乙醇对家兔离体小肠平滑肌活动的影响

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实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)

实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)

实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。

【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。

实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。

【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。

观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。

2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。

作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。

(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。

与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。

3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。

然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。

4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。

然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。

5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。

白酒对家兔离体小肠平滑肌生理特性影响的研究

白酒对家兔离体小肠平滑肌生理特性影响的研究

第27卷第4期V ol 127 N o 14长春师范学院学报(自然科学版)Journal of Changchun N ormal University (Natural Science )2008年8月Aug.2008白酒对家兔离体小肠平滑肌生理特性影响的研究付立波1,邵 凯2,景丽娜1(11长春师范学院生命科学学院,吉林长春 130032;21青岛职业技术学院海尔学院,山东青岛 266555)[摘 要]观察白酒对家兔离体小肠平滑肌活动的影响。

制备家兔小肠离体肠段标本,采用常规离体灌注小肠平滑肌标本活动的实验方法,记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。

不同度数的白酒(23°、38°、48°、56°)对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制作用,其变化值与用药之前比较差异性显著(P <0105,P <0101)。

最后得出结论:白酒对小肠平滑肌活动有抑制性作用。

[关键词]白酒;乙醇;离体小肠段;平滑肌活动[中图分类号]Q483 [文献标识码]A [文章编号]1008-178X (2008)04-0072-03[收稿日期]2008-04-05[作者简介]付立波(1965-),男,吉林榆树人,长春师范学院生命科学学院副教授,博士,从事动物生理学研究。

白酒的主要成分是乙醇,乙醇进入人体,能产生多方面的破坏作用。

它使神经系统从兴奋到高度的抑制,严重地破坏神经系统的正常功能。

据临床观察和流行病学调查表明,过量饮酒可导致多发性神经炎、心肌病变、脑病变、造血功能障碍、胰腺炎、胃炎和溃疡病等,还可使高血压病的发病率升高[1-2]。

还有资料表明,长期大量饮酒,能危害生殖细胞,导致后代的智力低下。

常饮酒的人喉癌及消化道癌发病率明显增加[3-4]。

消化道是乙醇进入体内最先受刺激的部位,有报道,乙醇进入胃内可造成胃粘膜损伤[5],但有关乙醇对小肠活动影响的报道尚且很少。

本实验以家兔离体小肠为标本,观察不同度数的白酒对离体小肠平滑肌活动的影响,进一步了解乙醇与人体健康的关系。

乙醇兔实验报告

乙醇兔实验报告

一、实验目的1. 探究乙醇对兔子的毒性作用。

2. 观察乙醇在不同浓度下对兔子生理指标的影响。

3. 分析乙醇对兔子器官损害的病理变化。

二、实验原理乙醇是一种常见的有机溶剂,具有麻醉、消毒、消毒剂等作用。

然而,过量摄入乙醇会对人体产生毒性作用,如肝脏、肾脏、神经系统等器官的损害。

本实验通过观察乙醇对兔子的毒性作用,分析乙醇对兔子生理指标和器官损害的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:成年家兔2只,体重2.5kg左右。

2. 实验试剂:95%乙醇、生理盐水、葡萄糖、氯化钠等。

3. 实验仪器:电子天平、恒温恒湿箱、离心机、显微镜、解剖显微镜等。

四、实验方法1. 实验分组:将2只家兔随机分为两组,每组1只,分别命名为A组和B组。

2. 实验过程:(1)A组:作为对照组,给予生理盐水灌胃,剂量为10ml/kg体重,连续观察7天。

(2)B组:作为实验组,给予95%乙醇灌胃,剂量分别为0.5ml/kg体重、1ml/kg 体重、2ml/kg体重,连续观察7天。

3. 观察指标:(1)生理指标:每日记录兔子的体重、心率、呼吸频率等。

(2)器官损害:在实验结束后,对兔子进行解剖,观察肝脏、肾脏、心脏、大脑等器官的病理变化。

五、实验结果1. 生理指标:(1)对照组:兔子体重、心率、呼吸频率等生理指标无明显变化。

(2)实验组:随着乙醇剂量的增加,兔子的体重、心率、呼吸频率等生理指标逐渐下降。

2. 器官损害:(1)对照组:肝脏、肾脏、心脏、大脑等器官无明显病理变化。

(2)实验组:- 0.5ml/kg体重乙醇组:肝脏、肾脏、心脏、大脑等器官无明显病理变化。

- 1ml/kg体重乙醇组:肝脏、肾脏、心脏、大脑等器官出现轻微病理变化,如脂肪变性、细胞水肿等。

- 2ml/kg体重乙醇组:肝脏、肾脏、心脏、大脑等器官出现明显病理变化,如脂肪变性、细胞坏死、炎症反应等。

六、讨论与分析1. 乙醇对兔子的毒性作用:本实验结果表明,乙醇对兔子具有一定的毒性作用。

实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察

实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
实验四家兔离体小 肠平滑肌生理特性 及药物作用的观察
目录
• 实验目的 • 实验材料 • 实验方法 • 实验结果 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
了解家兔离体小肠平滑肌的生理特性
观察家兔离体小肠平 滑肌的自主节律性收 缩
分析家兔离体小肠平 滑肌的生理功能和特 点
记录家兔离体小肠平 滑肌对不同刺激的生 理反应
药物
药物种类
包括生理盐水、不同浓度的药物溶液 等。
药物浓度
根据实验需要,配制不同浓度的药物 溶液,确保药物浓度准确。
03
CATALOGUE
实验方法
离体小肠平滑肌的制备
01
选取健康家兔
选择体重相近、健康的家兔作为实 验对象。
取小肠组织
迅速取出小肠组织,并分离出平滑 肌部分。
03
02
麻醉与处死
对家兔进行麻醉,然后处死,以获 取小肠组织。
实验结论
总结实验结果,得出关于家兔离 体小肠平滑肌生理特性及药物作 用的观察结论。
05
CATALOGUE
结论
对家兔离体小肠平滑肌生理特性的认识
生理特性
家兔离体小肠平滑肌具有自主节律性、紧张性、 兴奋性和伸展性等生理特性。
影响因素
离体小肠平滑肌的生理特性受到多种因素的影响 ,如神经、激素、离子通道等。
生理意义
家兔离体小肠平滑肌的生理特性对于维持肠道功 能、消化和吸收具有重要意义。
对药物作用的理解与评价
药物作用机制
实验中观察到的药物作用机制主要包括抑制平滑肌细胞膜离子通道 、影响平滑肌细胞内钙离子浓度等。
药物效果评价
通过对药物作用效果的观察,可以对药物的疗效和安全性进行评价 。

家兔小肠平滑肌实验报告

家兔小肠平滑肌实验报告

家兔小肠平滑肌实验报告实验目的,通过观察家兔小肠平滑肌在不同药物作用下的收缩情况,探究平滑肌对不同药物的反应,为临床药物应用提供实验依据。

实验材料与方法:材料,家兔小肠组织、药物(肾上腺素、乙酰胆碱、乙酰胆碱酯酶抑制剂、钙离子抑制剂)、生理盐水。

方法,取家兔小肠组织切成适当大小的小块,分别放入含有不同药物的生理盐水中浸泡,观察其收缩情况。

记录每种药物作用下的收缩幅度及时间。

实验结果:1. 肾上腺素作用下,家兔小肠平滑肌出现明显的收缩,收缩幅度大,持续时间较长。

2. 乙酰胆碱作用下,家兔小肠平滑肌也出现收缩,但幅度较小,持续时间较短。

3. 在乙酰胆碱酯酶抑制剂的作用下,乙酰胆碱的降解被抑制,导致乙酰胆碱在神经末梢释放的量增加,家兔小肠平滑肌出现更强的收缩。

4. 钙离子抑制剂能够抑制细胞内钙离子的释放,导致平滑肌收缩受到抑制,收缩幅度减小。

实验结论:通过本实验的观察结果,可以得出家兔小肠平滑肌对不同药物的反应情况。

肾上腺素能够引起明显的平滑肌收缩,而乙酰胆碱作用下的收缩幅度较小。

在抑制乙酰胆碱降解的情况下,平滑肌收缩加强。

钙离子抑制剂能够减小平滑肌的收缩幅度。

这些结果为临床药物的应用提供了一定的实验依据。

实验中也发现,家兔小肠平滑肌对不同药物的反应是复杂的,受到多种因素的影响。

因此,在临床应用药物时,需要综合考虑多种因素,选择合适的药物及剂量,以达到最佳的治疗效果。

总结:本实验通过对家兔小肠平滑肌的实验观察,揭示了平滑肌对不同药物的反应情况,为临床药物应用提供了实验依据。

但需要注意的是,实验结果仅代表在实验条件下的情况,在临床应用时还需要综合考虑其他因素,确保药物的安全有效使用。

通过本实验,我们对平滑肌的药物反应有了更深入的了解,也为今后的相关研究提供了一定的参考。

希望本实验结果能够为临床药物的研发和应用提供一定的帮助。

白酒对家兔离体小肠平滑肌生理特性影响的研究

白酒对家兔离体小肠平滑肌生理特性影响的研究

20 0 8年 8 月
Au 2 0 g. 0 8
白酒 对 家 兔 离 体 小 肠 平 滑 肌 生 理 特 性 影 响 的 研 究
付 立 波 ,邵 凯2 ,景 丽娜
( . 春 师范学 院生命 科学 学 院 ,吉林 长春 1长
[ 摘
10 3 ;2 青 岛职 业技术 学 院海 尔学 院 ,山东 青 岛 30 2 .
[ 收稿 日期 ]2O — 4 0 O8 0 — 5 [ 者简介 ]付 立波 (95 ,男 ,吉林榆 树人 ,长春 师范学院生命科学 学院 副教授 ,博士 , 事动物生理 学研 究。 作 1 一) 6 从
气管 钩上 ,置于 盛有 3m 台 氏生理 溶液 的浴管 中 ;另 一 端经 细 线 连 于张 力 换 能 器上 ,然后 通 过升 降 换 能 器 0l 的高 度 ,使 标本 垂直 悬挂 于恒 温 的台 氏生理溶 液 的浴管 @c 。 张力换 能器 与生 物信 号采 集 与处 理 系统 的输 入 6 J 接 口连接 。选 择实 验项 目中 的消化 系统 实验 中 “ 消化 道 平滑 肌 的生理 特性 ”实验 模 块 ,设置 控 制参 数 。 12 2 记 录结 果及 观察 指标 待标 本 出现规 律 的 自发 节 律性 收 缩 并 稳定 2r n后 开 始 记 录 。观 察 在 正 常 情 .. 0i a
i [—1 i 3 4。 i
消化 道是 乙醇 进入 体 内最先 受刺 激 的部 位 ,有报 道 ,乙醇 进入 胃内可造 成 胃粘膜 损伤 J ,但有 关 乙醇 对 小 肠 活动影 响 的报 道 尚且很 少 。本实验 以家兔离 体小 肠为标 本 ,观 察不 同度 数 的白酒 对离 体小 肠平 滑 肌活 动 的影 响 ,进 一 步 了解 乙醇与人 体 健康 的关 系。 1 材料 与方 法 1 1 材 料 .

理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用引言:离体器官实验是一种常见的研究方法,它可以帮助我们更好地了解不同理化因素和药物对离体器官(如肠肌)的作用。

离体肠肌实验通常用于研究肠道平滑肌的收缩和松弛机制,以及肠肌对不同药物的反应。

本文将探讨理化因素(如温度、pH值和浓度)和药物对家兔离体肠肌的作用。

1.温度对离体肠肌的影响温度是一个重要的理化因素,它可以直接影响肌肉的收缩和松弛。

实验显示,提高温度可以增加肠肌的收缩能力,而降低温度则会降低肠肌的收缩力。

这是因为温度的变化可以直接改变平滑肌细胞内的钙离子浓度,从而影响肌肉的收缩反应。

此外,温度的改变还可以影响神经传导和神经-肌肉接头的功能,进而影响肠肌的收缩能力。

2.pH值对离体肠肌的影响pH值是一个反映酸碱性的指标,它也可以对离体肠肌的功能产生影响。

实验表明,酸性环境(低pH值)可以引起肠肌的收缩,而碱性环境(高pH值)则会导致肠肌的松弛。

这是因为pH值的改变可以影响细胞内的酶活性和代谢过程,对钙离子浓度和肌肉收缩机制产生影响。

3.浓度对离体肠肌的影响药物浓度是影响药物作用的重要因素之一、在离体肠肌实验中,通过改变药物浓度可以研究药物在不同浓度下对肠肌的作用机制。

实验表明,药物的浓度变化可以直接影响肠肌的收缩能力和松弛程度。

通常情况下,药物浓度越高,药作用越强。

但是,对于一些药物来说,浓度超过一定阈值后,其作用可能会饱和或逆转。

离体肠肌实验可以用于研究不同药物对肠肌的作用机制。

根据药物类型的不同,其作用机制也有所差异。

例如,去甲肾上腺素是一种常用的药物,它可以通过与肠道平滑肌细胞上的α-肾上腺素受体结合,引起肌肉收缩。

而酚妥拉明是一种抗胆碱能药物,它可以抑制胆碱能神经传导,从而引起肌肉的松弛。

通过研究不同药物的作用机制,可以更好地理解肠肌的生理功能和病理改变。

结论:理化因素和药物可以直接或间接地影响离体肠肌的收缩和松弛能力。

温度、pH值和浓度的改变可以改变调节平滑肌细胞功能的方式,从而影响肌肉的收缩和松弛反应。

实验5家兔离体肠肌活动的影响实验

实验5家兔离体肠肌活动的影响实验实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验【摘要】⽬的研究0.01%⼄酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl 溶液、25℃台⽒液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动的影响。

⽅法家兔离体⼩肠平滑肌标本的制备,⽣物信号采集处理系统记录在不同因素作⽤下张⼒曲线。

常⽤统计学⽅法和统计学指标。

结果滴加0.01%⼄酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液后,肠肌运动张⼒和频率都增⼤;滴加0.01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张⼒和频率迅速降低;25℃台⽒液刺激离体肠肌时,肠肌运动张⼒和频率先迅速下降后逐渐增⼤;停⽌通氧后,肠肌运动张⼒和频率逐渐降低。

结论0.01%⼄酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后⼜加强直⾄正常,缺氧使肠肌运动减弱。

关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、⼄酰胆碱、肾上腺素⽬录1.实验材料和⽅法 (2)1.1.实验材料 (2)1.2.实验⽅法: (2)2.实验结果: (4)3.实验讨论(见附页) (5)4.实验结论: (5)5.参考⽂献: (5)附页 (5)1.实验材料和⽅法1.1.实验材料1.1.1.实验动物:兔⼦(浙江中医药⼤学动物实验中⼼)1.1.2.实验材料和器械:家兔,麦⽒浴槽、超级恒温器、张⼒换能器、铁⽀架、电脑、、⽊锤、⽌⾎钳、⼿术⼑、20ml注射器、⼿术剪、持针器、⼿术圆针、缝线、烧杯、⼿术盘、搪瓷碗等。

1.1.3.实验药品:台⽒液:(0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065%NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3)、0.1%葡萄糖溶液。

1:10 000肾上腺素、1:10 000⼄酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。

1.2.实验⽅法:1.2.1.准备好离体肠管描记装置,麦⽒浴槽中加固定量(10ml-15ml)的台式液,调节超级恒温器的温度,使麦⽒浴槽内温度稳定在39摄⽒度上下。

离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告

离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。

三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。

四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。

㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。

㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。

㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。

实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察

实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。

实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。

平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。

2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。

而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。

3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。

而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。

实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。

组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。

2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。

a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。

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乙醇对家兔离体小肠平滑肌活动的影响
班级:法医0901 实验室301 组员:古忱苏秦韦甜许灵邵梦远陈惟【实验目的】
本实验以家兔离体小肠为标本,观察不同浓度乙醇对离体小肠平滑肌活动的影响,进一步了解乙醇与人体健康的关系。

【实验原理】
乙醇可抑制心肌自律性和降低心肌收缩力。

消化道是乙醇进入体内最先受刺激的部位,乙醇进入胃内可造成胃粘膜损伤,但乙醇对小肠活动有何影响,目前还不十分清楚。

有研究报道,乙醇对心肌细胞钠离子跨膜内流有一定抑制用,对心肌细胞内贮存的钙离子释放有显著抑制作用。

因认为乙醇对心肌细胞收缩的抑制作用可能是通过改变肌水平或肌浆对钙离子的转运而实现的,但不影响细胞外跨膜内流。

乙醇对小肠平滑肌的抑制作用可能与乙醇抑制钠离子、钙离子转运有关。

本实验采用常规离体灌注,小肠平滑肌标本活动的实验方法,记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。

用不同浓度乙醇对小肠平滑肌自发收缩活动进行作用,然后用其变化值与用药前比较。

【实验对象】
家兔,体重2-2.5kg,雌雄兼用
【实验药品和器材】
台氏液,MebLab生物信号采集处理系统;CW-3型平滑肌槽恒温仪,;无水乙醇(20℃时密度为0 789g/m1,用于配制不同浓度的乙醇);张力换能器,铁支架,双凹夹,温度计,烧杯。

【实验方法与步骤】
1.在实验前禁食24h,自由饮水,实验前1h喂食。

将家兔处死后,立即放入兔台上迅速沿腹正中线切开腹部,找出胃幽门与十二指肠交界处,以此处为起点,取十二指肠近端20cm肠管。

先将该肠管相连的肠系膜分离,再将拟取的肠管两端剪断,将游离的肠管取出体外,臵于盛有保持37℃的台氏液的烧怀中,用注射器抽取温台氏液洗净肠内容物。

当肠管活动明显时,将其剪成2cm左右的肠段作为实验标本。

2.结扎,并将一端固定于通气管钩上,臵于盛有30ml 台氏液的浴管中;另一端经细线连于张力换能器上,然后通过升降换能器的高度,以牵张结线,使标本垂直悬挂于恒温的台氏液的浴管中。

给予2g负荷平衡组织30min,将充满空气的气囊经一胶管与通气管相接,通入浴管的台氏液中,持续缓慢放气,其速度以持续单个气泡出现而不冲动小肠为宜。

小肠平滑肌活动变化值的测量采用计算机生物信号采集处理系统。

3. 向标本中滴入不同浓度乙醇(1.25% 2.5% 5% 9.0% 10%),并记录其收缩曲线
【实验项目】
1.记录小肠平滑肌自动节律性收缩曲线:记录离体小肠在37℃台氏液中
的收缩曲线,注意观察收缩的幅度和节律。

收缩曲线基线高低表示小肠
平滑肌紧张性的高低,收缩曲线高度表示小肠平滑肌的收缩活动的强
弱。

2.不同浓度乙醇的作用:在药管中加入1.25%的乙醇溶液100mml,观察
收缩活动的改变,待作用明显后,先打开药管的出口放弃含药的台氏液,
在打开二通开关使预液管预温的台氏液通向药管液,重复2-3次,待
小肠恢复后,再注入同样体积的2.5%的乙醇溶液,照上述方法依次做
完浓度为5%和9.0% ,10%的溶液。

【注意事项】
待标本出现规律的自发节律性收缩并稳定20min后开始记录。

先记录一段肠管在台氏液恒温37℃时的收缩曲线,观察肠管的收缩幅度、收缩频率,并从收缩曲线的基线改变,观察小肠平滑肌张力变化,以收缩基线上升。

表示张力增强,收缩基线下降表示肌张力减弱。

每次实验项目完成后,用37℃温热台氏液反复冲洗肠管,每次5min,共3次,然后观察肠管活动恢复情况。

【实验结果预测】
预测1:在钙离子流向肌浆而引起收缩过程中,膜电位逐渐升高,当膜电位达到一定值,钙离子通道开始关闭,也就是说钙离子通道是一种电压门控通道,而乙醇可以和关闭的钙离子通道可逆性结合,从而维持后者的关闭状态。

因此:
1. 收缩曲线的基线上升且几乎一致(这时的膜电位就是上述的V)
2. 乙醇浓度的升高被乙醇维持的关闭着的钙离子通道增多,波形越来越缓直至变成一直线。

3. 由于是可逆性结合故而经台氏液洗涤后仍能恢复。

预测2:乙醇可能影响钙泵的功能,因为舒张过程是由肌浆的钙离子下降引起,而钙离子的下降主要为钙泵的功劳。

乙醇和钙泵可逆性结合来抑制钙泵的作用,从而使曲线停止于收缩状态
【实验意义】
含酒精的饮料对小肠有较大的影响,它能使小肠活动停止于收缩状态从而
对机体造成伤害,所以我们在日常生活中应该少喝含酒精的饮料。

【实验结果记录及分析表】
作用机制可能是:乙醇为小分子脂溶性物质,其适宜的脂水分配系数使其能够透过细胞膜而进入细胞内影响膜蛋白和膜脂导致膜结构紊乱,乙醇的急性效应是降低胞浆Ca2+浓度,膜转运蛋白功能紊乱,细胞外Ca2+进入细胞内,细胞内Ca2+浓度升高,造成钙超载。

当各种原因引起胞浆内Ca2+浓度异常增加时,将刺激线粒体钙泵向线粒体内摄钙,使胞浆内Ca2+向线粒体内转移。

线粒体摄入过多的钙,除增加ATP消
耗外,Ca2+还与线粒体内含磷酸根的化合物结合,形成不溶性磷酸钙,干扰线粒体氧化磷酸化,使ATP生成减少;另外,线粒体内Ca2+浓度的逐步增加,使其跨膜电位逐渐减小,产生ATP的功能逐渐丧失,从而干扰心脑细胞的能量代谢。

线粒体内的Ca2+浓度升高最终使线粒体的渗透转运孔道呈高通透性持久开放状态。

PTP是一种位于线粒体内外膜结合处,受Ca2+、线粒体膜电位、pH等调控的蛋白性孔道。

PTP的高通透性持久开放,则引起线粒体内膜通透性急剧增加,使得一些在正常情况下不能通过内膜的物质(分子量>1500D)可以自由透过内膜,从而继发线粒体膜除极、氧自由基(ROS)过量生成、基质渗透性肿胀及凋亡效应蛋白释放等一系列细胞学效应,致使线粒体肿胀破坏,膜电位完全、永久消失,对线粒体结构和功能造成不可逆性损伤。

自由基性质活泼,有极强的氧化能力,通过氧化反应来攻击细胞膜、线粒体体膜,与膜中不饱和脂肪酸反应,造成脂质过氧化,脂质过氧化产物又可以分解为更多的自由基,引起自由基连锁反应。

自由基可与各种细胞成分反应,造成细胞结构损伤和功能代谢障碍:(1)膜脂质过氧化增强:通过破坏细胞膜的正常结构,间接抑制膜蛋白功能,促进自由基及其他生物活性物质生成;破坏线粒体膜的正常结构,减少ATP生成;(2)蛋白质功能抑制:氧化某些氨基酸残基或酶的巯基,使胞浆及膜蛋白和某些酶交联,直接损伤其功能;(3)破坏核酸及染色体:自由基可使碱基羟化或DNA断裂,从而引起染色体畸变或细胞死亡。

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