分光光度计测还原糖含量-中国农大生化实验实验报告
糖含量测定_实验报告
一、实验目的1. 了解糖含量测定的原理和方法；2. 掌握DNS比色法测定还原糖及总糖含量的实验操作；3. 学习使用可见分光光度计进行比色分析；4. 了解不同样品中糖含量的变化规律。
二、实验原理1. DNS比色法测定还原糖含量：还原糖在碱性条件下与3,5-二硝基水杨酸（DNS）反应，生成橙红色的氨基化合物。
在一定浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系。
通过测定光吸收值，可以计算出样品中还原糖的含量。
2. 总糖含量测定：总糖含量可以通过测定还原糖含量来推算。
由于总糖中还原糖的比例相对稳定，因此可以通过测定还原糖含量来估算总糖含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 样品：葡萄糖、果糖、蔗糖等；- DNS试剂；- 氢氧化钠溶液；- 丙三醇；- 标准葡萄糖溶液；- 蒸馏水。
2. 实验仪器：- 可见分光光度计；- 电子天平；- 移液器；- 烧杯；- 试管；- 500mL容量瓶；- 恒温水浴锅；- 离心机。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：（1）取5个50mL容量瓶，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0mL标准葡萄糖溶液，加入蒸馏水定容至刻度；（2）向各容量瓶中加入2.0mL DNS试剂和2.0mL氢氧化钠溶液，混匀；（3）将溶液置于恒温水浴锅中，加热5分钟；（4）取出溶液，冷却至室温；（5）使用可见分光光度计在540nm波长处测定各溶液的光吸收值；（6）以葡萄糖浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）取5个50mL容量瓶，分别加入5.0mL样品溶液，加入蒸馏水定容至刻度；（2）向各容量瓶中加入2.0mL DNS试剂和2.0mL氢氧化钠溶液，混匀；（3）将溶液置于恒温水浴锅中，加热5分钟；（4）取出溶液，冷却至室温；（5）使用可见分光光度计在540nm波长处测定各溶液的光吸收值；（6）根据标准曲线，计算样品中还原糖的含量；（7）根据还原糖含量与总糖含量的比例关系，推算样品中总糖含量。
还原糖浓度测定实验报告
还原糖浓度测定实验报告糖浓度测定实验是一种常见的化学分析方法，常用于食品、制药等行业中对糖类物质进行浓度检测。
本实验旨在通过比色法来测定某种糖溶液的浓度，并利用标准曲线来计算未知样品的糖浓度。
实验所需材料包括：0.5％蔗糖溶液、1.0％蔗糖溶液、1.5％蔗糖溶液、2.0％蔗糖溶液、2.5％蔗糖溶液、浆果酮试剂、水浴、比色皿、分光光度计等。
首先，按照比例将蔗糖溶液稀释成不同浓度的溶液，制备一系列标准溶液。
本实验中采用0.5％、1.0％、1.5％、2.0％和2.5％的蔗糖溶液作为标准溶液。
每个标准溶液都可以测量多次以提高精确度。
接下来，准备浆果酮试剂，将其溶解在适量的乙醇中。
然后，取一定量的标准溶液，加入比色皿中，并加入适量的浆果酮试剂，使试剂与溶液充分反应。
注意保持比色皿内的溶液体积相同。
然后将比色皿放入水浴中，用适当的温度保持一段时间，使反应充分进行。
最后，取出比色皿，将其放置在分光光度计中，测量吸光度值。
然后，根据各标准溶液的吸光度值和已知浓度，绘制标准曲线。
选择合适的测量波长，在分光光度计中设置并记录波长。
使用波长来测量未知样品的吸光度值。
最后，通过读取标准曲线，可以将未知样品的吸光度值转换为对应的糖浓度。
根据实验得到的吸光度值，找到对应的糖浓度，从而得到未知样品中糖的浓度。
糖浓度测定实验的精确度和准确度取决于实验操作的规范性和仪器的准确性。
操作时需要注意保持试剂的纯净度和标准溶液的稳定性，避免外部因素对实验结果的干扰。
在实验报告中，应包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果分析和结论等内容。
实验结果应当和标准曲线进行比较，并给出未知样品的浓度值。
总之，糖浓度测定实验是一种常用的化学分析方法，通过比色法来测定糖溶液的浓度，利用标准曲线来计算未知样品的糖浓度。
实验操作要规范，结果要准确，并在实验报告中详细描述实验过程、结果和结论。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告还原糖的测定实验报告引言：还原糖是一类具有还原性质的糖类物质，它们能够将其他物质还原为较低的氧化态。
测定还原糖的含量对于食品、医药等领域具有重要意义。
本实验旨在通过一系列的化学反应和分析方法，测定某种食品中还原糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备首先，我们需要准备样品。
选取一种食品，如苹果汁，将其过滤并稀释至适当浓度。
确保样品中没有其他干扰物质的存在。
2. 还原糖的测定将准备好的样品分别取10ml放入两个试管中。
标记为A和B。
3. 试剂的添加在试管A中加入5ml硫酸铜溶液，并加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
4. 还原糖的反应在试管B中加入5ml硫酸铜溶液，并加入适量的还原糖试剂。
搅拌均匀后，加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
5. 比色测定待试管A和B冷却后，使用分光光度计分别测定它们的吸光度。
根据吸光度的差异，计算出还原糖的含量。
结果与讨论：通过实验，我们得到了样品中还原糖的含量。
根据试管A的吸光度，我们可以推测样品中还原糖的含量较低。
而试管B的吸光度明显高于试管A，表明样品中含有较高浓度的还原糖。
这一结果与我们的预期相符。
苹果汁中含有大量的果糖和葡萄糖等还原糖，因此我们可以得出结论，该苹果汁样品中还原糖的含量较高。
然而，我们也要注意到实验中存在的一些限制因素。
首先，我们只测定了还原糖的总含量，并没有对具体的还原糖种类进行分析。
其次，实验中的试剂和操作条件也可能对结果产生影响。
因此，在实际应用中，我们需要综合考虑多种因素，进行更为准确的分析。
结论：通过本实验的测定，我们成功地测定了某种食品中还原糖的含量。
这一实验方法简便易行，可以在食品、医药等领域中得到广泛应用。
然而，在实际应用中，我们需要注意实验条件的控制和结果的解读，以确保测定结果的准确性和可靠性。
还原糖含量的测定
2、测定样品中还原糖和总糖含量。 （1）提取样品中的还原糖： 立即用流动冷水冷却至室温 乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
立即用流动冷水冷却至室温
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。 通过本次实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作，熟悉分光光度计的使用方法。
准确称取0.1g食用面粉放置于100ml三角 然后以葡萄糖浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制出标准曲线。
准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中，加少量蒸馏水调成糊状，再加入50ml蒸馏水，摇匀，置于50℃水浴条件下20分钟，使还 原糖浸出；
瓶中，加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
还原糖
总糖
2.0
1.0
0
1.0
1.5
1.5
同时一起在沸水浴中加热5min*
冷却
立即用流动冷水冷却至室温
蒸馏水(ml)
21.5
21.5
吸光值(A540)
结果处理
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线 上查出相应的还原糖毫克数。按下列公式 计算出样品中还原糖和总糖的百分含量：
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
可 适 当 延 长 沸 水 浴 时 间 ； 若 不 显 蓝 色 ， 则 还原糖以葡萄糖含量计）。
立即用流动冷水冷却至室温
待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，用6mol/L NaOH中和至微红色，在4000rpm、5分钟条件下离心，得到的上清液转移到
还原糖和总糖的测定实验报告
还原糖和总糖的测定实验报告还原糖和总糖的测定实验报告导言：糖是我们日常生活中常见的食品成分之一，它不仅为我们提供能量，还赋予食物甜味。
然而，不同类型的糖对人体的影响是不同的。
为了更好地了解糖的含量和类型，我们进行了还原糖和总糖的测定实验。
实验目的：1. 学习使用化学方法测定食品中的还原糖和总糖含量；2. 了解不同类型糖的含量及其对人体的影响。
实验原理：还原糖是指能够还原氧化剂的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
总糖则包括还原糖和非还原糖，如蔗糖、乳糖等。
在实验中，我们将使用菲林试剂对还原糖进行定量分析，使用硫酸对总糖进行水解，然后再用菲林试剂进行测定。
实验步骤：1. 准备食品样品：我们选择了三种常见的食品作为样品，分别是苹果、饼干和牛奶；2. 进行还原糖测定：将样品研磨成粉末状，称取适量样品，加入适量的菲林试剂，加热反应，待溶液冷却后，用水稀释至一定体积，通过分光光度计测定溶液的吸光度，计算还原糖的含量；3. 进行总糖测定：将样品称取适量，加入适量的硫酸，用水稀释至一定体积，加热水浴进行水解，待溶液冷却后，用菲林试剂进行测定，计算总糖的含量。
实验结果：经过实验测定，我们得到了三种食品样品中还原糖和总糖的含量数据。
苹果中还原糖含量为X%，总糖含量为X%；饼干中还原糖含量为X%，总糖含量为X%；牛奶中还原糖含量为X%，总糖含量为X%。
讨论与分析：通过对实验结果的分析，我们可以得出以下结论：1. 不同食品中的糖含量差异较大，苹果中的糖含量较高，而饼干和牛奶中的糖含量较低；2. 还原糖和总糖的含量也存在差异，苹果中的还原糖含量较高，而饼干和牛奶中的还原糖含量较低；3. 总糖的含量比还原糖的含量高，这是因为总糖包括了还原糖和非还原糖的含量。
结论：通过本次实验，我们成功测定了苹果、饼干和牛奶中的还原糖和总糖的含量。
实验结果表明，不同食品中的糖含量存在差异，而总糖的含量比还原糖的含量更高。
这些数据对我们了解食品的营养成分和糖的类型具有重要意义。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]
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还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性，故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL1％淀粉溶液100mL0.1％糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告实验目的：通过实验，掌握还原糖的测定方法，了解还原糖在生活中的应用。
实验原理：还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在碱性条件下，还原糖能与铜离子发生氧化还原反应，将Cu2+还原为Cu+，同时还原糖被氧化为酸。
通过测定还原糖溶液对氧化铜的还原作用，可以确定还原糖的含量。
实验仪器和试剂：1. 分光光度计。
2. 玻璃烧杯。
3. 还原糖试剂。
4. 氢氧化钠溶液。
5. 硫酸铜溶液。
6. 蒸馏水。
实验步骤：1. 取一定量的还原糖溶液放入玻璃烧杯中。
2. 加入适量的氢氧化钠溶液，并混合均匀。
3. 加入适量的硫酸铜溶液，再次混合均匀。
4. 将混合溶液放入水浴中加热，使其发生反应。
5. 反应结束后，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度线。
6. 用分光光度计测定溶液吸光度，记录数据。
实验数据处理：根据实验数据，利用标准曲线法计算出还原糖的含量。
实验结果：通过实验测定，得到还原糖的含量为Xg/L。
实验结论：通过本次实验，我们成功掌握了还原糖的测定方法，并且得到了还原糖的含量。
还原糖在食品工业中有着重要的应用，我们需要进一步了解还原糖的性质和用途，为日后的实际应用提供参考。
实验注意事项：1. 实验过程中要注意安全，避免溶液溅出。
2. 操作仪器时要轻拿轻放，避免损坏。
3. 实验后要及时清洗玻璃器皿，保持实验台面整洁。
总结：本次实验成功测定了还原糖的含量，掌握了还原糖的测定方法。
通过实验，我们深入了解了还原糖的性质和应用，为今后的学习和工作打下了良好的基础。
希望大家能够在日常生活中多加利用所学知识，不断提高自己的实践能力。
以上是本次实验的实验报告，谢谢！。
分光光度计测还原糖含量实验报告
分光光度计测还原糖含量实验报告
实验目的：
测定样品中还原糖的含量，通过分光光度计的测量结果，分析样品的质量和纯度。
实验步骤：
1. 准备工作：将所需实验器材和试剂准备齐全，包括分光光度计、试剂瓶、样品瓶等。
2. 样品处理：将待测样品加入适量的蒸馏水中，并进行适当的稀释。
确保样品浓度在分光光度计的测量范围内。
3. 标准曲线制备：选取不同浓度的还原糖标准溶液，分别加入试管中。
使用分光光度计测定每个标准溶液的吸光度，并记录数据。
4. 测量样品：使用分光光度计测量样品溶液的吸光度，并记录数据。
5. 计算还原糖含量：根据标准曲线的吸光度和浓度关系，计算样品中还原糖的含量。
实验结果：
根据所测得的还原糖标准溶液和样品溶液的吸光度数据，绘制标准曲线。
通过标准曲线，计算出样品中还原糖的含量。
结果显示样品中的还原糖含量为X g/L。
根据实验要求，可以对样品的质量和纯度进行评估。
实验讨论：
在实验过程中，需要注意保持实验环境的稳定和准确。
避免外界
因素对实验结果的影响，如光线、温度等。
此外，还需注意样品的处理和稀释过程中的准确性和精确性，以确保实验结果的可靠性。
实验结论：
通过分光光度计测量还原糖含量的实验，可以得出样品中还原糖的含量。
该实验方法简单快捷，结果准确可靠，可用于样品质量和纯度的评估。
然而，仍需注意实验过程中的误差来源和控制，以获得更准确的结果。
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将数据代入公式，得
（1）还原糖含量=【0.0531*15*100/(1*1000)】*100%=7.96%
（2）还原糖含量=【0.0525*15*100/(1*1000）】*100%=7.88%
（3）平均值=（7.96%+7.88%）=7.92%
4．为什么还原糖与3,5-二硝基水杨酸溶液要先反应后稀释？
因为稀释前还原糖浓度较高，并且3,5-二硝基水杨酸溶液过量，这样可以使得还原糖充分反应，如果先稀释则还原糖浓度较低，反应时间加长，速率较慢。
5．结合实际应用，你认为本实验设计有什么不合理之处？
实验中，容量瓶的使用。
参考文献：揭念芹《基础化学》2000年9月第一版2008年7月第八次印刷
结果分析：
所得两组数据的吸光度值不相同，以至于所得浓度也不相同，其中可能存在的原因是使用具塞刻度试管稀释时存在终点标定误差。然而两组数据取平均值，使误差减小在允许范围内。
思考题：
1．比色测定法的原理及特点是什么？
原理：光吸收定律即朗伯-比尔定律，由于物质对光有选择吸收的作用且在一定浓度范围内，物质在某波长下的光吸收与其浓度成正比，所以利用标准溶液求得标准光吸收曲线，再根据所得吸光度值在标准曲线中寻找相对应的点即可知道未知溶液的浓度。光吸收简便，快速，灵敏度高，准确度较高，应用广泛。
2．植物样品中还原糖的提取
将植物样品—苹果称取1g放入研钵中，加入少量石英砂，磨成匀浆，转移到100毫升容量瓶中，用蒸馏水少量多次地清洗研钵，再将洗液转移到容量瓶中，至70-80ml，摇匀，置于80度恒温水浴中浸提半小时，其间摇匀数次，是还原糖浸出。
3．还原糖含量的测定
待上述提取液冷却到室温，过滤，滤液达十几毫升即可，取滤液1毫升放入15ml具塞刻度试管中，加入1毫升3,5-二硝基水杨酸溶液，摇匀后在沸水浴中准确加热5分钟，取出冷却后稀释到15毫升。使用722分光光度计测定OD540值。（作两个重复组取平均值）。
数据整理与计算：
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
浓度mg/ml
0.0000
0.0133
0.0400
0.0667
0.0933
0.1200
0.1333
0.0531
0.0525
吸光度
0.000
0.063
0.254
0.456
0.658
0.839
0.941
0.354
0.350
从标准曲线中查出样品的OD540值对应的还原糖量A（mg/ml），然后按下列公式计算样品中还原糖含量。
2．比色测定法中为什么要设空白，设空白时要注意什么？
消除溶液中其他因素的影响，设置空白时要注意只有葡萄糖浓度一个自变量变化，保证其他量均相同。
3．试分析一下样品的稀释倍数是如何确定的以及对测定结果的影响。
实验原理中讲到，在一定浓度范围内，吸光度与还原糖含量呈正比，由由于吸光度要控制在0.2至0.8之间，所以所需浓度便可知，即可通过稀释溶液实现。如果不在范围内，则超出呈正比的范围，所得浓度就会不准确。
实验步骤：
1．标准曲线的制作
取7只15ml具塞刻度试管，编号，分别加入葡萄糖标准液0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.0毫升，然后用移液器向各试管加蒸馏水，使最后体积为1.0毫升，摇匀，再各加入3,5-二硝基水杨酸溶液1毫升，摇匀，在沸水浴中准确加热5分钟，取出冷却至室温，用蒸馏水稀释至15毫升混匀，用分光光度计在540nm下测定消光值。以消光值为纵坐标，葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。
实验报告
实验名称：班级：
实验人：实验时间：
研究背景与目的：掌握还原糖含量测定的方法之一的3,5-二硝基水杨酸比色法，熟悉722分光光度计的主要用途、工作原理及使用流程。
实验原理：已知在植物体内含有一定量的还原糖，利用还原糖的还原性，使其与3,5-二硝基水杨酸反应，生成有吸光性的3-氨基-5硝基水杨酸。在某浓度范围内，该物质在540nm下的光吸收与还原糖含量成正比，通过测定该物质的消光值，查对标准曲线，便可得样品中还原糖含量。
仪器与试剂：722光栅分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）
电热恒温水浴锅（型号：双列八孔标号：09035天津市中环实验电炉有限公司）
电磁炉
架盘天平
具塞刻度试管15ml*9
移液器100ul—1000ul
容量瓶100ml*9
烧杯
研钵
漏斗
2mg/ml葡萄糖标准液
10mg/ml 3,5-二硝基水杨酸溶液
蒸馏水
孙英《分析化学实验》2009年3月第一版
袁静明赵强《3,5——二硝基水杨酸法测定葡萄糖方法的改进》（山西大学学报（自然科学版））1986年01期
722分光光度计的使用说明/view/92586d37ee06eff9aef8079b.html
实验小结：
这是第一次的生物化学实验，与同伴的配合中仍然存在着默契程度不足的问题，相信在日后的实验中会有所改进，其次，由于在实验前没有做相应的准备工作，所以实验时有些手忙脚乱，并且对实验流程不是十分熟悉，由此可见做实验前的准备工作的重要性。另外，此次实验更加加深了我对722分光光度计广泛应用的理解，为日后其他物质含量的测定奠定了基础。