胰岛素致低血糖效应生理实验11-2
实验十二 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
实验十二胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响血糖是指血液中糖，由于正常人血液中糖主要是葡萄糖，所以一般认为，血糖是指血液中的葡萄糖。
正常人空腹血糖浓度为4.4～6.7mmol/L（80～120mg/100ml）。
血糖是糖在体内的运输形式。
全身各组织都从血液中摄取葡萄糖以氧化供能，特别是脑、肾、红细胞、视网膜等组织合成糖原能力极低，几乎没有糖原贮存，必须不断由血液供应葡萄糖。
当血糖下降到一定程度时，就会严重妨碍脑等组织的能量代射，从而影响它们的功能。
所以维持血糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义。
血糖浓度的调节血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制，精细地控制着血糖的来源与去路，使之达到动态平衡。
神经系统的调节作用神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌，后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。
神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的。
下丘脑一方面通过内脏神经作用于肾上腺髓质，刺激肾上腺素的分泌；另一方面也作用于胰岛α-细胞，使其分泌胰高血糖素；同时还可以直接作用于肝。
三方面共同作用的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化，使糖原分解加速；糖异生关键酶的活性增加，糖异生作用增加，从而使血糖浓度升高。
下丘脑还可通过兴奋迷走神经，使胰腺β-细胞分泌胰岛素，同时还可直接作用于肝，使肝细胞内糖原合成酶活化，促进肝糖原的合成；此外还抑制糖异生途径，促进糖的氧化和转化，总体上使血糖的去路增加，来源减少，最终达到使血糖浓度降低的目的。
激素使血糖浓度降低的激素 :胰岛素使血糖浓度升高的激素:胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。
在激素发挥调节血糖浓度的作用中，最重要的是胰岛素和胰高血糖素。
肾上腺素在应激时发挥作用，而肾上腺皮质激素、生长激素、甲状腺素等都可影响血糖水平，但在生理性调节中仅居次要地位。
低血糖诱导实验报告
一、实验目的本实验旨在通过低血糖诱导，研究低血糖对胰岛β细胞功能的影响，探究低血糖诱导胰岛β细胞凋亡的机制。
二、实验材料1. 实验动物：成年雄性SD大鼠，体重200-220g。
2. 实验试剂：低血糖诱导剂（胰岛素）、葡萄糖、生理盐水等。
3. 实验仪器：离心机、细胞培养箱、显微镜、酶标仪等。
三、实验方法1. 实验分组：将实验动物随机分为低血糖组、正常对照组和假手术组，每组10只。
2. 低血糖诱导：低血糖组给予低血糖诱导剂（胰岛素）注射，使其血糖降至2.8mmol/L以下，持续4小时；正常对照组给予等量生理盐水注射；假手术组仅进行手术操作，不给予低血糖诱导。
3. 标本采集：低血糖诱导结束后，分别从各组动物中采集胰岛组织、血清和胰腺外分泌液。
4. 实验指标检测：（1）胰岛β细胞凋亡检测：采用TUNEL法检测胰岛β细胞凋亡情况。
（2）胰岛素分泌功能检测：采用酶联免疫吸附法检测血清胰岛素水平。
（3）胰岛组织形态学观察：采用HE染色观察胰岛组织形态学变化。
（4）胰岛细胞活力检测：采用CCK-8法检测胰岛细胞活力。
四、实验结果1. 低血糖组胰岛β细胞凋亡率显著高于正常对照组和假手术组（P<0.01）。
2. 低血糖组血清胰岛素水平显著低于正常对照组和假手术组（P<0.01）。
3. 低血糖组胰岛组织形态学观察显示胰岛细胞数量减少，细胞排列紊乱。
4. 低血糖组胰岛细胞活力显著低于正常对照组和假手术组（P<0.01）。
五、讨论本实验结果表明，低血糖诱导可导致胰岛β细胞凋亡、胰岛素分泌功能降低和胰岛组织形态学改变。
低血糖诱导胰岛β细胞凋亡的机制可能与以下因素有关：1. 低血糖诱导导致胰岛β细胞能量代谢紊乱，细胞内ATP水平下降，影响细胞生存。
2. 低血糖诱导激活细胞凋亡信号通路，如caspase家族等，导致胰岛β细胞凋亡。
3. 低血糖诱导促进胰岛β细胞氧化应激反应，产生大量活性氧，损伤细胞膜和细胞器，导致细胞凋亡。
胰岛素所致的低血糖休克及药物和激素对血糖的影响
胰岛素所致的低血糖休克及药物和激素对血糖的影响
实
验
计
划
书
设计人：廖曙光刘鑫鑫王敏哲王若楠张旭霞
第一临床医学院2012级医学影像学1班
2015年3月8日星期日
一、实验名称：
胰岛素所致的低血糖休克及药物和激素对血糖的影响。
二、实验目的：
学习监测血糖的方法，同时观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，从而加 深理解药物和激素影响血糖水平的机制。
分组
Ａ．空白对照组
Ｂ．低剂量组
Ｃ．中剂量组
Ｄ．高剂量组
第一只小鼠
第二只小鼠
６.分析实验数据，讨论实验结果。
二、药物和激素对血糖影响的实验
（1）取剩下的小鼠１６只，称重，随机分为8组。每组 ２只，用苦味酸分别标记编号。第一组为对照组，其余组为实验组。给药前采血测一次血糖。
（2）对各组小鼠给予不同药物或激素。具体给药方法如下：
第一组：生理盐水0.1ml/10g（0.1U/ml）腹腔注射；
第二组：胰岛素 1U/kg，按 0.1ml/10g（0.1U/ml）腹腔注射；
第三组：1:10000肾上腺素溶液 0.1ml/10g 腹腔注射；
第四组：0.1mg/ml的胰高血糖素溶液 0.1ml/10g 腹腔注射；
第五组：5mg/ml的糖皮质激素0.1ml/10g 腹腔注射；
糖尿病目前虽还没有根治方法，但绝不是不治之症。糖尿病完全是一种可防可治的疾病。传统对糖尿病的综合治疗有“五驾马车”的说法，即—糖尿病知识教育、饮食治疗、运动治疗、自我监测血糖、药物治疗。治疗上除了使用传统的药物治疗，还应结合多种手段综合治疗。同时加大药物的研发，并充分发挥我国中医中药优势。
口服降糖药近年来有了迅速的发展，除原来的磺酰脲类及双胍类外，已有第3类α—葡萄苷酶抑制剂，供临床应用，第4类胰岛素增敏剂(噻唑烷二酮类)；第5类胰升糖素抑制剂。第6类糖异生作用抑制剂则尚在实验和小剂量临床试用阶段。磺酰脲类降糖药可引起低血糖反应，而双胍类和α—葡萄苷酶抑制剂则不引起低血糖反应，被称为抗高血糖药物。
为了验证胰岛素具有降低血糖的作用
为了验证胰岛素具有降低血糖的作用，以小鼠活动状况为观察指标设计实验。
某同学的实验方案如下：①将正常小鼠随机分成A、B两组，观察并记录其活动状况。
②A组小鼠注射适量胰岛素溶液，B组注射等量生理盐水。
一段时间后，A组小鼠会出现四肢无力，活动减少，甚至昏迷等低血糖症状，B组活动状况无变化。
③A组小鼠出现低血糖症状后，分别给A、B两组小鼠注射等量葡萄糖溶液。
一段时间后，A组小鼠低血糖症状缓解，B组活动状况无变化。
该实验方案可以说明胰岛素具有降低血糖的作用。
请回答：(1)该实验原理是：。
(2)分析小鼠注射胰岛素溶液后出现低血糖症状的原因：。
(3)胰岛素在血糖平衡调节中的作用是：。
（1）胰岛素具有降低血糖的作用。
体内胰岛素含量过高时，引起血糖下降，机体出现活动减少，甚至昏迷等低血糖症状，此症状可以通过补充葡萄糖溶液得到缓解。
（4分）(2)注射胰岛素溶液后，血糖含量下降，小鼠组织细胞特别是脑组织细胞因血糖供应减少，导致能量供应不足而发生功能障碍，从而引起低血糖症状。
（4分）(3)胰岛素可使组织细胞对血糖的利用增加，同时使血糖来源减少，从而使血糖含量减少。
（4分）这是一道以“小鼠活动状况为观察指标、验证胰岛素具有降低血糖的作用”的实验为情景的学科内综合高考题。
（1）实验方案（方法步骤）的制订是依据实验原理来确定的，所以从中获取三个实验方案（方法步骤）的根据即解答出实验原理，好多考生没有紧扣三个方法步骤而漏答；(2)此小题答案可以参考人教版必修教材第一册第70页第一段对低血糖症状产生原因的分析，注意关键词“脑组织细胞因血糖供应减少，导致能量供应不足”；(3) 此小题答案可以参考人教版选修教材第12页第二段血糖平衡的调节，注意要从2个方面回答，即增加血糖的去路和减少血糖的来源。
胰岛素的生理作用实验报告
胰岛素的生理作用实验报告胰岛素的生理作用实验报告胰岛素是一种重要的激素，它在调节血糖水平和维持能量代谢中起着关键作用。
为了深入了解胰岛素的生理作用，我们进行了一系列实验。
本报告将详细介绍实验设计、结果分析和结论总结。
实验设计：实验采用小鼠作为模型，分为两组：实验组和对照组。
实验组小鼠注射胰岛素，而对照组小鼠注射生理盐水。
每组各有十只小鼠，实验进行了一周时间。
实验过程：首先，我们对小鼠进行了空腹血糖测定，以确定基线血糖水平。
然后，实验组小鼠被注射了胰岛素，剂量为每只小鼠体重的0.1单位。
对照组小鼠则注射了相同体积的生理盐水。
注射后，我们每隔30分钟测定一次小鼠的血糖水平，持续观察了两小时。
结果分析：实验组小鼠注射胰岛素后，血糖水平明显下降。
在注射后的30分钟内，实验组小鼠的血糖水平较对照组小鼠低。
随着时间的推移，实验组小鼠的血糖水平持续下降，而对照组小鼠的血糖水平保持稳定。
两小时后，实验组小鼠的血糖水平显著低于对照组小鼠。
结论：通过本实验，我们证实了胰岛素对血糖水平的调节作用。
胰岛素能够促进葡萄糖的吸收和利用，从而降低血糖水平。
实验结果显示，注射胰岛素后，小鼠的血糖水平明显下降，并持续维持在较低水平。
这进一步证明了胰岛素在调节血糖方面的重要性。
胰岛素的生理作用不仅限于血糖调节，它还参与了脂肪代谢和蛋白质合成等过程。
胰岛素能够促进脂肪细胞对脂肪的摄取和储存，并抑制脂肪分解。
此外，胰岛素还能够促进肌肉细胞对葡萄糖的吸收和利用，从而增加能量供应。
在蛋白质合成方面，胰岛素能够促进氨基酸的吸收和蛋白质的合成，有助于维持正常的组织修复和生长。
胰岛素的生理作用对于人类健康至关重要。
胰岛素的缺乏或功能异常会导致糖尿病等疾病的发生。
因此，深入研究胰岛素的生理作用机制，有助于我们更好地理解和治疗相关疾病。
总结：本实验通过注射胰岛素和生理盐水，研究了胰岛素对血糖水平的调节作用。
实验结果表明，胰岛素能够降低血糖水平，并参与脂肪代谢和蛋白质合成等生理过程。
实验二十 胰岛素的过量反应及其解救
第四章药理学实验实验二十胰岛素的过量反应及其解救【实验目的】1.观察胰岛素过量导致低血糖反应及解救方法，验证胰岛素对血糖的影响。
2.练习小白鼠腹腔注射法。
【实验原理】胰岛素是由胰岛β细胞受分泌的一种蛋白质激素，其主要生理功能是调节代谢。
胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，同时又促进糖原、脂肪、蛋白质的合成。
给小白鼠注射大量胰岛素之后，可导致血糖降低，引起低血糖性休克，发生精神不安、惊阙等现象。
【实验器材】普通天平或电子秤、1ml注射器、大烧杯、小鼠笼。
【实验药品】酸性生理盐水、50%葡萄糖注射液、胰岛素溶液（2U/ml）。
【实验动物】小白鼠。
【实验方法】1.取小白鼠3只，编号为甲乙丙并进行标记，称重，甲、乙为实验组，丙为对照组。
2.给实验组甲、乙两只小白鼠腹腔注射2U/ml胰岛素溶液0.1ml/10g，给对照组小白鼠注射酸性生理盐水0.1ml/10g。
3.将两组小白鼠都放在30～37℃环境中，记下时间，注意观察并比较两组小白鼠的神态、姿势及活动情况。
当实验组小白鼠出现明显反应时，给甲鼠注射50%葡萄糖注射液0.1ml/10g进行解救，乙鼠不进行解救处理。
4.比较甲、乙、丙鼠的活动情况，进行记录并分析结果。
【实验结果】将上述结果记录于表4-20-1中，并进行分析。
表4-20-1 实验结果鼠号体重（g）药物及剂量（ml）用药后反应2U/ml胰岛素溶液0.1ml/10g甲50%葡萄糖注射液0.1ml/10g乙2U/ml胰岛素溶液0.1ml/10g丙酸性生理盐水0.1ml/10g【注意事项】1.小白鼠在实验前18～24小时禁食。
2.酸性生理盐水配置：将10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理盐水中，调节其pH值在2.5～3.5。
3.2U/ml胰岛素溶液配置：宜使用普通胰岛素，因普通胰岛素显效快实验现象明显；并应使用酸性生理盐水进行稀释至所需浓度，因胰岛素在酸性环境下才有效应。
4.实验温度：夏季可为室温，冬季最好将注射胰岛素的小白鼠放在30～37℃环境中保温，因温度过低，反应出现较慢。
胰岛素致低血糖效应
姓名：学号：实验报告说明：1、实验报告务必独完成，对抄袭者将按不及格处理；2、实验报告的格式请按下面的各项要求来填写，不要改动；3、正文字体统一用“仿宋-GB2312”、，小四号，单倍行距，小标题加黑；4、下面的“替换这里”字体底纹在完成后去除；5、实验报告按时上传，上传时文件名统一按照网上说明来命名；实验名称：胰岛素致低血糖效应／人体动脉血压的测量同组姓名：实验日期：室温：气压：成绩：教师：一、实验结果（一）胰岛素致低血糖效应1、小白鼠的低血糖效应：给两只小白鼠注射胰岛素，23分钟后，两只小鼠均出现不爱活动，接着出现四肢无力、痉挛等惊厥反应。
立即给一只小鼠腹腔注射50% 葡萄糖溶液，另一只不注射，注射了葡萄糖的小鼠很快恢复了正常，而未注射的仍出现惊厥现象。
2、金鱼的低血糖效应：将二条金鱼放入A（即胰岛素溶液）中，一段时间后，两条金鱼的活动都有所减弱。
将其中一条移入B（葡萄糖溶液）中，可以观察到：在葡萄糖溶液中的金鱼，其活动明显比在胰岛素溶液中的强。
（二）人体动脉血压的测量结果收缩压：96mm 舒张压：72mm二、分析与讨论（一）胰岛素致低血糖效应胰岛素由胰岛B细胞分泌，通过促进肝细胞、肌细胞和其他组织细胞对葡萄糖的摄取和贮存，抑制糖异生和肝组织葡萄糖的释放，从而降低血糖水平。
它是调节机体血糖的重要激素之一，能促进组织的合成代谢、促进全身组织特别是肌肉、肝和脂肪组织摄取、储存和利用葡萄糖。
当体内胰岛素含量增高时，将引起血糖下降。
严重时可导致动物出现惊厥、肌肉抽搐、休克等低血糖现象。
当出现低血糖效应时，及时给动物补充血糖，可以缓解惊厥休克症状。
而补充血糖最直接最有效的方法就是给实验动物注射葡萄糖，当血糖为大脑提供了足够的能量后，出现的低血糖休克症状就可以得到缓解或是消除。
（二）人体动脉血压的测量结果动脉血压：流动的血液对血管壁所施加的侧压力。
收缩压（高压）：是指当人的心脏收缩时，动脉内的压力最高，此时内壁的压力称为收缩压。
实验十一 激素对血糖浓度的影响
实验十一激素对血糖浓度的影响【目的】1.掌握血糖的测定原理及方法。
2.掌握血糖的正常范围及意义。
3.熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制。
【原理】人和动物体内的血糖浓度均维持在一定范围内。
这是由于体内存在多种激素及调节物质，在它们的共同作用下，使糖酵解、糖氧化、糖原合成与分解、糖异生、脂肪合成与分解等代谢途径协同进行。
胰岛素可通过以下几种途径降低血糖：①促进肌肉、脂肪细胞的载体转运葡萄糖人内；②抑制蛋白激酶A，继而使糖原磷酸化酶活性降低：激活糖原合酶脱磷酸酶，从而使糖原合酶活性升高，加速肌肉、肝脏的糖原合成；③通过第二信使间接激活丙酮酸脱氢酶，加速丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA；④抑制磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性，促进氨基酸进入肌肉合成蛋白质，从而降低糖异生；⑤抑制脂肪动员，促进糖有氧氧化。
肾上腺素的作用与胰岛素相反，起升高血糖的作用。
肾上腺素升高血糖的作用迅速而明显，它通过与肝和肌肉细胞膜受体结合而激活磷酸化酶，产生级联放大效应，从而加快糖原的分解、肝释放葡萄糖、肌肉输出乳糖供肝糖异生等，最终导致血糖升高。
本实验观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后空腹血糖浓度的变化。
血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法。
首先用钨酸钠及盐酸沉淀血清中的蛋白质，制备血滤液。
在葡萄糖氧化酶的催化作用下，血滤液中的葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，并产生1分子过氧化氢；过氧化氢被偶联的过氧化物酶催化放出氧，氧将试剂中的4-氨基安替吡啉偶联酚(还原性氧受体)的酚氧化，生成红色的醌类化合物，其颜色深浅与葡萄糖的含量成正比，此溶液与经同样处理的标准葡萄糖溶液进行比色测定，即可求出血糖含量。
葡萄糖氧化酶葡萄糖——————>葡萄糖酸+H202过氧化物酶H20——————>H20+02O2+4-氨基安替吡啉偶联酚——————>醌类化合物（红色）葡萄糖氧化酶法测定血糖的特异性较高，能干扰测定结果的物质较少，如溶血样本血红蛋白浓度达lOg／L、黄疸样本胆红素浓度达342Um以及样本中所含的少量尿素、肌酐、甘油三脂等均不影响测定结果。
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胰岛素致低血糖效应
一：实验目的
了解胰岛素调节血糖水平的机能
二：实验原理
胰岛素是调节机体血糖的激素之一，当体内胰岛素含量增高时，便引起血糖下降，动物出现惊厥现象。
三：实验过程
◆实验动物与器材
小白鼠（4只），1ml注射器，鼠笼，胰岛素溶液（2U/ml），50%葡萄糖溶液，酸性生理盐水
◆实验方法与步骤
1、取4只小白鼠称重后，分实验组2只和对照组2只
2、给实验动物腹腔注射胰岛素溶液（0.1ml/10g体重）
3、将两组动物都放在室温环境下，并记录时间，注意观察并比较两组动物的神态，姿势及活动情况
4、当实验组动物出现角弓反张、乱滚等惊厥反应时，记录时间，并立即给其中两只皮下注射葡萄糖溶液（0.1ml/10g体重），另两只不予抢救
5、比较注射葡萄糖的动物以及出现惊厥并未抢救的动物的活动情况，并分析结果
6、试验结束后，试验动物全部断颈处死。
◆数据记录如下：
第一组注射胰岛素后12分钟呼吸变急促28分钟角弓反张35分钟僵直43分钟死第二组注射胰岛素后25分钟角弓反张，马上注射葡萄糖，很快恢复平静
四：思考题
1、正常机体内胰岛素如何调节血糖水平？
答：胰岛素促进细胞对葡萄糖的摄取和利用，促进肝脏和肌肉糖原的合成及贮存，抑制糖异生，促进葡萄糖转化为脂肪酸并贮存于脂肪组织中，上述作用使血糖水平降低。
2、试分析糖尿病产生的原因及治疗方法？
胰岛素是体内惟一能降低血糖浓度的激素，一旦某种原因引起胰岛素缺乏，葡萄糖的转运和利用将发生障碍，由于代偿机制，血糖浓度将升高，如超过肾糖阈，尿中将出现葡萄糖。
治疗方法：只要按时注射胰岛素即可。
五：讨论
◆注射胰岛素后，报纸上出现一滩血迹，可能为注射时刺伤内脏所致，单个只小鼠身上均无血迹。
◆实验中被小鼠咬伤，故未完成实验，试验数据和现象均为同组实验者提供。