艰难梭菌生物学特性及检验
医学:艰难梭菌

01
包括其生长繁殖机制、耐药性产生的分子机制等,为
新药研发提供理论支持。
探索艰难梭菌感染的免疫机制
02 研究感染后机体的免疫应答,寻找免疫干预的有效途
径。
艰难梭菌感染与宿主细胞相互作用的研究
03
揭示艰难梭菌如何侵染和破坏宿主细胞,为治疗提供
新思路。
深入开展艰难梭菌感染的流行病学调查
01
艰难梭菌感染的流行病学特征研究
艰难梭菌感染的预防措施
勤洗手
保持手部卫生是预防感染的重要措施。在接触公共场所物品或处 理食物前,务必彻底洗手。
分餐制
避免共用餐具和食物,采用分餐制可以降低交叉感染的风险。
提高免疫力
保持健康的生活方式,包括合理饮食、适量运动和充足的睡眠, 有助于提高免疫力,降低感染风险。
艰难梭菌感染的疫苗研究进展
疫苗研发
目前针对艰难梭菌感染的疫苗正处于研发阶段。一些研究团队正在探索基于毒素的疫苗和基于菌株的疫苗,以期提供 更有效的免疫保护。
临床试验
疫苗研发完成后,需进行临床试验以评估其安全性和有效性。这些试验通常涉及一定数量的志愿者,并分为不同阶段 进行。
疫苗推广
一旦疫苗获得批准并证明其有效性,下一步就是将其推广到更广泛的人群中。这需要制定相应的接种计 划和宣传教育活动,以提高公众对疫苗的认识和接受度。
免疫治疗方法的探索
利用免疫手段激活机体免疫系统,提高抵抗力, 控制感染。
3
预防措施的改进和完善
针对流行病学调查结果,制定和实施有效的预防 措施,降低感染风险。
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感谢您的观看
了解不同地区、不同人群的感染率和传播途径,为防控提供依据。
02
艰难梭菌感染实验室诊断的研究进展

艰难梭菌感染实验室诊断的研究进展杨靖;赵建宏【摘要】艰难梭菌是一种专性厌氧革兰阳性芽孢杆菌,一般认为是环境和人类肠道中的正常菌群.过度应用抗生素、免疫抑制剂或化疗药物使耐药的艰难梭菌产毒株过度繁殖并释放毒素是导致艰难梭菌感染(Clostridioides difficile infection,CDI)的主要因素.CDI的发病率在全球范围内不断增加,尤其是高产毒株在北美地区造成了医院内的暴发流行,引起了世界范围的关注.在此对艰难梭菌的致病机制和实验室诊断方法的研究进展进行阐述,为艰难梭菌相关性腹泻的早期诊断和治疗提供新思路.【期刊名称】《临床荟萃》【年(卷),期】2018(033)005【总页数】4页(P373-376)【关键词】梭菌感染;诊断【作者】杨靖;赵建宏【作者单位】河北医科大学第二医院河北省临床检验中心,河北石家庄 050000;河北医科大学第二医院河北省临床检验中心,河北石家庄 050000【正文语种】中文【中图分类】R517.5艰难梭菌(Clostridioides difficile)是一种专性厌氧革兰阳性芽孢杆菌,一般认为是人类肠道的正常菌群。
大量应用广谱抗生素、免疫抑制剂或化疗药物后可导致该菌过度繁殖,引起艰难梭菌感染(C. difficile infection, CDI)。
近年来在欧洲和北美一些国家出现了一种艰难梭菌高产毒株027/NAP1/BI的暴发流行,所致的CDI复发率和死亡率高,耐药性强,在发达国家已成为一种严重的医疗相关性感染,造成了巨大的经济损失,引起了世界范围的广泛关注[1-3]。
对于艰难梭菌及其毒素的早期诊断和治疗可以有效降低CDI的发病率、死亡率,避免不必要的医疗资源浪费。
目前,美国食品和药物管理局(FDA)已经批准了一些用于诊断CDI的实验室检测试剂。
近十年来,CDI的流行病学发生了很大变化[4],因此迫切需要建立一套适合临床的诊断方法,来准确区分CDI与艰难梭菌定植(C. difficile colonization, CDC)。
艰难梭菌 标准

艰难梭菌标准
艰难梭菌是一种潜在致病菌,常见于环境中的土壤和水中,也可在动植物体内
生长繁殖。
在医疗卫生领域中,艰难梭菌是导致医院感染的主要病原菌之一,因其耐热、耐干、耐化学药物等特点,使得感染治疗难度较大,病情较为严重。
艰难梭菌感染通常发生在免疫功能较差的患者身上,如长期接受抗生素治疗、
免疫系统功能低下、手术后患者等。
其常见的感染症状包括腹泻、腹痛、发热、恶心、呕吐等,病情进展迅速,容易引起并发症,如肠梗阻、败血症等。
在临床治疗中,艰难梭菌感染的治疗较为困难,主要是因为该菌对常规抗生素
的耐药性较强,导致治疗效果不佳。
因此,对于艰难梭菌感染的患者,应尽早进行病原菌的培养和药敏试验,以确定最有效的治疗方案。
在治疗过程中,应避免滥用抗生素,避免引起耐药菌株的产生,同时加强支持疗法,维持患者的营养状态和免疫功能,提高机体抵抗力。
此外,对于医疗机构来说,应加强感染控制措施,避免交叉感染的发生,严格
执行手卫生、器械消毒、环境清洁等措施,有效预防和控制艰难梭菌的传播。
同时,加强对医护人员的培训,提高其对感染控制的认识和操作技能,有效降低医疗机构感染的风险。
总的来说,艰难梭菌感染是一种严重的医疗难题,需要医护人员和患者的共同
努力,通过规范治疗、有效感染控制,降低病情的发生和传播,保障患者的健康和安全。
希望未来在病原菌的研究和医疗技术的发展中,能够找到更有效的治疗方法,为艰难梭菌感染的患者带来更好的治疗效果和生活质量。
应用气相色谱法鉴定艰难梭菌

材料与方法
仪器 型气相色谱仪 四川分析仪器厂 岛津
数据处理机 厌氧罐等∀
色谱条件
选用长 内径为
的不锈钢色谱柱 填
充∗
目上海试剂厂 白色担体加
固定液为 改性聚乙二醇
采用
氢火焰检测器 氮气作载气 载气流速
Ù色
谱柱柱温 ε 汽化室温度 ε 检测室温度
ε 桥电流为
∀
试剂和培养基
乙醚
氯仿
关键词 气相色谱法 艰难梭菌
分类号
Ù
前言
应用气相色谱法检测细菌的终末代谢产物 作 为细菌的一种快速诊断的方法 国外文献早有报 道∗ ∀
我 们 应 用 此 法 鉴 定 艰 难 梭 菌 Χλοστριδ ιυ δ ιφ φ ιχιλε 的 株临床分离株和 株对照参考株 分 析它们的脂肪酸代谢产物的气相色谱图 发现它们 的色谱图非常相似 均出现乙酸 异丁酸 丁酸 异戊 酸 异己酸 丙酸 戊酸峰 其中乙酸 丁酸 异己酸峰 较高 其次为异丁酸 异戊酸峰 而丙酸峰和戊酸则 较低 结果与国外报道一致 ∀
色
均较多 而异丁酸
异戊酸
戊酸 的含量
较少 丙酸的含量则甚微∀ 其中异己酸的含量最多∀
在
时 株艰难梭菌的色谱图中均出现
一个低平的色谱峰 此峰与
等 报道的 甲
苯 酚峰相似∀
等认为 甲 苯 酚峰 己酸峰
的高低及是否出现与培养基有关 也与加入的标本
量有关∀
艰难梭菌是引起抗生素伪膜性肠炎的主要病原
菌之一 临床分离鉴定此菌按常规方法较费时费力
盛入带玻塞的试管内 加
三氟
化硼甲醇液 混匀 塞紧玻塞 置室温下过夜 反应完
毕后 再加入 ∗
氯仿 振摇提取∀
艰难梭状芽胞杆菌

2011年加拿大安大略省尼加拉郡地区爆发梭状芽孢杆菌疫情,已造成16人死亡。爆发疫情的3家医院分别为 大尼加拉总医院(Greater Niagara General Hospital),4名病人死亡;圣凯瑟琳总医院(St. Catharines GeneralHospital),10人死亡;威兰医院(Welland Hospital),2人死亡。
形态染色
艰难梭菌革兰阳性粗长杆菌.大小为(1.3-1.6)μm ×(3.6-6.4)μm.培养2日后易转为革兰阴性:芽胞 卵圆形.位于菌体的次极端。
鉴别要点
1.本菌特征:革兰阳性粗大杆菌.芽胞卵圆形,位于菌体的次极端。菌落黄色、粗糙.不产生脂酶和卵磷脂酶. 不凝固和不消化牛奶。
2.与产气荚膜梭菌的鉴别:艰难梭菌不消化牛奶.麦芽糖、蔗糖均阴性,而产气荚膜梭菌则相反。
耐药性
本菌对万古霉素或甲硝唑敏感.对氨苄西林、头孢菌素、林可霉素、克林霉素、红霉素等耐药。
诊断方法
毒素检测: 组织细胞毒素检测被认为是诊断的金标准,需时48小时,敏感性高,且能检测毒素。 细菌培养: 用环丝氨酸头孢西丁果糖琼脂培养基进行厌氧培养,需时72小时,灵敏度高且可获得菌株,不能检测毒 素。 艰难梭状芽胞杆菌谷氨酸脱氢酶检测: 谷氨酸脱氢酶是艰难梭菌与梭菌属其他细菌共同的非毒素蛋白质,采用乳胶凝集试验,操作简单快速(1545分钟),敏感性略低,且与其他厌氧菌存在交叉反应。 基因诊断: 采用聚合酶链技术可检测A毒素、B毒素、二元毒素以及高毒力的菌株,敏感性高。 胶乳(凝集)试验(latex test): 胶乳绑定抗体后,加入过滤后的粪便滤液,观察起凝集结果。 扫描试验(screening test):
艰难梭菌可产生两种毒素:肠毒素和细胞毒素。肠毒素能趋化中性粒细胞浸润回肠肠壁,释放细胞因子,导 致肠道大量失水和出血性坏死。细胞毒素能解聚肌动蛋白,损坏细胞骨架,导致局部肠壁细胞坏死,有直接损伤 肠壁作用。
艰难梭菌 标准

艰难梭菌标准
一、诊断标准
1.临床表现为腹泻、腹部不适、恶心、呕吐等症状,严重者可能出现假膜性
结肠炎等肠道感染症状。
2.实验室检查:粪便培养显示艰难梭菌阳性。
二、感染控制标准
1.严格执行手卫生,接触患者前后必须洗手,防止交叉感染。
2.对患者进行隔离,防止感染扩散。
3.对患者使用过的医疗器械、器具、物品等进行消毒处理,防止病原体残留。
4.对病房、实验室等场所进行定期清洁和消毒,保持环境卫生。
三、预防标准
1.加强个人卫生习惯,保持手部清洁,避免接触感染源。
2.合理饮食,保持营养均衡,增强免疫力。
3.医疗机构应加强病房管理,严格执行消毒隔离制度,防止病原体传播。
4.对医护人员进行培训和教育,提高对艰难梭菌感染的认知和防范意识。
四、治疗标准
1.轻度感染:可以采用口服抗菌药物如甲硝唑、替硝唑等进行治疗。
2.中度感染:需要使用抗生素进行静脉注射或口服治疗,如青霉素类、头孢
菌素类等。
3.重度感染:需要使用特殊抗生素如万古霉素等进行治疗,同时加强营养支
持和对症治疗。
4.抗感染治疗期间应注意观察患者的病情变化,及时调整治疗方案。
五、监测标准
1.对患者进行定期检查,包括血常规、大便常规、艰难梭菌培养等,及时发
现感染征象。
2.对医护人员进行定期考核和培训,提高对艰难梭菌感染的识别和处理能力。
艰难梭菌致病及诊治进展
课程名称:生理学姓名:张建华学号: 114120304学院:生命科学学院专业、班级:11应生B班艰难梭菌致病及诊治进展摘要:艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽胞梭菌,是人类肠道感染的主要致病菌,以肠道病理损伤及菌群失调为主的感染性疾病。
使用抗菌药物后可导致艰难梭菌过度生长,分泌大量毒素A(肠毒素)和毒素B(细胞毒素),通过毒素介导致病。
毒素A启动细胞损伤后,毒素B即可侵入肠黏膜,引起细胞病变,导致一系列与感染相关的临床表现。
少数强毒株艰难梭菌还可以产生二元毒素,该毒素可以导致细胞骨架破坏,增强毒素A和毒素B的作用导致严重病变。
研究发现,人和动物艰难梭菌之间具有同源性,成为人类感染艰难梭菌的传染源。
对艰难梭菌产生毒素的致病机理进行综述,为治疗艰难梭菌感染提供依据。
关键词:艰难梭菌;发病;诊断;治疗1. 艰难梭细菌艰难梭菌(Clostridiumdifficile)是动物和人肠道中的正常菌群,也是抗生素相关性腹泻病原体。
艰难梭菌感染(C.difficileinfection,CDI)和艰难梭菌相关性腹泻(C.difficile-associateddi-arrhea,CDAD)是由肠道产毒性艰难梭菌芽胞杆菌过度增殖并释放毒素引起的。
艰难梭菌是马、牛、猪肠道中的病原菌,在仔猪的疾病中,艰难梭菌的感染率高达90%[2]。
本菌引起动物以发热、腹痛、水样腹泻及伪膜性肠炎为主要症状。
在人类还可导致低蛋白血症、电解质紊乱、败血症、中毒性巨结肠、麻痹性肠梗阻及" 拇指纹" 症,甚至出现死亡。
实验室检查可见白细胞增多、C-反应蛋白增高和清蛋白降低。
[1]1.1 发病原因艰难梭菌是一种条件致病菌。
正常情况下,少量艰难梭菌存在于肠道正常菌群中,肠道其他益生菌可抑制其过度繁殖,并降解其产生的毒素,而未表现出致病性。
但长期滥用抗生素(尤其是广谱青霉素类、头孢菌素类等)后,肠道正常菌群被抑制,肠道菌群平衡被破坏,耐药的艰难梭菌大量繁殖、产生毒素而致病。
艰难梭菌
一、生物学性状
G - 短小杆菌。无芽胞,无鞭毛 ,无荚膜,有菌毛。
分解葡萄糖,产酸不产气。除宋内志贺菌 个别菌株外,均不发酵乳糖。动力阴性。
志贺菌属细菌有O和K两种抗原。O抗原是 分类的依据,藉以将志贺菌属分为4群和40余 血清型(包括亚型):
A群即痢疾志贺菌(S. dysenteriae) B群即福氏志贺菌(S. flexneri) C群即鲍氏志贺菌(S. boydii) D群即宋内志贺菌(S. sonnei)
志贺菌的抵抗力比其它肠道杆菌弱。
二、致病性与免疫性
(一)致病物质 侵袭力和内毒素,有的菌株能产生外毒素。
(二)所致疾病 细菌性痢疾。我国主要为B群和D群。 传染源:病人和带菌者 传播途径:粪-口途径 感染几乎只局限于肠道,一般不侵入血液。 典型的急性细菌性痢疾:潜伏期1~3天,突
然发病,常有发热、腹痛、脓血黏液便,伴有里 急后重(tenesmus)。
二二分离培养与鉴定分离培养与鉴定标本接种于肠道鉴别或选择培养基上标本接种于肠道鉴别或选择培养基上3737度孵育度孵育18182424小时小时挑无色半透明可以菌落挑无色半透明可以菌落做生化反应和血清做生化反应和血清学实验学实验以确定其菌群和菌型三毒力试验测定志贺菌的侵袭力可用senery试验
艰难梭菌
艰难梭菌(Clostridium difficile)
白色念珠菌(白假丝酵母 菌)
真菌性肠炎的症状
一般可无特殊症状和体征,因此诊断真菌性 肠炎有一定困难。诊断本病主人依据有长期 粘液样腹泻、便秘交替出现的病史,并经抗 生素、磺胺等久治不愈
白色念珠菌累及结肠,约有85.5%的患者出 现腹胀,泡沫样腹泻,或便秘交替出现。早 期为粘液样称便,偶有便血或带血丝,其特 点是粘稠似蛋清附于大便上,或全部粘液便。 后期为脓性或脓血样稀便,或无明显的脓血 便。出血多时为暗红色糊状粘液便。腹痛及 压痛不明显。
艰难梭菌研究现状
艰难梭菌研究现状肖艳艳;张智洁;秦晓松【摘要】艰难梭菌(Clostridium difftcile,CD)是产芽胞革兰阳性厌氧菌,产毒素艰难梭菌可导致艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI).产毒素艰难梭菌已被公认是抗菌药物相关性腹泻最常见的病原体,也是发达国家最常见的导致住院患者腹泻感染的原因之一.高毒力菌株导致全世界范围内CDI的发病率和死亡率增加.如何快速而准确地检测CD一直是备受关注的问题,国内外多推荐两步法和三步法进行检测.艰难梭菌治疗的一线用药是甲硝唑、万古霉素以及非达霉素,应用粪便微生物移植(faecal microbiota transplantation,FMT)也可作为治疗轻度或严重复发CDI(recurrence Clostridium difficile infection,rCDI)的可选方法.艰难梭菌的芽胞能抵抗不良环境,但抗菌药物的使用,医院环境的复杂性和医务工作者的手等因素会导致艰难梭菌易于传播,因此医疗机构应加强艰难梭菌的预防.本文主要对艰难梭菌的流行病学、致病机制、检测及治疗进行综述.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2018(038)002【总页数】9页(P105-113)【关键词】艰难梭菌;艰难梭菌感染;两步法;粪便微生物移植【作者】肖艳艳;张智洁;秦晓松【作者单位】中国医科大学附属盛京医院检验科,辽宁沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院检验科,辽宁沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院检验科,辽宁沈阳110004【正文语种】中文【中图分类】Q93-3;R446.5艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)可以存活于正常人的肠道中,是最常见的胃肠道条件致病菌之一。
患者因为应用抗菌药物等原因导致肠道菌群失调后艰难梭菌开始大量繁殖,但只有产毒艰难梭菌致病。
艰难梭菌的感染率不断升高,是发达国家最常见的导致住院患者腹泻感染的原因之一[1],我国的艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)患病率也在不断上升,同时CD还是养老院和一些健康护理机构人员感染胃肠炎的主要原因[2]。
什么是艰难梭菌,宝宝需要进行常规检测么?
什么是艰难梭菌,宝宝需要进行常规检测么?最近经常有宝妈打电话来咨询:医生给我家宝宝做了粪便艰难梭菌(毒素)的检测,发现是阳性的,为什么会这样?怎么治?那么在此,结合刚刚在线发表的美国感染协会关于艰难梭菌感染的指南,向大家做一个科普。
什么是艰难梭菌?什么是艰难梭菌感染?难辨梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile,简称C. difficile)又称艰难梭菌,是肠道中的一种厌氧细菌,属于条件致病菌(这个具体定义大家自行百度)。
也就是说,只有在一定条件下,比如大量应用抗生素、免疫力减弱、菌群失调等情况下,C. difficile才可能会造成疾病。
C. difficile感染(简称CDI)后通常造成严重腹泻,其定义为:必须出现症状(主要是中重度腹泻\肠梗阻)的同时满足以下条件中的一项:1. 大便中检测到C. difficile毒素或者是产毒性的C. difficile;2. 是肠镜或组织病理确定存在伪膜性肠炎。
也就是说CDI并不是光凭一张化验单就能够下诊断的,症状和检测同时必须都有。
CDI造成的肠道感染,伪膜性肠炎是典型表现那么,问题来了:为什么大便中验出来有艰难梭菌毒素,还不能下诊断呢?把可能的害人精根除出去岂不是一了百了?前面说过,C. difficile属于条件致病菌。
其实正常人中就有无症状的定植。
从流行病学角度讲,刚出生1年以内的小宝宝带菌率最高,可高达40%,意味着约四成的健康婴儿可以在其粪便中检测到C. difficile。
1岁以后,C. difficile定植率开始逐渐降低,但1-2岁仍高达15%,过了3岁才和成人相当,约1%~3%。
而来自于我国的一项研究提示0-3岁的健康宝宝总携带率可达22.77%,其中1岁以内健康婴儿的携带率可高达69%。
健康宝宝中如此高的携带率,您认为光凭一张化验单就诊断宝宝有病了,可信么?正是因为在正常婴幼儿中有如此高的无症状携带者,所以在刚刚更新的《2018年美国感染病协会及流行病协会难辨梭状芽胞杆菌感染指南要点》的儿童部分特别提到以下几点:1. 腹泻的婴儿和新生儿中不应该常规进行C. difficile 的检测。
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艰难梭菌生物学特性及检验
艰难梭菌是抗生素相关性腹泻和伪膜性肠炎的病原菌,因其对氧极为敏感,分离培养困难而得名。
(一)临床意义
艰难梭菌是人和动物肠道中的正常菌群,在幼儿的粪便中最常见。
肠道中的乳杆菌、双歧杆菌、D群链球菌和真菌等对其具有拮抗作用。
长期使用氨苄西林、头孢菌素、克林霉素及红霉素等抗生素,尤其是克林霉素之后,引起肠道菌群失调,肠道中的正常菌群生长受到抑制,削弱或失去对艰难梭菌的拮抗作用,致使耐药的艰难梭菌在肠道中过度繁殖并产生毒素而致病,导致抗生素相关性腹泻(AAD),临床表现为水样便、黏液脓性便、血便和稀便,有时可见坏死的黏膜,其027型高产毒株曾在世界多个国家发生爆发流行。
此外,艰难梭菌是伪膜性肠炎(PMC)最主要的病原菌之一,有资料显示,几乎100%的伪膜性肠炎是由艰难梭菌引起的。
艰难梭菌亦可引起气性坏疽、脑膜炎、肾盂肾炎、腹腔、阴道感染及菌血症等,己成为医院内感染的重要病原菌之一。
(二)生物学特性
革兰阳性粗长杆菌,大小(1.3~1.6)μm×(3.6~6.4)μm,培养48小时后常转为革兰阴性。
芽胞为卵圆形或长方形,位于菌体的次极端,无荚膜,有些菌株有周鞭毛,能运动(图17-3A)。
本菌为严格的专性厌氧菌,用常规的厌氧培养法不易生长。
最适温度为30~37℃,在25~45℃均可生长。
在厌氧血平板上,培养48小时后,形成直径3~5mm、圆形、白色或淡黄色、边缘不齐、表面粗糙、不溶血的菌落(图17-3B)。
在环丝氨酸-头孢西丁-果糖-卵黄琼脂(CCFA)平板上,形成较大的表面粗糙、边缘不齐的黄色菌落,在366nm紫外线照射下,可见黄绿色荧光。
艰难梭菌能发酵葡萄糖、果糖、甘露醇产酸,水解七叶苷、液化明胶,不分
S,不凝固牛奶、硝酸盐还原解蛋白质、乳糖、麦芽糖与蔗糖,不产生吲哚和H
2
阴性、不分解卵磷脂酶及脂肪酶。
产生少量乙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和异己酸。
该菌可产生TcdA、TcdB、CDT、水解酶、SLP等多种毒力因子,其中尤以A 毒素与B毒素最为重要,85%~95%的标本中均可检出。
毒素A为肠毒素,能使肠壁出血坏死,液体积蓄;毒素B为细胞毒素,能直接损伤肠黏膜细胞,造成伪膜性结肠炎。
艰难梭菌耐受甲酚、乙醇和大部分洗手液,其芽胞可在环境中存活20年,是医院内感染的重要原因,有研究显示含氯消毒剂可有效降低院内感染率。
(三)微生物学检验
艰难梭菌广泛存在于婴幼儿的粪便中,健康成人粪便艰难梭菌的携带率为5%~10%,通常粪便中艰难梭菌的量达到lO5~108CFU/g才出现临床感染症状。
因此,临床诊断艰难梭菌相关疾病重点是检测艰难梭菌的A或B毒素,包括分子生物学方法检测其毒力基因,分离培养可用于流行病学调查和临床感染的辅助诊断。