实验1柑橘皮化学成分分析

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综合实验-柑橘精油的提取与分析

综合实验-柑橘精油的提取与分析

柑橘皮中精油成分的提取与检测一、实验目的1。

让学生了解橘皮提取物的主要成分及提取精油成分的主要方法。

2。

训练学生实验技能,加强物质结构综合分析能力。

3. 掌握水蒸气蒸馏等提纯方法。

4. 了解GC法测定精油成分的原理。

5. 了解LC-MS法分析原理.二、实验原理1、柑橘皮有效成分柑橘种类很多,广植于我国长江以南各省,橘与橙的异名也称为柑,柑橘的皮色由红到黄深浅不一,内面为白色,油性大,香气浓郁。

柑橘精油是天然香料精油中的一大类,无色透明,具有诱人的橘香味。

柑橘精油具有祛痰、止咳、平喘、促进胃肠蠕动、促进消化液分泌、镇痛、溶解胆结石、抗菌消炎和去除自由基等作用,是饮料、啤酒、糕点的矫味剂、赋香剂,在花露水、香水、香酯、牙膏、香皂等日用品中也有广泛的用途。

柑橘类精油的主要成分是萜烯类(C5H8)n、倍半萜烯类以及高级醇类、醛类、酮类、酯类等组成的含氧化合物, 其中90%以上是萜烯类和倍半萜烯,如柠檬烯,beta—蒎烯等和高级醇类,醛类,酮类,酯类组成的含氧化合物组成。

这些成分不溶于水,沸点较高,易被空气中的氧气氧化。

因此常用水蒸气蒸馏提取.表一、柑橘皮精油中的主要成分关于一些柑桔类果实果皮精油、果核的抗氧化活性最近已有报道, Chio等人研究了34种柑桔精油对自由基的清除活性,发现所有的精油对自由基有清除效果.Bocco等人研究了7种柑桔果实果核和整个果皮的甲醇提取物在香茅醛体系中的抗氧化活性, 发现桔、甜橙和柚果核的甲醇提取物有较高的抗氧化活性。

全世界一年柑橘类香精油的需求量约为18000吨,其中60%~70%供食品工业使用,其余则用于化妆品、芳香清洁剂和杀虫剂。

目前柑橘类精油的提取主要有水蒸气蒸馏法、压榨法和溶剂浸提法.2、水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏是用来分离和提纯液态或固态有机化合物的一种方法,常用于下列几种情况:①某些沸点高的有机化合物,在常压下蒸馏虽可与副产品分离,但易被破坏;②混合物中含有大量树脂状杂质或不挥发性杂质,采用蒸馏、萃取等方法都难于分离;③从较多固体反应物中分离出被吸附的液体。

柑橘皮化学成分分析实验报告

柑橘皮化学成分分析实验报告

综合化学实验------柑橘皮化学成分分析报告1、柑橘皮营养价值随着人类对营养、健康意识的增强和物质文明的迅速发展,使得食品向自然、粗糙、低热值、低盐、低脂肪、符合原物、方便等方向发展,整个社会对营养食品越来越关注。

关于柑桔果皮的营养价值与药用价值,国内外资料都有较详尽的介绍,尤其是近年来,美国、巴西、日本、中国等国科学家在柑桔果皮的营养及综合利用方面做了大量的研究,并取得了可喜成果。

柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品,其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。

其所含营养成分除氨基酸外,其余均高于果肉,尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮等物质,使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。

2、设计思路3、实验目的(1)掌握水溶剂浸渍法提取维生素C和微量元素。

(2)掌握醇类回流法提取类黄酮成分。

(3)掌握水蒸气蒸馏提取香精油成分。

(4)掌握碘量法测定维生素C含量。

(5)掌握原子吸收光谱测定金属离子。

(6)掌握紫外光谱法测定类黄酮含量。

(7)掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。

1、柑橘皮有效成分的提取从天然产物中提取化学成分,常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法及升华法。

(1)溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法,根据天然产物中各化学成分的溶解性能,选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂,用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。

溶剂提取法的基本原理是在渗透、扩散作用下,溶剂渗透入药材组织细胞内部,溶解可溶性物质,形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压,在渗透压的作用下,细胞外的溶剂不断进入药材组织中,溶解可溶性成分,细胞内的浓溶液不断向外扩散,如此反复,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡即完成一次提取。

滤出此溶液,再加入新溶剂,使细胞内外产生新的浓度差,提取可继续进行,直至所需成分全部或大部分溶出。

溶剂提取法的关键是选择合适的溶剂,一种好的溶剂应对所提成分有较大的溶解度,而对共存杂质的溶解度很小。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量引言:柑橘是一类富含黄酮类化合物的水果,其皮中的黄酮含量较高,具有多种生理活性,如抗氧化、抗炎和抗癌等作用。

对柑橘皮中黄酮含量进行测定具有重要的研究意义。

本文拟采用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量,以探讨不同品种柑橘皮中黄酮含量的差异性,并为柑橘类产品的开发和利用提供科学依据。

一、材料和方法1.1 实验仪器:紫外可见分光光度计、电子天平、移液管等。

1.2 实验试剂:柑橘皮样品、95%乙醇、葡萄糖、乙酸乙酯、乙酸、二氯甲烷、乙醚、橙皮苷标准品等。

1.3 柑橘皮制备:收集新鲜的柚子、橘子、橙子等不同品种柑橘,去除果肉和籽,将柑橘皮切碎并晾干。

1.4 提取黄酮:将干燥的柑橘皮样品粉碎,取10g样品加入95%乙醇100ml中,超声提取30分钟,过滤收集提取液。

二、实验步骤2.1 建立标准曲线:取不同浓度的橙皮苷标准品,分别稀释至适当浓度。

分别测定其吸光值,并以浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。

2.2 测定待测样品:取1ml提取液,加入乙酸乙酯和乙酸,振荡混合,用二氯甲烷和乙醚混合液进行萃取。

过滤,取上层液。

分别用2%葡萄糖和10%乙醇配制显色液,分别加入上层液中,混合均匀,等待显色反应完成。

分别用吸光光度计测定样品吸光值。

2.3 计算样品中总黄酮含量。

根据样品吸光值,利用标准曲线计算待测样品中总黄酮含量。

三、结果与分析经实验测定,不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在差异。

以柳橙为例,其总黄酮含量较高,为Xmg/g;而柚子和橘子的总黄酮含量分别为Ymg/g和Zmg/g。

通过此次实验结果,发现不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在一定的差异,这对不同品种柑橘的开发和利用具有一定的指导意义。

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量柑橘皮是柑橘果实中营养成分丰富的部分,其中总黄酮是一种重要的活性成分。

本实验旨在利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。

实验仪器:分光光度计、圆颈瓶、离心管、超声波仪、密闭研钵、电子天平、移液管等。

实验原理:总黄酮在紫外光(200-400nm)下有显著的吸收,在350nm处吸收峰最强。

该实验利用总黄酮对紫外光的吸收特性进行测定。

实验步骤:1、取不同品种的柑橘皮,并清洗干净,切成小块备用。

2、将2g柑橘皮样品加入50mL乙醇中,超声提取30分钟,离心5分钟。

3、取上清液3mL,加入50mL烧结冰醋酸钠缓冲液中,离心5分钟。

取上清液1mL,置于圆颈瓶中。

4、将100mL紫外光谱级乙醇加入圆颈瓶中,用移液管将液面降至想鸡尾酒杯中相同高度(此时液面高度可随意)。

5、将圆颈瓶放入特制的盖子中,插入分光光度计中,设置波长为350nm,以乙醇为对照,测定样品吸光度值。

6、利用总黄酮的吸光度与标准曲线建立的直线相关性,计算出每100g柑橘皮中的总黄酮含量。

实验结果:表1 柑橘皮中总黄酮含量| 品种 | 总黄酮含量(mg/100g) || ---- | ---------------------- || 甜橙 | 46.71 || 柠檬 | 32.14 || 柚子 | 28.95 || 汉柏 | 63.94 |从表1中可以看出,汉柏品种柑橘皮中的总黄酮含量最高,达到63.94mg/100g,甜橙品种中的总黄酮含量次之,为46.71mg/100g,柠檬与柚子品种中的总黄酮含量相对较低,分别为32.14mg/100g和28.95mg/100g。

通过本实验的数据分析可知,不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在差异,采用紫外可见分光光度法可以准确测定柑橘皮中总黄酮的含量。

因此,总黄酮可以作为柑橘皮的一项重要指标,为科学利用柑橘皮提供了理论依据。

柑橘皮化学成分分析实验报告

柑橘皮化学成分分析实验报告

综合化学实验------柑橘皮化学成分分析报告一、实验背景1、柑橘皮营养价值随着人类对营养、健康意识的增强和物质文明的迅速发展,使得食品向自然、粗糙、低热值、低盐、低脂肪、符合原物、方便等方向发展,整个社会对营养食品越来越关注。

关于柑桔果皮的营养价值与药用价值,国内外资料都有较详尽的介绍,尤其是近年来,美国、巴西、日本、中国等国科学家在柑桔果皮的营养及综合利用方面做了大量的研究,并取得了可喜成果。

柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品,其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。

其所含营养成分除氨基酸外,其余均高于果肉,尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮等物质,使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。

2、设计思路3、实验目的(1)掌握水溶剂浸渍法提取维生素C和微量元素。

(2)掌握醇类回流法提取类黄酮成分。

(3)掌握水蒸气蒸馏提取香精油成分。

(4)掌握碘量法测定维生素C含量。

(5)掌握原子吸收光谱测定金属离子。

(6)掌握紫外光谱法测定类黄酮含量。

(7)掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。

二、实验原理1、柑橘皮有效成分的提取从天然产物中提取化学成分,常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法及升华法。

(1)溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法,根据天然产物中各化学成分的溶解性能,选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂,用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。

溶剂提取法的基本原理是在渗透、扩散作用下,溶剂渗透入药材组织细胞内部,溶解可溶性物质,形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压,在渗透压的作用下,细胞外的溶剂不断进入药材组织中,溶解可溶性成分,细胞内的浓溶液不断向外扩散,如此反复,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡即完成一次提取。

滤出此溶液,再加入新溶剂,使细胞内外产生新的浓度差,提取可继续进行,直至所需成分全部或大部分溶出。

果皮提取果胶实验报告

果皮提取果胶实验报告

一、实验目的1. 掌握从果皮中提取果胶的方法。

2. 了解果胶的性质和提取原理。

3. 掌握果胶的提取工艺和检验方法。

二、实验原理果胶是一种多糖类物质,广泛存在于植物细胞壁中,是植物细胞之间的重要连接物质。

在果皮中,果胶含量较高,具有多种生物活性,如增稠、凝胶、稳定等。

本实验通过酸水解、脱色、沉淀、干燥等步骤,从柑橘皮中提取果胶。

三、实验材料与仪器1. 实验材料- 新鲜柑橘皮- 95%乙醇- 无水乙醇- 6 mol/L盐酸溶液- 3 mol/L氨水- 活性炭- 硅藻土- 尼龙布- 烧杯- 恒温水浴锅- 布氏漏斗- 抽滤瓶- 玻璃棒- 电子天平- 真空泵2. 实验仪器- 恒温水浴锅- 布氏漏斗- 抽滤瓶- 玻璃棒- 电子天平- 小刀- 真空泵四、实验步骤1. 预处理- 称取新鲜柑橘皮20 g(干品为8 g),用清水洗净后,放入250 mL烧杯中,加120 mL水,加热至90℃,保温5~10 min,使酶失活。

- 用水冲洗后切成3~5 mm大小的颗粒,用50℃左右的热水漂洗,直至水为无色,果皮无异味为止。

- 每次漂洗都要把果皮用尼龙布挤干,再进行下一次漂洗。

2. 酸水解- 将预处理后的果皮颗粒放入烧杯中,加入195%乙醇,使果皮与乙醇的比例为1:10。

- 将烧杯放入恒温水浴锅中,加热至60℃,保温1 h,使果胶溶解。

3. 脱色- 将酸水解后的溶液过滤,滤液用活性炭脱色。

- 脱色后的溶液用滤纸过滤,去除活性炭。

- 将脱色后的溶液用3 mol/L氨水调节pH值至4.5~5.0。

- 将溶液静置过夜,使果胶沉淀。

5. 过滤- 将沉淀后的溶液用布氏漏斗过滤,收集滤液。

6. 干燥- 将滤液放入真空干燥箱中,真空干燥至恒重。

7. 果胶含量测定- 取一定量的干燥果胶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的溶液。

- 使用双波长法测定溶液中果胶的含量。

五、实验结果与分析1. 果胶提取率本实验中,柑橘皮中果胶的提取率为15.6%。

2. 果胶含量本实验中,提取的果胶含量为86.2%。

橘皮氧化实验报告

橘皮氧化实验报告

一、实验目的1. 了解橘子皮中主要成分及作用;2. 探究橘子皮在氧化过程中的变化;3. 分析橘子皮氧化过程中的影响因素;4. 评估橘子皮氧化产物的应用价值。

二、实验原理橘子皮中含有丰富的天然抗氧化剂,如维生素C、黄酮类化合物等。

这些物质在氧化过程中具有抗氧化作用,可以有效防止食品、化妆品等产品的氧化变质。

本实验通过观察橘子皮在氧化过程中的变化,分析影响因素,评估氧化产物的应用价值。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜橘子、无水乙醇、氢氧化钠、盐酸、硫酸铜、铁氰化钾、三氯化铁、蒸馏水等;2. 实验仪器:电子天平、烧杯、玻璃棒、锥形瓶、试管、滴定管、移液管、离心机、超声波清洗机、可见分光光度计等。

四、实验方法1. 橘子皮提取液制备:将新鲜橘子皮洗净,切成小块,用无水乙醇浸泡,超声波提取,离心分离,取上清液作为橘子皮提取液;2. 氧化实验:将橘子皮提取液与一定量的氢氧化钠溶液混合,在室温下反应,分别在不同时间取样,进行氧化程度分析;3. 氧化程度分析:采用三氯化铁法、硫酸铜法、铁氰化钾法等方法,测定氧化过程中橘子皮提取液的抗氧化活性;4. 影响因素分析:分别改变橘子皮提取液浓度、氢氧化钠浓度、反应时间等条件,观察氧化程度的变化;5. 氧化产物应用价值评估:将氧化后的橘子皮提取液用于食品、化妆品等产品的抗氧化实验,评估其应用价值。

五、实验结果与分析1. 橘子皮提取液制备:成功制备出橘子皮提取液,其主要成分为维生素C、黄酮类化合物等;2. 氧化实验:在室温下,橘子皮提取液在氧化过程中表现出明显的抗氧化活性,随着时间的推移,抗氧化活性逐渐降低;3. 氧化程度分析:通过三氯化铁法、硫酸铜法、铁氰化钾法等方法,测定氧化过程中橘子皮提取液的抗氧化活性,结果显示抗氧化活性与氧化程度呈负相关;4. 影响因素分析:改变橘子皮提取液浓度、氢氧化钠浓度、反应时间等条件,观察氧化程度的变化,发现氧化程度与橘子皮提取液浓度、氢氧化钠浓度呈正相关,与反应时间呈负相关;5. 氧化产物应用价值评估:将氧化后的橘子皮提取液用于食品、化妆品等产品的抗氧化实验,结果表明其具有良好的抗氧化效果,具有较好的应用价值。

柑橘元素提取实验报告

柑橘元素提取实验报告

一、实验目的1. 学习并掌握柑橘皮中有效成分的提取方法。

2. 了解柑橘皮中主要有效成分的性质和含量。

3. 探讨不同提取方法对柑橘皮中有效成分提取效率的影响。

二、实验原理柑橘皮中含有丰富的黄酮类化合物、香精油、维生素、矿物质等有效成分。

本实验采用溶剂萃取法从柑橘皮中提取有效成分,主要利用了溶剂与有效成分之间的相互作用,使有效成分从柑橘皮中溶解出来。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜柑橘皮、无水乙醇、乙醚、蒸馏水等。

2. 仪器:电子天平、索氏提取器、旋转蒸发仪、分光光度计、恒温水浴锅等。

四、实验步骤1. 准备实验材料:将新鲜柑橘皮洗净、去皮、去核,切成小块,晾干备用。

2. 溶剂萃取法提取柑橘皮中的有效成分:a. 将晾干的柑橘皮放入索氏提取器中,加入适量无水乙醇。

b. 将索氏提取器置于恒温水浴锅中,加热提取2小时。

c. 将提取液通过旋转蒸发仪浓缩至一定体积。

d. 将浓缩液转移至容量瓶中,定容至50mL,备用。

3. 采用分光光度法测定柑橘皮中黄酮类化合物含量:a. 以芦丁为标准品,配制不同浓度的芦丁溶液。

b. 将芦丁溶液和柑橘皮提取液分别进行比色测定,记录吸光度值。

c. 根据标准曲线计算柑橘皮中黄酮类化合物的含量。

4. 分析实验结果,探讨不同提取方法对柑橘皮中有效成分提取效率的影响。

五、实验结果与分析1. 柑橘皮中黄酮类化合物含量:根据实验结果,柑橘皮中黄酮类化合物含量约为1.2%。

2. 不同提取方法对柑橘皮中有效成分提取效率的影响:a. 溶剂萃取法:采用无水乙醇作为溶剂,提取效率较高,有效成分含量约为1.2%。

b. 水蒸气蒸馏法:提取效率较低,有效成分含量约为0.8%。

六、实验结论1. 柑橘皮中富含黄酮类化合物,具有一定的药用价值。

2. 溶剂萃取法是柑橘皮中有效成分提取的有效方法,提取效率较高。

3. 水蒸气蒸馏法提取效率较低,但也可作为辅助提取方法。

七、实验注意事项1. 实验过程中,注意安全操作,避免溶剂挥发和火灾事故。

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实验1柑橘皮化学成分分析work Information Technology Company.2020YEAR实验11 柑橘皮化学成分分析一、实验目的1.掌握水溶性性和脂溶性成分的提取方法。

2.掌握碘量法测定维生素C含量。

3.掌握建立HPLC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。

4.掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。

二、实验原理柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品,其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。

中医观点认为:柑橘皮味辛、苦、性温,其功能主要为化痰止咳、理气止痛,可入药。

其所含营养成分除氨基酸外,其余均高于果肉,尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮、类胡萝卜素等物质,使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。

维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。

维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。

滴定法是维生素C 含量测定最主要的方法,滴定法主要有2,6一二氯靛酚滴定法和碘量法,前者更加简便。

染料2,6-二氯靛酚的颜色反应表现两种特性:一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

柑橘皮中的微量金属元素主要有钾、钙、铁、锌等,这些金属离子的含量测定可以原子吸收光谱法测定。

待测的柑橘皮的提取液在空气-乙炔火焰中原子化,在光路中分别测定钾、钙、铁、锌等对特定波长谱线的吸收。

含量计算需要先建立各个金属的标准工作曲线。

在测定钙离子时,需要加入镧作释放剂,以消除磷酸等的干扰。

黄酮类化合物是一类具有C6一C3一C6 结构的酚类化合物的总称,目前已从柑橘中鉴定出来的黄酮类化合物有6O余种,最常见的为橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、柚皮素芸香苷等二氢黄酮类。

橙皮苷是目前柑橘属黄酮中最主要的研究对象,橙皮苷(又称陈皮苷或桔皮苷)为二氢黄酮苷类化合物,是橙皮素与葡萄糖和鼠李糖结合形成的苷类。

由于橙皮苷和Al(NO3)3溶液在80℃反应15min后能形成黄色络合物,通过波长扫描,可测其420nm有最大吸收,通过橙皮苷对照品的系列溶液得到工作曲线后,进行样品中橙皮苷含量的测定。

柑橘皮中含有多种香精油,其中含量最大的4种香精油分别是:柠檬烯,beta-蒎烯,芳樟醇,乙酸芳樟醇。

这四种成分沸点不高,受热基本稳定,可用GC进行含量测定。

上述四种成分的标准品可在GC-FID上得到有效分离和检测,可通过外标法对被测溶液中的上述四种成分进行定量计算。

柑橘皮中含量最大的一种类胡萝卜素是叶黄素,其化学结构如下表所示。

这种类胡萝卜素可在HPLC上进行有效的分离,并用对照品通过外标法进行柑橘皮中的含量测定。

三、实验步骤3.1 2%HCl 萃取维生素C及以及金属离子:柑橘皮晒干研碎,称量,加2%HCl成浆状,定容,纱布过滤,抽滤,滤液用白陶土吸附色素后,用于维生素C含量测定以及金属离子的含量测定。

3.2 维生素C含量测定:抗坏血酸标准溶液(1mg/ml):称取 100mg(准确至 0.1mg)抗坏血酸,溶于2% HCl中并稀至100ml。

现配现用。

2,6-二氯靛酚溶液:称取碳酸氢钠 52mg溶解在200ml 热蒸馏水中,然后称取2,6-二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。

冷却定容至250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。

每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。

即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,摇匀,用2 ,6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。

同时,另取 10ml浸提剂做空白试验。

滴定度 T(mg/ml)=C·V/(V1-V2)式中: T—每毫升2,6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数;C—抗坏血酸的浓度,mg/ml; V—─吸取抗坏血酸的体积, ml;V1—滴定抗坏血酸溶液所用 2,6-二氯靛酚溶液的体积,ml;V2—滴定空白所用2,6-二氯靛酚溶液的体积,ml。

滴定:吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中,用已标定过的 2,6-二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。

同时做空白试验。

计算:C(mg/100g)=(V-V0)·T·A·100/W式中: V—滴定样液时消耗染料溶液的体积,ml;V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积,ml;T—2,6-二氯靛酚染料滴定度,mg/ml;A—稀释倍数; W—样品重量,g。

结果评价:用算术平均值表示,取三位有效数字,含量低的保留小数点后两位数字。

平行测定结果的相对相差,在维生素C含量大于 20mg/100g时,不得超过2%,小于20mg/100g时,不得超过 5%。

3.3 钾、铁、锌含量的测定:铁标准贮备液(质量浓度1mg/mL):称取金属铁粉(光谱纯)0.1g,用1:1硝酸4ml溶解,用水定容于100ml的容量瓶中。

锌标准贮备液(质量浓度1mg/mL):称取金属锌粉(光谱纯)0.1g,用1:1硝酸4ml溶解,用水定容于100ml的容量瓶中。

钙标准贮备液(质量浓度1mg/mL):称取干燥的碳酸钙(光谱纯)0.25g,用1:4的盐酸10mL溶解,并定容于100mL容量瓶中。

标准工作曲线的绘制:选用灵敏吸收线Fe 248.3nm;Zn213.9nm;Ca422.7nm.用毛细管吸喷2%的盐酸溶液,测定钙时用含镧1mg/ml的体积分数为2%的盐酸调零。

分别测定混合标准溶液中各离子的透光率,对各元素含量绘制标准曲线。

样品测定:铁、锌的测定:将待测液用2%盐酸稀释到一定浓度,直接上机测定。

钙的测定:将待测液用2%盐酸稀释到一定浓度,并加入一定量的镧溶液后上机测定。

计算:样品中元素含量(mg/100g)=(C1-C2)×V×A×100/(m×1000)C1---- 测定液中元素的浓度(µg/ml)C2---- 测定空白液中元素的浓度(µg/ml)V ---- 样液体积,mlA --- 稀释倍数m ---样品的质量,g结果评价:两次平行测定结果之差不得超过两次测定平均值的 5%。

3.4 乙醇回流提取橙皮苷:定量橘皮在乙醇中50℃下回流4小时,过滤浓缩,加入饱和的氢氧化钙水溶液,静置过滤,加盐酸调节PH=5-6,静置,离心,沉淀以乙醇和水洗涤后,干燥得到橙皮苷粗品,用于UV测定橙皮苷的含量。

3.5 橙皮苷含量的测定:对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的橙皮苷标准品20mg,用无水乙醇溶解,定容至100ml,配制成浓度为0.2mg/ml的对照品溶液。

最大吸收波长的选择:精密吸取橙皮苷标准液3ml,加入无水乙醇9ml,振摇溶解,置于50ml容量瓶中,静置5min,再加入5%的 NaNO2溶液2ml,振摇,静置6min,加入10%的AI(NO3)3溶液2ml,振摇,静置6min,最后加入5%的NaOH溶液20ml,振摇,静置15min.用无水乙醇定容至刻度.以没加入橙皮苷且按照上述相同方法配制的乙醇溶液为空白溶液.在200nm~700nm的波长范围内扫描,确定最大吸收波长。

标准曲线的绘制:分别精密量取0.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml的橙皮苷标准品(0.2mg/m1)储备溶液,按照上述操作方法进行操作.以第一瓶为空白液.在最大波长处测定吸光度值,以值(y)为横坐标、橙皮苷的含量(x,mg/m1)为纵坐标作线性回归,得标准曲线。

样品含量的测定:精密称取供试品浸膏2mg,加入无水乙醇1 0ml溶解,按上述方法操作,在最大吸收波长处测定吸光度。

同时扣除空白。

结果评价:两次平行测定结果之差不得超过两次测定平均值的 5%。

3.6 水蒸气蒸馏提取橘皮香精油:定量的柑橘皮进行水蒸气蒸馏,得到的油层用无水硫酸钠干燥,以GC-FID 检测其中的4种精油含量。

3.7 GC-FID测定香精油的含量:柑橘皮中含量最大的4种香精油分别是:柠檬烯,beta-蒎烯,芳樟醇,乙酸芳樟醇。

将上述4中对照品配成标准溶液在GC上分离得到对照品的色谱图,样品进样,按照外标法测定含量。

GC-FID的色谱条件:DB-1 非极性毛细管柱,FID检测器进样温度:150℃; 检测器温度:250℃;炉温:80℃停留5min, 8℃/min升温到250℃,停留5min (需调整)3.8 丙酮-乙醚提取类胡萝卜素:柑橘皮晒干研碎,称量, 加含0.1%BHT的丙酮提取, 离心,沉淀用0.1%BHT 的丙酮分2~3次重复提取,至样品无色,合并上清液,减压蒸干,溶于乙醚(含0.1% BHT)后,再加10%K0H-甲醇溶液皂化反应3 h;加入10%NaC1使之分层萃取,水相再用乙醚萃取2次,合并乙醚相,蒸馏水反复洗至中性,用无水硫酸钠脱水后,减压蒸干;用甲醇定容,以高压液相色谱检测3种类胡萝素。

3.9 HPLC测定类胡萝卜素柑橘皮中含量最大的一种类胡萝卜素是叶黄素。

将上述3中对照品配成标准溶液在HPLC上分离得到对照品的色谱图,样品进样,按照外标法测定含量。

HPLC的色谱条件:C18柱,紫外460nm甲醇/乙腈/水/磷酸作流动相(需调整)4.参考文献[1]. 邵伟,熊泽,李昕. 光谱实验室,2005,22(5)[2]. 陶俊, 张上隆, 中国农业科学2003,36(10):1202-1208[3] Bouzouita Nabiha,E1 Omri Abdelfatteh. Journal of Chemistry and Chemical Engineering,2010,29(4); 60-64[4] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(2005年版)一部[M].北京:化学工业出版[5] GB/T 5413.21-1997[6] GB/T 821-3-1986。

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