027 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【E】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离AIIIBI + IICI + IIIDII + IIIEI + II + III028 第二代基因工程是指【C】A途径工程B代谢工程C蛋白质工程DRNA 基因工程E细胞器基因工程029 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【C】A重组质粒渗透至细胞外B重组质粒被细胞内核酸酶降解C重组质粒在细胞分裂时不均匀分配D重组质粒杀死受体细胞E重组质粒刺激受体细胞提高其通透性030利用毛细管作用原理,将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【D】AWestern 印迹转移技术BNorthern 印迹转移技术C基因的表现型分析法DSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中.mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。

在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是起始密码AUG,另一个是【C】A启动子B调节基因CSD序列D终止子二、填空题答案1、Ⅱ型限制性内切酶可特异性地识别呈双重螺旋对称结构的特定双链DNA序列并进行切割。

如Bst BⅠ(TT CGAA)消化可产生含5 ′CG 3′的5′磷酰基端黏性末端末端,PstⅠ(CTGCA G)消化可产生5′TGCA 3′的3′-OH端黏性末端,而SmaⅠ(CCC GGG)消化产生平末端。

2、识别顺序相同但切割位点不同者称同位酶,识别顺序与切割方式均相同者称同裂酶,来源与识别顺序均不同,但切割后形成的限制性片段有相同的粘性末端,称同尾酶。

3、受体细胞经过一些特殊方法(如:CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许有外源DNA的载体分子通过,这种细胞称为感受态细胞。

4、在翻译过程中,mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。

在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是起始密码AUG ,另一个是SD序列。

5、在提取分离DNA的过程中,加入酚-氯仿、去垢剂或酶的目的是使蛋白质变性或水解,除去蛋白质,使用金属离子螯合剂如EDTA等的原因是细胞内有金属离子,如Mg2+,是酶活性的辅助因子,会使DNA被DNase分解,故除去使DNase活性的Mg2+以保护DNA不被变性或降解。

在小批量碱变性提取质粒过程中加入醇溶液的目的是是DNA变性沉淀,并除去蛋白质、糖类等其他水溶性杂质,使之分离,加入Rnase的目的是除去DNA 沉淀中的RNA,是凝胶电泳检测时条带更明显。

6、PCR的全称是聚合酶链式反应,它是一种在体外模拟DNA复制方式选择性地扩增DNA特殊区域的技术。

它是在四种脱氧核苷三磷酸存在下,以寡聚核苷酸为引物及单链DNA 为模板,经DNA聚合酶催化合成DNA互补链的过程,其基本反应步骤为高温变性、低温退火和适温延伸,并循环n次,达到扩增目的。

7、采用光导原位合成或微量点样等方法,将大量生物大分子或其他生物样品有序地固化于支持物表面,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量的技术称为生物芯片技术,根据固定的探针不同,可分为基因芯片、蛋白芯片、细胞芯片和组织芯片。

该技术具有高通量、快速高效、高度灵敏等特点。

8、根据Southern blot的结果可以说明被检测样品中的DNA及其含量,了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等,Northern blot 则用于检测样品中是否含有基因的转录产物(mRNA)及其含量,而Western blot的结果可以明被检测基因在蛋白质水平上的表达状况。

9、基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系称为表达系统。

10、用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的植物组织或者细胞中,这一方法称为基因枪法。

基因工程课程习题问答题1、基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些?切、接、转、增、筛(检)(1)切——获得DNA片段,取得目的基因;载体的选择与制备。

方法:从生物基因组中分离得到——基因组DNA ——>酶切产物从总RNA中分离得到mRNA ,再逆转录得到cDNA 人工合成——化学合成;PCR(聚合酶链式反应)(2)接——DNA片段和载体DNA在体外连接,形成重组子。

(3)转——将重组的DNA引入宿主细胞方式:转化——某一基因型细胞从周围介质中吸收另一基因型细胞的DNA,而使其基因型和表型发生相应变化的现象;转染——除去蛋白质外壳的病毒核酸感染细胞或原生质体的过程;转导——用噬菌体做载体,将一个细胞的基因传递给另一个细胞的过程。

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