细菌性食物中毒样品的采集及实验室检测程序
细菌性食物中毒检测

的病原体的统一性。
常见细菌性食物中毒 实验室诊断
沙门氏菌食物中毒 实验室诊断
从可疑食品、病人呕吐物或腹泻便中检出血清学型
别相同的沙门氏菌。如无可疑食品,从几个病人呕吐 物或腹泻便中检出血清学型别相同的沙门氏菌也可。
有必要时可观察分离出的沙门氏菌与病人血清的凝 集效价,恢复期应比初期有所升高(一般约升高4倍)。
食物中毒物资准备
培养基准备
C-B保存液:保存病原菌
亚硒酸盐增菌液:培养沙门菌 普通肉汤:培养金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌 1%葡萄糖肉汤:培养链球菌 7.5%NaCl肉汤:培养金黄色葡萄球菌 嗜盐增菌液:培养副溶血性弧菌
食物中毒物资准备
培养基准备
碱性蛋白胨水:培养霍乱弧菌 肠道增菌液:培养致泻大肠埃希菌
食物中毒物资准备
采样用物品
4.患者呕吐物采集:无菌平皿和特殊采样棉球各20 个以上。 5.血样采集:一次性注射器、灭菌试管各10支以上。 6 .保藏样品的冷藏设备。 7.防污染的工作服或隔离衣、帽、口罩、手套、靴 子等。 8.其他必备物品:75%医用酒精、酒精灯、酒精 棉球、洗耳球 、打火机、记号笔 等.
志贺菌食物中毒 实验室诊断
从可疑食品、病人吐泻便中检出志贺菌。
观察分离出的志贺氏菌与病人血清的凝集 效价,恢复期应比初期有明显升高(一般约升高 4倍)。
食物中毒检验
食物中毒检验工作是食物中毒调查的重要组成部分, 检验技术水平与食物中毒致病物质查明率密切相关, 检验结果对提供疾病临床确诊依据、中毒食品和病原 因子污染来源等方面具有重要意义。实验室检验工作 技术性较强,检验结果的正确性不仅取决于实验室的 条件和技术水平,同时还与检验样品的采集、保存、 送样方法等方面有关。因此在分析检验结果时,除了 应考虑结果是否符合有关实验室判定标准外,还应综 合考虑各种困难影响检验结果的因素。有时阳性检验 结果不一定都能说明病原因子在食物中毒中的致病作 用。阴性结果也不一定能完全否定某种病原因子。
细菌性食物中毒及其检测

一、食物中毒食物中毒 指摄入含有生物性、化学性有毒有害物质的食品或把有毒有害物质当作食品摄入后所出现的非传染性(不同于传染病)的急性、亚急性疾病。
引起食物中毒的食品
2、判断可疑中毒食物
直接涂片、染色、镜检观察细菌形态
一般活菌数测定
直接培养
增菌培养
动物ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ验
患者血清凝集试验
第四节 细菌性食物中毒检验方法及预防
细菌性食物中毒的检验方法
治疗原则 迅速排除毒物 对症治疗 特殊治疗
预防原则 防止污染 控制繁殖 杀灭病原菌
细菌性食物中毒的预防
第四节 细菌性食物中毒检验方法及预防
尸体解剖:可采取胃肠内容物、脏器、肠系膜、淋巴结及血液等。
查源:从业人员带菌检查的样品采集。
第三节 细菌性食物中毒样品的采集与送检 样品采集后,最好立即送检,如条件不允许,最长不得超过4h。 送检样品时,应注意冷藏,不得在样品内加入任何防腐剂。 应附送详细送检申请单,填明样品名称、来源、送检时间、中毒情况、检验要求等。 二、样品的送检
膳食调查(了解患者发病前24小时-48小时进餐食品、进餐时间、加工方法)
膳食登记
进食食谱逐项询问填写,以便确定可疑食物(品种、数量、加工方法等)
同膳食中患者和非患者的共同食品 同膳食中全部患者均食过的食品 同膳食中,仅非患者进食过的食品 临时就餐膳的患者进食过的食品
中毒食品必须是同膳者全部患者进食过的食品,同时在同膳者中全部未患病者均未进食过的食品。
三天内先后 有69人发病
69人出现相似的 急性胃肠炎症状
祝大家拥有健美的身材 健康的体魄!
细菌性食物中毒应采集的样品有哪些?应怎样注意采样时机?如何进行采样?

• (5)从业人员带菌检查 • • 细菌性食物中毒对从业人员带菌检查非常 重要,粪便用肛拭管直接采样(不宜留便) ,保存 于增菌液中; • 对患有呼吸道或皮肤病从业人员,用无菌 拭子对其咽部或皮肤病灶处进行涂抹采样,保存 于无菌试管或增菌液中同时涂片数张(立即火焰 固定) 。
• (1)采集的样品一般应在4小时内接种完毕, 故必须及时送检;(2)夏季送检样品时,应注 意冷藏,不得加入任何防腐剂;(3)应附详细 送检单,应填明样品名称、份数、重量、来源、 中毒表现、送检时间、有范围的检验项目、采 样条件(容器是否灭菌、有无封条)、送样人; (4)样品必须有牢固的标签,包装严密封闭; (5)注意无菌操作,防止污染,以免影响结果。 (6)采样过程中履行必要的采样手续。(发生 中毒单位负责人签封与开具收据等)
• (4)血、尿样采集 • 怀疑是感染型细菌性食物中毒时,可在发 病初期采血直接培养病原体。观察从患者血液、 排泄物中分离出的菌株,是否与食物中分离出 的菌株同一菌型。对疑似细菌性食物中毒,应采 患者急性期(3 d 内) 和恢复期(2 周左右) 血液。 • 方法:无菌操作抽取静脉血3m1 于无菌试管 中,同时采集1 份正常人血样作对照;尿样品每 份取100-200毫升。
• 六、肉毒梭菌食物中毒
• 潜伏期:12~36h,最短为2~6h,长者可达 8~10天。中毒剂量愈大则潜伏期愈短,病情 亦愈重。 • 临场表现: • 起病突然,病初可有头痛、头昏、眩晕、乏力、 恶心、呕吐(e型菌恶心呕吐重、a型菌及b型 菌较轻)
• 稍后,眼内外肌瘫痪,出现眼部症状,如视力 模糊、复视、眼睑下垂、瞳孔散大,对光反射 消失。口腔及咽部潮红,伴有咽痛,如咽肌瘫 痪,则致呼吸困难。肌力低下主要见于颈部及 肢体近端。由于颈肌无力,头向前倾或倾向一 侧。腱反射可呈对称性减弱。
食物中毒事故标本和样品采集

附件16.食物中毒事故标本和样品采集、保存和运送要求一、常用采样物品类别物品食品等样品采样器皿一次性塑料袋、带盖的无菌广口瓶(100-1000ml)、采水样的瓶、箔纸密盖的金属罐。
生物样本采样器皿无菌粪便盒、血液采集管(抗凝、不抗凝)、1-2ml血清螺旋管、10-30ml无菌螺旋管、Cary—Blair运送培养基( 适用于肠道样本的保存运送)、Stuart运送培养基(适合于呼吸道样本的保存运送)、2ml病毒保存液。
采样用灭菌和包裹的器械勺、匙、压舌板、刀具、镊子、钳子、抹刀、钻头、金属管(直径1.25~2.5cm,长度30~60cm)、吸液管、剪刀、Moore拭子(供下水道、排水沟、管道等处采样用,由120单位x15cm棉纱条中间用双股长线或金属线系紧制成)、纱布消毒剂75%乙醇、酒精灯制冷剂袋装制冷剂、可盛装水或冻结物的厚实塑料袋或瓶子、装冰用的厚实塑料袋防腐剂10%福尔马林或10%聚乙烯醇食品温度计探针式温度计(-20~110℃),长13~20cm球式温度计(-20~110℃)其他常用物品防水记号笔、胶带、棉球、灭菌蛋白胨或缓冲液(5ml 置于带螺盖的试管中)、电钻(用于冷冻食物采样)蒸馏水、隔热箱或聚苯乙烯盒、标本运输箱二、常见的食物中毒事故标本和样品采集类型样本来源可采集的标本和样品类型病人粪便、尿液、血液、呕吐物、洗胃液、肛拭子、咽拭子;从业人员粪便、肛拭子、咽拭子、皮肤化脓性病灶标本;可疑食品可疑食品剩余部分及同批次产品、半成品、原料;加工单位剩余的同批次食品,使用相同加工工具、同期制作的其他食品;使用相同原料制作的其他食品;食品制作环境加工设备、工用具、容器、餐饮具上的残留物或物体表面涂抹样品或冲洗液样品;食品加工用水;其他由毒蕈、河豚等有毒动植物造成的中毒,要搜索废弃食品进行形态鉴别;三、生物标本的采集、保存和运送(一)粪便标本粪便标本是检测细菌、病毒、寄生虫、毒素等的常用标本。
疾控中心处理食物中毒检验流程

疾控中心处理食物中毒检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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食物中毒现场卫生学采样

食品工用具样品
用生理盐水浸湿 拭子,然后擦拭 器具的接触面, 再将拭子置于生 理盐水中。
2021/11/4
刀具样品的采集
用灭菌生理盐水浸湿棉拭子,在刀具 (重点在与食物接触的刀锋部位)上反 复涂擦,然后置于灭菌生理盐水管内, 密封管口。
2021/11/4
水样品采集
GB/T5750.2-2006
样品采样前的准备工作
1
穿工作服,戴口罩、帽子
2 打开采样箱,在采样区域铺设无菌台布
3
点燃酒精灯,取出所需物品
4
戴手套或用75%酒精棉球消毒双手
2021/11/4
现场采样流程步骤
无菌操作准备 1
样品采集流程
2Hale Waihona Puke 样品采集收尾32021/11/4
食物中毒常见样品种类
食品
粪便
呕吐物
无菌操作
厨师手
制作食品用具
采样原则 采样物品准备 样品与标本的种类 采样流程与方法
2021/11/4
A
及时性原则
B
针对性原则
C
适量性原则
采样原则
D
不污染原则
2021/11/4
食物中毒现场卫生采样
采样原则 采样物品准备 样品与标本的种类 采样流程与方法
2021/11/4
文件资料 取证工具 采样用品
2021/11/4
采样物品 准备清单
细菌检验
2021/11/4
病毒检验
寄生虫 检验
粪便标本
细菌检验
粪便标本需5g。肛拭子,需插入Cary-Blair 运送培 养基底部,将顶端折断,并将螺塞盖旋紧。标本 应4℃冷藏保存。
病毒检验
细菌性食物中毒及检验

第二节、细菌性食物中毒及概述
(一)、细菌性食物中毒的定义和分类 1. 定义:指吃了大量含有活菌或细菌毒素引起的,急性肠胃 炎为主要特征。 2. 分类:根据作用机制不同,分为两类。
感染型细菌 性食物中毒 毒素性食 物中毒 沙门菌、变形杆菌 属、链球菌属等 致病性大肠杆菌、 蜡样芽胞杆菌、肉 毒梭菌、志贺菌、 副溶血型链球菌
第二节、细菌性食物中毒及概述
(二)、细菌性食物中毒的共同特征 1. 潜伏期短,发病急,在同一时期内发病的人比较多。 2. 发病季节强,一般4-11月份,而4-9月份进入高峰期。 3. 中毒的发生与食物有关,中毒病人不具有传染性,凡进食 者大部分或者全部发病,不进食者不发病。 4. 中毒症状的特殊性:发热、呕吐、腹泻等急性肠胃炎症状。
下垂,染病后昏睡死亡,死时头脚向后伸。解剖可见肝出血、坏死,肾肿大。
有毒动植物中毒
常见的有毒动植物品种有河豚鱼中毒、含高组胺鱼类中毒、毒蕈中毒、含氰甙植 物中毒、发芽马铃薯中毒、豆角中毒、生豆浆中毒等。
化学性食物中毒
包括一些有毒金属,及其化合物、农药等,常见的化学性食物中毒有有机磷引起 的食物中毒、亚硝酸盐食物中毒、砷化物引起的食物中毒等
第二节、细菌性食物中毒及概述
(三)、临床表现 1. 轻度肠胃炎型 潜伏期短(0.5-1h),症状较轻,呈一过性 的呕吐或者腹泻。主要蜡样芽胞杆菌和葡萄球菌食物中毒 2. 急性肠胃炎型 潜伏期较长(3-10h),典型的肠胃炎症状, 病人恶心、呕吐、腹痛、腹泻。用抗生素治疗效果显著。如沙 门菌、志贺菌、副溶血型孤菌、小肠结肠耶尔森菌、空肠弯曲 菌等 3. 神经麻痹型 潜伏期1-3天,症状主要是:吞咽困难,复视, 失音,呼吸困难等。肉毒梭菌 4. 重度型 潜伏期短,1-2h出现恶心、呕吐,随着病程的进 展,症状日趋严重,出现黄疸、昏迷、发烧、抽搐、尿少、尿 血、尿闭而死亡。如酵米面及变• 1. 了解食物中毒和食物传染概念 • 2. 了解细菌性食物中毒的定义和分类、共同特征 及临床表现 • 3. 掌握细菌性食物中毒样品的采集、送检和处理 方法
细菌性食物中毒样品的采集及实验室检测程序(ppt 79页)

无菌操作采样
无菌操作:防止外界微生物的污染和病原菌 扩散所采用的操作技术
食物中毒采样目的是检测标本的实际污染状 况,故应严格避免由于采样对检品造成的新 的污染。
要求采样容器、用具、培养基需严格灭菌同 时以无菌操作取样。
无菌操作采样
采样前用75%酒精棉球进行手消毒或戴手套 采样用棉拭子、盐水等要求经高压灭菌消毒 采样容器要求密闭、内壁光滑、清洁干燥经
细菌性食物中毒的特点
与饮食有密切关系,去除原因食品后,不再 有新的患者。
临床症状以急性胃肠炎为主,基本相同。 短时期内多人发病,无人传染人的现象。 中毒发生与不同区域人群饮食习惯有密切关
系。 与季节相关。细菌繁殖条件及人体防御机能。 发病率高,病死率较低、恢复快、多数预后
良好
细菌性食源性疾病的流行病学
传染源:被病原菌感染的动物或人
传播途径:通过进食被细菌或其毒素污染 的食物
人群易感性:普遍,无病后免疫力,可重 复感染
流行特征:夏秋季高发;病例可散发或爆 发流行;发病急,时间集中,潜伏期短; 有共同进餐史;症状轻重与进食量有关。
细菌性食源性疾病的发病机制
现场调查主要物品清单
防护用品 白色工作服或隔离衣、医用手套、口罩等
调查用表 食物中毒个案调查表、卫生监督文书、采样 单等
取证工具 照相机、摄像机、录音机 其他相关专业参考资料
食物中毒采样目的
查明病因和来源 确定检验项目, 验证假设 为以后的分析结论提供证据
食物中毒采样意义
毒素型
活菌污染食品 | 适宜条件
食品中大量繁殖产生外毒素 (如肠毒素、神经毒素等)
| 摄入含外毒素的食品而中毒
| 出现相应外毒素的特殊临床表现
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细菌性食物中毒的特点
➢ 与饮食有密切关系,去除原因食品后,不再 有新的患者。
➢ 临床症状以急性胃肠炎为主,基本相同。 ➢ 短时期内多人发病,无人传染人的现象。 ➢ 中毒发生与不同区域人群饮食习惯有密切关
系。 ➢ 与季节相关。细菌繁殖条件及人体防御机能。 ➢ 发病率高,病死率较低、恢复快、多数预后
良好
| 人摄入
侵犯消化道粘膜 —消化道— 体死亡放出内毒素
引起充血、水肿、渗出等炎症 作用于体温调节中枢
发烧
消化道症状
细菌性食源性疾病的发病机制
毒素型
➢ 细菌污染食物在其中繁殖并产生大量毒 素,人食入大量毒素的食物而造成的中 毒。
➢ 临床症状与食入毒素量正相关
➢ 起病急,不发热,病程短,可引起败血 症或严重毒血症(葡萄球菌肠毒素、肉 毒毒素)
❖ 食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的前列, 是当前世界上最突出的卫生问题。
食源性疾病特点
❖ 爆发和散发两种形式 ❖ 肠道传染病存在人与人之间传播 ❖ 种类多、潜伏期不同 ❖ 不一定出现明显消化道症状
细菌性食源性疾病
➢ 细菌性食源性疾病:是进食被细菌或细菌毒 素污染的食物而引起的感染性或中毒性疾病。
无菌操作采样
➢ 无菌操作:防止外界微生物的污染和病原菌 扩散所采用的操作技术
➢ 实验室检测结果是查明爆发原因的证据 ➢ 科学准确合理地采集、运送、保存标本
直接影响实验结果的可靠性
食物中毒采样原则
➢ 目的明确 ➢ 代表性 ➢ 典型性 重点突出 有的放矢 ➢ 适时性 把握时机 ➢ 程序性
食物中毒样品种类
➢ 剩余食品 ➢ 病人排泄物 ➢ 血液标本 ➢ 尸体解剖标本 ➢ 炊具类标本 ➢ 现场环境标本 ➢ 原料、半成品和成品 ➢ 从业人员标本
感染型
➢ 细菌污染食物在条件适宜时大量繁殖,人食 入大量活菌的食物,引起消化道感染而造成 的中毒。
➢ 细菌毒力、细菌污染程度、进食量多少、人 体抵抗力等因素与症状轻重直接相关。
➢ 较少引起败血症或严重毒血症,病程较短 (沙门氏菌、副溶血性弧菌)
感染型
活菌污染食品
| 适宜条件
食品中大量繁殖(菌量一般106)
现场调查流程
建立病例定义,制定采样计划(提出假设) 验证假设 可疑样本采集和送检 实验室检验 采取控制措施 调查结论和书面报告
建立病例定义
❖ 72h内食用了共同餐次食品 ❖ 是否到医院就诊、是否服药 ❖ 24h腹泻3次以上 ❖ 症状体征明显
建立病例定义
❖ 核实病例数 ❖ 确定事件的存在 ❖ 描述疾病的三间分布 时间分布 地区分布 人群分布
➢ 食物中毒诊断标准主要以流行病学调查资料 及病人的潜伏期和中毒的特有表现为依据, 实验室诊断是为了确定中毒的病因而进行的
食物中毒的致病因素
➢ 2012年全国报告食物中毒917起 ➢ 微生物引起的患者数最多,占总数的50% ➢ 美国食源性疾病爆发细菌性的占总起数的
75%,占病例数86%。我国细菌性食物中毒 发生起数同样常年居首位
➢ 细菌性肠道传染病(霍乱、痢疾、伤寒副伤 寒、O157
➢ 短期内集中发病常被诊断为细菌性食物中毒
➢ 散发或潜伏期较长病例常被诊断为胃肠炎或 其他疾病
食物中毒相关概念
➢ 食物中毒:摄入了含有生物性、化学性有毒 有害物质的食品或者把有害物质当作食品Байду номын сангаас 入后出现的非传染性(不属于传染病)的急性、 亚急性疾病。
毒素型
活菌污染食品 | 适宜条件
食品中大量繁殖产生外毒素 (如肠毒素、神经毒素等)
| 摄入含外毒素的食品而中毒
| 出现相应外毒素的特殊临床表现
食物中毒诊断标准和处理原则GB14938
➢ 产气荚膜梭菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 病原性大肠艾希氏菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 变形杆菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 变质甘蔗食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 霉变谷物中呕吐毒素食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 耶毒假单胞菌酵米面亚种食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 沙门氏菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 葡萄球菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 副溶血性弧菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断及技术处理原则 ➢ 肉毒梭菌食物中毒诊断及技术处理原则
❖ 食物中毒样品种类和采集方法 ➢ 采样注意事项 ➢ 实验室应急检测程序
食源性疾病
❖ WHO:由于食物中含有致病因子引起的以急性病理 过程为主要临床特征的感染性或中毒性疾病
❖ 美国CDC:由于食用了受污染的食品或饮料而引起 的疾病
❖ 包括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染 病、寄生虫病及化学性有毒有害物质所引起的疾病。
美国食源性病原体
➢空肠弯曲菌 ➢产气荚膜梭状芽孢杆菌 ➢出血性大肠杆菌O157 ➢单增李斯特菌 ➢沙门氏菌 ➢金黄色葡萄球菌 ➢圆孢子虫 ➢隐孢子虫
常见细菌性食物中毒
➢ 沙门氏菌、志贺氏菌、致泻性大肠杆菌、副 溶血性弧菌、其它致病性弧菌、金黄色葡萄 球菌、蜡样芽胞杆菌、肉毒梭菌、产气荚膜 梭菌、出血性大肠杆菌O157、单增李斯特菌、 耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、变形杆菌、耶毒 假单胞菌酵米面亚种、气单胞菌、肠球菌等
现场调查主要物品清单
➢ 防护用品 白色工作服或隔离衣、医用手套、口罩等
➢ 调查用表 食物中毒个案调查表、卫生监督文书、采样 单等
➢ 取证工具 照相机、摄像机、录音机 其他相关专业参考资料
食物中毒采样目的
➢ 查明病因和来源 ➢ 确定检验项目, 验证假设 ➢ 为以后的分析结论提供证据
食物中毒采样意义
现场调查主要物品清单
➢ 采集工具
长柄勺、剪刀、铲子、小刀、镊子、夹子、吸管、启 瓶器、采便管、注射器、消毒棉签、采样棉球、消 毒纱布、酒精灯、压舌板、皮筋、记号笔、标签纸 等
➢ 样品容器
无菌塑料袋、广口瓶(200-500mL)、运送培养基 试管、生理盐水、灭菌平皿、一次性小试管、便盒、 样品冷藏设施等
细菌性食源性疾病的流行病学
➢ 传染源:被病原菌感染的动物或人
➢ 传播途径:通过进食被细菌或其毒素污染 的食物
➢ 人群易感性:普遍,无病后免疫力,可重 复感染
➢ 流行特征:夏秋季高发;病例可散发或爆 发流行;发病急,时间集中,潜伏期短; 有共同进餐史;症状轻重与进食量有关。
细菌性食源性疾病的发病机制