丹参脉冲胶囊中丹参脂溶性成分的提取工艺研究_徐光昳

5 μm） 150 mm， 丹参购自 哈 尔 滨 药 材 批 发 市 场 。 丹 参 酮 Ⅱ A （ 批 号： 110532 － 200508 中国药品生物制品检定所） ， 95% 乙醇（ 医 用） 。甲醇为色谱纯， 水为双蒸水， 其他试剂为分析纯。 2 丹参的提取工艺研究 2. 1 因素水平的确定 根据参考文献和预实验结果， 以提取物中丹参酮ⅡA 含 量为标准， 考察影响回流提取丹参的四个主要因素： 乙醇浓 度 A、 乙醇用量倍 B、 提取时间 C、 提取次数 D（ 见表 1 ） 。 表1
丹参中含量最高的脂溶性有效成分， 具有广泛的药理活性， 如抗氧化、 抗肿瘤、 扩张冠状动脉、 预防心绞痛和心肌梗死 、 保护脑缺血再灌注损伤或局部缺血缺氧引起的脑损伤等 。 ［2 ］ 所以采用乙醇回流提取法进行 。 1 仪器和试剂 Agilent 1100 高效液相色谱仪， P680 泵， UVD340U 检测 LC － WS100 工作站， 器， 色谱柱： Kromasil C18 色谱柱（ 4. 6 ×
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黑龙江医药 Heilongjiang Medicine Journal Vol. 26 No. 2 2013
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丹参脉冲胶囊中丹参脂溶性成分的提取工艺研究
徐光昳， 李
哈尔滨商业大学药学院( 黑龙江
鑫
哈尔滨 150076 )
摘 要 目的： 优选出丹参最佳的醇提取工艺。方法： 提取采用乙醇回流提取法， 以脂 溶 性 成 分 丹 参 酮 Ⅱ A 为指 4 8 倍 用 量， 标成分， 通过 L9 ( 3 ) 正交试验设计安排进行提取优化。结果： 最 佳 提取 工艺为 乙醇 浓 度 95% ， 回 流 提取 2 次， 每次 1 h。结论： 该提取工艺稳定可行， 丹参酮ⅡA 含量较高， 适合用于制备丹参脉冲胶囊。 关键词： 丹参; 脂溶性成分; 提取 中图分类号： TQ461 文献标识码： A 文章编号： 1006 － 2882 （ 2013 ） 02 － 253 － 02
响因素非常多。研究人员来自根据药物的选择性选择正确的 适宜的基质、 冷凝剂， 适当的指标评价， 保证滴丸制剂 方法， 的稳定、 有效、 可控。 滴丸的硬度是衡量其是否具有应用价值的一个重要指 标。硬度会影响生物利用度和疗效， 硬度过低又不利于生 产、 包装、 使用、 运输和长期贮存等。 因此， 正确反映和测定 滴丸硬度， 对于滴丸的生产和科研 、 保证临床用药的准确性 等方面均具有不容忽视的实际指导意义 。 参考文献
60℃ 减压干燥， 粉碎， 即得丹参提取物浸膏粉 。 测定丹参酮 ⅡA 的含量及收率， 计算综合评分 = 含量 + 收率* 0. 3 ， 见表 2 。方差分析见表 3 。 表2
实验号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 K1 K2 K3 Ｒ A（ % ） 1 1 1 2 2 2 3 3 3 16. 427 19. 123 22. 970 6. 543
水平 1 2 3 A /% 75 85 95
因素水平表
因 B /倍 8 10 12 素 C / min 1 1. 5 2 D /次 1 2 3
2. 2
试验方法 4 根据以上因素水平表， 选择 L9 （ 3 ） 正交试验表。 取丹 参， 粉碎， 过 60 目筛。分别称取 9 份， 每份 20g， 按表 1 项下 滤液回收乙醇， 得清膏， 条件进行提取。 丹参提取液滤过，
［1 ］ 动脉粥样硬化； 抗肿瘤作用 。 丹参酮 II A （ Tanshinone II A， Ts II A） 系从丹参的根中提取分离的二萜醌类化合物， 为
* P ﹤ 0. 05 2. 3 结果分析 从极差分析结果表明各因素对综合提取效果的影响作 用大小依次为 A（ 乙醇浓度） ＞ B （ 乙醇用量） ﹥ D （ 提取次 数） ﹥ C（ 提取时间） 。 由表 3 的方差分析结果可知因素 A 对丹参的综合提取效果具有显著性影响 。 综合两种分析结 果确定乙醇回流提取的最佳工艺为 A3 B2 C3 D2 。 即： 乙醇浓 10 倍乙醇用量， 度 95% ， 提取时间 2h， 提取 2 次。 2. 4 验证性试验 同 2. 2 项下方法， 按照最佳提取条件进行提取， 平行试 验三次， 分别测定丹参酮ⅡA 含量及收率。 结果丹参酮 Ⅱ A 平均含量 12. 5% ， 平均收率 35. 9% ， 综合评分 23. 26 ， 高于正 交试验中的测定结果。 3 3. 1 高效液相测定丹参提取物中丹参酮 ⅡA 的含量 色谱条件 5 μm ） ； 流动 色谱柱： Kromasil C18 色谱柱（ 4. 6 × 150mm， 相： 甲醇： 水 = 85 ： 15 ； 流速 0. 8mL / min； 检测波长为 270nm； 进样量： 20 μL； 柱温为室温。 3. 2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA 对照品 5. 0mg， 用流动相溶解并定 得 0. 1mg / mL 的丹参酮 Ⅱ A 对照品储 容于 50mL 容量瓶中， 备液。 3. 3 供试品溶液的制备 精密称取丹参提取物 150mg， 以 20 mL 流动相溶解并定 备用。 容于 100mL 容量瓶中， 3. 4 方法学考察 1， 1. 5 ， 2， 2. 5mL， 精密量取丹参酮ⅡA 储备液 0. 5 ， 置于 10mL 容量瓶中， 10 ， 15 ， 20 ， 25 μg / mL 的系 流动相定容， 得 5， 记录各对照 列对照品溶液。分别精密吸取 20 μL 溶液进样， 品溶液峰面积 U， 得到峰面积与丹参酮ⅡA 质量浓度 C（ mg / L） 的线性回归方程： U = 153. 99C + 5. 07 ， r = 0. 9999 ， 线性浓 度范围是 5 μg / mL ～ 25 μg / mL。精密度实验 ＲSD = 1. 36% ， 重复性实验 ＲSD = 0. 48% ， 稳定性实验 8h 内 ＲSD = 1. 30% ， ＲSD = 0. 81% 。 平均回收率为 97. 53% ， 4 讨论 经实验得知本提取工艺得到的丹参脂溶性成分含量较 高， 工艺稳定， 适合用于制备丹参脉冲胶囊中的丹参含药 片。经本提取工艺制得的丹参脉冲胶囊在一定规格下符合 要求， 溶出试验稳定且达到标准要求 。 参考文献
Danshen Pulse Capsule of Tanshinone Fat － soluble Component Extraction Technology Ｒesearch
Xu G u an gy i ， et al Dep ar tm en t of p har m acy ， H ar bi n Un i v er s i ty of Com m er ce Abstract： Objective： Select the best alcohol extraction process of Ｒadix Salviae Miltiorrhizae. Methods： Extracted using with liposoluble constituents tanshinone Ⅱ A as the index components， through the L9 （ 3 4 ） orthogethanol refluxing extraction， onal design extraction optimization arrangement. Ｒesults： The optimum extraction process is 95% ethanol， 8 times the amount， reflux extraction 2 times， each time 1 h. Conclusion： The extraction process is stable， the contents of tanshinone Ⅱ A high， suitable for use in the preparation of Danshen pulse capsule. Key words： Salvia miltiorrhiza； Fat soluble components； Extraction 2010 级硕士研究生。 作者简介： 徐光昳( 1987 ) ， 女， 哈尔滨商业大学药学院， 项目来源： 黑龙江省 2011 年研究生创新科研基金， 项目编号: YJSCX2011 － 150HLJ