烟草叶盘诱导不定芽实验报告
植物烟草实验
烟草叶片愈伤组织诱导摘要用不同成分培养基，附加0.8%琼脂，3%蔗糖，调pH5.8—6.0，取烟草叶片作为外植体进行愈伤组织诱导培养，计算污染率、诱导率以及诱导情况，观察愈伤组织的发生情况。
实验表明，养分较高的培养基，外植体生长情况较好。
当细胞分裂素高于生长素的浓度时，有利于分化出芽；细胞分裂素低于生长素的浓度时，有利于分化出根；当细胞分裂素及生长素的浓度适合时，愈伤组织不分化，但是生长旺盛。
关键词：烟草叶片愈伤组织诱导前言烟草（Nicotiana tabacum）又名草烟，属茄科烟草属的一年生草本植物，本属约有60种，原产于美洲和大洋洲[1]。
烟草是重要的经济作物和工业原料作物，其体内所含的烟碱等生物碱是非常宝贵的医药及化工原料[2]。
有报道烟草细胞悬浮培养物获得细胞分裂素类物质，因此很有必要对烟草的组培快繁进行研究，以获得更有效的方法提高产率和产量。
柯善强综述植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[3]，戴冕进行了烟草叶肉原生质体再生植株的研究[4] ,徐瑞娟等通过烟草花序苞叶的离体培养分化出花芽[5],战淑敏用烟草叶组织培养直接获得再生植株[6]。
本实验以烟草叶片组织为外植体进行组织培养，诱导愈伤组织，观察愈伤组织诱导情况。
1.材料与方法1.1 配置培养基母液，每2人为一个小组，配置以下培养基，并分装，灭菌，然后室温下放置一周。
1.2 取烟草叶片取烟草的嫩叶片作外植体。
先用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次后，置于超净台上，于无菌条件下先用75%的酒精浸泡30秒，然后置于无菌瓶中用10%次氯酸钠溶液浸泡20分钟至30分钟，再用无菌水冲洗4次，最后在无菌培养皿中将嫩叶片切成1cm见方小块，接种在培养基中。
1.3.1 观察污染情况：观察是否有细菌性污染（菌斑呈粘液状,接种后1-2天出现）和真菌性污染（出现不同颜色霉菌,接种后3-10天出现），并计数。
计算污染率。
污染率(%)=污染的材料数/总接种材料数×100%[7]1.3.2 观察各培养基中的外植体产生愈伤组织的情况，愈伤组织出现时间和愈伤组织形态特征（颜色和质地等），计数形成愈伤组织的材料数，并计算诱导率。
烟草叶片愈伤组织诱导及分化培养的验证
+ + 都较均匀
+
1块上面较43; 分化出了大量丛生芽 ,且均匀
注 :“ + ”表示极度分布不均 ,多数在一个以下 ;“ + + ”表示均匀分布 ,但都较小 ,多为分化点 ,且其数量在 10～20;“ + + + ”表示分布均匀 ,且都很 多 ,最少的愈伤组织上至少也有 20个丛生芽或者分化点。
愈伤组织形成数 ∥块
诱导率 ∥%
愈伤组织生长状态
Pollution number 0 0 0 0 0
Callus number 5 4 4 3 5
Induction rate 100 80 80 60 100
Growth state of callus 5块都比较大 ,且较均匀 有 2块较小 不均匀 , 2块中等 , 2块很小 2块较小 , 1块上面有黑点 中等均匀
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安徽农业科学 2009年
ferentiation point, the number is 10 - 20; + + + indicates the distribution is even and much, the least callus number is 20 multip le shoots or differen2
分化数
D ifferentiation number 5 5 4 3 5
分化率 ∥% D ifferentiation
rate 100 100 80 60 100
植物细胞工程实验报告(肖峰)
姓名：肖峰学号： B0704002班级： 07生物技术（1）班指导老师：莫廷辉时间： 2009年11月目录实验一、培养基母液的配制实验二、培养基的配制与灭菌实验三、香蕉吸芽的组织培养实验四、烟草叶片的组织培养实验五、柱花草的组织培养实验六、木薯的组织培养实验七、桉树的组织培养实验八、玉米不成熟胚的培养实验九、花生成熟胚培养实验十、水稻盾片的培养实验十一、芦荟的组织培养（自选材料实验）实验一、培养基母液的配制一、实验目的掌握培养基母液的配制。
在配置培养基之前，为了方便和用量准确，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。
当配置培养基时，只需按预先计算好的量吸取母液。
二、实验原理培养基是植物细胞、组织和器官吸取营养的场所。
在植物细胞的分裂和分化过程中，需要各种营养物质，这些营养物质包括无机营养成分、有机营养成分、植物生长调节物质等。
在对植物的器官、组织和细胞进行离体培养时，只是切取植物体的一小部分，它们无法象整体植株那样合成生长发育所需的全部物质。
而自然界的植物千差万别，每一种植物都有自己独特的生理代谢过程和各自的营养需求，没有哪一种培养基能够适用于所有植物。
因此，对培养基组成成分的筛选是非常重要和必不可少的程序。
目前对植物进行组培时，人们所使用的培养基只几十种，其中MS培养基应用最为广泛。
说明MS 培养基的无机盐成分对许多植物种均是适宜的，它的无机盐含量较高，微量元素种类较全，浓度也较高。
三、实验试剂与仪器设备1、药品试剂：母液、蔗糖、卡拉胶（或琼脂）、NaOH溶液、HCl溶液、无菌水、NAA、BA、IAA、2，4-D等。
2、仪器设备：电子天平、量筒、PH试纸、培养瓶、解剖刀、酒精灯、高压灭菌锅、移液管、洗耳球、玻璃棒、药勺、超净操作台、铁架、镊子等。
四、实验内容（一）母液的配制MS培养基母液方案配制如下表：具体配制步骤如下：1、大量元素母液的配制无机盐中大量元素母液，按照培养基配方的用量，把各种化合物扩大20倍，用感量为0.01g的扭力天平，分别用50mL烧杯称量，用重蒸馏水溶解.溶解时在每只烧杯中加入30-40mL重蒸馏水，置于酒精灯上,加热使其溶解(注意温度不可过高，60-70℃)。
叶盘法转基因烟草技术
叶盘法转基因烟草技术实验目的：学习并了解叶盘法转基因烟草的技术流程。
二. 实验原理：土壤中的农杆菌是一种革兰氏阴性菌，能够感染植物的受伤部位。
农杆菌中有一种环形的Ti质粒，Ti质粒最重要的两个区域为T-DNA区和毒性区，T-DNA是Ti质粒上唯一能够整合到植物染色体上的序列，而毒性区上一系列则帮助T-DNA区整合到植物的染色体上。
土壤农杆菌转化植物的常用方法是叶盘法。
这种转基因方法十分简单，一般是将植物的叶片切成小圆片，用农杆菌感染后共培养2-4天，而后转移到加有选择压的分化培养基上分化出芽，在MS培养基上生根后，再生出完整的植株。
三. 试剂及设备1.试剂：MS培养基：配方见“植物的组织培养技术”实验指导Kan：卡那霉素Cb：羧苄青霉素NAA：萘乙酸6-BA：细胞分裂素T1培养基：MS培养基T2培养基：MS培养基+6-BA2.0mg/L+NAA0.5 mg/L+Kan100 mg/L+Cb500 mg/LT3培养基：MS培养基+ Kan100 mg/L+Cb500 mg/L（T2：生长培养基；T3：生根培养基）2.仪器：光照培养箱，恒温摇床，超净工作台，接种器械等四.实验步骤：1 农杆菌培养1）从平板上挑取含有目的基因的单菌落，接种到3 ml YEB 液体培养基中（Str 25 μg/ml、Rif 50 μg/ml、Kan 80 μg/ml）于恒温摇床上27℃，180 rpm 摇培过夜至OD 600 为0.6-0.8。
2）摇培过夜的菌液按1%-2%的比例，转入新配置的无抗生素的YEB 培养基中，在与上述相同的条件下培养6 h左右，OD600 为0.2-0.5 时即可用于转化。
或：将按上述方法培养的OD 600 为0.6-0.8 的菌液，转入无菌离心管中，于室温条件下，5000 rpm 离心10 min，去掉上清液，菌体用1/2 MS液体（pH 5.4-5.8）培养基重悬，稀释至OD600 为0.2 左右，用于转化。
2 烟草愈伤组织诱导实验
烟草叶片愈伤组织诱导分化实验1. 实验目的（1）通过诱导植物（烟草叶片、水稻种子）愈伤组织和器官发生，分析生长素和细胞分裂素对烟草叶片离体培养的作用。
（2）了解植物组织在离体培养条件下脱分化和再分化的特点。
2. 实验原理外植体形成愈伤组织大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。
启动期主要通过激素以及环境因素的诱导使外植体细胞代谢增强，大量蛋白质与核酸形成为细胞分裂做准备；分裂期时外植体细胞在激素诱导下脱分化并不断增殖，形成结构疏松的组织块；形成期时，由于不同植物生长激素的诱导使愈伤组织形成根、芽等形态分化。
烟草为常见模式植物之一，常用于植物组织培养，是研究细胞脱分化和再分化的理想材料。
在愈伤组织诱导及分化过程中，光照条件起到的作用是促使愈伤组织进行光合作用生成糖类，促使代谢活动进行。
6-BA、NAA均为植物生长调节剂，6-BA属于细胞分裂素，可诱导愈伤组织发生并促进牙的形成；NAA属于细胞分裂素，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根。
根据Skoog和Miller提出的生长素和细胞分裂素相对浓度调节器管分化的概念，相对高的生长素有利于细胞增殖和不定根的分化，而相对高的细胞分裂素浓度有利于不定芽的分化。
通过改变激素的种类和浓度，有效地调节培养组织的器官分化，已经在许多植物的组织培养中得到证实，甚至在一些低等植物中也得到了证实。
3. 实验材料与操作方法3.1 实验材料3.1.1 材料选择：烟草By-2，滤纸片，枪头3.1.2 实验试剂：（1）植物生长调节剂（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）6-BA 0.5mg/mL（1mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）NAA 0.5mg/mL（1 mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）（2）抗生素（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）卡那霉素50 mg/mL（蒸馏水定容）利福平15 mg/mL（无水乙醇溶解再用蒸馏水定容）链霉素30 mg/mL（蒸馏水定容）羧苄青霉素100 mg/mL（蒸馏水定容）（3）实验用培养基MS大量元素储存母液（50×，蒸馏水定容）：1650mg/L NH4NO3+1900mg/L KNO3+370mg/L MgSO4·7H2O+170mg/L KH2PO4+440mg/LCaCl2·2H2O（CaCl2·2H2O在配制过程中不易溶解，可单独配成储液存放）MS微量元素储存母液（100×，蒸馏水定容）：0.83mg/L KI+6.2mg/L H3BO3+22.3mg/L MnSO4·4H2O+8.6mg/L ZnSO4·7H2O+ 0.25mg/L Na2MoO4·2H2O+0.025mg/L CuSO4·5H2O+0.025mg/L CoCl2·6H2O +27.8mg/LFeSO4·7H2O +37.3 mg/L Na2-EDTA·2H2O（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA·2H2O两个试剂配制成100×溶液4℃冰箱避光储存）MS有机成分储存母液（100×，蒸馏水定容）：3mg/L甘氨酸+0.5mg/L烟酸（维生素B5）+0.5mg/L盐酸吡哆醇（维生素B6）+0.1mg/L盐酸硫胺素（维生素B1）+100mg/L肌醇（肌醇难溶解，一般独自配成浓缩液储存）MS培养基（NaOH调节至pH 5.8，蒸馏水定容）：1×大量元素+1×微量元素+1×有机成分+30g/L蔗糖+0.8%琼脂+不同比例生长素（6-BA+IAA）3.1.3 实验仪器：超净工作台，烧杯，锥形瓶，培养皿，枪形镊子，眼科剪，移液枪，酒精灯，光照培养室，3.2 操作方法取幼嫩烟草叶片约5片（选择幼年的外植体较好，如分生组织、维管束、形成层组织、静止的薄壁组织），用自来水清洗晾干。
烟草实验情况汇报
烟草实验情况汇报
本次烟草实验旨在探究不同环境条件对烟草生长的影响，以及对烟草质量和产
量的影响。
我们选择了室内和室外两种不同的环境条件进行实验，以期获得更全面的数据和结论。
首先，我们在室内设置了温度恒定、湿度适宜的环境条件，对烟草进行种植和
观察。
在这种条件下，我们发现烟草生长速度较快，叶片颜色较为鲜绿，但是烟草的高度和叶片数量相对较少。
同时，室内环境下的烟草产量也较低，质量略有下降。
其次，我们在室外选择了阳光充足、气候适宜的环境条件进行烟草种植实验。
在这种条件下，烟草生长速度较慢，但是烟草的高度和叶片数量明显增加，叶片颜色也更加饱满。
与室内环境相比，室外环境下的烟草产量明显提高，质量也有所增加。
综合实验结果，我们可以得出以下结论，不同环境条件对烟草生长和产量有着
明显的影响。
温度恒定、湿度适宜的室内环境有利于烟草的生长，但产量和质量相对较低；而阳光充足、气候适宜的室外环境则能够提高烟草的产量和质量，但生长速度较慢。
在今后的研究中，我们将进一步探究不同养分供给、灌溉条件对烟草生长的影响，以及烟草在不同环境条件下的适应性和生长规律。
希望通过这些研究，能够为烟草种植提供更科学、更有效的栽培技术和管理方法，为烟草产业的发展做出贡献。
总的来说，本次实验取得了一定的成果，但是也存在一些不足之处，需要在今
后的研究中加以改进和完善。
我们将继续努力，不断深化研究，为烟草生产和种植提供更多有益的信息和数据。
感谢各位的支持和关注，期待在未来能够取得更加丰硕的成果。
烟草育种学实习报告（推荐五篇）
烟草育种学实习报告（推荐五篇）第一篇：烟草育种学实习报告烟草育种生产实习报告一、实习目的：通过烟草育种生产实习，进一步了解烟草的生长习性，将理论知识渗透到实践中。
强化理论和实践相结合，提高自身对现代烟草育种的理解和基本技能；提高和培养理论联系实际、独立分析和解决问题的能力，懂得根据市场需求变化来组织管理和经营农业生产。
二、实习时间：2012年3月10日到2012年9月30日三、实习内容：不论是直播还是催芽播种，烟草在播种之前要对种子进行处理。
通过种子处理，清除种子中的夹杂物，淘汰不饱满的种子，对提高种子的发芽势和发芽率有着显著作用。
同时通过药剂处理可以杀灭种皮上附着的病菌和病毒，有效地地减轻苗床期烟草病害的发生。
播前烟草种子处理主要包括以下几方面内容：（1）种子精选：目的是清除种子的夹杂物，淘汰不饱满的种子。
生产上多采用水选法。
将种子倒入盛有清水的小缸或其他器皿内。
烟草种子粒小而轻，比重明显比水小（烟籽比重约为0.9，水比重为1），初放入时种子到多漂浮在水面，应搅拌，使之浸泡均匀。
放置4-6小时后，饱满的种子下沉，不好的种子及夹杂物漂浮在水面，将漂浮物捞出，选留沉下去的种子。
水选后的种子晒干备用或随即消毒催芽。
（2）晒种：水选后的种子含水比较多，第一天要晒干种子表面水分，以手抓能松散为宜，在15-20℃下晒2-3天即可。
若气温超过20℃，采用间歇晒种方法，即每次晒几小时收藏起来，第二天再晒几小时，连晒2-3天。
（3）灭菌：清毒利用药剂杀灭烟种皮上附着的病菌和病毒。
常用药剂是稀释一千倍的硝酸银溶液，或稀释一百倍的硫酸铜溶液，或稀释五十倍的福尔马林溶液。
将需消毒的种子装入纱布袋内，浸入上述浓度的药液（温度为20℃左右）中，浸泡十五分钟。
浸泡时，将种子袋药液提出药液，再放入，重复几次，以使袋内种子充分接促药液。
取出种子袋占用清水充分冲洗净。
否则，易发生药害。
（4）催芽：催芽方法有布袋催芽和盆钵催芽。
布袋催芽要求装入种子的数量约为袋子容量的一半，布袋以能装0.25-0.5公斤干种大小为宜。
烟叶生产实验报告总结
烟叶生产实验报告总结
本次烟叶生产实验旨在探究不同处理方式对烟叶生长的影响，并分析其对烟叶品质的影响。
实验中，我们将烟叶种植在相同的土壤条件下，分为三组进行处理。
第一组为对照组，不进行任何处理；第二组为施加化肥处理组；第三组为施加生物菌剂处理组。
通过长期观察，我们发现施加化肥处理组的烟叶生长速度较快，株高较高，叶片颜色较为鲜绿。
与对照组相比，该组烟叶产量明显提高，但品质方面表现出来的差异较小。
而施加生物菌剂处理组的烟叶生长情况也较好，生长速度和株高接近施肥组，但叶片颜色相对较浅。
然而，与对照组相比，该组烟叶产量有一定提高，且品质方面有明显改善。
烟叶的香气更加浓郁，质地更加饱满，烟叶口感也更加柔和。
综上所述，本次实验结果表明施肥处理能够提高烟叶的产量，而施加生物菌剂处理则能够提高烟叶的品质。
根据实验结果，我们可以针对具体需要，选择相应的处理方式，从而优化烟叶的生产和品质。
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烟草叶盘诱导不定芽实验报告
引言：
不定芽是植物生长中的一个重要生理现象，对于植物的繁殖和种质改良具有重要意义。
在植物组织培养中，通过外源激素和培养基的配合可以有效地促进植物体内不定芽的发生和分化。
本实验通过利用烟草叶盘诱导不定芽的方法，探究烟草组织培养中不定芽的分化和发生规律，为植物组织培养提供理论基础和实践指导。
材料与方法：
1.材料：
烟草叶片，酵母提取液，MS培养基，植物生长激素（NAA和BA），培养室
2.方法：
（1）将新鲜烟草叶片取出，剪成大小适当的叶盘。
（2）将叶盘用75%酒精消毒3-5分钟，用无菌双层组织滤纸吸干表面的酒精。
（3）将消毒后的叶盘置于含有蔗糖、植物生长激素和酵母提取液的MS培养基
中，培养在暗、25℃环境下。
（4）叶盘在培养基上生长约2周后，进行观察和记录。
结果：
在暗、25℃的环境下，经过2周的培养，烟草叶片上出现了大量的小型不定芽。
这些不定芽分布在叶盘的表面，短小粗壮，颜色鲜绿。
通过观察和记录，可以发现，不定芽的发生与培养基中植物生长激素的浓度有着密切关系。
在不同浓度的植物生长激素（NAA和BA）下，不定芽的数量和大小均不同，其中以NAA的作用较为明显。
讨论：
烟草叶片诱导不定芽实验是植物组织培养中常用的一种方法，通过在培养基中添加植物生长激素，可以有效地刺激植物叶片上的不定芽的发生和分化。
实验结果表明，在同一培养条件下，不定芽的数量和大小与植物生长激素浓度有着密切关系。
其中，NAA的浓度对于不定芽的数量和分化比较敏感，可以通过调节NAA 的浓度来控制不定芽的发生和分化。
结论：
本实验通过烟草叶片诱导不定芽的方法，探究了植物组织培养中不定芽的发生和分化规律。
实验结果表明，通过在培养基中添加植物生长激素，可以有效地促进植物体内不定芽的发生和分化。
同时，在不同浓度的生长激素下，不定芽的数量和大小也有所不同。
这对于进一步探究植物组织培养的机理和方法具有重要意义。