糖含量的测定
多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法有多种,以下列举其中几种常用的方法: 1. 酚硫酸法:将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物,通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法:样品经热水溶解后,乙醇沉淀,除去其他可溶性糖及杂质的干扰,用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便,测定速度快,可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法:在一定条件下,刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物,而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外,还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
测定多糖含量测定方法

测定多糖含量测定方法
多糖含量的测定方法有多种,以下列举几种常用的方法:
1. 酚-硫酸法:将待测样品加入酚-硫酸混合液中,经强酸催化后,产生深棕色或褐色色素,根据其吸收波长测定其光密度,即可得到多糖含量。
2. 比色法:将待测样品加入反应液中,经过酸或碱催化后,与磷钨酸等试剂发生比色反应,测定吸收波长,计算多糖含量。
3. 全甘蔗多糖含量测定法:利用全甘蔗多糖的特性,在酸性条件下能与硫酸基团结合产生黄色化合物,根据其吸收波长测定光密度,计算多糖含量。
4. 中性多糖含量测定法:利用中性多糖的特性,在加酸或碱后,能够水解为单糖,利用安替比林反应或酶法,测定水解产物里的糖含量,根据比例关系计算多糖含量。
5. 光学活性低分子糖含量测定法:利用光学活性低分子糖所具有的旋光性质,通过测定样品的旋光度,计算出其中低分子糖的含量,进而计算多糖含量。
总糖含量的测定苯酚硫酸法

总糖含量的测定苯酚硫酸法
总糖含量的测定苯酚-硫酸法的实验原理为:苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490nm处(戊糖及糖醛酸在480nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。
实验材料包括葡萄糖试剂、试剂盒、浓硫酸、苯酚等,实验步骤如下:
1. 材料处理:将0.5~1g所测的材料捣碎,用适量蒸馏水、玻璃碾磨器碾磨并分次抽提,混合液离心得抽提液即样品液。
2. 标准曲线制作:取50μg/ml的己糖标准溶液0ml,0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml,0.5ml于试管中,用水补足到0.5ml,加0.3ml 5%酚溶液,混匀后快速加入1.8ml浓硫酸,振荡混匀,室温放置20min即可出现橙黄色,以第一管调零点,可于490nm处比色测定读OD值。
以糖含量为横坐标,相应的OD值为纵坐标,绘制标准曲线。
3. 样品含量测定:取0.5ml内含2~25μg糖量,同样加入0.3ml 5%酚溶液,混匀后立刻沿管壁加入浓硫酸1.8ml,振荡混匀,达室温后,可测490nm处的OD值,从标准曲线上查相应糖含量。
该方法不需要沸水浴加热,且蛋白质的存在对显色反应影响不大,故也可用于糖蛋白中的己糖测定,还可用于己糖甲基化衍生物和6-脱氧核糖、戊糖的测定。
除此之外,该方法的热量来自浓硫酸与水的混合,因此加浓硫酸时反应快,且应立即混匀,试管应大一些,以免烫手。
食品中糖含量的测定方法研究

食品中糖含量的测定方法研究糖作为一种常见的食物成分,在食品中扮演着重要的角色。
然而,过多的糖摄入对健康有害。
因此,准确测定食品中糖的含量是非常重要的。
本文就食品中糖含量的测定方法进行研究。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法是目前最常用的测定食品中糖含量的方法之一。
该方法通过将样品中的糖分离并使用色谱柱进行定性和定量分析。
高效液相色谱法有准确度高、分析速度快等优点,已经被广泛应用于食品质量检测。
二、酶法测定法酶法测定法是一种通过酶促反应来测定糖含量的方法。
该方法通过将样品与特定的酶底物反应生成可测定的产物来测定糖的含量。
酶法测定法具有反应性强、准确性高等优点,但需要较长的分析时间。
三、红外光谱法红外光谱法是一种基于糖分子对红外光的吸收和散射的特性来测定糖含量的方法。
该方法具有快速、非破坏性等特点,可以对样品进行迅速的分析。
然而,红外光谱法在某些食品样品中存在干扰物质的问题,因此需要进一步改进。
四、核磁共振法核磁共振法是一种通过测定磁共振信号来确定糖含量的方法。
该方法具有高分辨率、非破坏性等特点,可以对样品进行准确的定量分析。
然而,核磁共振法的设备昂贵且复杂,不易在所有实验室中广泛应用。
五、电化学法电化学法是一种基于糖分子在电化学反应中的电子转移特性来测定糖含量的方法。
该方法具有高灵敏度、准确性高等优点,已经成为一种常用的食品中糖含量测定方法。
然而,电化学法在某些食品样品中存在样品处理和电极选择的问题。
综上所述,食品中糖含量的测定方法有多种选择,每种方法都有其特点和局限性。
在实际应用中,我们可以根据具体情况选择合适的测定方法。
随着科学技术的不断进步,未来可能会出现更加准确和快速的测定方法,为食品质量检测提供更大的便利和贡献。
多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有很多种,以下是常用的几种方法:
1. 偏光法:利用在特定波长下,糖溶液对光的旋光性质进行测定来确定多糖含量。
常用的仪器有偏光仪和旋光仪。
2. 毛细管电泳:将糖溶液置于细毛细管中,通过电场作用,使糖分子在毛细管中迁移,并测定迁移速度来确定多糖含量。
3. 酶解法:使用特定的酶对糖进行降解,然后测定产生的小分子糖或产生的酶活力来确定多糖含量。
常用的酶有α-淀粉酶、葡萄糖氧化酶等。
4. 光谱法:利用红外光谱或核磁共振等技术,通过检测糖分子特征吸收峰或共振信号来确定多糖含量。
5. 硫酸-苯酚法:将多糖与硫酸混合,然后加入苯酚,生成可测定的色素化合物,通过比色法测定吸光度来确定多糖含量。
以上方法都是常用的多糖含量测定方法,选择适合的方法需要根据实验目的、样品性质和仪器设备的可用性等因素综合考虑。
各类糖含量的测定

糖的测定方法有很多,大致可分为三类1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,)2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。
一.总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
(一)铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4·(COOH)2+ 6K4[Fe(CN)]+ 4H2O6滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2,试剂1)1%的次甲基兰指示剂2)盐酸(水解作用)3)10%和30%的NaOH溶液4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1%铁氰化钾于锥形瓶中→加10%NaOH2.5ml加12.5 ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
蔗糖含量测定方法

蔗糖含量测定方法蔗糖含量(也称为蔗糖浓度)是指在某一种样品中蔗糖的相对浓度或百分比。
蔗糖含量测定是食品工业、制糖业、饮料业等领域中常见的分析方法之一。
下面将介绍几种常用的蔗糖含量测定方法。
1. 折射法:折射法是测定蔗糖含量的常用方法之一。
这种方法是基于溶液折射率与溶液中溶质浓度之间的关系。
蔗糖的折射率与其浓度成正比。
测定时,首先使用密度计或折射仪测得溶液的折射率,然后利用标准曲线或相关方程将折射率转换成蔗糖浓度。
2. 比重法:比重法也是一种常用的蔗糖含量测定方法。
这种方法是基于蔗糖溶液的密度与其浓度之间的关系。
测定时,首先用密度计或密度测定仪测得溶液的密度,然后使用标准曲线或相关方程将密度转换成蔗糖浓度。
3. 高效液相色谱法(HPLC):HPLC是一种高效分离和测定的方法,可以用于测定蔗糖含量。
在HPLC中,蔗糖通过液相色谱柱进行分离,并通过检测器进行测定。
由于蔗糖在色谱柱上与其他化合物有不同的保留行为,因此可以通过测定蔗糖的保留时间和峰面积来计算蔗糖含量。
4. 还原糖法:还原糖法是一种常用的蔗糖含量测定方法,其中最常用的是费林试验。
在费林试验中,蔗糖被还原为葡萄糖和果糖,然后使用漆黑酸或其他可视指示剂进行滴定。
通过测量滴定所需的试剂量,可以计算出蔗糖的含量。
5. 红外光谱法:红外光谱法是一种常用的非破坏性蔗糖含量测定方法。
在红外光谱法中,通过测量蔗糖溶液的红外光谱特征峰的强度或面积,可以计算出蔗糖的含量。
这种方法无需样品预处理,操作简单快捷。
这些方法各有优缺点,选择合适的方法需要根据实际情况进行权衡。
在实际应用中,可以根据需要和资源选择适合的蔗糖含量测定方法,并通过与标准方法的比较来确保测定结果的准确性和可靠性。
糖含量测定

植物组织中可溶性糖含量测定(1)标准曲线的制作:1%蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取。
加少量水溶解,移入100mL容量瓶中,加入浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度。
100ug/L蔗糖标准液:精确吸取1%蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶中,加水定容。
取20mL刻度试管11支,从0-10分别编号,按表27-1加入溶液和水,然后按顺序向试管内加入蒽酮乙酸乙酯试剂和5mL浓硫酸,充分振荡,立即将试管放入沸水浴中,逐管准确保温1min取出后自然冷却至室温,以空白作参比,在630nm波长下测其吸光度,以吸光度为纵坐标,以糖含量为横坐标,绘制标准曲线,并求出标准线性方程。
试剂 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10100µg/ml蔗糖标准液 0水(mL)蔗糖量(µg)0 20 20 40 40 60 60 80 80 100 100(2)可溶性糖的提取取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取-,共3份,分别放入3支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25 mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
3.显色测定:吸取样品提取液 mL于20 mL刻度试管中(重复2次),加蒸馏水,以下步骤与标准曲线测定相同,测定样品的光密度。
4.计算可溶性糖的含量(%) =(C×VT ×n×100)/(W×VS×106 )C为从标准曲线查得的糖量(ug); VT为提取液总体积(mL)VS为测定时取用的样品提取液体积(mL);n 为稀释倍数W为样品质量(g)。
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、植物组织中糖含量的测定
一、实验材料:苹果、梨、黄瓜等各种水果
二、实验目的:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主
要原料和贮存物质。
不同栽培条件,不同成熟度可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。
因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
三、实验原理:
1.糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物。
糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质,其在可见光区 620 nm 波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。
2. 酮糖在一定条件下和间苯二酚生成鲜红色物质,该物质在 480 nm 处有最大
吸收,该方法可用来测定蔗糖。
测定时先用碱与样品共热,破坏其中的还原性糖,然后用间苯二酚测定蔗糖中的果糖部分。
3. 果糖与间苯二酚、盐酸共热生成的红色络合物在480 nm处吸收峰最高。
四、试剂配置:
80 % 乙醇
2 M NaOH
30 % HCl:用36 %的浓HCl配置。
葡萄糖、蔗糖和果糖标准液(1mg/ml):用蒸馏水配置。
蒽酮试剂:150 mg蒽酮溶于100 ml 稀硫酸(76 ml 浓硫酸加入到30 ml 水中)。
0.1 % 间苯二酚:0.1g间苯二酚溶于100 ml 95 %的乙醇,避光保存。
五、实验步骤
1、提取
取0.5 g 植物组织,于2 ml 80%的乙醇中研磨后,转入两个2 ml 离心管中,75℃温浴10 min,5000g离心5 min,收集上清于10ml离心管中。
沉淀用80 % 乙醇于75℃水浴重复抽提两次,合并上清液后,用80 % 的乙醇定容至10 ml。
提取液用于可溶性总糖、果糖与蔗糖含量的测定。
注:将苹果的提取液稀释一倍。
2、可溶性总糖
取10 µl上述乙醇提取液,加入90 ul 80 % 的乙醇,加入3 ml 蒽酮试剂[150 mg 蒽酮溶于100 ml 稀硫酸(76 ml 浓硫酸加入到30 ml 水中)],90℃保温15 min ,冷却后于620 nm处测吸光值。
含量以µg·g-1鲜重表示。
用20-100 µg 的葡萄糖同法测定,作标准曲线(体系中加入20-100μl葡萄糖,再用80 % 的乙醇补足剩余体积)。
3、蔗糖
取100 µl乙醇提取液,加入200 µl 2 M NaOH,100℃煮5 min,冷却后加入2 ml 30 %的HCl, 600 µl 0.1 % 的间苯二酚(0.1g间苯二酚溶于100 ml 95 %的乙醇),80℃保温10 min,冷却后于480nm处测吸光值。
蔗糖含量以µg·g-1鲜重表示。
用20-100 µg 的蔗糖同法作标准曲线(体系中加入20-100μl蔗糖,再用80 % 的乙醇补足剩余体积)。
4、果糖含量测定
取10 µl乙醇提取液,加入190 µl 80 % 的乙醇、400 µl 0.1 % 的间苯二酚和2400µl 30 %的HCl ,80℃保温10 min,冷却后于480nm处测吸光值。
果糖含量以µg·g-1鲜重表示。
用20-100 µg 的果糖同法作标准曲线(体系中加入20-100μl果糖,80 % 的乙醇)。