安捷伦液相色谱柱的选择与保养
液相色谱柱的保养与维护
液相色谱柱的保养与维护色谱柱的用法寿命，除了与所分析的样品、流淌相及用法频率有关，最主要的是与日常的维护疏远相关。
色谱柱的用法寿命，主要是按照柱效和柱压两个指标来衡量，假如一支色谱柱柱效太低，或者柱压太高，通常被认为该色谱柱的用法寿命已经结束。
因此，延伸色谱柱用法寿命的关键，是消退引起柱效下降和柱压上升的因素。
可通过以下几点完成色谱柱的日常维护工作。
1.流淌相的pH因为硅胶基质的填料中存在Si——C和Si——O键，流淌相超过其pH范围将会导致硅胶基质溶解和键合相碳链断裂，使柱效下降，寿命变短。
因为流淌相的pH控制不当而对色谱柱造成的伤害，通常很难使色谱柱复原。
因此，必需仔细对待，严格控制流淌相的pH。
2.去除样品和流淌相中的固体颗粒样品和流淌相中含有的固体颗粒物质，会阻塞色谱柱筛板，筛板被堵不仅会引起柱压上升，而且还会引起柱效下降，由于筛板的阻塞会引起液流不均，导致色谱峰形拖尾、变宽，甚至浮现双峰，从而使柱效下降。
因此，建议用法超纯水和色谱纯试剂，在分析前对样品举行超声、针筒过滤，流淌相过0.45um滤膜，尤其是流淌相中加入了缓冲盐(如NaH2PO4等)，必需过滤。
3.用法庇护柱或在线过滤器样品和流淌相经过滤后，并不能彻低消退固体颗粒物质，由于泵的磨损、密封圈和管路的老化，也会产生固体颗粒物，这些固体颗粒被流淌相带入色谱柱，阻塞筛板，导致柱压上升、柱效下降。
庇护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱筛板径相同，因此，可以阻挡固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的阻塞。
因为柱压上升在分析故障中占很大的比例，因此，除了对样品和流淌相举行过滤外，建议在色谱柱进样端加上庇护柱或在线过滤器。
4.正确用法缓冲盐缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流淌相保持一定的离子强度和pH，削减拖尾。
缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此，缓冲盐用法不当会致其析出，阻塞填料基质上的空隙，使填料板结，柱压升高；同时，妨碍了基质上键合的碳链自由伸展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养非常重要，可以延长柱的使用寿命并保证分离效果的稳定性。
以下是液相色谱柱的维护与保养的一些建议：
1. 保持柱的洁净：在使用结束后，及时用纯水和有机溶剂洗净色谱柱。
可以采用逆向流动的方法，即用纯水从柱底往上流动直到洗净。
避免使用酸碱溶液以及有机溶剂中的含有杂质的溶液来清洗，避免杂质残留。
2. 避免干燥：柱在储存或者不使用时要避免干燥。
可以用保湿的方式，例如在储存时使用密封塑料袋或保湿剂。
避免长时间暴露在空气中，避免干燥引起的柱损坏。
3. 正确使用柱：避免使用超过柱最大压力或流速的方法进行色谱分离，这会导致柱壁破裂或分离效果恶化。
遵守柱的使用说明和规格。
4. 定期检查：定期检查柱的使用情况，例如检查是否有柱壁表面损坏或吸附物的形成。
如果发现有问题，应及时更换色谱柱。
5. 柱的再生：某些类型的液相色谱柱可以通过柱的再生来延长使用寿命。
具体的再生方法可以参考柱的使用说明书或与供应商咨询。
6. 注意避免柱受到冲击：在搬运和使用过程中要轻拿轻放，避免柱受到冲击造成损坏。
总之，正确的维护与保养可以延长液相色谱柱的使用寿命并保证其分离效果的稳定性。
根据柱的材质和类型，还可以采取适当的措施进行再生以延长柱的使用寿命。
液相色谱柱的选择与使用
液相色谱柱的选择与使用
目录 一、液相色谱柱的选择 1、 分离模式的选择 2、 C-18柱的性能影响因素 3、 保留值与pH的关系 二、液相色谱柱的安装 1 、液相色谱柱的结构 2、 色谱柱的安装 三、液相色谱柱的使用 1 、样品的前处理 2 、流动相的配制 3、 色谱柱的平衡 4、 流动相流速的选择 四、 分析条件调整的影响 五、液相色谱柱的维护
• 可电离的组份的分离可能会随pH变化发生显著变化 —甚至很小的 0.05–0.25 个pH变化单位.
保留值与pH的关系
pH变化： 0.2个pH(7.0~7.2) 保留时间改变： 1.2分钟 (13.6~14.8分钟)
保留时间随pH 改变不明显
保留时间随pH改变 不明显(酸性环境中)
保留时间
保留值与pH的关系
•碳覆盖率 •封端
•硅胶纯度 •色谱柱尺寸 •颗粒形状 •粒径 •表面积 •孔径
C-18柱的性能影响因素：色谱柱物理性质
硅胶纯度 • 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
色谱柱尺寸 • 填料床的长度和内径
颗粒形状 • 球型或不规则型
粒径 • 平均颗粒直径, 通常3-10µm
表面积 • 颗粒外表面和内部孔表面的总和, 以m2/gram表示
封端 • 键合步骤之后, 用短链将裸露的硅羟基键
合后封闭起来
C-18柱的性能影响因素：键合类型
CH3
键合类型对色谱分离的影响 ： O Si
单齿键合：
CH3
OSi
CH3
提高传质速率, 加快色谱柱平衡
O Si CH3
CH3
OSi
CH 3
双齿键合：
O Si
增加色谱柱稳定性, 增加色谱柱的载
安捷伦的色谱柱的介绍及选择
安捷伦的色谱柱的介绍及选择安捷伦（Agilent）是一家全球领先的科学仪器和化学分析解决方案提供商，其色谱柱产品在色谱分析领域具有广泛的应用和卓越的性能。
在选择安捷伦色谱柱时，需要考虑样品类型、分析目标、分析条件和仪器兼容性等因素。
本文将详细介绍安捷伦色谱柱的特点、类型和选择要点，以帮助读者更好地了解和选择适合自己实验需求的色谱柱。
安捷伦色谱柱主要有液相色谱柱和气相色谱柱两大类，涵盖了分子筛柱、反相柱、离子交换柱、氨基酸柱等各种类型。
以下是对其中一些常用色谱柱类型的详细介绍：1.反相柱（C18、C8等）：反相柱是液相色谱柱中应用广泛的类型之一，它的固定相通常是疏水性的烷基链（如C18、C8等），适用于非极性或弱极性化合物的分离。
安捷伦的反相柱具有较高的分离效果和使用寿命，能够提供良好的保留和分辨能力。
2.离子交换柱：离子交换柱可以根据溶液中离子的电荷和大小进行选择，可分为阳离子交换柱和阴离子交换柱。
它们广泛应用于药物分析、环境分析和生物样品分析等领域。
安捷伦的离子交换柱具有良好的耐酸碱性和高分辨能力，可有效分离带电离子和无机离子。
3.氨基酸柱：氨基酸柱是一类特殊的反相柱，其固定相是在C18固定相的基础上修饰上了特殊的萘乙酰氨基酸萃取相。
这种柱材具有特异性和选择性，特别适用于氨基酸的分离和分析。
4.手性柱：手性柱是用于分离和分析具有镜像异构体的化合物。
安捷伦色谱柱的手性柱具有优良的立体选择性和分离能力，适用于手性药物、香精香料、农药等领域的研究。
在选择安捷伦色谱柱时，需要综合考虑以下几个方面：1.样品特性和分析目标：根据样品的性质和分析目标确定使用的色谱柱类型。
如反相柱适合非极性和弱极性化合物的分离，离子交换柱适用于阳离子和阴离子的分析。
2.分析条件和分离效果：考虑分析条件（如流速、温度等）对色谱柱性能的影响。
根据分析条件来选择具有适当相容性和稳定性的柱材。
3.样品矩阵和交叉污染：如果样品矩阵复杂或存在交叉污染问题，可以选择具有更好选择性和保持高分辨能力的色谱柱。
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。
这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。
否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。
安捷伦液相操作维护保养规程
安捷伦液相操作维护保养规程一、安全操作规范：1.操作前必须穿戴个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等。
2.在操作液相设备时，要保证周围环境干燥、清洁无尘。
3.不得将有机溶剂直接排放到下水道中，应按照相关规定进行处理。
4.避免与有机溶剂发生直接接触，防止引起火灾和爆炸。
在操作过程中要小心避免溢漏。
二、操作准则：1.严密密封液相系统，避免泄漏。
2.在使用气溶胶短管时，注意定期更换新管，并将废弃管进行妥善处理。
3.当不使用设备时，要关闭电源，并将设备清洁干净，避免灰尘和污渍。
4.设备放置时要水平摆放，不可放置在湿润或有机溶剂易波及的地方。
5.使用过程中，要定期检查设备的密封部分是否正常，如有破损应及时更换。
三、操作流程：1.根据实验要求，合理选用相关仪器设备，并调整好设备的参数。
2.操作前先进行设备的预热，保持设备恒定的温度。
3.将待测样品注入进样装置中，确保样品完全进入进样管。
4.打开进样阀，将样品注入到色谱柱中，观察色谱曲线并记录相关数据。
5.实验结束后，使用合适的溶剂将色谱柱进行洗脱，防止发生堵塞现象。
6.将设备进行清洗，除去可能残留下来的污物。
7.对设备进行维护检查，保证下次使用时设备处于良好状态。
四、设备保养：1.定期检查设备的电源线和数据线，如有破损应及时更换。
2.定期清洗仪器的进样口和进样管，防止堵塞。
3.对仪器设备进行定期润滑，确保设备的正常运转。
4.定期校准仪器的测量参数，确保仪器的准确性。
5.确保仪器设备的周围环境干燥，避免设备受潮。
五、事故及处理方法：1.发生溢漏情况时，立即关闭设备，及时清理溢漏物，并通风排气。
3.发生火灾或爆炸时，迅速撤离现场，并使用灭火器等灭火工具进行灭火。
六、员工培训和操作技能提升：1.新员工入职时，进行液相操作培训，包括安全操作规范、设备操作流程等方面的培训。
2.定期组织员工进行操作技能培训和考核，提高员工的操作技能和专业知识水平。
3.鼓励员工参加相关培训和学习，提升专业水平和操作技能。
分析检测中液相色谱柱的选择及使用维护
分析检测中液相色谱柱的选择及使用维护摘要：随着色谱柱技术的不断创新发展，色谱柱填料的种类越来越丰富，分离模式以及方法得到的提高和改进，促进了高效液相色谱法在各领域分析中更为广泛的应用。
高效液相色谱柱是检测分析工作中的重要工具，要更加重视色谱柱的使用与维护。
色谱柱正确的使用与维护是分析检测结果准确性的保障，同时可以延长柱寿命，有利于减少分析检测的成本。
本文将系统介绍分析检测中反相色谱柱的选择和使用维护的注意事项。
关键词：液相色谱法；色谱柱；分析；选择；使用维护引言高效液相色谱仪是一种高压、高速、高效、高灵敏度的检测仪器，特别适用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大的有机物的定量和定性分析，广泛应用于医药、环保、生命科学和食品安全检测。
但在实际操作中，受目标探测器含量低和样品组成复杂的影响，会出现测试失败、测试错误、检测时间长等现象。
本文通过剖析高效液相色谱法检测常见问题，为检测分析提供技术要点和控制措施，并对问题检测结果进行全面分析，以提高高效液相色谱检测技术水平。
1液相色谱法概述高压泵产生液体水柱，最后使用高压泵形成五色流动色谱，使用当前色谱。
此外，高效分光光度计还有一个关键优势:通过与其他仪器连接，通过分离样品和监测步骤，可以大大提高样品的质量和效率。
因此，高效的色调范围技术具有很大的优势。
简而言之:只有更好地了解和理解高效频谱形成技术的基础，才能最大限度地发挥应用高效频谱颜色技术的价值，这对促进我国石油工业的综合力量至关重要。
因此，技术人员必须充分注意这一点。
2色谱柱填料的结构类型色谱主要填充“无孔”、“完整”和“多孔曲面”孔结构类型。
未填色填满样式是没有孔的表面。
与其他填充相比，避免溶解元和物质在孔内扩散可以提高光谱柱的效果，而光谱分离效果更强，因为它比表面小，因此相对较小。
因此，在分析液体色谱时很少应用无孔色谱柱。
完全填充剂是在多孔制造过程中生产的有机硅，多端口填充材料的应用有助于提高固相溶液分子的保存和分布。
安捷伦液相色谱仪故障分析及解决方法 液相色谱维护和修理保养
安捷伦液相色谱仪故障分析及解决方法液相色谱维护和修理保养安捷伦液相色谱仪是一种应用特别广泛的有机多组分化学分析仪器。
它具有分别效能高,分析速度快,样品用量少,可进行多组分测量等优点。
安捷伦液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。
它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。
一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。
但是由于人员素养样品的性质以及仪器本身等方面的原因,常常显现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。
所以把握一种精准、快速的排出仪器故障的方法特别紧要。
安捷伦液相色谱仪的故障分析：1、什么原因导致液相色谱仪压力过高？可能的原因：1.排气阀里面的 PTFE 滤蕊堵塞。
2.压力上限设置太低。
3.压力传感器堵塞。
安捷伦液相色谱仪建议的措施：1.打开排气阀。
假如压力仍旧很高，则更换排气阀内的 PTFE 滤芯。
2.查看软件的压力上限设置并确保设置值适于分析。
3.检查系统内的堵塞部位。
（如下所述）要检查是否堵塞，请接受隔离系统的方法来排出故障：将安装的色谱柱、预色谱柱和预色谱柱过滤器摘开。
①. 假如压力恢复到正常值，则在色谱柱的位置安装 ZDV 接头。
A 假如压力正常，则色谱柱、预色谱柱或过滤器是产生问题的原因。
请进行更换。
B 假如压力仍旧很高，则在色谱柱的另一端查找堵塞位置（例如：通入检测器或从其通出的管路）。
②. 假如取杰出谱柱后压力仍旧很高，则检查从排气阀到自动进样器的管路。
假如压力正常，则使用进样步骤命令将自动进样器的进样阀切换到旁路状态。
A 假如压力正常，则说明自动进样器堵塞。
请检查针、针座、针座毛细管和转子密封垫。
B 假如压力仍旧很高，则检查从进样六通阀到色谱柱入口之间的管线。
液相色谱柱日常使用和维护色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
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8页
C-18柱---性能影响因素
A类硅胶
Original ZORBAX SIL (1970s) 由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表 面上金属含量高 (硅羟基的pKa低), 导致碱性化合物发生拖尾
B类硅胶 (高纯)
ZORBAX Rx-Sil (1987) 由于金属含量低, 硅羟基pKa高, 碱性化合物不发生拖尾
6页
C-18柱---性能影响因素
色谱柱物理性质
硅胶纯度
• 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
色谱柱尺寸
• 填料床的长度和内径
颗粒形状
• 球型或不规则型
粒径
• 平均颗粒直径, 通常3-10µm
表面积
• 颗粒外表面和内部孔表面的总和,
示
以m2/gram表
孔径
• 颗粒的孔或腔的平均尺寸,
范围80-300Å
O Si R
固定相键合 二甲基硅烷
封端 四甲基硅烷
Agilent Technologies
19页
安捷伦专利的空间位阻保护
取代基：五个 旁侧基团: 异丙基
键合相 流失, 保留减弱
另一个裸露的硅羟基 ,
潜在的拖尾因素
普通硅胶柱低 pH <2 不稳定, 发生水解
Zorbax StableBond 空间位阻保护---抗水解能力
非离子化
抑制电离反相键合相色谱 离子对键合相的反相模式
样品
离子化
用硅胶的正相模式 离子交换模式 溶于有机溶剂 凝胶渗透色谱 凝胶过滤色谱
分子量>2, 000
溶于水
大孔填料的离子交换模式
用大孔填料的反相模式
Agilent Technologies
正相 &反相色谱
正相吸附色谱
极性:固定相 > 流动相 固定相 - 极性 流动相(己烷, 庚烷)- 非极性 极性物质后出峰
安捷伦科技
Sa
1页
HPLC色谱柱选择与维护保养
Agilent Technologies
分离模式的选择
溶于正己烷 溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水 溶于有机溶剂
2页
用硅胶的正相模式
用键合相的正相模式 用键合相的反相模式
用键合相的反相模式
分子量<2, 000 溶于四氢呋喃 低分子凝胶渗透色谱 用键合相的反相模式 溶于水
样品: 1. ketoprofen 2. ethyl paraben 3. Hydrocortisone 4. fenoprofen 5. propyl paraben 6. Propranolol 7. ibuprofen
pH 7.00
0 1
1
2
4
5
7 3
6
0.25 个pH
2 1
3 Time (min) 4 5
Agilent Technologies
11页
C-18柱---性能影响因素
颗粒形状 --- 对色谱分离的影响
当使用黏度较大的流动相50:50=MeOH:H2O时 , 球型颗粒可以降低柱压, 延长色谱柱寿命
粒径 --- 对色谱分离的影响
较小的颗粒柱效较高, 但会引起柱压过高. 3.5µm粒径的常用于分离复杂的多组份样品, 而组份单一的样品多采用5µm的粒径
可用于分离蛋白质和多肽 分子量虽小但hydrodynamic volume(水动力学体积)较大的分子
Poroshell 色谱柱
高流速下, 高柱效分析大分子的蛋白质和多肽
色谱柱填料孔径必须适合 待测物分子自由进出填料 孔, 与孔内表面的键合相 进行分离分配
Agilent Technologies
14页
15页
300Å 孔径可改善大分子的峰形
色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 mm 流动相: 60% MeOH: 40% 0.1% 三氟乙酸 O 流速: 0.75 mL/min CH 3 CHO 温度: RT CH H 2 3C 检测器: UV 282 nm HC
HO OCH 3 O O OCH 3 CH 2 CH 2 O H 3C O HO 3 O O O H
保留时间随pH 改变不明显
保留时间随pH改变 不明显(酸性环境中)
Agilent Technologies
23页
液相柱---保留值与pH的关系
方法稳定区
中性组份 酸性组份
方法波动区(pKa+1.5)
方法稳定区
碱性组份
Agilent Technologies
24页
液相柱---保留值与pH的关系
Extend C18 pH 2~11.5
球形
不规则形
1.8µm
3.5µm
5µm
Agilent Technologies
7µm
12页
C-18柱---性能影响因素
表面积 --- 对色谱分离的影响
高表面积对于多组份样品的分离具有较强的保 留能力, 柱容量和分离度. 表面积低的填料通 常能迅速达到平衡状态, 对于梯度淋洗尤为 重要
孔径 --- 对色谱分离的影响
4
7
6
6
0 5 10 Time (min) 1. Maleate 马来酸盐 2. Scopolamine 东莨菪碱 pKa 7.6 色谱柱: ZORBAX Extend-C18 3. PseudoEphedrine 假麻黄碱 pKa 9.8 4.6 x 150 mm, 5 mm 4. Doxylamine 抗敏安(多西拉敏) pKa 9.2 流动相: 30% 缓冲液: 70% 待测物pKa+1.5以外 5. Chlorpheniramine 氯苯吡胺pKa 9.1 MeOH pH 7 缓冲液20 mM 的流动相pH Na2HPO4 pH 11缓冲液 20 mM 6. Triprol内径ine 苯丙烯啶pKa 6.5 可保证方法的稳定性 TEA 7. Diphenhydramine 苯海拉明 pKa 9.0 0 5
4
5
6
pH 7.25
0 1
2
67
3
2
3 Time (min)
4
5
6
• 可电离的组份的分离可能会随pH变化发生显著变化 —甚至很小的 0.05–0.25 个pH变化单位.
Agilent Technologies
22页
液相柱---保留值与pH的关系
pH变化： 0.2个pH(7.0~7.2) 保留时间改变： 1.2分钟 (13.6~14.8分钟)
Agilent Technologies
C-18柱---性能影响因素
色谱柱尺寸 --- 对色谱分离的影响
• 短柱 (15-100mm) - 运行时间短, • 长柱 (150-250mm) - 分辨率高, 柱压低 运行时间长
10页
• 窄径柱 ( 2.1mm) - 检测器灵敏度高 • 宽径柱 (3-21.2mm) - 载样量高
Zn 1 88
< 1 nd
N/ A N/ A nd
130 57
nd N/ A N/ A nd
2900 N/ A 40
65 230 N/ A N/ A N/ A N/ A
Zorbax Rx-SIL: 11种金属< 35 ppm (未检出其他杂质,
<1ppm); 99.995% 纯度的二氧化
Agilent Technologies
碳覆盖率--- 对色谱分离的影响
高碳覆盖率：提高分辨率, 分析时间长 低碳覆盖率：缩短运行时间
封端 --- 对色谱分离的影响
封端：减轻待测组份与硅胶表面残留的酸 性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象 对于极性样品, 未封端与经过封端处理的 色谱柱在选择性上有明显差异
Agilent Technologies
孔结构复杂, 孔径不均匀导致柱效不够高, 有 • 聚合物基质 机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损
Agilent Technologies
C-18柱---性能影响因素
•硅胶纯度 •色谱柱尺寸 物理性质
5页
•颗粒形状
•粒径 •表面积 •孔径
•键合类型 化学性质 •碳覆盖率 •封端
Agilent Technologies
RS变化值 1.6
Agilent Technologies
21页
液相柱---保留值与pH的关系
色谱柱: ZORBAX Eclipse XDB-C8 4.6 x 75 mm, 3.5 µm 流动相: 44% 25 mM磷酸, pH 7.00 : 56% 甲醇 流速: 1.0 mL/min 温度: 25°C 检测: UV 250 nm
二氧化硅 Zorbax Rx-SIL Zorbax SIL Nucleosil Hypersil nd = 未检出
Na 10 17 56
K <3 nd
金属浓度（ppm) Mg Al Ca Ti 4 nd 1.5 57 300 2 9 38 nd 32
Fe 3 21 76
Zr nd 88
Cu nd
Cr nd
300Å 孔径可改善蛋白质和多肽峰形
孔径,
选择合适的 填料孔径分析 大分子可获得 最佳峰形
0.20 0.18
0.16 0.14
分子量对峰宽的影响(梯度分离)
300SB-C18 (300Å) SB-C18 (80Å)
PW 1/2
0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0
Agilent Technologies
ZORBAX®生产工艺
• StableBond • Eclipse XDB • Bonus-RP • Extend
硅胶 + 脲 (pH=2) + 甲醛 CH2O
9页
D O2
粒径