多功能DNA纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
DNA产物纯化试剂盒使用说明
DNA产物纯化试剂盒使用说明首先，准备工作。
将DNA产物纯化试剂盒中所需的试剂和材料平衡至室温。
同时，准备好所需的离心机、洗涤液和洗脱液等设备和试剂。
接下来，使用试剂盒提供的离心管将DNA产物样品加入离心管中。
然后进行离心步骤，使DNA沉积在离心管底部。
根据试剂盒的具体要求和实验目的，离心条件可以有所不同，如转速和离心时间等。
离心完成后，上清液将包含主要的杂质。
然后，将上清液倒出，注意不要打破DNA沉淀。
接着，使用洗涤液进行洗涤步骤。
将洗涤液加入离心管，然后轻轻混合，使洗涤液和DNA充分接触。
再次进行离心步骤，使DNA沉积在离心管底部。
再次倒出上清液，以去除多余的杂质。
然后，使用洗脱液将DNA从离心管中洗脱出来。
将洗脱液加入离心管，并在室温下孵育一段时间。
然后，进行最后一次离心步骤，以将DNA完全沉积在离心管底部。
最后，将洗脱液和含有纯化后的DNA的上清液转移到一个干净的离心管中。
最后，进行DNA纯化后的样品的分析和存储。
使用适当的方法和设备，如电泳或光谱仪，验证DNA的纯度和浓度。
如果需要，可以将纯化后的DNA进行长期冻存或其他相应的操作和储存。
总之，DNA产物纯化试剂盒能够方便快速地从混合DNA产物中纯化目标DNA。
它通过一系列的操作步骤，包括离心、洗涤、结合和洗脱等，能够将目标DNA从杂质中分离出来，提供纯净的DNA样品。
使用者只需要按照说明书中的步骤进行操作，就可以得到高质量的DNA样品，用于后续的分析、实验和存储等工作。
DNA凝胶回收试剂盒产品说明书
北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期：常温运输和保存，保质期一年。
产品描述：本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ，回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分：使用方法：1.凝胶回收：切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收：直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡，需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟)，其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。
3.在等待期间，活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12,000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇（对100mg胶块，加50uL），快速振荡10秒混匀。
碧云天DNA纯化试剂盒产品说明书
碧云天DNA纯化试剂盒产品说明书产品中文名称：PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒产品英文名称：PCR Clean Up Kit/DNA Purification Kit产品属性：特点：采用了一种新型的DNA纯化柱。
在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。
无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足15分钟即可完成。
每个DNA纯化柱最多可以结合的DNA量：约15微克。
DNA回收效率：约90%纯化能力：纯化50个平均体积不超过400微升的DNA样品。
组分：溶液I (DNA纯化结合液)：20ml溶液II (洗涤液)：26ml (第一次使用前加入39ml无水乙醇)溶液III (洗脱液)：3mlDNA纯化柱及废液收集管：50套保存条件：室温保存，一年有效。
产品应用：适用于PCR反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质；同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化。
纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA，长至30个碱基的引物均可去除。
产品数据：DNA回收效率约为90%，接近100bp或10kb的DNA片段回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。
另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
图为试剂盒纯化效果图（仅供参考）注意事项：1.第一次使用前在溶液II(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
2.溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
3.本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。
所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
PCR产物纯化回收试剂盒
◆PCR产物纯化回收试剂盒◆目录号1302◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外PCR产物纯化回收试剂盒目录号：1302目录编号包装单位130201 50次130202 100次130203 200次适用范围：适用于PCR反应产物、酶切产物DNA片段、探针标记纯化回收，DNA样品浓缩等。
试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次平衡液室温5ml 10ml 20ml结合液BB 室温30 ml 60ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 20 ml 吸附柱EC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
使用前应该恢复到室温2.储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：在高离序盐存在的情况下，DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质结合液，不含传统结合液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.结合液调制成为了黄颜色，便于监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
4.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
DNA回收试剂操作步骤
胶回收目的基因一、平衡柱子1.取一个新的Hibind DNA结合柱装在收集管中，吸取合适体积的Buffer GPS 平衡缓冲液（具体见下表）至柱子中；小量提取200ul中量提取1ml大量提取3ml2.室温放置3-5min。
3.室温下，12,000转离心2min或3,000转离心5min。
4.倒弃收集管中滤液，将Hibind DNA柱子重新装在收集管中；加入700ul（Minicolum），4ml（Midi column）或10ml（Maxicolumn）灭菌水至柱子中。
5.室温下，按上述条件离心；6.倒弃收集管中滤液，将Hibind DNA柱子重新装在收集管中；这就是已经平衡好的柱子，按试剂盒说明书进行操作。
该流程处理过的柱子，可室温放置1-2周。
二、胶回收目的基因1.琼脂凝胶电泳回收DNA目的片段时，使用新鲜的TBE电泳缓冲液，重复使用影响PH值和回收产量。
2.小心切除目的片段。
3.将目的片段称重后放入1.5ml离心管中，凝胶重为0.1g，其体积可视为100ul，添加与等体积的绑定缓冲区(XP2)。
孵化混合物在55 - 60摄氏度7分钟或直到凝胶完全融化。
混合摇动或倒置管每2 - 3分钟。
离心管收集所有液体到试管底部。
注意：pH值影响完全溶凝胶后的凝胶/绑定缓冲混合物。
DNA产量将明显降低pH值>8时。
如果混合物的颜色变成橙色或红色,加上5ul 5m的醋酸钠；pH值为5.2时,将pH值下降。
调整后, 凝胶/绑定缓冲区混合物的颜色是淡黄色。
4.将Hibind DNA结合柱装在合适的收集管中（2ml）；5.向HiBind®DNA结合柱加入700ul的DNA/agarose solution（DNA /琼脂糖溶液）,在室温10,000转离心1min；6.倒弃收集管中的废液，HiBind®DNA结合柱容量超过700ul，可以收集25ug左右的DNA,如量多可分开回收。
7.向HiBind®DNA结合柱中加入300ul Binding Buffer（XP2），在室温10,000转离心1min；8.向HiBind®DNA结合柱中加入700ulSPW,在室温放置1-2min，再10,000转离心1min；倒弃废液；注：spw使用前加入无水乙醇。
PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）
PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）储存条件：PCR 产物回收纯化试剂盒（磁珠法）保存于2-8℃。
产品描述：PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）采用超顺磁性磁珠，配合优化的缓冲液体系，可方便、快速回收PCR产物中的DNA，并有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质，整个过程操作简单快速。
本产品可用于纯化回收150bp~50kb的DNA片段，回收率可达 90%以上，且 DNA 纯度高。
纯化后的DNA可用于酶切、测序、PCR等后续操作。
实验方案1. 取出100 μL Binding Buffer至合适的反应管(1.5 mL EP管或PCR管)中。
2. 将MagBeads Preservation Solution漩涡震荡30s，使磁珠充分震荡重悬，取出20 μL ，加入Binding Buffer中，用移液器缓慢吹打10次或漩涡震荡30s。
使磁珠分散均匀。
注意：用移液器吹打重悬磁珠时需缓慢操作，避免产生气泡。
吹打后应将吸头内残留的磁珠吹打干净，避免磁珠损失。
如果需要同时进行多个样品的纯化，请先在同一个容器中进行磁珠预处理，再将磁珠分装到各个反应管中。
1. 向预处理后的磁珠悬液中加入50 μL PCR产物，用移液器缓慢吹打10次或漩涡震荡30s使两者充分混匀。
2. 将反应管在室温下静置5min，让DNA和磁珠充分结合。
3. 将反应管置于磁力架上，等待2分钟，目测磁珠全部吸附于管壁上(后续该操作简称为“磁性分离”)，移去上清液，从磁力架上取下反应管。
主要成分：结合DNA磁珠预处理1 Binding buffer为异丙醇，客户自行准备。
2Wash Buffer： 首次使用前请添加无水乙醇。
接下一页磁力架使用说明磁条：可抽出2卡口：对准此处按下EP 1常见问题指南：Q1: 纯化PCR产物的得率低？A1: 1. 确保磁珠混匀，并与产物充分结合 2. 确保使用Wash Buffer前，乙醇已加入3. 如果使用其他洗脱液进行洗脱，请确保合适的洗脱液pH和盐浓度Q2: 为什么所得PCR产物的A260/A230比值偏低？A2: 可能残留有有机试剂，可尝试用乙醇沉淀法再进行一次洗涤。
Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书
完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分，凝胶重量不超過300 mg ）放入干净的离心管中． 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解．注意：凝胶完全融解后应呈现黄色，即可进行后续操作。
如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色，请使用10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作．（溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA 才能够有效的与膜结合，当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色，需要进行调整．）2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 待溶液温度降至室温后，将所得溶液加入吸附柱ＤＦＨ中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1，以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中． 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除．注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切，PCR 等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分，凝胶重量不超過300 mg ）放入干净的离心管中． 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解．注意：凝胶完全融解后应呈现黄色，即可进行后续操作．如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色，请使用10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作．（溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA 才能够有效的与膜结合，当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色，需要进行调整．）2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 待溶液温度降至室温后，将所得溶液加入吸附柱DFH 中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中，以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除．注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、ＰＣＲ等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中，向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ，充分混匀（无需去除石蜡油或矿物油）． 注意： 如PCR 反应体系为50 μl （不包括石蜡油体积），则加入250 μl 溶液Gel/PCR ． 樣品混匀后溶液应呈现黄色，即可进行后续操作． 如果溶液的颜色为紫色，请加入10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作． 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中． 注意：吸附柱容积为750 μl ，若样品体积大于750 μl 可分批加入．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除． 注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切，PCR 等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download。
DNA纯化回收试剂盒
DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管（2ml）50个200个说明书1份1份二、操作步骤（一）、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
（请使用当天处理过的柱子）2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入赶紧的离心管中，称取重量。
3、向胶块中加入等倍体积溶液PC（如果凝胶重为0.1g，其体积可视为100ul，则加入100ulPC溶液），50℃水浴放置10分钟左右，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。
（若胶块的体积过大，可事先将胶块切成碎块）4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。
5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。
6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中，12000rpm（~13400×g）离心2分钟，尽量出去漂洗液。
将吸附柱置于室温放置数分钟，彻底晾干。
8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。
12000rpm（~13400×g）离心2分钟，收集DNA溶液。
（二）、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
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杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
多功能DNA纯化回收试剂盒
目录号：DR03
试剂盒组成、储存、稳定性：
试剂盒组成保存
50次
(DR0301)
100次
(DR0302)
200次
(DR0303)
平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶/结合液DB 室温50ml 100ml 200ml
漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇
洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 20 ml
吸附柱EC 室温50个100个200个
收集管（2ml）室温50个100个200个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
适用范围：
适用于琼脂糖凝胶DNA回收、PCR反应产物纯化回收、酶切产物DNA片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA样品浓缩等。
储存事项:
1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直
接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
使用前应该恢复到室温。
2. 储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存
均在室温下（15℃-25℃）进行。
3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时
盖紧盖子。
产品介绍：
在高离序盐存在的情况下，DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，
最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附
量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、
连接克隆等下游反应。
3. 独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运
用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用。
4. 溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到
最佳结合效果，大大提高回收效率。
5. 改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH
缓冲在最佳结合范围内。
6. 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
注意事项
1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，
如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.溶胶液/结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛
和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3.回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率迅速
降低。
4.回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有关。
一般1-15μg，
100bp-5kb的DNA片段，回收率可高达85％－95％。
5.切胶回收时，紫外灯观察对DNA片段有损坏作用，应该尽可能使用能量低的长波
紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。
也可以使用水
洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。
用水洗脱，DNA片段应该保存在－20℃。
DNA片段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以
适当稀释。
关于平衡液的使用
1.介绍：核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影
响其核酸的结合能力。
硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。
从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。
平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。
用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。
室温保存。
在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。
2.使用方法：取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中，吸取100μl的平衡缓冲液
至柱子中。
13000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。
此时平衡液预处理柱子完毕。
接后续的操作步骤。
操作步骤：
提示：第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1.琼脂糖凝胶DNA回收：
1. 在长波紫外灯下，用干净刀片将所需回收的DNA条带切下，尽量切除不含DNA
的凝胶，得到凝胶体积越小越好。
2. 将切下的含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心管，称重。
先称一个空1.5ml离心管重量，然后放入凝胶块后再称一次，两次重量相减，得到凝胶的重量。
3. 加3倍体积溶胶/结合液DB。
如果凝胶重为100mg，其体积可视为100μl，则加入300μl溶胶液。
如果凝胶浓度大于2％，应加入6倍体积溶胶液。
4. 56℃水浴放置10分钟（或直至胶完全溶解）。
每2-3分钟涡旋震荡一次帮助加速
溶解。
5. 可选,一般不需要：每100mg最初的凝胶重量加入150μl的异丙醇，震荡混匀。
有时候加入异丙醇可以提高回收率，加入后不要离心。
回收大于4Kb的片段时，不加入异丙醇，加入有时反而可能降低回收效率。
平衡液预处理吸附柱：
使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”
6. 将上一步所得溶液加入吸附柱EC中（吸附柱放入收集管中），室温放置1分钟，
12,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。
如果总体积超过750μl，可分两次将溶液加入同一个吸附柱EC中。
过滤下的溶胶/结合液和收集管内残存的强碱性平衡液混合后，溶胶液可能会从黄色变成橘红甚至紫色，此为酚红PH指示剂碱性条件下的正常颜色变化。
7. 加入600μl漂洗液WB （请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30
秒，弃掉废液。
8. 加入600μl漂洗液WB，12,000rpm离心30秒，弃掉废液。
9. 将吸附柱EC放回空收集管中，12,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂
洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱EC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加50μl洗脱缓
冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中加热效果更好），室温放置2分钟，12,000rpm 离心1分钟。
如果需要较多量DNA，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，离心1分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于25μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少产量。
2.PCR产物或者酶切片段等DNA纯化：
1. 每100μl PCR扩增后体系或者酶切后体系加入500μl溶胶/结合液DB，充分混匀。
（如果初始体系小于100μl，请事先用双蒸水调整至100μl）。
平衡液预处理吸附柱：
使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”
2. 将上一步所得溶液加入吸附柱EC中（吸附柱放入收集管中），室温放置1分钟，
12,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。
3. 从此步骤开始和琼脂糖凝胶DNA回收的操作步骤7-10完全一致，请参见琼脂糖
凝胶DNA回收的操作步骤7-10。