化妆品微生物五项检测
化妆品微生物检验标准
化妆品微生物检验标准一、菌落总数菌落总数是指化妆品中可培养的微生物总数，包括细菌、霉菌和酵母菌等。
这些微生物可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。
菌落总数是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映化妆品受污染的程度。
二、霉菌和酵母菌总数霉菌和酵母菌是常见的真菌，在化妆品中可能污染原料或生产过程中。
霉菌和酵母菌大量繁殖会导致产品变质，对皮肤产生不良影响。
因此，对霉菌和酵母菌总数的检测是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
三、耐热大肠菌群耐热大肠菌群是指一群嗜热、不产气的革兰氏阴性杆菌，其中包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属等。
在大肠杆菌中，有一种不耐热的“大肠菌群”是食品污染的指示菌。
耐热大肠菌群可以反映肠道致病菌污染的可能性。
四、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是一种常见的革兰氏阳性球菌，是一种常见的细菌性病菌。
耐热性较强，对食品和化妆品的污染具有一定危险性。
因此，对金黄色葡萄球菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
五、铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，是一种条件致病菌，可引起皮肤感染和败血症等。
铜绿假单胞菌在化妆品中是一种常见的污染菌，对化妆品的卫生质量有一定影响。
因此，对铜绿假单胞菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
六、细菌总数细菌总数是指化妆品中可培养的细菌总数，包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。
这些细菌可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。
细菌总数可以反映化妆品受污染的程度。
七、粪大肠菌群粪大肠菌群是指一群能够产气的肠杆菌科细菌，主要分布于动物粪便和自然界中。
在化妆品中，粪大肠菌群的检出可能提示产品受到肠道致病菌的污染，具有潜在的危险性。
因此，对粪大肠菌群的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
化妆品微生物五项检测
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
化妆品微生物五项检验
菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理,
在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、 pH值、需氧性质等）,1g（1mL）检样中所含菌落的总数.所得 结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和 兼性厌氧菌落总数.
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
金黄色葡萄球菌检查流程图
灰/黑色
问题2
油性样品如何处理
稀释子型表面活性剂,分子一端 是亲水基团,一端是亲油基团,常用作增溶剂和 油/水乳化剂.决定了加入的顺序.
微生物许可检验项目 问题3
检验项目
特殊用途化妆品
非特殊用途 育 化妆品 发 类
染 发 类
烫 发 类
脱 毛 类
谢谢大家
接种阳性菌计算回收率
推荐了解： 人员培训能力掌握的检验重要指标. 有条件可做视具体样品测试结果. 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状
化妆品安全技术规范微生物检测
1、选取平均菌落数在30-300之间的平皿，当只有一个稀释度的平均菌落数在此范围时，即以该 平皿菌落数乘其稀释倍数报告之。（见下图）
2、若有两个稀释度在30-300之间，则应求出两菌落总数的比值来决定，若比值≤2，应报告其平 均数，若>2，则以其中稀释度较低的平皿菌落数报告之。（见下图）
2.1 化妆品采样要求
2.1.3 固体样品
称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀， 使其分散混悬，静置后，取清液作为供试液。
使用均质器时，则采用灭菌均质袋，将上述水溶性膏、霜、粉剂等 ， 称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min~2min； 疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石 蜡， 10mL吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min~5min。
2.1 化妆品采样要求 01 02 03 04 05
应从不少于2个包装单位的取样 中共取10g或10mL
包装应无破损，检验前不得 打开 样品应置于室温阴凉干燥处，不 要冷藏或冷冻 宜先取岀部分样品做微生物检 验，再将剩余样品做其他分析
所用器皿及材料均应事先灭菌
2.1 化妆品采样要求
微生物项目，若一个样品包装内各部分为独立包装, 应当分别检验 若一个样品包装内各部分为非独立包装，应混合取样检验 若产品为不同类别的彩妆组合，应分别检验。
2.6 金黄色葡萄球菌检验方法
Baird-Parker平板：圆形，光滑，凸 起，湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘 为淡色，周围为一混浊带, 在其外层有 一透明带。用接种针接触菌落似有奶 油树胶的软度。
2.6 金黄色葡萄球菌检验方法
THANK YOU
演示完毕感谢观看
化妆品的检验方法
化妆品的检验方法
微生物检验是化妆品卫生性的重要检验方法。
微生物检验主要包括总
菌落数、大肠菌群、霉菌和酵母菌等指标的检测。
常用的微生物检验方法
有菌落计数法、膜过滤法和前处理+涂布法等。
此外，还可以使用PCR技
术对化妆品中可能存在的病原微生物进行检测。
稳定性测试是为了评估化妆品在存储和使用过程中的物理和化学稳定性。
稳定性测试主要包括外观、pH值、粘度、溶解度、离析和沉淀等指
标的测定。
稳定性测试可以确定产品的保存期限，也可以评估产品的质量
和性能。
生物学活性测试用于评估化妆品的功效和安全性。
生物学活性测试主
要包括皮肤刺激性、致敏性、眼刺激性和抗菌性等的测试。
常用的生物学
活性测试方法有皮肤刺激试验、皮肤致敏试验、眼刺激试验和抗菌试验等。
除了上述主要的检验方法外，还可以根据具体需求进行其他相关测试，如光敏性、防晒性能、抗氧化性能等。
此外，还要注意遵守产品标准和相
关法规的要求，并参考国家和国际标准组织发布的相关标准方法进行检验。
综上所述，化妆品的检验方法主要包括化学分析、微生物检验、稳定
性测试和生物学活性测试等。
通过这些检验方法，可以确保化妆品的安全性、卫生性和质量标准，保护消费者的健康和权益。
化妆品原料微生物检验标准
化妆品原料微生物检验标准一、细菌总数1.目的：评估化妆品原料的细菌污染程度，反映化妆品生产过程中的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行细菌总数的测定。
3.判定标准：细菌总数小于或等于1000 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。
二、霉菌和酵母菌总数1.目的：评估化妆品原料的霉菌和酵母菌污染程度，反映原料的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行霉菌和酵母菌总数的测定。
3.判定标准：霉菌和酵母菌总数小于或等于100 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。
三、耐热大肠菌群1.目的：检测化妆品原料中是否存在耐热大肠菌群，反映原料的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行耐热大肠菌群的测定。
3.判定标准：未检出耐热大肠菌群为合格，检出耐热大肠菌群为不合格。
四、金黄色葡萄球菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在金黄色葡萄球菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行金黄色葡萄球菌的测定。
3.判定标准：未检出金黄色葡萄球菌为合格，检出金黄色葡萄球菌为不合格。
五、铜绿假单胞菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在铜绿假单胞菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行铜绿假单胞菌的测定。
3.判定标准：未检出铜绿假单胞菌为合格，检出铜绿假单胞菌为不合格。
六、沙门氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在沙门氏菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行沙门氏菌的测定。
3.判定标准：未检出沙门氏菌为合格，检出沙门氏菌为不合格。
七、志贺氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在志贺氏菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行志贺氏菌的测定。
3.判定标准：未检出志贺氏菌为合格，检出志贺氏菌为不合格。
八、大肠埃希氏菌O157:H71.目的：检测化妆品原料中是否存在大肠埃希氏菌O157:H7，预防感染性疾病的发生。
化妆品的微生物五项检测
化妆品的微生物五项检测化妆品检测哪些微生物项目及检测方法？微生物五项：菌落总数，霉菌与酵母菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，耐热大肠杆菌检测方法：《化妆品安全技术规范》2015版。
菌落总数：《化妆品安全技术规范》2015版中第五章的2 菌落总数检验方法1 范围本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。
本规范适用于化妆品菌落总数的测定。
2 定义2.1 菌落总数Aerobic bacterial count化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。
所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和兼性厌氧菌落总数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
霉菌与酵母菌：《化妆品安全技术规范》2015版中第五章的6 霉菌和酵母菌检验方法1 范围本规范规定了化妆品中霉菌和酵母菌数的检测方法。
本规范适用于化妆品中霉菌和酵母菌的测定。
2 定义2.1 霉菌和酵母菌数测定化妆品检样在一定条件下培养后，1g 或1mL 化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养5分钟，计算所生长的霉菌和酵母菌数。
金黄色葡萄球菌：《化妆品安全技术规范》2015版中第五章的5 金黄色葡萄球菌检验方法1 范围本规范规定了化妆品中金黄金色葡萄球菌的检验方法。
本规范适用于化妆品中金黄色葡萄球菌的检验。
2 定义2.1 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。
铜绿假单胞菌：《化妆品安全技术规范》2015版中第五章的4 铜绿假单胞菌检验方法1 范围本规范规定了化妆品中铜绿假单胞菌的检验方法。
本规范适用于化妆品中铜绿假单胞菌的检验。
化妆品微生物检测标准
化妆品微生物检测标准
一、细菌总数检测
细菌总数是指化妆品中含有的细菌类微生物的总数。
细菌总数是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，也是反映化妆品被污染程度的重要指标之一。
实验原理：采用倾注平板法，将一定体积的样品注入细菌培养基中，经过培养后，细菌在培养基表面生长繁殖形成菌落，通过计数菌落数，可以推测出样品中细菌的总数。
实验步骤：
（1）将样品进行适当稀释；
（2）将一定体积的稀释液注入细菌培养基中；
（3）将培养基放入培养箱中，在适宜的温度和湿度条件下培养；
（4）观察菌落的生长情况，并进行计数。
注意事项：
（1）实验前要对手部进行消毒，避免污染样品和培养基；
（2）实验过程中要使用无菌技术和无菌器材；
（3）实验后要对培养基进行灭菌处理。
二、大肠菌群检测
大肠菌群是指一群好氧性芽孢杆菌，它们的出现意味着化妆品可能被粪便污染。
实验原理：采用滤膜法，将一定体积的样品通过滤膜过滤，将滤膜放在培养基上培养，观察是否有大肠菌群生长。
实验步骤：
（1）将样品进行适当稀释；
（2）将滤膜放在过滤器上，将稀释液过滤；
（3）将滤膜放在培养基上培养；
（4）观察是否有大肠菌群生长。
注意事项：
（1）实验前要对手部进行消毒，避免污染样品和培养基；
（2）实验过程中要使用无菌技术和无菌器材；
（3）实验后要对培养基进行灭菌处理。
三、肠道致病菌检测
肠道致病菌是指能够引起肠道疾病的细菌，如沙门氏菌、霍乱弧菌等。
实验原理：采用生化反应和血清学试验等方法，对样品中的肠道致病菌进行检测。
化妆品微生物五项检测2024
化妆品微生物五项检测引言概述：化妆品作为人们日常生活中重要的美容产品，需要保证其在使用过程中不会对消费者的健康造成任何影响。
微生物污染是影响化妆品安全性的重要因素之一，因此进行化妆品微生物五项检测是确保化妆品质量和安全性的重要措施之一。
本文将以化妆品微生物五项检测为主题，分为引言概述、正文内容、总结三个部分进行详细阐述。
正文内容：一、化妆品微生物五项检测的重要性1.化妆品微生物污染的危害a.细菌、真菌和其他微生物的存在可能引发消费者的过敏反应和感染疾病，对健康构成威胁。
b.微生物生长繁殖会引起化妆品质地、外观和气味等方面的变化，降低其市场竞争力。
2.化妆品微生物五项检测的作用a.确保化妆品的质量和安全性，防止微生物污染问题的发生，保护消费者的健康和权益。
b.根据国际和国内相关标准，对化妆品进行规范检测，提高产品合规性，增强企业竞争力。
二、化妆品微生物五项检测的内容1.总大肠菌群检测a.大肠菌群是一类肠道菌的总称，其存在可能暗示化妆品产品受到了污染。
b.通过培养和定量方法检测化妆品中的大肠菌群数量，判断其是否超过国家标准规定。
2.霉菌和酵母菌检测a.霉菌和酵母菌是化妆品微生物污染的主要源头之一，其生长和繁殖会导致产品质量降低。
b.采用传统培养法或分子生物学方法检测霉菌和酵母菌的数量和种类，评估是否达到规定限值。
3.致病菌检测a.化妆品中的致病菌可能导致消费者感染疾病或其他健康问题。
b.采用PCR、ELISA等方法检测化妆品中常见的致病菌，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
4.毒素检测a.某些微生物会产生毒素，即使微生物数量较少，也可能对消费者的健康造成严重影响。
b.利用液相色谱法、质谱法等技术检测化妆品中可能存在的毒素，评估其安全性。
5.防腐剂有效性检测a.防腐剂是化妆品中的重要成分，帮助抑制微生物的生长和繁殖。
b.通过测定防腐剂的最小抑菌浓度或接种存活数来评估防腐体系的有效性。
总结：化妆品微生物五项检测是保证化妆品质量和安全性的重要手段。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
革兰氏染色操作流程精品来自件保证检验结果正确设备： 恒温培养设备 高压灭菌器（验证） 超净工作台（生物安全柜） 均质器(旋涡混合器) 天平（0.1g） 显微镜（可要可不要无硬性要求）
精品课件
常规洁净工作台设置
精品课件
目前大部分微生物实验室布局
精品课件
人员操作方面： 无菌操作，避免污染； 一定专业技术或工作经验（招聘与外部审核时） 相互协作； 测试结果的证明。
精品课件
铜绿假单胞菌 检验操作流程
未检出2天，检出4天
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假
单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿 脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐， 在 42℃±1℃条件下能生长。
该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血 症等。在自然界中分布甚广，空气、水、土壤
菌落总数的测定便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品 进行卫生学总评价的综合依据。
精品课件
测试流程
48小时出结果（30-300）：
供试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
精品课件
数据 处理
检查结果、 观察与计数
TTC亦不可多加会抑制菌落生长
为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂 吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌 存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）化妆品检样在一定条件下培养后，1g或 1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判 明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎 红培养基上，置28℃±2℃培养5d，计算所生长的霉菌 和酵母菌数。（5-50）
精品课件
灰/黑色
Baird Parker’s平板
血浆凝固酶试验
精品课件
血浆凝块
甘露醇高盐琼脂
液态血浆
结果报告
凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检， 证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸， 血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色 葡萄球菌。
精品课件
霉菌和酵母菌 检验操作流程
精品课件
日常维护： 设备的计量与保证； 超净台及时清洁与杀菌（操作前后半小时）； 检验后材料的及时处理； 环境卫生（沉降菌的检测每周）。
精品课件
问题2
油性样品如何处理
稀释液生理盐水-极性溶剂、液体石蜡-非极性 溶剂、吐温80-非离子型表面活性剂，分子一 端是亲水基团，一端是亲油基团，常用作增溶 剂和油/水乳化剂。决定了加入的顺序。
精品课件
接种阳性菌计算回收率
推荐了解： 人员培训能力掌握的检验重要指标。 有条件可做视具体样品测试结果。 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状
的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方 法的有效性。
精品课件
耐热大肠菌群 检验操作流程
未检出2天，检出3-4天
耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria系
精品课件
SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
分
菌 18~24h 离 18~24h
培 36±1℃ 纯 36±1℃
养
化
无菌落或无特征菌落
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
镜检
书写检验 记录单
最终结 果判断
精品★课件铜绿假单胞菌检查流程图
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在 44.5℃培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。 该菌主要来自人和温血动物粪便，可作为粪便污染指标 来评价化妆品的卫生质量, 推断化妆品中有否污染肠道 致病菌的可能。
精品课件
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
精品课件
供试 液的 制备
增
菌 44.5±0.5℃ 检查
培 养
24-48h
结果 判断
不产酸不产气
书写检验 记录单
最终结 果判断
★粪大肠菌群检查流程图
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44.5±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
紫黑色
结果报告
根据发酵乳糖产酸产气，平 板上有典型菌落，并经证实 为革兰氏阴性短杆菌，靛基 质试验阳性，则可报告被检 样品中检出耐热大肠菌群。
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
粉红/紫 红色
SCDLP培养基
氧化酶试验
精品课件
盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
绿脓菌素试验 明胶液化 试验
精品课件
N2
硝酸盐还原产气试验 明胶液化 明胶培养基（高层）
结果报告
被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆 菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被 检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而 液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为 阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
精品课件
金黄色葡萄球菌 检验操作流程
未检出2天，检出3天
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为革兰氏阳
性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露 醇，血浆凝固酶阳性。
该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种， 能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致 败血症。
精品课件
SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
化妆品微生物五项检验
精品课件
菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理，
在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、 pH值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所 得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性 和兼性厌氧菌落总数。
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试 验
金黄色葡萄球菌检查流程图