天根琼脂糖gel DNA回收试剂盒
天根切胶回收说明书

天根切胶回收说明书
天根切胶回收试剂盒说明书
一、产品简介
天根切胶回收试剂盒是一种高效的DNA片段回收试剂盒,能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段。
该试剂盒采用独特的吸附技术,能够有效地去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段。
回收的DNA片段可用于后续的克隆、测序、PCR等实验。
二、产品特点
1. 高效回收:能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段,回收率高达90%以上。
2. 纯度高:能够有效去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段,提高后续实验的准确性和可靠性。
3. 操作简便:采用独特的吸附技术,无需使用有机溶剂,简化了操作步骤。
4. 稳定性好:试剂盒中的成分稳定,便于长期保存和使用。
三、使用方法
1. 准备凝胶和电泳缓冲液:将凝胶和电泳缓冲液按照要求准备妥当。
2. 切胶:按照实验要求将凝胶切成适当大小的胶块。
3. 洗涤:将切好的胶块放入离心管中,加入适量的洗涤液,充分混匀,洗涤去除凝胶中的杂质。
4. 吸附:将洗涤后的胶块放入吸附柱中,按照说明书要求进行吸附操作。
5. 洗脱:将吸附后的DNA片段进行洗脱,收集洗脱液。
6. 检测:对回收的DNA片段进行检测,如琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测。
四、注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书,确保按照说明书要求正确操作。
2. 本试剂盒仅供实验室使用,请勿用于食品、药品等领域。
3. 使用过程中请注意安全,避免直接接触眼睛、皮肤和衣物等。
如不慎接触到皮肤或眼睛,请立即用清水冲洗,并及时就医。
4. 本试剂盒中的试剂和耗材均为一次性使用,用后请及时处理废弃物。
DNA凝胶回收(试剂盒)

DNA凝胶回收(试剂盒)
1.在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸净凝胶表面液体并切碎。
计算凝胶重量。
该重量作为一个凝胶体积。
(提前记录1.5ml离心管重量,100mg等于100ul体积)
2.加入3个凝胶体积的Buffer DE-A,混合均匀后于75℃加热(低熔点琼脂糖凝胶于40℃加
热),间断混匀(每2-3Min),直到凝胶块完全融化。
(约6-8Min)
注意:buffer DE-A为红色。
帮助观察凝胶是否完全融化。
3.加0.5个buffer DE-A体积的Buffer DE-B,混匀。
(当分离的DNA片段小于400bp时,需再加入一个凝胶体积的异丙醇)
注意:加入buffer DE-B 为黄色
4.吸取3中混合液,转移到DNA制备管中(2ml试剂盒内提供的离心管)中,12000g离心1Min,室温放置2Min。
弃滤液。
5.将制备管置于2ml 离心管中,加500ul buffer W1,放置2Min,12000g离心30s 弃滤液。
6.将制备管置于2ml 离心管中,加700ul buffer W2,放置2Min,12000g离心30s 弃滤液。
重复一次,不过时间为1Min。
7.将制备管置于2ml 离心管中,12000g再离心1Min。
8.将制备管置于洁净的1.5ml的离心管中(试剂盒内提供),在制备膜中央加入25-30ul Eluent,室温静置1min,12000g 离心1min 洗脱DNA.可暂放-20冰箱中。
DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。
产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。
3.在等待期间,活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。
胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理首先,将含有目标DNA片段的琼脂糖凝胶切割出来。
这可以通过电泳将DNA片段从DNA混合物中分离出来,然后在紫外灯下观察到DNA片段的迁移带。
然后,将切割的琼脂糖凝胶用试剂盒提供的缓冲液进行均质化处理。
均质化后的琼脂糖凝胶中含有目标DNA片段。
接下来,使用离心机将均质化后的琼脂糖凝胶离心。
离心的目的是将琼脂糖凝胶上的DNA片段分离出来。
DNA片段会沉积到离心管底部的沉淀中。
上清液中则只含有琼脂糖凝胶、缓冲液和其他杂质。
然后,将离心管中的上清液去除。
去除上清液的目的是除去琼脂糖凝胶的残余和其他杂质,以便纯化DNA片段。
最后,向离心管中加入酶切缓冲液和蛋白酶。
酶切缓冲液包含酶切DNA片段所需的盐和缓冲成分,以及一些防止核酸降解的物质。
蛋白酶则会降解琼脂糖和与其结合的蛋白质。
在将酶切缓冲液和蛋白酶加入后,离心管需要在适当的温度下进行酶切反应。
酶切反应的目的是分解凝胶中的琼脂糖和与其结合的蛋白质,从而释放出目标DNA片段。
在酶切反应完成后,离心管需要再次进行离心,以将琼脂糖和其他残留物沉淀到离心管底部。
上清液中则含有纯化后的DNA片段。
最后,将离心管中的上清液转移至干燥消化DNA纯化膜(试剂盒中提供),并根据试剂盒的说明进行后续的DNA回收操作。
根据不同试剂盒的要求,DNA可以通过洗涤、低温离心或其他方法进行最终的回收。
总的来说,胶回收DNA试剂盒的原理是通过离心法和蛋白酶酶解法将凝胶上的目标DNA片段回收,以获得纯化后的DNA样品。
这一方法简单有效,可以应用于分子生物学和生物医学研究中的DNA分析和操作。
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒大比对

3. 评估方法 • 使用Nanodrop 2000测量OD值
图: 取2ul纯化的质粒DNA上样于1.0%琼脂糖凝胶电泳 分析结果。M: DL5000 DNA Marker. 结果表明,Magen的HiPure Plasmid Micro Kit与其它品 牌对应的产品效果相当,质粒条带完整,超螺旋质粒含量 高。
2. 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒大比对
1. 选择品牌: • Qiagen, QIAquick Gel Extraction Kit , 28704 • Tiagen, 超薄琼脂糖凝胶回收试剂盒,DP208 4. 电泳结果
• Omega, E.Z.N.A. Gel Extraction Kit, D2500-02
1. 选择品牌: • Qiagen, QIAamp DNA Blood Mini Kit, D51104 • Tiagen, 血液基因组提取试剂盒(DP318) 4. 电泳结果
试剂盒回收DNA,然后电泳检测DNA回收效率。结果表明,
Magen的HiPure Gel Pure DNA Micro Kit在小片段和大片段上 有更高的回收率,其余片段则相差不大。
3. 评估方法
•
用1琼脂糖电泳分析DNA回收效率
Magen HiPure Gel Pure DNA Micro Kit(D2110)的优势:
3. 评估方法
•
用1琼脂糖电泳分析DNA回收效率
Magen HiPure PCR Pure DNA Micro Kit(D2120)的优势: 1. 高效去除引物二聚体。 2. 低洗脱体积,可低至7-10ul洗脱。 3. 长时间稳定的结合柱,无需平衡液处理 4. 更高的回收率
4.பைடு நூலகம்柱法血液DNA提取试剂盒大比对
CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒提取食用菌DNA

32生物技术且污染较少[I引。
综合前人研究成果,作者采用间接法提取青贮饲料中的微生物总DNA,使用了CTAB试剂,采用异丙醇沉淀DNA。
吸光度和PcR检测是评价DNA质量常用的手段。
临1,本研究中通过光吸收、琼脂糖电泳及PcR检验,结果表明提取的DNA质量较高。
进一步的DGGE结果表明,所述方法具有较高的涵盖性,对样品中的微生物没有遗漏。
图6目标菌株的扩增结果M:分子量标准;1:添加目标菌株的实验组;2:未添加目标菌株的对照组。
Fig.6A群∞∞egelelectmphon∞isofPCRamplifiedDNAfromlargetstrainM:DNAmarkerD12,000;1:cornstalkwithaddedtariffstrain;2:controlcomslalkwithNolmgetstrain.WhitehouseCA等¨6j通过向处理过的土壤中加入目标菌株Franci.靶llatularensis的方法评价不同商业DNA抽提试剂盒的抽提灵敏度,结果最好的两种试剂盒的极限灵敏度为20—100cfu/g材料。
本文用同样的策略,采用文中所述方法从含有75个L.case/的材料提取的DNA中PCR扩增出了目的片段,灵敏度折合约3cfu/g材料。
YangJin—Long等。
15。
用ERIC—PCR方法评价了从粪便中提取细菌总DNA的方法,本研究中用DGGE法对提取方法进行评价。
发现所述的提取方案能提取出所有的菌株的染色体,没有遗漏。
随着微生物分子生态学的发展,各种提取环境样品总DNA的方法陆续建立起来,但是对多种环境样品而言,没有一种方法能适用于所有的环境样品,每一种样品都需要根据其特有的理化和生物学特性,优化出一种合适的提取DNA的方法‘4'”J。
参考文献:[I]YangHY,WangXF,LiuJB,e1.a1.Effectofwater一.solublecarbo-hydratecontentmsilagefermentationofwheatstl'aw[J].JournalofBi旧-scienceandmomgiaeering.2006,lOI(3):232—237.[2]NisIdnoN,WadaH,瑚idaM,ela1.Micwbialcomls,fermentatian2009年19(1)prt】clucts,andaerobicstabilityofwholecropcornandatotalmixedrationell—siJedwithandwithoutinoeulmion0f厶吲06捌ZmⅢior厶删06∞姚Ⅱbucha硎【JJ.JournalofDairysd蛳蚀,2004,87(8):2563~2570.[3]RossF,De¨aglioF.QualityofsilagesfromItalianfarms∞att8tedbyn幽andindenfityofmicrobialindicators【Jj.JApptM.a删,2007,103(5):1707一1715.[4]JanyJL.BarbierG.Culture—independenti'Ilf,th础qforidentifylngmicrobi—alcommunitiesincheese[J].FoodmiaobioIo科,.2008.25(7):839—848.【5JLeeL,rnnLS.KelleyST.Culture—independentanalysisofbacterialdi—versityiilachild—carefacility[J].BMCMicrobiol,2007.7(27):l—13.[6JAmininAL,WarganegaraFM,AditiawatiP,eta1.Siarpleenrichmentandindependentculturestoexp∞dbacteAalcommunityanalysisfromgedong-songohot@ring[J].JournalofBioscicneeand瑚帕呜.哪州雌,2008,106(2):21l一214.[7]MuyzerG.DGGF¨V,GEamethodforidentifyinggenesfromnaturaleeosys-terns【JJ.Curr0I'illMicrobiol。
多功能DNA纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://多功能DNA纯化回收试剂盒目录号:DR03试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0301)100次(DR0302)200次(DR0303)平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶/结合液DB 室温50ml 100ml 200ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 20 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
适用范围:适用于琼脂糖凝胶DNA回收、PCR反应产物纯化回收、酶切产物DNA片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA样品浓缩等。
储存事项:1. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
使用前应该恢复到室温。
2. 储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3. 独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用。
Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作。
如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作.如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中,以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中,向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油). 注意: 如PCR 反应体系为50 μl (不包括石蜡油体积),则加入250 μl 溶液Gel/PCR . 樣品混匀后溶液应呈现黄色,即可进行后续操作. 如果溶液的颜色为紫色,请加入10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作. 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 注意:吸附柱容积为750 μl ,若样品体积大于750 μl 可分批加入.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除. 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
快速:整个操作过程快速方便,几十分钟即可完成回收工作。 多样:可以回收单链、双链 DNA 片段以及环状质粒 DNA。 高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液,保证最大量回收到高纯度的目的 DNA。
7. 为了提高 DNA 的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,重复 步骤 6。
CA1 柱的洗脱体积不应少于 20 μl,CA2 柱的洗脱体积不应小于 30 μl 过小影响回收效率。 洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内 (可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围),pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;且 DNA 产物应 保存在-20℃,以防 DNA 降解。
注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。 2. 如下一步实验要求较高,则应尽量使用 TAE 电泳缓冲液。 3. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA 造成损伤。 4. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测 pH 值,如 pH 值大于 7.5,可向含
DP208/209-03 (200 次) 2 x 100 ml 50 ml 30 ml
20 个
50 个
200 个
20 个 1份
50 个 1份
Байду номын сангаас
200 个 1份
储存条件:
本试剂盒在室温(15–25℃)干燥条件下,可保存 12 个月;更长时间的保存 可置于 2–8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放 置一段时间,必要时可在 37℃水浴中预热 10 分钟,以平衡溶液温度。)
操作步骤:
第一次使用前请先在 15 ml 漂洗液 PW 中加入 60 ml 无水乙醇! 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的 离心管中,称取重量。
2. 向胶块中加入 3 倍体积溶胶液 PN(如果凝胶重为 0.1 g,其体积可视为 100 µl, 则加入 300 µl 溶胶液),50℃水浴放置 10 分钟,其间不断温和地上下翻转离心 管,以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块,可再补加一些溶胶液或继续 放置几分钟,直至胶块完全溶解 (若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)。
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD Order: 010-82629288 Technical: 010-62521767 62526072 Toll-free: 800-810-2177
超薄/普通 琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒
(离心柱型) 目录号:DP208/209
4. 向吸附柱中加入 700 μl 漂洗液 PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇), 13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5. 向吸附柱中加入 500 μl 漂洗液 PW,13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉废液。将离 心吸附柱 CA1 或 CA2 放回收集管中,13,000 rpm 离心 2 分钟,尽量除去漂洗 液。将吸附柱置于室温或 50℃温箱数分钟,彻底地晾干,以防止残留的漂洗液 影响下一步的实验。
注意:如果漂洗液有残留会影响回收效率和 DNA 质量。
订货电话:010-82629288
6. 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量 65–70℃ 水浴预热的洗脱缓冲液 EB,室温放置 2 分钟。13,000 rpm 离心 1 分钟收集 DNA 溶液。
产品简介:
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统, 从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、 无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp–40 kb大小的片段,回收率大 于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30-50 %)。
注意:胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合 DNA 的能力较弱。
3. 将上一步所得溶液加入一个吸附柱 CA1 或 CA2 中(依所购买的试剂盒种类而定) (吸附柱放入收集管中),13,000 rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中的废液,将吸 附柱重新放入收集管中。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
试剂盒内容:
试剂盒组成
溶胶液 PN 漂洗液 PW 洗脱缓冲液 EB 吸附柱 CA1 (DP208 超薄型)
或 吸附柱 CA2 (DP209 普通型) 收集管(2 ml)
说明书
DP208/209-01 (20 次) 20 ml 15 ml 15 ml
DP208/209-02 (50 次) 50 ml 15 ml 15 ml
DNA 浓度及纯度检测
回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯 度。
DNA 应在 OD260 处有显著吸收峰,OD260 值为 1 相当于大约 50 μg/ml 双链 DNA、40 μg/ml 单链 DNA。
OD260/OD280 比值应为 1.7–1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离 子水,比值会偏低,因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
有 DNA 的胶溶液中加 10–30 µl 3 M 醋酸钠(pH5.2)将 pH 值调到 5–7 之间。
5. 回收<100bp 及>10kb 的 DNA 片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗
脱的时间。 6. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率
越低。
技术支持:010-62526072 62521767