（TOC约束理论）干细胞常用实验技术
(TOC约束理论)TOC约束理论约束理论简介
约束理论简介约束理论（TheoryofConstraints，简称TOC）是戈德拉特博士（Dr.EliyahuM.Goldratt）在他的优化生产技术（OptimizedProductionTechnology，简称OPT）的基础上发展起来的。
戈德拉特最初开发的OPT软件用了有限能力排程、车间控制和决策支持，由一家叫CreativeOutput公司经销。
由于戈德拉特把重点从经销软件转移到强调管理哲理和培训教育上，他被迫离开了这家公司。
因此，当前存在早期以OPT命名的商品软件和戈德拉特博士进一步发展的OPT哲理或TOC，不要混淆。
OPT有9条基本原则，这些原则在约束理论中得应用。
它们是：1.重要的是平衡物流，不是平衡能力；2.非瓶颈资源的利用率是由系统的其它约束条件决定的，而不是由其本身能力决定的；3.让一项资源充分开动运转起来同使该项资源带来效益不是同一一个涵义；4.瓶颈资源损失一小时相当于整个系统损失一小时，而且是无法补救的；5.想方设法在非瓶颈资源上节约下一小时以提高生产率只是一种幻想，非瓶颈资源不应满负荷工作；6.产量和库存量是由瓶颈资源决定的；为保证瓶颈资源负荷饱满并保证企业的产出，在瓶颈工序和总装配线前应有供缓冲用的物料储备。
瓶颈工序前可用拉式作业，其后可用推式作业。
7.传送批量可以不等于甚至多数情况是不应等于加工批量；8.批量是根据实际情况动态变化的，而不是固定不变的；加工批量应当是一个变数；9.只有同时考虑到系统所有的约束条件后才能决定加工件计划进度的优先级。
提前期只是排进度的结果。
TOC是在OPT的基础上发展起来的，它是一种在能力管理和现场作业管理方面的哲理，把重点放在瓶颈工序上，保证瓶颈工序不发生停工待料．提高瓶颈工作中心的利用率，从而得到最大的有效产出。
根据不同的产品结构类型、工艺流程和物料流动的总体请况，设定管理的控制点。
约束是多方面的，有市场、物料、能力、工作流程、资金、管理体制，员工行为等，其中，市场、物料和能力是主要的约束。
干细胞定向分化的实验技巧
干细胞定向分化的实验技巧干细胞是具有自我更新和分化为多种细胞类型潜能的细胞群体。
干细胞定向分化是指将未分化的干细胞诱导分化为特定细胞类型的过程。
这项技术在医学研究和临床应用中具有巨大的潜力，可以用于组织工程、再生医学和疾病治疗等领域。
在干细胞定向分化的实验中，一些关键的技巧和方法是必不可少的。
本文将介绍一些常用的干细胞定向分化实验技巧。
1. 干细胞培养和扩增在进行干细胞定向分化实验之前，首先需要培养和扩增干细胞。
常用的干细胞包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞（iPS细胞）。
在培养过程中，需要提供适当的培养基和生长因子来维持干细胞的自我更新和增殖能力。
在扩增时要注意细胞的密度控制，以避免细胞在过度拥挤的环境中产生自发分化。
2. 诱导分化因子的选择和优化干细胞定向分化的关键是选择合适的诱导分化因子。
对于每种分化类型，诱导因子的选择和浓度需要进行优化。
通常，这些诱导因子可以是细胞因子、转录因子或化学物质。
例如，要将干细胞定向分化为神经细胞，可以添加神经生长因子等相关因子。
在优化过程中，可以通过调整因子的浓度、处理时间和培养条件来实现更有效的定向分化。
3. 细胞外基质的使用细胞外基质（ECM）是一种提供细胞黏附和信号传导的支持物质。
在干细胞定向分化实验中，使用细胞外基质可以模拟体内的微环境，促进特定细胞类型的定向分化。
常用的细胞外基质包括胶原蛋白、纤维蛋白和海藻酸。
选择合适的细胞外基质可以提高定向分化的效率和特异性。
4. 流式细胞术分析流式细胞术是一种常用的细胞分析方法，可以用来检测和分离不同细胞类型。
在干细胞定向分化实验中，可以利用流式细胞术来检测和定量特定细胞表面标记物的表达。
通过标记特定蛋白或分子，可以确定定向分化的效率和细胞类型的纯度。
流式细胞术还可以用于分离和纯化特定细胞群体，以进一步进行后续实验。
5. 功能性分析在干细胞定向分化实验中，除了表面标记物的表达外，还需要进行功能性分析来验证定向分化的效果。
约束理论(TOC)
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 原则6:瓶颈控制了库存和产销率
– 产销率指的是单位时间内生产出来并销售出去的产品 所创造的利润额
– 从平衡物流的角度出发，应允许在非关键资源上安排
适当的闲置时间
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 原则4:瓶颈上一个小时的损失则是整个系统的 一个小时的损失
– 生产时间包括调整准备时间和加工时间。但在瓶颈 资源与非瓶颈资源上的调整准备时间的意义是不同 的。而如果在瓶颈资源上节省一个小时的调整准备 时间，则将能增加一个小时的加工时间，相应地， 整个系统增加了一个小时的产出
• OPT的计划与控制步骤 • “鼓”、“缓冲器”和“绳子”
– OPT中的提前期是批量、优先权和其它许多因素的 函数，是编制作业计划产生的结果
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 目前理论界对OPT认识还不一致,存在着 各种看法,主要包括
– 把OPT当做一种新的计划思想
– 作为一种作业计划的仿真语言
– 作为生成MPS、物料和能力需求计划及详细 计划的一个软件包
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约束理论(TOC)
约束理论的理论基础─ OPT
• OPT的一些重要概念 • OPT的九条原则 • OPT的计划与控制─DBR系统
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约束理论(TOC)
OPT的一些重要概念
• 瓶颈与非瓶颈资源
二级物流师基础名词解释-TOC约束理论-物流师考试.doc
2014年二级物流师基础名词解释:TOC约束
理论-物流师考试
2014年物流师备考阶段，特为大家整理总结2014年二级物流师基础名词解释，供大家参考学习，希望能够帮到大家！
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TOC约束理论
约束理论(theory
of
constraints)简称TOC，通常称之为最优生产技术OPT的软件和技术也属于TOC的范畴。
TOC提出不同的指导思想，首先将产品与过程信息合起来表示，以减少信息容量。
其次，不是对所有资源同时进行排序和负荷分配，而是先找出生产系统中的瓶颈(或称约束)、然后只对瓶颈资源进行排序和资源分配，最后根据对瓶颈资源的排序来对其他有多余容量的资源进行排序。
这样，不仅大大的减少了排序与资源负荷分配的难度，而且这两者可以同时完成，大大缩短了排序时间。
所以这种方法也称为同步制造。
精编【TOC约束理论】TOC制约法
【TOC约束理论】TOC制约法xxxx年xx月xx日xxxxxxxx集团企业有限公司Please enter your company's name and contentv约束理论（制约法）指约束管理/约束理论（theory of constraints ，TOC) 。
简单的讲，约束理论是关于企业应作哪些变化以及如何最好地实现这些变化的理论。
具体一些，约束理论是这样一套管理原则──帮助企业找出目标实现过程中存在的障碍，并实施必要的改变来消除这些障碍。
约束理论认为，对于任何一个系统来说，如果它的投入/产出过程可以按环节或者阶段进行划分，而且一个环节的产出依赖于前面一个或多个环节的产出的话，那么，这个系统最终的产出将受到系统内生产率最低的环节的限制。
换言之，任何一个链条的牢固程度取决与它最薄弱的环节。
在论及生产制造企业时，约束理论认为企业的目标就是取得更多的利润。
为实现这一目标，可以有三条途径：增加产销率，减少库存，减少运营费用。
这三条途径中，正如约束理论奠基者Dr. Goldratt所说，减少库存和减少运营费用会碰到最低减少到0的限制，而对于通过提高产销率来取得更多利润的可能性，则是无穷无尽的。
此外，约束理论还发展出一系列工具，来帮助企业重新审视自己的各种行为和措施，看它们对于企业目标的实现产生了怎样的有利或不利的影响。
TOC是什么？TOC是Theory of Constraints的简称，中文译为“约束理论”。
美国生产及库存管理协会(APICS)又称它为约束管理(Constraint Management)。
TOC是怎么发展出来？TOC是由以色列的一位物理学家Eliyahu M. Goldratt博士所创立的。
他的第一本有关TOC的著作于1984年出版，书名为“目标”(The Goal)。
该书以小说的行文写成，描述一位厂长应用TOC在短时间内将工厂转亏为盈的故事。
因为该书所描述的是许多工厂都普遍存在的问题，因此该书出版之后，读者甚广，并译成13国语言，成为全球的畅销书，销售量在200万册以上，TOC因而流传。
约束理论(TOC)
约束理论（TOC）TOC(Theory ofconstraints)，中文译为"瓶颈理论"，也被称为制约理论或约束理论，由以色列物理学家高德拉特(Eliyahu M. Goldratt)博士创立，与精益生产、六西格玛并称为全球三大管理理论;其核心观点为立足于企业系统，通过聚焦于瓶颈的改善，达到系统各环节同步、整体改善的目标。
约束理论是关于企业应作哪些变化以及如何最好地实现这些变化的理论。
具体一些，约束理论是这样一套管理原则──帮助企业找出目标实现过程中存在的障碍，并实施必要的改变来消除这些障碍。
约束理论认为，对于任何一个系统来说，如果它的投入/产出过程可以按环节或者阶段进行划分，而且一个环节的产出依赖于前面一个或多个环节的产出的话，那么，这个系统最终的产出将受到系统内生产率最低的环节的限制。
换言之，任何一个链条的牢固程度取决与它最薄弱的环节。
在论及生产制造企业时，约束理论认为企业的目标就是取得更多的利润。
为实现这一目标，可以有三条途径：增加产销率，减少库存，减少运营费用。
这三条途径中，正如约束理论奠基者Dr. Goldratt所说，减少库存和减少运营费用会碰到最低减少到0的限制，而对于通过提高产销率来取得更多利润的可能性，则是无穷无尽的。
此外，约束理论还发展出一系列工具，来帮助企业重新审视自己的各种行为和措施，看它们对于企业目标的实现产生了怎样的有利或不利的影响。
TOC理论的内容TOC认为，任何系统至少存在着一个约束，否则它就可能有无限的产出。
因此要提高一个系统 (任何企业或组织均可视为一个系统)的产出，必须要打破系统的约束。
任何系统可以想像成由一连串的环所构成，环与环相扣，这个系统的强度就取决于其最弱的一环，而不是其最强的一环。
相同的道理，我们也可以将我们的企业或机构视为一条链条，每一个部门是这个链条其中的一环。
如果我们想达成预期的目标，我们必须从最弱的一环，也就是从瓶颈(或约束)的一环下手，才可得到显著的改善。
TOC约束理论概述
TOC约束理论概述引言TOC（Theory of Constraints，约束理论）是由以色列物理学家艾略特·戴克斯特勒（Eliyahu M. Goldratt）提出的一种管理理论。
TOC的基本理念是认为系统的整体绩效受到系统内的某个约束因素的制约，解决这个约束即可提升整体绩效。
TOC的基本原理1.约束因素的存在：TOC认为在系统中必定存在一个或多个约束因素，限制着整体系统的绩效。
2.优化约束：TOC的核心策略是优化约束因素，通过提升约束因素的绩效来提升整体系统的绩效。
3.子约束：TOC指出系统中可能存在多个约束因素，形成约束链，需要依次解决这些子约束。
TOC的关键概念1.吞吐量（Throughput）：指的是系统在单位时间内生产的产品数量，是衡量系统绩效的关键指标。
2.存货（Inventory）：指的是系统中尚未完成的产品数量，存货过多会降低系统绩效。
3.操作费用（Operating Expenses）：指的是系统运转的成本，TOC鼓励降低操作费用来提升系统盈利。
4.约束（Constraint）：指的是限制系统整体绩效的因素，TOC的关键是找出约束并加以解决。
TOC的应用领域TOC最初是在生产领域应用最为广泛，例如生产制造、供应链管理等。
随着TOC理论的不断完善，其应用领域也逐渐扩展到服务行业、项目管理等领域。
TOC的实践方法1.五步过程：TOC提出了一个解决约束的五步过程，分别是：识别约束、决定如何利用约束、调整其它部分以适应约束、神经中枢改进、回到第一步。
2.批量生产管理：TOC提倡采用小批量生产的方式，通过缩短生产周期和减少存货来提升系统效率。
3.整体系统优化：TOC强调系统整体的优化，而不是片面优化某个环节，强调系统整体协同效应。
TOC的发展TOC理论得到了广泛应用和发展，形成了一系列的工具和方法，并衍生出应用于项目管理、营销管理等领域的相关理论。
结语TOC约束理论提供了一种系统思维的管理方法，帮助组织找到瓶颈并加以解决，从而提升整体绩效。
TOC约束理论基础知识简介
TOC(Theory of Constraints)约束理论简介约束理论（TheoryofConstraints，简称TOC）是戈德拉特博士（Dr.EliyahuM.Goldratt）在他的优化生产技术（OptimizedProductionTechnology，简称OPT）的基础上发展起来的。
戈德拉特最初开发的OPT软件用了有限能力排程、车间控制和决策支持，由一家叫CreativeOutput公司经销。
由于戈德拉特把重点从经销软件转移到强调管理哲理和培训教育上，他被迫离开了这家公司。
因此，当前存在早期以OPT命名的商品软件和戈德拉特博士进一步发展的OPT哲理或TOC，不要混淆。
OPT有9条基本原则，这些原则在约束理论中得应用。
它们是：1.重要的是平衡物流，不是平衡能力；2.非瓶颈资源的利用率是由系统的其它约束条件决定的，而不是由其本身能力决定的；3.让一项资源充分开动运转起来同使该项资源带来效益不是同一一个涵义；4.瓶颈资源损失一小时相当于整个系统损失一小时，而且是无法补救的；5.想方设法在非瓶颈资源上节约下一小时以提高生产率只是一种幻想，非瓶颈资源不应满负荷工作；6.产量和库存量是由瓶颈资源决定的；为保证瓶颈资源负荷饱满并保证企业的产出，在瓶颈工序和总装配线前应有供缓冲用的物料储备。
瓶颈工序前可用拉式作业，其后可用推式作业。
7.传送批量可以不等于甚至多数情况是不应等于加工批量；8.批量是根据实际情况动态变化的，而不是固定不变的；加工批量应当是一个变数；9.只有同时考虑到系统所有的约束条件后才能决定加工件计划进度的优先级。
提前期只是排进度的结果。
TOC是在OPT的基础上发展起来的，它是一种在能力管理和现场作业管理方面的哲理，把重点放在瓶颈工序上，保证瓶颈工序不发生停工待料．提高瓶颈工作中心的利用率，从而得到最大的有效产出。
根据不同的产品结构类型、工艺流程和物料流动的总体请况，设定管理的控制点。
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（TOC约束理论）干细胞常用实验技术实验室内部的人胚胎干细胞protocol人类胚胎干细胞H1和H9维持方案一、试剂配制饲养层细胞培养基Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM)DMEM (GIBCO 11960-044) 450mlFCS GIBCO 16000-044 50ml 10%Pen/Strep 2.5ml 50IU/mlL-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml人类胚胎干细胞培养基HESC-MediaKO-DMED GIBCO 10829-018 480mlKOSR GIBCO 10828-028 120ml 20%10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mML-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mMPen/Strep 3ml55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mMITS GIBCO 41400-045 6ml4-80C避光保存。
用前每50毫升加200-400ng bFGF细胞冻存培养基FBS-DMSOFCS GIBCO 16000-044 9ml 90%DMSO SIGMA D2650 1ml 10%细胞消化液Trypsin-EDTA0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mMPBS(-) 14190-144 8mlMEF细胞有丝分裂终止液Mito CMitomycin C 0.2mg 0.05mg/mldd-H2O 15230-162 4ml避光保存。
Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM 中。
.0.1% Gelatin(用于培养皿的包被)1% Gelatin 40ml 0.1%ddH2O GIBCO 15230-162 360ml高压消毒。
二、培养方案一) 饲养层细胞的培养1、主要实验材料（1）培养液为F-DMEM。
（2）小鼠周龄为7～8w的性成熟母小鼠和周龄为8w的种公鼠。
2. 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养（1）小鼠胚胎的准备1)性成熟母小鼠与种公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合笼。
2)每天早上观察母小鼠阴道口。
有乳白色或蛋黄色冻胶状物(阴道栓)即确定为怀孕。
见栓当天上午定为怀孕的0.5d。
3)取怀孕12.5～14.5d母鼠,断颈处死，无菌条件下暴露子宫。
4)用镊子提起近子宫颈端,分离子宫系膜,剪断子宫角。
5)取出整个子宫,在无菌滤纸上吸干血迹,置于有PBS或无血清DMEM平皿内。
用PBS洗涤三次,弃除表面残余血迹。
6)沿子宫系膜侧剪开子宫,取出带有胎膜的胚胎,置于另一盛有PBS 或无血清DMEM平皿内,充分洗涤,弃除表面红细胞。
7)用小镊子撕破胎膜,取出胎鼠,弃除胎膜,用PBS洗涤三次。
8)去除胚胎头部、内脏和四肢，将躯干部置于另一盛有PBS或无血清DMEM平皿内,用PBS 至少洗涤三次,充分弃除红细胞。
（2）小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养二) 培养方法有两种: 组织块培养法和单细胞悬液培养法。
组织块培养法：1) 用无菌眼科小剪刀或刮胡刀片将鼠胚躯干剪(切)成1mm3以下的碎块,吸置于离心管内。
2) 室温下静置5～10min, 弃上层液，留下胚胎组织碎块。
3) 向装有鼠胚组织碎块的离心管内加入1ml消化液,轻轻吹吸30sec。
4) 加入等体积的培养液终止消化。
室温下静止5-10min。
5) 弃上清液,留下鼠胚组织块沉淀物。
6）加入5ml培养液重新悬浮鼠胚组织块,移入培养瓶内。
每5个鼠胚的组织块可使用1个100ml的培养瓶。
7) 补加适量的培养液,使组织块悬浮液能均匀分布于培养瓶表面。
37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。
8) 培养开始的前两天不要晃动培养瓶。
第三天见组织块附着培养瓶表面, 周围生长出细胞。
补充培养液或更换培养液,继续培养。
每天观察。
9) 待细胞连成一片时,即可消化。
消化时弃培养液,用PBS洗涤一次；加适量消化液（以能覆盖细胞层为度），在室温下作用大约30sec；弃消化液，让残余消化液继续作用。
轻敲培养瓶底, 当细胞层出现裂隙时，加入培养液终止消化。
或在倒置显微镜下观察，当细胞与细胞之间分开即可终止消化。
10）补加培养液，轻轻吹打均匀，吸置离心管内，静置5～10min。
11）上层为单细胞悬液,下层为组织块沉淀。
将上层单细胞悬液轻轻吸置另一离心管内,弃组织块。
12）以800～1000rpm 5min离心，弃上清。
加入培养液,重新悬浮细胞沉淀。
以1:3比例传代。
采用3～5代细胞作为饲养细胞。
单细胞悬液培养法：1)～5）步骤同组织块培养法1)～5) 步骤。
6)重复组织块培养法3）～4）步骤5～6次,即重复消化鼠胚组织块5～6次。
每次消化后都收集上层液即单细胞悬液。
最后一次消化后弃组织块。
７)将收集到的单细胞悬液离心，800～1000rpm 5min。
８)弃上清,加入培养液,轻轻吹吸,制备成均匀的单细胞悬液。
9) 移置培养瓶内。
5个鼠胚制备出来的单细胞悬液可以使用3个100ml的培养瓶。
10)补加适量的培养液，吹吸均匀。
37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。
每天观察。
11)培养2～3d后,细胞连成片,即可消化。
消化过程同组织块培养法９)步骤。
12)以1:2～1:3比例传代培养,2～3d传一代。
采用3～5代细胞作为饲养细胞。
（3）培养结果在培养MEF初始的1～2代时,杂细胞（非成纤维细胞的其他组织细胞）较多,细胞形态多样；在第三代开始时,杂细胞逐渐减少。
小鼠胚胎成纤维细胞为梭状；但连成片时,由于受杂细胞的影响,形态不够典型。
三）细胞冷冻1. 当细胞90%-100% 融合时,尤其细胞少量堆聚可冷冻。
2. 处理方法同传代培养1-8，每25 cm2 的细胞加1ml FBS-DMSO重悬细胞。
3. 每个冷冻管编号加1ml细胞悬液。
4. 置入40C1小时，放入1cm厚的泡沫盒中置入-800C过夜，置入液氮长期保存。
四）灭活饲养层细胞并备饲养层皿试剂和材料HESC Medium、PBS(+)、PBS(-)、Mito C、Trypsin-EDTA离心管、移液管Mito C处理（以25 cm2培养瓶为例）1. 需要铺皿前一天，全换液。
.2. 留2ml培养基。
3. 加40ul Mito C（10ug/ml）。
4. 培养皿底以0.1％Gelatin溶液覆盖预处理。
5. 3小时后，去培养基，处理方法同传代方法。
6. 重悬细胞，细胞计数，以、7.0×104/ cm2（MEF）铺皿。
7. 置于培养箱常规培养。
8. 15分钟后，取出皿，吹打皿中央，重新置于培养箱中培养。
五、复苏及冻存hES细胞细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。
然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。
步骤：1．从液氮中取出一管细胞；2．将冻存管置于37℃水浴中2分钟（或放到管内溶液恰好完全溶解）；3．将细胞转移到一15ml Falcon管中；4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；5．离心200g×5min；6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，吹打10次；7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；8．孵育。
冻存细胞冻存液：90％HS和10％二甲基亚砜步骤：1．1×PBS洗细胞并留少许PBS在培养皿内；2．用细胞刮刀收集细胞；3．将细胞转入15ml Falcon管内并离心200g×5min；4．弃去上清并将细胞重悬于冷的冻存液中。
5．分装于冻存管内，每管1ml；将冻存管装入Nalgen冻存盒内。
6．置－80℃过夜，第二天移入液氮。
转载自丁香园1、Stem Cell Analysis干细胞分析（功能、表型、核酸含量、边群）[London Research Institute]brief introduction：Stem Cell Analysis ,FACS Laboratory, London Research Institute干细胞分析，包括以下四方面内容：Functional AnalysisPhenotypingNucleic Acid contentSide Population analysis2、Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-Cell Stage Embryos [Nagy Lab，Mount Sinai Hospital] brief introduction：Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-CellStage Embryos[Nagy Lab，Mount Sinai Hospital]3、Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos[Nagy Lab，Mount Sinai Hospital]brief introduction：Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos Nagy Lab，Mount Sinai Hospital4、Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture Dishesbrief introduction：Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture DishesFrom the Laboratory of Dr. Allan Bradley Baylor College of Medicine, Houston, Texas5、Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks [Baylor College of Medicine]brief introduction：Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks ,Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas6、Preparing 48-Well Plate Feeders[Baylor College of Medicine]brief introduction：Preparing 48-Well Plate FeedersFrom the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas7、Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates冻存96空板中的胚胎干细胞克隆[Baylor College of Medicine] brief introduction：Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas8、In Vitro Differentiate ES cells into glial cells and neurons 胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital)brief introduction：Differentiate ES cells into glial cells and neurons ,Nagy Lab，Mount Sinai Hospital胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞9、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies 胚胎干细胞体外分化为囊胚体(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital)brief introduction：In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies ,Nagy Lab，Mount Sinai Hospital 胚胎干细胞体外分化为囊胚体10、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle胚胎干细胞体外分化成心肌细胞(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital ) brief introduction：In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle Nagy Lab，Mount Sinai Hospital11、Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos 从小鼠胚胎分离纤维原细胞Baylor College of Medicinebrief introduction：Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos , Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas12、ES Cell Subcloning Protocol 胚胎干细胞亚克隆(NIH Stem Cell Unit)brief introduction：ES Cell Subcloning Protocol, NIH ，Stem Cell Unit13、ES and TS cell freezing/thawing胚胎干细胞冻存复苏brief introduction：ES and TS cell freezing/thawing, Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系14、ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)brief introduction：ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)15、ES / MEF cell culture and electroporation of targeting construct 胚胎干细胞培养及电穿孔brief introduction：This website is an online resource for those interested in murine transgenesis. Within this site you will find information pertaining toresearch and techniques employed in the field of transgenics, including both DNA microinjection and embryonic stem cell injection.16、Electroporation of ES Cell 胚胎干细胞电穿孔[Mount Sinai Hospital]brief introduction：Electroporation of ES Cell ,Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital胚胎干细胞电穿孔，该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系17、Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC)人胚胎干细胞培养[NIH Stem Cell Unit]brief introduction：Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC),NIH Stem Cell Unit人胚胎干细胞培养，来自NIH Stem Cell Unit的材料，该网址下还有许多NIH关于干细胞的资料。