常用缓冲液配置
缓冲溶液的配置
二、缓冲液免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多，即使是同种缓冲液，其浓度、pH、离子强度等也常不同。
在此介绍几种最常用缓冲液的配制。
1、0.2mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer，PB）试剂：NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O。
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的NaH2PO4；称取NaH2PO4·2H2O 31.2 g 或NaH2PO4·H2O 27.6g加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的Na2HPO4：称取Na2HPO4·12H2O 71.632g（或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O，充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。
若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
2、0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水（Phosphate Buffered Saline, PBS）试剂：0.2 mol/L PB50mlNaCl 8.5～9g（约0.15mol/L）重蒸水至1000ml配制方法：称取NaCl8.5～9g及0.2mol/L的PB50ml，加入1000ml的容量瓶中，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀即可。
若拟配制0.02mol/L的PBS，则PB量加倍即可，依此类推。
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液，0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。
缓冲液配制及注意事项
缓冲液配制及注意事项
缓冲液配制及注意事项
一、定义
缓冲液是一种有机水溶液，其pH值可以在一定范围内稳定。
缓冲液主要分为碱性缓冲液和酸性缓冲液，常用的缓冲液有磷酸-碳酸滴定液、氢氧化钠滴定液、氢氧化钾滴定液等。
二、缓冲液的配制
1、磷酸-碳酸滴定液
磷酸-碳酸滴定液的pH在4～6之间，该液体没有固体溶解度，只能通过溶质溶解来溶解自身，所以要配制磷酸-碳酸滴定液，首先要准备一定的浓度的碳酸氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液，然后根据实验需要选择相应的浓度比例，将两种溶液混合，即可得到磷酸-碳酸滴定液。
2、氢氧化钠滴定液
氢氧化钠滴定液的pH为7，只要准备一定浓度的氢氧化钠溶液，就可以得到氢氧化钠滴定液，由于氢氧化钠能溶解固体，因此，可以将一定物质的固体溶解于氢氧化钠溶液，从而得到一种比较稳定的氢氧化钠滴定液。
3、氢氧化钾滴定液
氢氧化钾滴定液的pH在8～9.5之间，可以通过准备一定浓度的氢氧化钾溶液来得到氢氧化钾滴定液，也可以将一定比例的氢氧化钠溶液和氢氧化钾溶液混合，用离子选择膜将氢离子从氢氧化钠溶液中
筛除，得到浓度为4mol/L的氢氧化钾滴定液。
三、缓冲液的注意事项
1、配制缓冲液时应注意操作步骤，尤其不要添加过多的溶剂。
2、配制的缓冲液应该达到一定的酸碱度，保持比较稳定的pH值，避免极端的酸碱度对实验影响，使实验结果准确可靠。
3、配制的缓冲液必须及时使用，避免受到外来因素的影响，使其滴定性能发生变化。
4、使用缓冲液时应该注意安全，尤其是有机缓冲液，要避免皮肤接触，以免受到烫伤。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1.氯化钾-盐酸缓冲液(0・2mol/L)邻苯二甲酸氢钾：分子量=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 4.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85Na2HPO4分子量=141.98,0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4・2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.61g/L。
C6H8O7•H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
5.使用时可以向每升混合液中加入1g酚，若最后p H值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0・1mol/L)柠檬酸C6H8O7・H2O：分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。
常用缓冲液配方及缓冲范围
常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液，其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。
缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。
下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液，常用于生物化学和分子生物学实验。
它的配方通常为：- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。
2.PBS缓冲液PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物学缓冲液，具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。
它的配方通常为：-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。
3.TAE缓冲液TAE（三乙酸缓冲液）是一种常用的核酸电泳缓冲液，其配方为：- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳，如聚丙烯酰胺凝胶电泳（）和琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。
它的配方基于Tris缓冲液，在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。
例如，对于Tris-HCl缓冲液的配方为：- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值（通常为7.2至9.0）Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。
这只是一些常用的缓冲液配方，根据不同实验需求和物质稀释要求，还有其他许多缓冲液的配方。
对于缓冲液的选择，关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系，并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。
常用缓冲液配置
成分及终浓度
配制10ml溶液各成分的用量
L Tris-HCl
100mmol/L MgCl2
100mmol/L DTT
2mmol/L ATP
5mmol/L盐酸亚精胺（可选）
ml BSA（组分V）（可选）
3.适量分成小份后，-20℃保存。
17）10 mMATP
组份浓度：10 mMATP
配制量：20 ml
配制方法：
1.称取121 mg Na2ATP·3H2O，加入到50 ml塑料离心管内。
2.加20 ml的25 mMTris-HCl（，搅拌溶解。
3.适量分成小份后，-20℃保存。
一.常用贮液与溶液
1mol/L亚精胺（Spermidine）:溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加的浓盐酸至的水中。
须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇
至微量离心管，加的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
2.高温高压灭菌后，4℃保存。
常用缓冲溶液的配置
1 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
2 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
3 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
4 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
常用缓冲溶液的配置方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01 g/L。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
① 使用时可以每升中加入1g 酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41 g/L 。
227．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为8.25克/升10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至100吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根）硼砂Na 2B 4O 7·H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含19.07克/升。
常用缓冲溶液的配置
缓冲液组成
pKa
缓冲液pH
缓冲液配制方法
氨基乙酸—HCl
2.35
pKa1
2.3
取氨基乙酸150g溶于500mL水中后，加浓HCl 80mL,水稀释至1L
H3PO4—枸橼酸盐
2.5
取Na2HPO4·12H2O113g溶于200mL水后，加枸橼酸387g,溶解，过滤后，稀释至1L
一氯乙酸—NaOH
2.86
2.8
取200g一氯乙酸溶于200mL水中，加NaOH40g溶解后，稀释至1L
邻苯二甲酸氢钾—HCl
2.95
pKa1
2.9
取500g邻苯二甲酸氢钾溶于500mL水中，加浓HCl 80mL，稀释至1L
NH4Ac—HAc
4.5
取NH4Ac77g溶于200mL水中，加冰HAc 59mL，稀释至1L
NaAc—HAc
4.74
4.7
取无水NaAc83g溶于水中，加冰HAc 60mL，稀释至1L
NaAc—MAc
4.74
5.0
取无水NaAc160g溶于水中，加冰HAc 60mL，稀释至1L
NH4Ac—HAc
5.0
取NH4Ac250g溶于水中，加冰HAc 25mL，稀释至1L
六次甲基四胺—HAc
5.15
8.21
8.2
取25gTris试剂溶于水中，加浓HCl 8mL，稀释至1L
NH3—NH4Cl
9.26
9.2
取NH4Cl54g溶于水中，加浓氨水63mL,稀释至1L
NH3—NH4Cl
9.26
9.5
取NH4Cl54g溶于水中，加浓氨水126mL,稀释至1L
NH3—NH4Cl
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实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl , ,组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值浓HCl约70ml约60ml约42ml4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。
2)10×TE Buffer , ,组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
1M Tris－HCl Buffer（，，）100ml20ml 500mM EDTA2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。
4)3 M 醋酸钠组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 8g0.2g KCl1.42g Na2HPO40.27g KH2PO42. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将pH值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
6)10 M 醋酸铵组份浓度：10 M 醋酸铵配制量：100 ml配制方法：1. 称量 g醋酸铵置于100～200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 使用 mm滤膜过滤除菌。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7)苯酚/氯仿/异戊醇 (25 : 24 : 1)配制方法：1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25 : 24 : 1)。
氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24 : 1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
8）10％ (W/V) SDS组份浓度：10％ (W/V)SDS配制量：100ml配制方法：℃加入溶解68的去离子水，80ml烧杯中，加入约100-200ml置于SDS高纯度的10g称量1.2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后，室温保存。
9）2 N NaOH组份浓度：2 N NaOH配制量：100 ml配制方法：1. 量取80 ml去离子水置于100～200 ml塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8 g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100 ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
10） N HCl组份浓度： N HCl配制量：100 ml配制方法：1. 在 ml的去离子水中加入 ml的浓盐酸（ N)，均匀混合。
2. 室温保存。
11）5 M NaCl组份浓度：5 M NaCl配制量：1 L配制方法：1. 称取292.2 g NaCl置于1 L烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1 L后，适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
11）20％ (W/V) Glucose组份浓度：20％ (W/V) Glucose配制量：100 ml配制方法：1. 称取20 g Glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
12）Solution I(质粒提取用)组份浓度：25 mM Tris-HCl（, 10 mM EDTA, 50 mM Glucose配制量：1 L配制方法：1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
1M Tris-HCl（）25ml20ml （）0.5M EDTA45ml ）1.11M（Glucose％20．dH2O910ml2. 高温高压灭菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 ml的Solution I中加入2 ml的RNase A（20 mg/ml)。
13）Solution II(质粒提取用)组份浓度：200mM NaOH，1％(W/V)SDS配制量：500ml配制方法：1.量取下列溶液，置于500ml烧杯中10％ SDS 50ml2N NaOH 50ml2.加灭菌水定容至500ml，充分混匀3.室温保存，此溶液保存时间最好不要超过一个月注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌14）Solution III(质粒提取用)组份浓度：3 M KOAc, 5 M CH3COOH配制量：500 ml配制方法：1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
KOAc????????????????? 147g?CH3COOH2. 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
15）0.5 M EDTA组份浓度：0.5 M EDTA配制量：1 L配制方法：称取 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值至（约20 g NaOH)。
注意：pH值至时，EDTA才能完全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
16）1 M DTT组份浓度：1 M DTT配制量：20 ml配制方法：1. 称取 g DTT，加入到50 ml塑料离心管内。
滤器过滤除菌。
mm（，溶解后使用 M NaOAc的20 ml加2.3. 适量分成小份后，-20℃保存。
17）10 mM ATP组份浓度：10 mM ATP配制量：20 ml配制方法：1. 称取121 mg Na2ATP·3H2O，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl（，搅拌溶解。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至，再加水定容到100ml。
L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O 和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加的浓盐酸至的水中。
25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。
分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：将200mg的蛋白酶L加入到水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free RNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH ）。
溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。
用1mol/L的Tris－HCl调pH至，于-20℃贮存。
（配制过程中要戴手套）。
100ml氯化钠于足量的水中，定容至29.2g）：溶解NaCl氯化钠（5mol/L．10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。
用水定容至1L。
2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。