碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)
简介:
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ,简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.2~9.8。

此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。

碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法,其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下,可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。

在碱性条件下酚与氨基安替比林结合,并经氧化生成红色醌式结构物,呈深浅不一的红色,产物红色越深,说明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过酶标仪测定吸光度,据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。

该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:
自备材料:
1、 96孔板
2、 水浴锅或恒温箱
3、 酶标仪
操作步骤(仅供参考):
1、 配制标准品工作液:取出Phenol 标准(1mg/ml)恢复至室温后,取溶解于ddH 2O ,使
浓度达到,即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。

按照下表稀释系列标准品溶液。

编号 名称
TE0005 50T TE0005 100T Storage
试剂(A): ALP Assay buffer 2.5ml 5ml 4℃ 避光 试剂(B): ALP 显色液 2.5ml 5ml -20℃ 避光 试剂(C): 显色基液
7.5ml 15ml -20℃ 避光 试剂(D): Phenol 标准(1mg/ml) 1ml 1ml RT 试剂(E): ddH 2O 1ml
1ml
RT
使用说明书
1份
1
2
3
4
5
Phenol(0.05mg/ml)(μl) 0 10 20 30 40 50
ddH2O(μl) 55 45 35 25 15 5
相当于金氏单位(U/L) 0 10 20 30 40 50
2、准备样品:
①细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离
心取上清,冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的
测定,尿液通常也可以直接用于测定,冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。

③高活性样品:如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或
PBS等进行稀释,如鸡血清、血浆可稀释后检测。

3、加样:按照下表设置对照孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免
产生气泡。

如果样品中的碱性磷酸酯酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

样品的检测最好能设置平行孔。

加入物(μl) 对照孔标准孔测定孔
Phenol标准(1~5号管) —55 —
待测样品——55
ALP Assay buffer 50 50 50
37℃水浴中孵育5min。

ALP显色液(37℃提前温育) 50 50 50
立即混匀,37℃水浴中准确孵育15min。

显色基液150 150 150
待测样品55 ——
4、用分光光度计,以0号孔(ddH2O)调零,读取对照孔、标准孔、测定孔吸光度(即A对照、
A标准、A测定),如无法检测,亦可检测范围内吸光度,一般应数小时内检测完毕。

计算结果:碱性磷酸酶金氏活性单位的定义:在37℃条件下,待测样品与显色底物(即ALP显色液所含物质)作用,产生酚为一个金氏单位。

以系列Phenol标准(1~5号孔)对应的金氏单位为x轴,以相应的A标准(1~5号管)为y轴,绘制标准曲线。

以A测定-A对照的差值为实际的吸光度,用该差值与标准曲线进行对比,求出酶活力单位。

参考区间(37℃):
健康成年人3~13金氏单位
健康儿童5~28金氏单位
注意事项:
1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。

2、如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。

3、所测样本的值高于标准曲线的上限,应稀释样品后重新测定。

4、空白管如果显红色,说明ALP显色液不可用,应丢弃。

5、加入显色基液时,应迅速,并且及时混匀,否则显色不充分。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

相关:
编号名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson三色染色液
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
PW0082 丽春红S染色液(1×Ponceau S)。

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碱性磷酸酶测定方法(磷酸苯二钠比色法)

碱性磷酸酶测定方法(磷酸苯二钠比色法)

磷酸酶磷酸酶能酶促有机磷化合物的水解。

试验表明,土壤微生物对于土壤含磷有机物的矿化起着主要的作用;某些高等植物的根系也有磷酸酶活性。

土壤的磷酸酶活性可以表征土壤的肥力状况(特别是磷的状况)。

基本原理:土壤磷酸酶活性的测定常用各种磷酸酯作为基质。

应用得最多的是酚酞磷酸酯、苯磷酸酯、甘油磷酸酯、ɑ-或ß-萘磷酸酯和p-硝基苯磷酸酯等的水溶性钠盐。

当它们被酶促水解时,能析出无机磷和基质的有机基团。

因此磷酸酶活性的测定时测定基质水解后的无机磷或酚的部分。

这里介绍的方法是测定基质水解时生成的酚量。

该法可用于测定各种磷酸酶的活性:碱性磷酸酶(用PH10的硼酸盐缓冲液),中性磷酸酶(用PH7.0的柠檬酸盐缓冲液),酸性磷酸酶(用PH5.0的乙酸盐缓冲液)试剂配制:1)甲苯2)0.5% 磷酸苯二钠3)硼酸盐缓冲液(PH9.6与PH10.0):称取12.404g硼酸(H3BO3)溶于700ml 去离子水,用稀NaOH溶液调节至PH10.0,用去离子水稀释至1000ml4) 氯代二溴对苯醌亚胺试剂:取0.125g 2,6-二溴苯醌氯酰亚胺,用10ml 96%的乙醇溶解,贮于棕色瓶中,存放在冰箱里。

保存的黄色溶液未变褐色之前均可使用。

5)标准溶液:(a)母液:1g酚溶于蒸馏水中,并稀释至1000ml,溶液保存在暗色瓶中;(b)工作液:10ml溶液(a)稀释至1000ml(1ml含10ug酚)6)0.3%硫酸铝溶液标准曲线绘制:取0,1,3,5,7,9,11和13ml酚工作液(b),置于50ml容量瓶中,每瓶加入5ml缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂,显色后稀释至刻度,30min后比色测定。

以光密度为纵坐标,浓度为横坐标绘成标准曲线。

操作步骤:1)取5g风干土置于200ml三角瓶中,用2.5ml甲苯处理2)处理15min后,加入20ml 0.5%磷酸苯二钠3)将反应混合物置于37℃恒温箱中,培养24h后,在培养液中加100ml 0.3%硫酸铝溶液用致密滤纸过滤。

土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒使用说明

土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒使用说明

土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒使用说明货号:BC0280规格:50T/48S产品简介:土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。

土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。

通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。

产品内容:试剂一:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。

用前加50mL蒸馏水充分溶解。

试剂三:液体×1瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。

临用前加1152μL无水乙醇(自备),48μL蒸馏水充分溶解。

(变褐色后不能再使用)标准品:液体×1瓶,0.5μmol/mL苯酚标准液,4℃保存。

操作步骤:催化反应:称取风干混匀土壤约0.1g,加入0.05mL甲苯(自备),轻摇15min;加0.4mL试剂一并且摇匀后,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。

10000rpm室温离心10min,取上清液置于冰上待测。

显色反应:1.分光光度计预热30min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。

2.空白管:取1mL玻璃比色皿,加入50μL蒸馏水,100μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830μL,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A空白管。

3.标准管:取1mL玻璃比色皿,加入50μL标准液,100μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830μL,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A标准管。

4.测定管:取1mL玻璃比色皿,加入50μL上清液,100μL试剂三,20μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830μL,混匀后室温静置30min,于660nm测定吸光度,记为A测定管。

血清中碱性磷酸酶的测定

血清中碱性磷酸酶的测定

混匀。37°C水浴保温5min,同时将底物液预热 底物液/ml 1.00 1.00 1.00 1.00
混匀。 37°C水浴保温15min 铁氰化钾溶液/ml 血清/ml 3.00 - 3.00 - 3.00 - 3.00 0.100
计算公式: 计算公式:
ALP的活力=( A测定-A 位)
对照)/(A标准-A空白)ห้องสมุดไป่ตู้0.15×100(Kings单
2生成的酚化合物本身在一定的条件下就可显色如磷酸对硝在在ph10ph10的环境中的环境中alpalp催化磷酸二苯钠的水解生成苯酚催化磷酸二苯钠的水解生成苯酚和磷酸氢二钠苯酚与和磷酸氢二钠苯酚与44氨基安替比林反应生成色素原该色氨基安替比林反应生成色素原该色素原经铁氰化钾氧化生成红色醌亚胺衍生物
血清中碱性磷酸 酶活性的测定 磷酸苯二钠法) (磷酸苯二钠法)
实验器材与试剂
• (一)器材 器材
5ml移液管、100ul或微量可调式移液器、721E型分光光度计、1cm比色 皿、37℃恒温水浴锅。
• (二)试剂 试剂
(1)0.1mol/L碳酸缓冲液(pH=10.0):称取无水碳酸钠6.36g、碳酸氢钠 3.36g、4-氨基安替比林1.5g,溶于800ml蒸馏水中,定容至1L,置于棕色 瓶内储存。 (2)20mmol/L磷酸苯二钠溶液:先将500ml蒸馏水煮沸,迅速加入磷酸苯 二钠2.18g(磷酸苯二钠如含2分子结晶水,应称取2.54g),冷却后加氯 仿2ml防腐,在4℃冰箱内保存。用剩的溶液不应再倒回瓶中。 (3)铁氰化钾的硼酸溶液:称取铁氰化钾2.5g、硼酸17g,各溶于400ml 蒸馏水中,两液混合后,加蒸馏水至1L,置于棕色瓶内避光保存。如出 现蓝绿色,说明试剂变质,应弃去。 (4)酚标准工作液(0.05mg/ml):购买合格的二级标准品。

ALP标准操作规程

ALP标准操作规程

对-硝基苯磷酸盐在碱性溶液中为无色,在ALP的催化下,对-硝基苯磷酸盐分列出磷酸基团,生成游离的的对硝基酚,对硝基酚在碱性溶液中转变为醌式结构,呈现出较深的黄色,在405 nm 处连续监测吸光度的上升反应速率,反应速率与样本中碱性磷酸酶的含量成正比。

即可计算出样本中碱性磷酸酶的活力。

2.标本要求最适样本为新鲜不溶血血清或血浆。

血浆采用肝素扛凝;请勿使用EDTA、草酸盐或氟化物。

储存血清ALP的活性会缓慢增高,建议采血当天测定ALP的活性。

【3.试剂3.1 试剂:本试剂盒为液体双试剂,各组分如下:R1:AMP缓冲液410mmol/L、醋酸镁2.5mmol/LR2:AMP缓冲液410mmol/L、醋酸镁2.5mmol/L、对硝基苯磷酸二钠16.2mmol/L3.2:校准血清本试剂盒为连续监测法,可采用理论因子进行结果的计算:每次测定前只需要进行空白定标。

3.3 试剂的稳定性:2 ~ 8℃避光保存,防污染,有效期一年。

试剂首次开启后尽快用完。

当试剂空白吸光度高于0.8时,试剂按照失效处理。

4.仪器BT815A型号半自动生化仪。

5.操作5.1、参数设置6.计算ALP (U/L) =ΔAT/min×K 405 nm时,K=2713 7、性能指标的计算方法7.1、空白吸光度计算1-3号试管的吸光度的平均值,即为空白吸光度值,应符合:A405nm ≤0.80。

7.2、准确度计算4-6号试管的含量的平均值,即为准确度。

应符合:测定定值质控血清,三次测定的平均值应在规定的靶值范围内。

7.3 线性范围计算出7-11号试管的浓度值,在EXCEL中,利用相关系数公式(CORREL),自动求出理论浓度值与测定浓度值的相关系数。

应符合:在5~1000U/L范围内, 相关系数r应≥0.9907.4 分析灵敏度计算出12-21号试管的浓度值,在EXCEL中,利用平均值公式(AVERAGE),自动计算出平均值(X);利用标准差公式(STDEV),自动计算出标准差(SD),求出X+2SD。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒使用说明

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒使用说明

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)货号:G5610有效期:6个月有效。

产品内容:产品规格试剂(A):ALP Assay buffer 2.5ml试剂(B):ALP显色液 2.5ml试剂(C):显色基液7.5ml试剂(D):Phenol标准(1mg/ml)1ml试剂(E):ddH2O1ml产品说明:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH9.2~9.8。

此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。

碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法,其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下,可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。

在碱性条件下酚与氨基安替比林结合,并经氧化生成红色醌式结构物,呈深浅不一的红色,产物红色越深,说明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过酶标仪测定510nm处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。

该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料:96孔板、水浴锅或恒温箱、酶标仪操作步骤(仅供参考):1、配制标准品工作液:取出Phenol标准(1mg/ml)恢复至室温后,取0.1ml溶解于1.9ml ddH2O,使浓度达到0.05mg/ml,即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。

按照下表稀释系列标准品溶液。

012345010******** Phenol(0.05mg/ml)(μl)ddH2O(μl)55453525155相当于金氏单位(U/L)010********2、准备样品:(1)细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-80℃冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。

碱性磷酸酶测定

碱性磷酸酶测定

碱性磷酸酶测定一、试剂配制1、甲苯2、pH9.8氯化铵-氢氧化铵缓冲液:称取20g纯氯化铵,溶于少量水(我配200ml,用一百多毫升水溶40g氯化铵),然后加入浓氨水润洗烧杯和定容至100ml,用pH试纸测pH,pH为10即可,不用刻意调pH。

(氨水很臭,需要带口罩在通风橱配)3、8%铁氰化钾溶液(只能用一周,放冰箱保存):取8g铁氰化钾,用水定容至100ml。

4、2%4-氨基安替比林(只能用一周,放冰箱保存):取2g4-氨基安替比林,用水定容至100ml。

5、0.5%磷酸苯二钠溶液(用pH9.4硼酸缓冲液配)(1)先配制pH9.4硼酸盐缓冲液:称取4.768g硼砂(十水合四硼酸钠)和0.44g纯氢氧化钠,用蒸馏水定容至1000ml。

(硼砂需要用电炉加热配制,硼砂用称量纸称量,氢氧化钠需要用烧杯称量,基本不用配pH,pH试纸测为9)(2)称取5.05g磷酸苯二钠,用pH9.4硼酸缓冲液定容至1000ml。

6、酚标准溶液:酚溶液:称取1g苯酚用水溶至1L,保存于暗色瓶中。

(苯酚还是需要水浴加热,详细配法看脲酶测定,但由于1g很难准确称量,并在我配完发现天平托盘上结了一层苯酚,但测量后不影响标线的准确程度,R值为三个9)酚工作液:取10ml原液用水稀释至1L(1ml中含0.01mg/mL)二、测定过程1、称取5g过1mm筛的土样于绿色塑料瓶(每个样需要3个重复,前两个重复和第三个重复分开放,第三个重复为无基质重复,每天做两个无土样重复,此重复加甲苯、磷酸苯二钠溶液),加5滴甲苯(用滴管加5滴),盖盖盖子后用震荡机低速震荡15min(我选择160的速度),然后给第三个重复加入20ml蒸馏水,给前两个重复加入20ml磷酸苯二钠,盖上盖子后充分摇匀后在37摄氏度恒温箱培养2小时。

2、培养结束后过滤,过滤后取5ml滤液加入50ml容量瓶(用5ml枪加,由于过滤液体没那么多,每加一个样用两遍蒸馏水润洗枪),加水至大概20ml,再加0.25ml氯化铵-氢氧化铵缓冲液,0.5ml4-氨基安替比林液,0.5ml铁氰化钾溶液(用1ml枪加),每加一种都要充分摇匀。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序

碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶(ALP)存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。

测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力,做临床辅助诊断用。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶(ALP)的活力。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶(ALP)活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶(ALP)试剂盒采用的是AMP缓冲液法。

5.原理在AMP的缓冲环境下,磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下,可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。

在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升,其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。

−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:R1:AMP缓冲液(PH10.50)、乙酸镁;R2:AMP缓冲液(PH8.85)、磷酸对硝基苯、乙酸镁。

AMP:2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性:试剂在2-8℃避光保存,有效期1年。

试剂工作液在2-8℃避光保存,可稳定4周,15-25℃可保存稳定4天。

7.4试剂准备:试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求zhongshengbeikong

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

1.1包装规格液体双剂型试剂1(R1):80mL×3,试剂2(R2):60mL×1;试剂1(R1):80mL×2,试剂2(R2):20mL×2;试剂1(R1):60mL×3,试剂2(R2):45mL×1;试剂1(R1):40mL×3,试剂2(R2):30mL×1;试剂1(R1):40mL×3,试剂2(R2):10mL×3。

1.2主要组成成分试剂1(R1)液体:AMP缓冲液350mmol/L(pH 10.5)2.5mmol/LMgCl2试剂2(R2)液体:对硝基苯磷酸盐 16mmol/L2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足:2.1.1试剂1(R1)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损;2.1.2 试剂2(R2)应为淡黄色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长410nm(400nm~420nm)(光径1cm)处,试剂空白吸光度(A)应≤1.000;试剂空白吸光度变化率(△A/min)应≤0.005。

2.4准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10%。

2.5分析灵敏度对应于活性为120U/L的ALP所引起的吸光度变化率(△A/min)的绝对值应在0.010~0.050范围内。

2.6重复性重复测试同一样本,变异系数(CV)应≤5%。

2.7批间差测试同一样本,批间差(R)应≤6%。

2.8线性范围在[1,1200]U/L(37℃)范围内,线性相关系数(r)应≥0.990;在(20,1200] U/L(37℃)范围内,线性相对偏差应不超过±10%;在[1,20]U/L(37℃)范围内,线性绝对偏差应不超过±2U/L。

Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号:E-BC-K091-M产品规格:48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器:酶标仪(500-530 nm)使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。

检测原理在pH=10的反应液中,碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解,生成游离酚和磷酸。

酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合,并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物,根据红色的深浅计算酶活的高低。

本试剂盒检测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法(货号:E-BC-K318-M)。

提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器:酶标仪(500-530 nm,最佳检测波长520 nm)、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。

耗材:枪头(1000 µL,200 µL,10 μL)、EP管(10 mL,2 mL)。

试剂:双蒸水、PBS(0.01 M,pH 7.4)或生理盐水(0.9% NaCl)试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。

②工作液的配制:按试剂一:试剂二为1:1的体积比混匀,现用现配,未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。

③不同浓度标准品的稀释:样本准备①样本处理血清血浆等液体样本:直接测定。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液)产品技术要求dd

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液)
组成:
适用范围:用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。

2.1外观
试剂盒外观应整洁,液体无渗漏,文字符号标识清晰;试剂1:无色澄清液体;试剂2:淡黄绿色澄清液体。

2.2装量
每瓶不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度
用指定的空白样品测试试剂(盒),在光径1cm下,在A405nm处测定试剂空白吸光度A≤0.8,空白变化率△A/min≤0.005。

2.4分析灵敏度
试剂测定(120±12)U/L被测物,吸光度变化△A/min≥0.01。

2.5线性范围
2.5.1在[25,750]U/L内,相关系数R≥0.990。

2.5.2在 [25,100]U/L时绝对偏差不超过±10U/L,测定(100,750]U/L相对偏差不超过±10%。

2.6精密度
2.6.1 重复性
重复测试(120±12)U/L的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。

2.6.2批间差
测定(120±12)U/L样本,所得结果的批间相对极差(R)应不大于10%。

2.7准确度
比对试验相关系数r2≥0.95, [25,100]U/L区间内,绝对偏差不超过±10U/L,(100,750]U/L区间内,相对偏差不超过±10%。

2.8 效期稳定性
试剂有效期为12个月,取到效期后一个月内进行检测,测定结果应符合2.3-2.6.1、2.7项要求。

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