氨基酸自动分析仪
日立L-8900氨基酸自动分析仪
离子交换树脂
专用氨基酸分析仪的色谱柱主要是以磺酸型强酸性阳离子交换 树脂为柱填料。强酸型阳离子交换树脂，它是由苯乙烯和二乙 烯苯聚合而成的。该树脂是由苯乙烯和二乙烯基本聚合后磺化 而成，球状树脂的粒度一般在5-10μm之间，交联度多为8%12%。
交联度大，树脂的网状结构紧密，孔隙度小，对外界离子进入 树脂有阻碍作用，较大的离子根本不能进入树脂内部，这样就 可以提高树脂对离子的选择性。交联度大的适合用于分子量较 小的氨基酸分离；交联度小，树脂结构疏松，孔隙度大，适合 用于蛋白质、肽类的分离。
氨基酸在溶液中受溶液 pH 的影响存在着下列平衡
等电点（pI）：在某一 pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴 离子的趋势或程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时溶液 的pH成为该氨基酸的等电点。
不同氨基酸等电点
丙氨酸 Ala （A）6.02 天冬酰胺 Asn （N）5.41 半胱酰酸 Cys （C）5.02 谷氨酰胺 Gln （O）5.65 组氨酸 His （H）7.58 赖氨酸 Lys （K）9.74 苯丙氨酸 Phe （F）5.48 丝氨酸 Ser（S）5.68 色氨酸 Trp （W）5.88 缬氨酸 Val （V）5.97
缺点：水解时间长、而且不易水解完全。 提示：作为氨基酸全分析不可采用此法。 目前日本、欧洲和我国植物蛋白水解生产上采用的工艺均为酸水解法
4. 微波消解法：微波消解技术，近年来在化学领域尤其是在氨基酸 样品前处理方面显示出了良好的应用前景。
微波水解条件：体积30毫升左右高强度、耐腐蚀和透射微波的容器， 水解温度150-160℃，水解时间30分钟。
1.酸水解法：标准水解法，是普遍采用的水解方法，在水解过程中采 用6N 的盐酸作为水解剂，此方法的特点是水解彻底，水解后的氨基 酸全部以L-型形式存在，但色氨酸遭破坏。（6N HCL 、110℃真空 水解24小时）
全自动氨基酸分析仪安全操作及保养规程
全自动氨基酸分析仪安全操作及保养规程1. 引言全自动氨基酸分析仪是一种高精准度的仪器设备，广泛应用于生物化学、制药、食品科学和环境科学等领域。
为了确保全自动氨基酸分析仪的正常运行，保障操作人员的安全，提高仪器使用寿命，特制定本安全操作及保养规程。
2. 安全操作规程2.1. 仪器准备在使用全自动氨基酸分析仪之前，必须做好以下准备工作：•检查仪器及附件的完整性和完好性，确保没有破损或缺失部分；•检查仪器的电源是否正常，接地是否良好；•检查仪器各项连接是否牢固，不得存在松动或漏气的情况；•准备好所需的标准品、试剂和样品。
2.2. 操作流程全自动氨基酸分析仪的操作流程如下：1.打开仪器电源，启动仪器，等待仪器自检完成；2.根据实验要求，选择相应的测试方法和参数；3.准备好标准品和待测样品，并按照规定的比例进行稀释；4.将标准品和样品加入仪器中，按照指示设置仪器的运行参数；5.启动仪器运行，等待测试结果；6.记录测试结果，并根据需要进行数据处理和分析；7.清洗仪器和配件，关闭仪器电源。
2.3. 仪器维护为了确保全自动氨基酸分析仪的正常运行，必须进行定期的维护保养工作。
以下是常见的维护保养内容：•每天使用后，对仪器进行外观清洁，包括仪器表面、键盘、显示屏等；•每周清洗仪器内部，包括进样器、反应器、光路和传感器等部分；•定期检查仪器的气路系统，确保气路畅通无阻；•定期校准仪器，以确保测试结果的精确度和准确性；•定期更换仪器的耗材和配件，如注射器、试剂瓶等。
3. 安全注意事项在操作全自动氨基酸分析仪时，必须注意以下安全事项：•操作人员必须穿戴防护眼镜、实验手套和防护服；•操作人员应严格按照操作流程进行操作，不得随意更改参数或操作顺序；•在使用化学试剂时，应注意避免直接接触皮肤和眼睛，并注意避免吸入有害气体；•禁止在仪器运行过程中离开操作区域，以免发生意外事故；•操作人员应定期参加相关培训，了解仪器的安全操作和应急处置方法。
氨基酸自动分析仪ppt课件
（2）进样分离系统
组成：进样器、色谱柱
AA最佳分离温度：30~70度， 需恒温，一般柱温升高，出峰时 间缩短。
（3）第检二测系节统氨基性酸能分取决于AA衍生的方式:
茚三酮法，柱后衍生。茚三酮与分离后的 AA混合并在100左右的水浴中反应15min， 最后由紫外检测仪检测。
OPA法，分离柱流出液与NaClO混合，再 与OPA混合，生成荧光衍生物，采用荧光 光度计分析测定。
1.1 离子交换树脂
1.填料：磺酸型强酸阳离子交换树 脂 2.苯乙烯为主体； 3.离子交换的活性基团：磺酸根 （连接在苯乙烯中乙烯基的对位 上）； 4.与二乙烯基苯交联，形成不溶的 高分子骨架，易吸水溶解。 5.交联剂所占比例决定网状结构的 孔径大小（氨基酸：8%~12%的交 联度）。
1.2 氨基酸在色谱
第三十八章 氨基酸自动分析仪
概述
实质：高效液相色谱仪 填料：强酸型阳离子交换树脂 检测器：可见或荧光分光光度计
选择性好、准确度高 分析速度快，灵敏度高
概述
20世纪40年代，开始探求色谱法 分析氨基酸；
提高洗脱流速、改良柱直径、填 料粒度，提高分析速度；
20世纪80年代，键合反相分配色 谱、柱前衍生技术的发展；
离子交换树脂的型号、粒度、 交联度；
柱长、直径、柱温；
洗脱液的阳离子类型、PH值、 离子强度、洗脱梯度、流速及其 中有机溶剂含量。
1、3 衍生及检测
多数氨基酸无生色基团，在紫外可 见光区无吸收（Phe、Trp、Lyr例 外），需要将它们衍生，成为具有 紫外、可见光吸收或能产生荧光的 物质才可以检测。
第二节 氨基酸分析 性能
（3）程序控制系统
（4）数据处理系统及其他辅 助系统
自动氨基酸分析仪安全操作及保养规程
自动氨基酸分析仪安全操作及保养规程氨基酸分析仪是广泛用于科学研究、教学和企业生产的仪器，能够分析不同样品中氨基酸的含量及其组成成分。
在进行氨基酸分析实验时，必须严格遵守安全操作规程，以免发生意外事故或影响实验结果。
本文将介绍自动氨基酸分析仪的安全使用和保养规程，帮助使用者安全、稳定地完成实验。
安全操作规程1. 使用前准备在使用自动氨基酸分析仪前，必须对仪器进行检查。
首先，检查仪器电源是否连接稳定。
其次，检查试剂、标准样品、废液等物品是否充足。
最后，检查仪器与计算机之间的连接是否正常。
2. 佩戴个人防护用品操作氨基酸分析仪前，必须佩戴适当的个人防护用品，如安全眼镜、手套、实验服等，以防止试剂和样品对身体造成伤害。
3. 样品处理在样品处理过程中，必须遵守化学安全操作规程，防止误操作。
需要避免接触酸、碱等腐蚀性试剂，如若不慎溅到身上，应及时用大量清水冲洗。
4. 仪器操作在操作自动氨基酸分析仪时，需要经过仪器的预热和自检等程序后，才能正常操作。
在操作过程中，需要根据分析任务调整仪器的相应参数，如样品量、提取溶液、分离液等。
需要严格遵守操作手册中的设备操作顺序，并始终保持仪器和周边环境的清洁。
5. 废液处理做完实验后，需家庭进行废液的处理，以避免污染环境和影响健康。
废液需严格按照科学处理方法处置，如通过中和处理、离子交换层析等方法，处理完成后需要进行分类存放，并及时清理和消毒仪器。
保养规程1. 仪器清洁定期清洗自动氨基酸分析仪的各个组件，避免仪器表面积存灰尘和样品残留物。
可以用无水乙醇或稀酸进行清洗，但不能使用有机溶剂和刷子等。
2. 玻璃组件的清洁在实验过程中，如果发现玻璃组件出现脏污或污垢，应当及时清洗，避免污染下一批次的样品。
可以用清水和洗涤剂进行清洗，仪器内部清洁可以使用纯净水冲洗。
3. 检查仪器连接使用自动氨基酸分析仪时，需要经常检查仪器与电脑和仪器与电源之间的连接，防止出现不良接触和松动现象。
4. 维护好仪器的小配件在使用过程中，有一些小配件容易丢失或弄坏，如玻璃管、螺丝等。
全自动氨基酸分析仪的技术指标及特性
全自动氨基酸分析仪的技术指标及特性全自动氨基酸分析仪的技术指标及特性一、仪器配置全自动氨基酸分析仪:包括自动进样器、泵、检测器、分析软件、带电子制冷功能的溶液存放单元，所有缓冲液及茚三酮都有惰性气体隔离保护。
溶剂输液单元有集成四通道真空脱气装置。
分析柱或反应器具有泄漏保护、压力过高保护性能。
二、技术参数1( 分析柱电子恒温(制热或制冷)温度梯度可编程 20?,99?准确度 0.1?安全保护过热保护2( 自动进样器进样模式100μl体积可变循环进样进样体积可变; 1μl,5000μl，0.1μl增量重现性10μl 变体积进样时变异低于1% 温度控制 +5?(?1?),70?(电子恒温) 3( 分析时间蛋白质水解产物 30分钟,50分钟，自动时间控制生理体液 90分钟,180分钟，自动时间控制 4( 缓冲泵(溶剂递送单元)活塞双活塞流速 0.01ml/min,2.00ml/min 压力波动低于0.1%最大压力 40MPa (400bar，6000psi) 材料 PEEK5 检测系统检测波长 570nm, 440nm(可同时检测) 流动池体积8μl检测极限茚三酮(可见光度计)10pmol 荧光光度计3pmol6( 系统控制和数据处理软件(2软件，4通道，2接口板)用户可配置的工作站，用于数据采集和系统控制操作系统Windows 98以上，输出报告兼容Excel 软件有预置的不同格式的打印模板根据美国药典(USP)和欧洲药典(ESP)标准自动地对峰参数和数值进行计算根据预先设置，系统可多次自动进行基线校正测量过程中可以随时进行基线校正故障诊断系统，可诊断缓冲压和流速的高低等异常可支持严格的GLP要求。
3氨基酸自动分析仪操作流程.doc
全氨基酸自动分析仪基本操作操作规程注意事项：1、使用仪器前必需检查主机上各缓冲液瓶中液体是否足够(应保持至少1/2)；2、检查进样器中清洗液(2%异丙醇)是否够用；3、盖样品槽盖子时必需到位(听到“咔嚓”声)，以免损坏进样针；4、氨基酸标样原始浓度为125μmol/50μL ，测定时最少应该稀释10倍，即为12.5μmol/50μL ，用pH2.2的buffer 来配制。
仪器操作：1、打开氨基酸分析仪、进样器及电脑开关；2、冲洗进样器针头：3、数据采集A 、 对话框中选中Reaction Coil 并设置reaction coil:135℃；Column temp:50℃B 、菜单中View Fluidics Diagram 观察整个流程运行情况 C 、设置进样顺序：(必需先再生后进样) View program control sample list insert program filename regen.prg 再生程序 输入sample ID: zs No. of sample 默认为1 ok insert programe filename standard sample for sodium column. Prg 样品程序 输入Sample ID: by No. of sample: 1 vial No(s): 1(标样位置) enter volume ok设置好后先不要按“RUN”D 、设置进样信息打开氨基酸工作站界面 选择通道并显 分别在通道1、2中输入进样信息4、数据处理A 、标准曲线的绘制打开一个标样，按住shift ，双击各峰排序 修改配样信息：标准浓度单位：nmol/50μL ；进样体积：据具体情况(半胱氨酸浓度比其它要低一倍) 保存 按“”校正.B 、 试样与标准曲线进行校正。
氨基酸分析仪工作原理
氨基酸分析仪工作原理
氨基酸分析仪是一种用于检测和分析氨基酸组成的仪器。
其工作原理基于氨基酸分析技术，下面将介绍其工作原理。
首先，样品制备阶段。
需要将待测样品或混合物进行样品制备，取出所需氨基酸，并将其转化为可以被仪器检测的形式。
常见的制备方法有酸水解、酶解和自动制备等。
接下来，进行氨基酸分离阶段。
分析仪通常采用高效液相色谱（HPLC）技术进行分离。
样品溶液被注入到色谱柱中，利用
柱中的填料即色谱介质，不同氨基酸会在填料中以不同速度移动，从而实现氨基酸的分离。
然后，进行氨基酸检测阶段。
分离出的氨基酸会通过检测器进行检测。
常用的检测器包括紫外检测器（UV-DAD）和荧光检测器。
UV-DAD可以通过测量氨基酸在紫外光下的吸收来得
到其浓度信息，而荧光检测器则利用氨基酸的荧光特性进行检测。
最后，进行数据处理和结果分析。
仪器会自动将检测到的氨基酸信号转化为数字信号，并通过连接的计算机或数据处理系统进行数据转储和分析。
分析人员可以根据需要选择合适的分析方法和数据处理软件，对结果进行计算、统计和解读。
综上所述，氨基酸分析仪的工作原理主要包括样品制备、氨基酸分离、氨基酸检测以及数据处理和结果分析等步骤。
通过这
些步骤，可以准确地分析和确定样品中存在的氨基酸成分和浓度，为相关领域的研究和应用提供重要的实验数据。
氨基酸分析仪概况
氨基酸分析仪概况氨基酸分析仪是一种用于检测和分析氨基酸的仪器设备，广泛应用于食品、农产品、生物医药等领域。
该仪器通过特殊的分析方法和技术，可以快速、准确地测定样品中氨基酸的含量和组成，为科研和生产提供了重要的数据支持。
氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位，同时也是生命体内重要的代谢产物。
因此，准确测定样品中的氨基酸含量和组成对于了解生物体的代谢状态、蛋白质的结构和功能等方面具有重要意义。
氨基酸分析仪的出现大大简化了氨基酸的分析过程，提高了分析效率和准确性。
1.试剂槽和自动进样系统：用于储存和供给所需的试剂。
自动进样系统能够实现样品的自动进样，提高分析效率。
2.反应器：用于将样品与试剂进行反应。
反应过程中，氨基酸与试剂发生特定的化学反应，产生可检测的信号。
3.检测器：用于检测反应产生的信号。
常见的检测器包括紫外-可见光谱检测器、荧光检测器等。
检测器能够将检测到的信号转化为可读取的数据。
4.数据分析系统：用于处理和分析检测到的数据。
数据分析系统可以进行数据的整理、统计和绘图等操作，提供数据报告和结果分析。
5.控制系统：用于控制仪器的运行和参数调节。
控制系统可以对温度、压力、流速等参数进行调控，保证仪器的稳定运行。
氨基酸分析仪的工作原理通常基于特定的化学反应原理，常用的分析方法包括高效液相色谱法(HPLC)、氨基酸分析仪电泳法(AAA)等。
其中，HPLC是目前应用最广泛的分析方法之一、HPLC基于样品中氨基酸与特定试剂发生反应，形成具有特定吸收或荧光性质的产物，通过波长选择器和检测器对产物进行检测和分析。
AAA则是通过电泳的原理分离和检测样品中的氨基酸，根据氨基酸的电泳迁移速率和特定检测方法进行分析。
氨基酸分析仪的应用领域非常广泛。
在食品工业中，氨基酸分析仪可以用于检测食品中的氨基酸，评估蛋白质的含量和质量，并对食品中的氨基酸进行监控和调节。
在农业领域，氨基酸分析仪可以帮助农业科研人员了解植物和动物组织中的氨基酸含量和代谢状态，对肥料的选择和使用提供科学依据。
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氨基酸自动分析仪
氨基酸分析仪是进行氨基酸分离、衍生和检测的自动化分析系统，广泛用于制药、食品、饲料、农业、育种、医学研究、临床诊断和地质考察等领域。
仪器类别：仪器仪表 /成份分析仪器 /氨基酸分析仪
指标信息：分辨率：THR-Ser Ile-leu ≥98% 保留时间重现性：RSD≤0.5% (水解，所有峰) 峰面积重现性：RSD≤1% (水解，所有峰)
1．原理
测定原理是利用样品各种氨基酸组分的结构不同、酸碱性、极性及分子大小不同，在阳离子交换柱上将它们分离，采用不同pH值离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱下来，再逐个以另一流路的茚酮试剂混合，然后共同流至螺旋反应管中，于一定温度下（通常为115～120℃）进行显色反应，形成在570nm 有最大吸收的蓝紫色产物。
其中的羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色产物，其最大吸收在440nm。
这些有色产物对570nm、440nm光的吸收强度与洗脱出来的各氨基酸的浓度（或含量）之间的关系符合比耳定律，可与标准氨基酸比较作定性和定量测定。
2．操作方法
①样品处理：
测定样品中各种游离氨基酸含量，可以除去脂肪杂质后，直接上柱进行分析。
测定蛋白质的氨基酸组成时样品必须经酸水解，使蛋白质完全变成氨基酸后才上柱进行分析。
②样品分析：经过处理后的样品上柱进行分析。
上柱的样品量根据所用自动分析仪的灵
敏度来确定。
一般为每种氨基酸0.1μmol 左右（水解样品干重为0.3mg 左右）。
测定必须
在pH5～5.5、100℃下进行，反应进行时间为10～15min，生成的紫色物质在570nm 波长下
进行比色测定。
而生成的黄色化合物在440nm 波长下进行比色测定。
做一个氨基酸全分析
一般只需1h 左右，同时可将几十个样品一起装入仪器，自动按序分析，最后自动计算给出精确的数据。
仪器精确度在±1～3%。
用阳离子交换柱分离及测定氨基酸所的如下图
自动分析仪氨基酸分离图谱
3.结果计算
带有数据处理机的仪器，各种氨基酸的定量结果能自动打印出来，否则，可用尺子测量
峰高或用峰高乘以半峰宽确定峰面积进而计算出氨基酸的精确含量。
另外，根据峰出现的时间可以确定氨基酸的种类。
4.说明
①显色反应用的茚三酮试剂，随着时间推移发色率会降低，故在较长时间测样过程中应随时采用已知浓度的氨基酸标准溶液上柱测定以检验其变化情况。
②近年出现的采用反相色谱原理制造的氨基酸分析仪，可使蛋白质水解出的17 种氨基酸在12min 内完成分离，且具有灵敏度高（最小检出量可达1pmol）、重现性好以及一机多用等优点。
5.应用举例
（一）医学上的应用
■氨基酸代谢异常角度阐述了氨基酸与肝性脑病的关系
■血清中11种游离氨基酸的降低可直接影响人体组织的正常发育、生长
■必需氨基酸在创伤愈合中的关系
■肿瘤组织氨基酸代谢的变化规律
（二）饲料上的应用
■质量控制
各种饲料必需氨基酸的含量和它们之间的比例必须恰当，测定原料和产品中的氨基酸含量，以达到保证质量的目的。
■真伪鉴别
鱼粉氨基酸组成特点是赖氨酸、蛋氨酸含量高，氨基酸分析结果很容易就可以辨别真伪。
（三）农业、食品、饮料及其它
■对玉米、大豆、小麦等农作物的氨基酸含量进行检测
■对果汁、饮料进行真伪的鉴别
■检验测定茶氨酸来鉴别真伪茶叶
■对酱油级别的认定
6.仪器推荐
代表厂家：德国曼默博尔A300、德国sykam、日本hitachi等
仪器名称：全自动氨基酸分析仪（High Speed Amino Acid Analyzer）
仪器型号：L-8900
生产厂家：日本Hitachi公司
主要配置：
²色谱柱：尺寸：4.6mm×60mm，粒度：3µm，装填日立离子交换树脂
²输液泵：微量型串联式双柱塞往复泵，压力：0-20 MPa，流量：0.000-0.999 mL/min ²自动进样器：进样量：0.1-100 µL
²柱温箱：方式：半导体制冷加热，温度设定：20-85℃
²反应单元：方式：电子加热。
温度设置范围：50- 140（步进1）
²可见光度计：光谱：消象差凹面衍射光栅，波长：570nm、440nm
性能指标：(以蛋白质水解液标准分析为例，共进样5次)：
²净分析时间：约30分钟，53min/循环
²保留时间重现性：CV 0.3%（精氨酸）
²峰面积重现性：CV 1.0%（甘氨酸、组氨酸）
²最小检出限：3pmol (信噪比=2 、天门冬氨酸)
²最适浓度：2 nmol/20µL
²基线稳定性：CH1 150 or less，CH2 600 or less。