最新临床微生物标本处理及操作流程
微生物学标本采集与处理程序

微生物学标本采集与处理程序1. 引言微生物学标本的采集和处理是微生物学研究中至关重要的一环。
正确的采集和处理程序能够保证标本的质量和准确性,从而确保后续的实验和分析的可靠性。
本文档旨在介绍一套标准的微生物学标本采集与处理程序,以帮助研究人员在实验室中进行规范的操作。
2. 标本采集2.1 选择合适的采集根据所研究的微生物类型和标本特点,选择合适的采集。
常用的采集包括离心管、培养皿、尿液收集等。
确保采集清洁无污染,并在使用前进行灭菌处理。
2.2 标本采集技巧在采集标本前,确保双手清洁并穿戴好防护手套。
根据标本类型,采取适当的采集方法,例如:- 血液标本:通过静脉采血或采用穿刺器采集足跟血。
- 粪便标本:采用干燥的收集新鲜便样,并确保不混入尿液、水或其他污染物。
- 尿液标本:清洁外阴部,使用无菌尿杯收集中段尿液。
- 喉拭子标本:使用标本采集棒轻轻刮取喉部后壁表面。
- 污水标本:根据采样点不同,采用合适的和采集方法。
2.3 标本标识标本采集完成后,将标本上贴上标识标签,标明采集日期、采集者姓名、标本类型等关键信息。
确保标识清晰、不易脱落。
3. 标本处理3.1 标本转运采集完成后,及时将标本转运至实验室。
对于需要特殊处理的标本,应按照相应的要求进行转运,确保样本稳定和安全。
3.2 标本处理前的准备在处理标本前,仔细阅读实验操作指南,准备必要的试剂和材料。
同时,确保实验室工作台面清洁无菌。
3.3 标本处理步骤根据实验要求,进行标本处理的步骤。
可能的步骤包括标本培养、PCR扩增、生物化学检测等。
根据具体情况,确保每一步骤的操作规范和无菌。
3.4 标本处理后的处理标本处理完成后,将废弃物正确处理,如进行灭菌消毒或遵守实验室废物管理规定。
4. 结论微生物学标本采集和处理程序的规范操作对于研究可靠性和实验结果的准确性至关重要。
研究人员应遵循本文档中的程序和指南,确保标本采集和处理的质量和准确性,从而提升微生物学研究的可信度和可靠性。
制作微生物标本的步骤

制作微生物标本的步骤
制作微生物标本是一个非常重要的过程,它可以帮助科研人员对微生物进行观察和研究。
以下是制作微生物标本的一般步骤:
1. 样品采集,首先,需要准备好要观察的微生物样品。
这可能涉及到从环境中采集样品,或者从培养基中得到纯培养的微生物。
2. 固定,接下来,需要将微生物固定在载玻片或其他适当的基材上。
这通常涉及使用化学物质(如甲醛或乙醇)来固定微生物的结构,以便在后续的染色和观察过程中保持其形态完整。
3. 染色,染色是制作微生物标本中的关键步骤。
常用的染色方法包括革兰氏染色、吉姆萨染色和折射率染色等。
这些染色方法可以帮助突出微生物的特定结构或细胞器,并使其在显微镜下更易于观察。
4. 封片,一旦微生物标本制备完成,需要使用透明的封片液将载玻片封好,以保护标本并避免其干燥或受到外界污染。
5. 观察,最后,制作好的微生物标本可以通过光学显微镜或电
子显微镜进行观察。
科研人员可以通过观察微生物的形态、结构和特征来进行进一步的研究和分析。
总的来说,制作微生物标本是一个需要细致操作和谨慎处理的过程。
每一个步骤都需要严格控制,以确保最终的标本能够真实地反映微生物的形态和结构特征,为后续的研究工作提供可靠的数据支持。
临床微生物标本采集与运送标准操作流程

临床微生物标本采集与运送标准操作流程下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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微生物标本操作流程

微生物标本操作流程一、采集标本1.根据需要使用的微生物种类,选择采集适当的标本类型,如血液、尿液、呼吸道分泌物、伤口分泌物等。
2.采集前洗手,戴好手套,保证操作无菌。
3.根据标本类型选择适当的采集方法,如穿刺、切开、吸引等。
4.采集标本时避免污染和损伤,采集的标本量要充足,确保后续实验的需要。
5.采集后立即将标本放入合适的容器中,并用合适的保存液固定标本。
二、保存标本1.封闭保存a.无菌标本应尽快处理。
b.根据需要,选择适当的保存方式:常温、4℃、-20℃,-80℃等。
c.使用密封标本袋、离心管等避免样本污染。
d.根据需求添加保存液,如生理盐水、甘油、琼脂糖等。
2.运输保存a.标本运输前应按照需要将标本进行适当保存。
c.标本运输时需要严格遵守相关的运输规定和防护措施,避免标本在运输过程中受到污染或损坏。
三、处理标本1.无菌条件下进行标本处理。
2.打开封闭的标本容器时,应尽量减小环境污染。
3.首先进行外部检查,检查标本是否完整,有无明显破损或渗漏。
4.根据需要,将标本分为不同的试管或培养皿中,避免不同菌种相互干扰。
5.针对具体需求,对标本进行不同的处理,如离心、稀释、加酶处理等。
四、传递标本1.打开封闭的标本容器时,应尽量减小环境污染。
3.准备适当的传递容器和传递材料,避免标本在传递过程中受到损坏或污染。
4.标本传递时应尽快送至指定的实验室,避免标本在传递过程中受到温度变化、时间延误等因素的影响。
五、清洗操作区域和工具1.实验完成后,需要对操作区域进行清洁2.清洗操作区域可以使用含有消毒剂的清洁剂,如含有氯己定的漂白粉或消毒液。
3.清洗使用过的工具,如采集器具和传递容器等,使用适当的清洁剂和消毒液进行清洗和消毒,保证无菌状态。
微生物标本操作流程的重点是保持标本的无菌状态,避免标本的污染和损伤。
在每一步操作中,都要严格遵守操作规程和消毒措施,以确保标本的质量和准确性。
此外,还需要根据具体实验需求,选择适当的保存液、保存条件和传递方法。
微生物检验流程及操作标准

微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:微生物检验是一种重要的实验室技术,用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程,以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具,并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质,比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息,包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后,需要尽快进行处理,避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行,使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释,以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行,以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存,确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前,需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上,避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行,避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养,促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况,记录生长的数量和形态,用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作,避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时,需要进行鉴定和分析,确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准,进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读,判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
临床微生物室标本处理及操作流程(93页)

自然排尿 是
过夜培养
否
继续培养; 随后观察;发送初步的培养阴性报告
> 105 CFU/ml
< 105 CFU/ml
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
1 organism 一种以上细菌生长
三种或以上的机会致病 菌包括酵母菌
ID & Suscept.鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
)1-2种机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
若为腐生葡萄球菌,则处理与其他致病菌相同; 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染
进行鉴定和药敏,若数量< 105CFU/ml, 仍然对可能的致病菌进行操作
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎 社区获得性肺炎
院内获得性肺炎
免疫妥协患者肺炎
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen 自然咳痰 诱导痰 气管内吸取物 肺部组织 支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
淀粉样小体
弹性纤维
库什曼螺旋体
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
几种细菌的混合形态,缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态?
呼吸道标本中未被染色的,有折射的杆菌=抗酸杆菌
微生物标本制作流程及注意事项

微生物标本制作流程及注意事项
以下是 7 条关于微生物标本制作流程及注意事项的内容:
1. 嘿,先来说说准备工作,就像你要出门得先收拾好东西一样!得选好合适的工具和材料呀,比如无菌容器,这可太重要啦!就像战士上战场得拿好武器,你没有无菌容器怎么能行呢?接下来按照正确的方法采集微生物,可别瞎弄哦!例:你想想,要是随便拿个脏脏的容器去装,那不是把所有细菌都污染啦?
2. 采集完了,那就要处理啦!这就好比给微生物洗个澡一样重要呢。
把多余的杂质啥的清理掉,要仔细哟!然后给它们找个舒适的“家”,让它们安稳待着。
例:你说,要是不认真处理,那标本不就乱糟糟的啦,后续还怎么观察和研究呀?
3. 固定这一步也不能马虎呀,就像是给微生物拍个“定妆照”!得用合适的化学试剂固定好它们的形态,不然它们变形了可咋办?例:假如固定不好,再看的时候都不认得这是啥微生物了,那岂不是白忙活了?
4. 染色可有意思啦,就跟给微生物化个妆似的!让它们变得更加明显好看,方便我们观察呀。
但可别乱染色哟,得按照要求来。
例:你能想象染错颜色后,完全找不到重点的样子吗?
5. 制作过程中要时刻注意卫生呀!就像你在厨房做饭得保持干净一样。
千万不能让其他杂菌混进去捣乱哦!例:要是随便一弄,引入了其他细菌,那你的标本不就不纯净啦?
6. 还有呀,操作的时候得轻点儿,别把微生物给弄伤啦,它们可也是很“娇弱”的呢!例:你试试用力过猛把它们都弄坏了,还研究个啥呀?
7. 最后,一定要记得好好保存标本哦,这可是你的宝贝呀!放在合适的环境里,别让它们受到任何伤害。
例:不好好保存,等要用的时候找不到,那不是傻眼啦?总之呀,微生物标本制作一点都不能马虎,每个环节都要认真对待才行!。
临床微生物实验室标本处理流程详细

微生物实验室标本处理流程涂片革兰染色,其他形
态:1.弧形菌属根据标本种类标本接种后油镜下观察染色 2.弯
曲菌3.酵母菌上显板挑选可疑菌落,35°C培养,情况和细菌形
态4其他菌:鉴定参照《全国必要时可做18~24h 检验操作规
程3版》) CO2,厌氧培养 G+球菌G-球菌:主要奈瑟G-杆菌 G+
杆菌(分芽菌属和布兰汉菌属(多为污为主孢和无染,结合
临芽孢)床)触酶(+)触酶试验氧化酶触酶(-):链球菌属
氧化酶(+):氧化酶(-): 血浆凝固酶非发酵菌(不动,嗜肠杆
菌属麦除外)血浆凝固酶血浆凝固酶(+)(-)参照《全国
检验操作规一般采用肠杆菌属鉴定板程3版》鉴定,并做链条,
沙门志贺加做血清学球菌属药敏鉴定葡萄糖O/F F(+):金F (-):新生霉新生霉素参照《全国检验操作规程按照肠杆菌属
做药敏微球菌试验并报告黄色葡萄素(+):(-):腐生3版》
鉴定按照非发酵菌球菌葡萄球菌属做药敏试验并报告表皮葡萄
球菌备注:此图为粗略图,以全国检验操作规程3版为准按照
葡萄球标本处理:1.痰液:血板+麦康凯(插管痰注明)菌属做
药敏 2.大便:血板+麦康凯+SS平板(稀便注明)试验,报
告 3.尿:血板+麦康凯(中段尿注明,用大环取样)
4.棉签取样的标本: 血板+麦康凯(最好以生理盐水湿润后接种)
5.带菌量少的标本:需要增菌处理注意事项:接种标本后平板
注意注明接种时间和标本编号,性病衣原体筛查要留标本于冰
箱中。
支原体标本避免干燥和高温,及时处理为宜。
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下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
标本质量
脓痰
唾液or诱导痰 (?)
粘液样痰 带血痰
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
成双革兰氏阳性球菌,短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌(小)=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他
肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌
可能是肺结核,抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
尿培养标本 Urine Culture
尿道感染
每年850万例尿路感染, 90%为女 性 1/2.5个妇女在一生中会得UTI 下行性感染:血流肾脏膀胱 (金黄色葡萄球菌,酵母菌,结 核分枝杆菌) 上行性感染:尿道膀胱肾盂 血流
临床微生物标本处理及操作流 程
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
脑脊液 CEREBROSPINAL FLUID
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作,腰椎穿刺采样 最少1 mL,最好>5 mL 打入3个小管中,以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上,置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏!
纯培养的机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
一种以上细菌生长
检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌 (病人的首份尿标本显示如此的培养结果 ,若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌 ,则需要对菌株进行操作)
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌(查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
用于尿液培养的标本
•肾活检或肾抽吸物(外科) •耻骨上膀胱抽吸物
(孕妇,婴儿,全膀胱)
•微导管尿(内部导管和外部导管)-老年人 •中段尿,清洁留取——急诊成年人 •留置导尿管中采集的标本(经常被三种以上细菌污染)
尿液标本
•采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内,然后用清水冲洗
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛; 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏,若数量< 104CFU/ml, 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌, 则处理与其他致病菌相同; 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
评价尿培养的标准
纯培养的机会致病菌
➢1 organism
(查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释) ➢一种以上细菌生长
三种或以上的机会致病 菌包括酵母菌
ID & Suscept.鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
)1-2种机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
如何看待CSF的培养结果?
(1)如果同期送检的血培养大于3天报警,通常不是很紧急
(2)假如仍不确定,电话联系微生物室值日主管,了解革兰氏
染色涂片的相关情况。
(3)必须综合生化和血液学结果 (4)如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他
指标正常,对报告的致病菌应保持怀疑,可能送检污染。
呼吸道标本 Respiratory Cultures
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本 Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
若为腐生葡萄球菌,则处理与其他致病菌相同; 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染
进行鉴定和药敏,若数量< 105CFU/ml, 仍然对可能的致病菌进行操作
是
> 104 CFU/ml
导管尿
过夜培养
< 104 CFU/ml
继续培养;
否 随后观察;发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
几种细菌的混合形态,缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态?
呼吸道标本中未被染色的,有折射的杆菌=抗酸杆菌
呈链排列的革兰阳性球菌?或革兰阳性分枝杆菌?
肺中的结节吸出物,不规则“球菌”,分叉,无短链,链的末端的呈尖状,都 证明是分枝状的革兰阳性杆菌,可能是放线菌或诺卡菌(通常来自脑或肺组织 的标本)
呼吸道标本的涂片评估模
式 肺炎-可接受的
不合格标本
评述
很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野
许多鳞状上皮 >10个/低倍视野
可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞,说明在采 集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。
很多的中性粒细胞
很多中性粒细胞混合有形态多 样的细菌(革兰氏阴性杆菌, 纺锤形,革兰氏阳性球菌) 许多或中等量的中性粒细胞,
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒 收
有PMN的痰标本,中性粒细胞多,且鳞状上皮细胞特别 少=接受,进行培养
粘液丝
胞内细菌 ——提示感染 细胞内细菌
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
滑石颗粒
见于迁链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
以一种形态的细菌为主
许多不着色的有折射的杆状细 菌
很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少
酵母菌样,酵母菌是一种 很少引起肺炎的细菌,常 由口腔污染
中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式,培养只 会培养出正常菌群,所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。
•长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 • 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
尿液运输方法
如不能及时送检,需冷藏。 4小时延迟送检,须废弃标本。
是
> 105 CFU/ml
自然排尿 过夜培养
< 105 CFU/ml
否
继续培养; 随后观察;发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告