三株益生菌的发酵特性。
三株口服液
发展状况
A
1994年8月，30万元的注册资金、 成立三株实业有限公司；； 次年猛跳至23亿元；
第三年就达到了惊人的80亿元； 在省会城市，地级市注册了600个子 公司，并在县，乡镇建立了2000多个 办事处，其营销队伍更是达到15万人。
食用功效
能有效抑制和杀灭胃肠道各种有害菌及病原菌、调理恢复人体 消化吸收功能，激活机体吞噬活性、提高机体免疫力，清除体 内多余自由基和有害物质，促进机体内组织细胞新陈代谢，提
三级发酵，相互协调、 共生共荣；国内首创， 世界领先。
益生菌
益生菌是一类对
宿主有益的活性 微生物
①乳杆菌类
②双歧杆菌类 ③革兰氏阳性球菌
酸奶
普洱茶
1
2 4
①预防或改善腹泻
3
5
1.增强植物新陈 代谢 2.产生抗菌物质 3.有益菌群与土
6
1、源于人体 2、抗胃酸和胆汁
②缓解不耐乳糖症状
③预防生殖系统感染 ④增强人体免疫力
不单是对肠道疾病（如肠炎、结肠炎、十二指肠溃疡等）有
非常好的疗效，同时对胃部疾病（如胃炎、胃溃疡、浅表性 胃炎、胃胀、胃痛等）有非常好的治疗效果和预防作用。
优势特点
每100ml含200亿益生
三级共生发酵技术 菌，是酸奶益生菌含 量的200倍
多菌株全面调理
肠胃微生态平衡， 效果更突出
国际专利技术（欧 盟27国专利、韩国 专利）生产
3、抗龋齿菌和致病菌
4、对人体安全 5、具有临床证实的各 保健作用
⑤促进肠道消化系统健康 壤中放线菌等共 ⑥降低血清胆固醇 生共殖 ⑦帮助吸收营养成分
常德事件
1996年6月3日，湖南常德市77岁的退休 职工陈伯顺，因患老年性尿频，买了十瓶 三株口服液回家，服用治病。但服到第四 六瓶时，已全身红肿；服到第八瓶，老人 家居然全身溃烂。湖南汉寿县第二人民医 院诊断为“三株药物高蛋白过敏症”。时 三株公司董事长吴炳新坚信三株没有毒性， 30万元完全是敲诈，根本不予理彩，同 时，吴炳新相信法院会给他一个公正的判 级人民法院宣判消费者陈伯顺系服用三株
乳酸菌抗氧化特性和耐酸耐胆盐特性的研究
安徽农业大学硕士学位论文乳酸菌抗氧化特性和耐酸耐胆盐特性的研究姓名：周晓莹申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：张明; 陈晓琳2011-06乳酸菌在发酵过程中能产生超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及NADH氧化酶，这使得乳酸菌具有防癌能力及提高机体免疫力的能力。
含有乳酸菌的微生态制剂在养殖业、乳制品及医药等方面有着广泛的应用。
本文重点研究三株乳酸菌的抗氧化性及耐胆盐、耐酸特性。
本实验研究超声波破粹仪处理的样品与未处理样品的抗氧化性。
首先，采用脱氧核糖氧化法测定各样品对·OH的消除率。
在60mmol/L 2-脱氧-D-核糖的体系中，菌株1以处理的发酵液对·OH的消除率最强，最高消除率为83. 4%，其他两株菌在本实验中对·OH无清除作用。
再次，采用邻苯三酚氧化法测定各样品对O2·的消除率。
在2. 5mmol/L邻苯三酚的体系中，菌株1、菌株5、菌株34分别以处理的菌体、处理的发酵液及未处理的菌体对O2·的消除率最高，最高消除率分别为96. 5%、86. 3%及88. 8%。
在0. 12mmol/L DPPH的体系中，菌株1、菌株5、菌株34分别以处理的上清液、未处理的菌体及未处理的菌体对DPPH的消除率最高，最高消除率分别为82. 8%、92. 6%及70. 4%。
在抗脂质过氧化性方面，以5%亚油酸为脂质，测定各样品对亚油酸的抑制率。
菌株1、菌株5、菌株34都以处理的菌体对亚油酸的抑制率最高，且抑制率分别为5. 6%、10. 1%及7. 0%。
在5% DTNB体系中，菌株1、菌株5、菌株34的无细胞提取物内TTG含量分别为5. 0×10-6mol/L，6. 6×10-6mol/L及3. 4×10-6mol/L。
采用SOD试剂盒、GSH-PX试剂盒分别测定样品内的SOD、GSH-PX含量。
菌株1、菌株5、菌株34都以上清液内SOD含量最高，最高含量分别为3. 05U、3. 65 U及3. 28 U；菌株1、菌株5、菌株34分别以菌体、菌体及上清液内GSH-PX 含量最高，且最高含量分别为194. 52U、124. 68U及49. 71U。
几种常用益生菌简介
几种常用益生菌简介1、两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum）形态及培养特征：菌体外形呈高度变化的棒状，分叉、弯曲、不规则状。
在固体培养基上厌氧培养时菌落成圆形，微凸起，具有乳白色、不透明光滑粘液性表面。
革兰氏阳性，但随发酵时间变化可能出现异常；要求有机氮作氮源，最适生长温度36-38℃，≤20℃或≥45℃不生长；最适pH6-7，pH≤5.5生长缓慢或不生长。
培养基：TPY培养基或GAM 培养基或BS培养基应用范围：酸奶、乳酸菌饮料、奶酪、肉制品发酵、火腿香肠发酵、蔬菜发酵、大豆乳发酵、绿豆乳发酵、果汁发酵、谷物发酵、薯类发酵、酿酒；生产含益生菌奶粉、各类食品、各类饮品、各类乳制品、保健品、制成胶囊、压成片剂、粉状冲剂等。
动物、家畜、家禽、鱼饲料添加剂，用于猪、牛、鸡饮用水等，代替抗生素，减少药物在体内的残留量。
生物学功能：保持肠道微生态平衡，改善胃肠功能，润肠通便，使肠道处于健康状态。
2、青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis）形态及培养特征：呈短弯曲棒状，有时双歧棒状。
菌落光滑、凸圆、边缘完整、乳白色、闪光并具有柔软的质地，厌氧，在有氧的的斜面上不生长，但对氧的敏感性因菌种不同而异。
最适生长温度35-37℃，≤20℃或≥46.5℃不生长；培养基：TPY培养基或GAM 培养基或BS培养基应用范围：酸奶、乳酸菌饮料、奶酪、大豆乳发酵、绿豆乳发酵、果汁发酵、；生产含益生菌奶粉、各类食品、各类饮品、各类乳制品、保健品、制成胶囊、压成片剂、粉状冲剂等。
动物、家畜、家禽、鱼饲料添加剂，用于猪、牛、鸡饮用水等，代替抗生素，减少药物在体内的残留量。
生物学功能：保持肠道微生态平衡，改善胃肠功能，润肠通便，使肠道处于健康状态。
3、长双歧杆菌（Bifidobacterium.longum）形态及培养特征：呈长、弯曲、棒状或球棒状，革兰氏染色性质可变，菌落隆起、光滑或起伏状，直径2-5mm,发光或粘液外表。
三株乳酸菌形态特征的研究
乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的 细菌统称[1]，是日常生活中最常见、应用最广泛的一 类菌，目前乳酸菌分为 43 个属，共有 373 个种和亚 种[2]。嗜热链球菌 （Streptococcus thermophilus） 和保 加利亚乳杆菌 （Lactobacillus bulgaricus） 作为最经典 的酸奶发酵剂菌种，二者常一起用于酸奶生产，通 过共生作用相互促进，大大提高生长速度并改善了 酸奶的品质 。 [3-5] 而植物乳杆菌 （Lactobacillus plan原 tarum） 可以有效预防冠心病和动脉粥样硬化等心血 管疾病[6]，嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌和植物乳杆 菌三者以 1∶1∶1 的比例搭配发酵乳类不会产生拮 抗作用[7]。乳酸菌的益处渐渐被人们所认识，再加上 人类健康意识的不断提高，乳酸菌的利用程度也大 大提高[8]。但不是每个生长阶段的乳酸菌涂片都展现 乳酸菌典型的形态，乳酸菌是革兰氏阳性菌[9]，可以 根据其生长曲线培养不同生长时间段的菌群进行革 兰氏染色、涂片观察，以便更好地观察和认识乳酸
mophilus and Lactobacillus plantarum were smear observed by activated and cultured until the second generation，then inoculated into the medium. They were cultivated from 8 h to 24 h and Gram stained once every 2 h，and compared their morphological changes under microscope after planting and Gram staining. All of them were Gram positive and smears showed blue purple. They were at the end of the logarithmic phase cultured from 16 h to 18 h and showed typical morphological features. It should be paid attention to control of fungus age and dyeing time in the process of Gram staining.
发酵剂对发酵香肠微生物变化的影响
（ ．％ ）葡 萄 糖 （ ． ％ ） 黑 胡 椒 粉 （ ．％ ） 硝 酸 ２７ ， ０３ ， ０２ ，
钾 （ ． １ ％பைடு நூலகம்） ０ ０５ 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 发酵剂 制作 ．
原 料混 合后 ， 成三份 ， 份 不加 发 酵 剂做 对 照 分 一
（ 简称对 照组 ） 一 份接 种 发酵 剂 Ｓ （ 称 Ｓ 组 ） 一 ， 。简 ，
关键词 发 酵香 肠 发 酵剂 微 生物 变化
发 酵香 肠 是 把 调 味 品 、 以及 切 碎 的瘦 肉和 脂 盐
藏 于 ４Ｅ， 为发 酵剂用于发 酵香肠生产 。 ＇ 作
表 １ 发 酵 剂 木 糖 葡 萄 球 菌 Ｃ Ｓ３ Ｃ Ｒ ０和 １２ 、３ １
乳酸菌 １ １的特 性 和 发 酵 剂 组 成
生乳 酸 、 乙酸 ， ｐ 使 Ｈ值 下 降 ， 而影 响发 酵香肠 技 术 从 特性 和微 生物 稳定 性 。葡萄 球 菌 和微 球 菌通 过 发 酵
碳水 化合 物 ， 硝酸 盐分解 ， 白质分 解 和 脂肪 分 解 等 蛋
生化 反应 ， 加 产 品颜 色 稳 定 性 ， 少 组 织 恶 臭 、 增 减 腐 败， 减少 处理 时 间 ， 促进 风 味发 展 等 。 自然发 酵 香 肠 作 为野 生菌种 乳 酸菌 与葡 萄球 菌 、 球 菌 的保 存 者 ， 微 大 量 的菌株 被 分 离 出来 ， 根 据 他 们 的生 化 特 性 来 并 筛 选具 有优 势 的发 酵 剂 ， 而 保 证 人 工 接 种 发 酵 剂 从
每个 批次 分别 无菌 操作 取样 １ ｇ 转 移 到无 菌袋 ０， 中， 加人 ９ ｍＬ无 菌生 理 盐 水 ， ０ 用均 质 机 均 质 ９ ｓ 用 ０，
益生菌的发酵原理
益生菌的发酵原理益生菌的发酵原理是指通过合适的温度、时间和微生物菌种等条件，使含有益生菌的基质发生发酵作用，从而增加益生菌的数量和活性。
益生菌的发酵原理主要包括以下几个方面：第一，选择合适的益生菌菌种。
不同的益生菌菌种具有不同的生长需求和特性，因此在发酵过程中需要选择适宜的菌种。
常见的益生菌菌种包括乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌等，它们能够在合适的条件下迅速繁殖。
第二，提供合适的基质。
发酵过程中，益生菌需要适当的营养物质来生长和繁殖。
常用的基质包括牛奶、果汁、大豆、麦麸等。
这些基质中含有丰富的糖类、蛋白质、维生素和矿物质等营养物质，为益生菌提供了生长的必要条件。
第三，调节温度和pH值。
益生菌的生长和发酵对温度和pH值有一定的要求，因此在发酵过程中需要控制这两个因素。
一般来说，乳酸菌的适宜生长温度在30左右，而酵母菌则较适应较低的温度。
此外，不同的益生菌对pH值的要求也不同，一般在4-6之间。
第四，控制发酵时间。
发酵时间的长短影响着益生菌的繁殖速度和产生的代谢产物。
一般来说，益生菌的发酵过程需要一定的时间，以确保菌种得到充分的生长和繁殖。
益生菌的发酵过程中，微生物菌种通过代谢过程产生一些有益物质。
首先，益生菌通过分解基质中的复杂碳水化合物，如淀粉、纤维素等，产生一些发酵产物，例如有机酸、醇类、气体等。
这些产物可以改善基质的口感和风味，提高其营养价值。
其次，益生菌发酵还能合成一些有益物质。
例如，乳酸菌能够产生乳酸和双歧酸，这些物质能够调节肠道微生物群落，抑制有害菌的生长，并提高机体的免疫力。
另外，益生菌发酵还能产生一些维生素、酶和其他有益物质，如细胞因子、激素和抗氧化物质等，这些物质对人体健康有着积极的作用。
综上所述，益生菌的发酵原理主要包括菌种选择、适宜的基质提供、温度和pH 值的控制，以及合适的发酵时间。
通过以上的发酵过程，益生菌能够快速繁殖，并产生一系列有益物质，从而发挥保健和健康调节的作用。
这也是益生菌产品在保健食品和医药领域得以广泛应用的原因之一。
三株乳酸菌形态特征的研究
三株乳酸菌形态特征的研究作者：乌素杨晓艳班瑞来源：《农产品加工·下》2019年第06期摘要：选取3株乳酸菌分别为保加利亚酸乳杆菌（Lactobacillus bulgaricus）、嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），活化菌株并培养至第2代，接种到培养基中，待菌生长到8，10，12，14，16，18，20，22，24 h，对菌种进行制片和革兰氏染色，对比3株乳酸菌的形态变化。
3株乳酸菌的所有涂片都呈现蓝紫色，证明3株乳酸菌均为革兰氏阳性菌。
3株乳酸菌在培养16～18 h时，为对数期末期，革兰氏染色试验菌体呈现典型形态。
在对菌体染色过程中，应注意控制好菌龄和脱色时间。
关键词：乳酸菌;形态;制片革兰氏染色中图分类号：Q93-33 ; ; 文献标志码：A ; ; doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2019.06.043Abstract：In this experiment，three kinds of Lactic acid bacteria which were Lactobacillus bulgaria，Streptococcus thermophilus and Lactobacillus plantarum were smear observed by activated and cultured until the second generation，then inoculated into the medium. They were cultivated from 8 h to 24 h and Gram stained once every 2 h，and compared their morphological changes undermicroscope after planting and Gram staining. All of them were Gram positive and smears showed bluepurple. They were at the end of the logarithmic phase cultured from 16 h to 18 h and showed typical morphological features. It should be paid attention to control of fungus age and dyeing time in the process of Gram staining.Key words：lactic acid bacteria;morphology;planting Gram staining method乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的细菌统称[1]，是日常生活中最常见、应用最广泛的一类菌，目前乳酸菌分为43个属，共有373个种和亚种[2]。
三株益生芽孢杆菌的16SrDNA测序鉴定
齐，培养 72 h 可见淡红色色素；显微镜下，革兰氏阳 EU871707、EU871708。
性，菌体杆状，芽孢椭圆中生，孢囊无明显膨胀，无伴
将得到的 16S rDNA 序列提交到 NCBI通培养基上培养初期菌落 库中进行 BLAST 在线分析。Kb003 菌株在前 109 个命
特征、生理生化特性鉴定方法与现代分子生物学技术 16S rDNA 基因序列分析相结合，对无锡阿尔宝尔生 物工程有限公司从动物肠道分离并保存的三株芽孢 杆菌 Kb003、Nor3075 和 JD008 菌株进行鉴定，为该三 株菌株开发成动物微生态制剂的应用和对调整动物
料协会发布了可以直接饲喂动物的微生物种类有 42 种，我国农业部 1999 年 6 月公布可直接饲喂动物的 微生物种类有 12 种。由于用芽孢杆菌研制成微生态 制剂的特点是芽孢杆菌产品以内生的孢子存在，抗逆 性强，能耐酸碱和耐高温、高压，在饲料加工和储存过 程中不易失活；芽孢杆菌在生长繁殖过程中能产生多 种有效的酶促活性，一些酶常是畜禽不具有的；芽孢 杆菌为需氧菌或兼性厌氧菌，培养要求的营养物质简
菌株 Kb003 + － + + + － － + － + + － － + + － － + + + + + +
菌株 Nor3075 + － + + + － + + － + + + － + + － － + + + + + +
菌株 JD008 + － + + + + － + + + + + + + － － － + + + + + －
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聪
培养温度（℃）
图６培养温度与活蔺数的关系
发酵时Ｎ（ｈ１
图３
Ｑ。生长曲线
２．２．４初始ｐＨ对生长的影响调节培养基初始ｐＨ 分别为４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８培养２４ｈ，测定 ｏＤ锄，查ｏＤ锕与菌体工作曲线，绘制发酵液初始ｐＨ
与活菌数的关系曲线。
毫
凸
由图７可知，保加利亚乳杆菌Ｂ。发酵液初始ｐＨ 为５．３～５．８时发酵效果最优，起始ｐＨ过低或过高，都 不利于乳酸菌生长，５．５时所获得的活菌最多。为４．０８ ｘ １０９ｅｆｕ／ｍＬ。双歧杆菌Ｓ．最适初始ｐＨ为６．８－７．３，
ｌ咝
Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ 黪’
：
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ矿Ｆｏｏｄ
生物三连 …’ 一
一
Ｉｎｄ甜ｔｒｙ
：７
；二
ｋ一～
张强１．马齐１．徐升运’。陈卫峰１，张晴２ （１．陕西省科学院酶工程研究所，陕西西安７１０６００；２．西安理工大学，陕西西安７１００４８）
摘要：为获得最大生物量，利用比浊法做标准曲线测定发酵液中的活茵数．研究了三株益生茵的发酵特性。结果表 明，双歧杆茵Ｓ。在ｐＨ７．０、１５０ｒ／ｒａｉｎ、３５％条件下发酵２７ｈ活茵为２．１５×１０９ｃｆｕ／ｒａＬ，保加利亚乳杆茵０６在ｐＨ５．５、 ２００ｒ／ｒａｉｎ、３５＇（ｉ条件下发酵３６ｈ活茵为４．７５ Ｘ１０９ｅｆｕ／ｍＬ，嗜热链球茵Ｂ６在ｐＨ７．０、２００ｒ／ｒａｉｎ、４０。Ｃ条件下发酵３０ｈ活茵
（１．Ｅｎｚｙｍｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｓｈａａｎｘｉ，Ｘｉ’卸７ １０６００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｘｉ’蛐Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ’卸７１００４８，Ｃｈｉｎａ） ｏｂｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｌａｒｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏｍａｓｓ，ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｌｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｅ ｗｅｒｅ
中图分类号：１踟ｌ－３
文献标识码：Ａ
文章编号：１００２－０３０６（２００９）０５—０１７８－０３
益生茵是一种可通过改变肠道菌群平衡而对动 物施加有利影响的活的微生物添加剂【‘’２１。益生菌的 活细胞数量需要达到１０６ｃｆｕ／ｇ，但是在某些情况下， 只要益生菌活细胞数在食品保质期内不低于１０５ｅｆｕ／ｇ 也被认为能达到益生效果，几个世界食品组织提出 的官方标准是最低１０６—１０ ７ｅｆｕ／ｇ¨。ｏ。２００３年中国 卫生部制定的《乳酸菌饮料卫生标准》规定的活性乳 酸茵指标在出厂时达到１０７ｃｆｕｆｍＬ，销售过程有活菌 检出即可№】。因此，提高益生菌的活菌数是提升益生 茵制品品质的重要途径。本文采用比浊法测定活菌 数，研究了自选的三株益生菌的发酵特性。
１．２培养基Ｆ．８】 １．２．１ 双歧杆菌斜面培养基 蛋白胨３％，酵母膏 ０．５％，牛肉膏ｌ％，ＮａＣｌ １％，可溶性淀粉０．１％，葡萄 糖４％，Ｋ：ＨＰＯ。０．６％，新鲜牛奶５０％，ｐＨ７．１－７．２。液 体种子培养基：蛋白胨１．５％，葡萄糖１．５％，酵母膏 ０．４％，牛肉膏０．４％，ＮａＣｌ ０．５％Ｎａ＿２ＨＰ０４０．２５％，ｐＨ
菌数。
２结果与讨论
活菌数与ＯＤ６００的关系 取适量培养液离心定容，控制吸光度在０．０５— ０．４０的范围内，吸光度与细胞密度呈线性关系。利用 血球计数板直接镜检计数，做０Ｄ。与活菌数的工作 曲线，结果见图１。
２．１
的接种量分别接人发酵培养基中培养２４ｈ。于 ６００ｈｍ处测定ｏＤ。，换算成相应的活菌数，绘制接种 量与ＯＤ。的关系曲线。 由阁５可知，不同接种量对益生菌的活菌数有
Ｘ
ｂａｃｔｅｒｉａ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒ／ａ
Ｓ．。ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ
ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ
１０９ｃｆｕ／ｍＬ，ｔｈｅ ｌｉｖｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ Ｑ６＇ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐＨ５．５， ２００ｒ／ｍｉｎ，３５０Ｃ ｆｏｒ ３６ｈ。ｗａｓ ４．７５×１０９ｃｆｕ／ｍＬ，ｔｈｅ ｌｉｖｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
Ｘ
Ｓｔｒｅｐｔｏｅｏｅｃｕｓ ｔｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ Ｂ６，
ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐ１－１７．０，２００ｒ／ｍｉｎ，加℃，ｆｏｒ ３０ｈ，ｗａｓ １．４３
Ｋｅｙ
１０９ｃｆｕ／ｍＬ
ＷＯｒｄｓ：ｐｒｏｂｉｏｔｉｃ；Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ；Ｓｔｒｅｐｔｏｅｏｅｃｕｓ ｔｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ；Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ；ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ
发酵时间（ｈ） 图４
。
ｐＨ７．Ｏ时活菌最多，为１．８ｌ
ｘ
１０９ｃｆｕ／ｍＬ。嗜热链球
Ｂ。生长曲线
菌Ｑ。最适初始ｐＨ为６．８－７．３，ｐＨ７．０时活菌最多，为
０．７２×１０９ｃｆｕ／ｍＬ。
由图可知，ｓ．、Ｑ。、Ｂ６的生物量分别在２７、３６、３０ｈ 时达到最大，活菌数目分别达到２．０５×１０９、１．１４ ｘ １０’、４．８３×１０９ｃｆｕ／ｍＬ。故以获得最大生物量为目的 的发酵时间分别为Ｓ。２７ｈ，Ｑ。３６ｈ，Ｂ。３０ｈ。 ２．２．２接种量的确定 以ｌ％、５％、１０％、１５％、２０％
１．２．３
采用比浊法ｍ测定发酵液中微生物的数量。取 １０ｍＬ菌液，在５０００ｒ／ｒａｉｎ的转速下离心分离，将沉淀 洗涤后定容至１００ｍＬ。在波长６００ｎｍ下测定其 ＯＤ鲫，利用血球计数板直接镜检计数，换算成相应
万方数据
生彻三程———————、丽丽面』型俎
的活菌数，做出光密度一菌数标准曲线。然后，以样 品液所测得的光密度，从标准曲线中查出对应的
下的活菌数为２．０４
Ｏ．１ Ｏ
１０９ｃｆｕ／ｍＬ，Ｑ。的最佳培养温度 为４０。Ｃ，最大活菌数为Ｏ．９０ ｘ １０９ｃｆｕ／ｍＬ，Ｂ。的最佳
Ｘ
温度是４０℃，最大活菌数是４．１ｌ
发酵时Ｎ（ｈ１ 图２
４．５
ｘ
１０９ｅｆｕ／ｍＬ。
Ｓ．生长曲线
３
４
乓３．５
ｂ ２
ｘ
０．８ Ｏ．７ ０．６
唁３
５ ２
§Ｏ．５
８
ｏ．４ ０．３ ０．２ Ｏ．１ Ｏ ２ ８ １３ １８ ２４ ３３ ４８
生物王程 …。。
’。’
３
差
鲞
己
主
鲞
三量．／少＼．
．一
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鬈
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５ ５．５ ６ ６．５ ｐＨ
７
蠡
翼
７．５
８
●
２０
４０
６０
８０
１００
玉米粉替代量（％）
图７
ｐＨ与活菌数的关系
图ｌＯ不同玉米粉替代量对Ｓ。，Ｑ。，Ｂ。生长的影响
趋势，在１５０ｒ／ｒａｉｎ时，所获得的活菌数最多，为２．２７ ×１０９ｅｆｕ／ｍＬ；Ｂ６在１７５ｒ／ｒａｉｎ时所获得的活菌最多， 为５．４７×１０９ｅｆｕ／ｍＬ；Ｑ６在１７５ｒ／ｍｉｎ时所获得的活菌 最多，为１．０５×１０９ｅｆｕ／ｍＬ。但随着转速的进一步提 高，菌体大鼍生长，营养物质消耗过快，而影响菌体 生长，使得活菌总数下降。
接种世确定为１０％，Ｑ。为５％。
ｏ
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—Ｊ毒皇ｕｂ一×一瓤惬烬
２ ∞＂如耶∞拍如巧∞：２ｍ，Ｏ
ｏ．ｏｉ ｏ．０５２ ｏ．０８８ ｏ．Ｏｌ ７ ｏ ０４２ ｏ．０６４ ｏ．０４ ｏ．１６３ ｏ．２７６ ×
籁
ｉ强
０Ｄ啪 图１
Ｓ，，Ｑ。，Ｂ。活菌数与０Ｄ鲫的关系
烬
５ ｌｏ
１５
２０
２．２发酵条件的选择 ２．２．１发酵时间的确定每隔２ｈ取样，利用比浊法 测定发酵液的０Ｄ。，并绘制０Ｄ。一时间的工作曲线， 结果见图２一图４。
为１．４３×１０９ｃｈ／ｍＬ。
关键词：盗生茵，双歧杆茵，嗜热链球茵，保加利亚乳杆茵，比浊法
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈ ｒｅｅ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ
ＺＨＡＮＧ
Ｑｉａｎ９１，ＭＡ Ｑｉ’，ＸＵ Ｓｈｅｎｇ—ｙｕｎｌ，ＣＨＥＮ Ｗｅｉ—ｆｅｎ９１，ＺＨＡＮＧ Ｑｉｎ９２
ｃｕｒｖｅ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ｌｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ。ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ
ｏｆ
ｂａｃｔｅｒｉａ
ｗａｓ ｄｒａｗｎ ｗｉｔｈ
ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｖｉｎｇ ｐ卜仃．０。１５０ｒ／ｒａｉｎ，３５℃，ｆｏｒ ２７ｈ，ｗａｓ ２．１５
（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
收稿日期：２００８—０９—１ｌ 作者简介：张强（１９７５～）。男．工程师，主要从事酶工程．发酵工程的 研究。 基金项目：国莩星火计划项目（２００７ＥＡ８５００３）；陕西省科学院青年基 金项目（２００８一Ｋ１６）。
保加利亚乳杆菌斜面培养基 蛋白胨１．０％． 酵母膏０．５％，牛肉膏１．０％，葡萄糖２．０％，西红柿汁 ．０％，ｐＨ ５．４。液体种子培养基：蛋白胨０．５％，酵母膏０．５％。 蔗糖０．５％，乳糖０．５％，醋酸钠０．１５％，ＮａＣＩ １．０％。 ｐＨ自然。 １．３生物量的测定
２．２．５摇床转速对生长的影响
将菌株分别在０、
１２５、１５０、１７５、２００、２２５ｒ／ｒａｉｎ下培养２４ｈ。测定
０Ｄ锄，绘制转速与活菌数的关系曲线。
由图８可知，ｓ。随着转速的增大而呈明显上升
万方数据
陌面甄丽，７９
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