平菇菌种的制作
平菇菌种的制作
一、目标要求：
1、要求学生掌握平菇菌种的制作技术及操作过程；
2、使学生掌握制作过程中的消毒处理；
3、使学生掌握种菇的选择、培养基的制作等操作技术。
二、使用工具：
灭菌高压锅、培养基料、消毒液、无菌箱、接种刀、平菇种菇、酒精灯、试管及试管架。
三、教学重点：
菌种的接种过程及消毒处理。
四、教学过程：
我们生活中都吃过平菇，但是你知道平菇的菌种是怎样制作的吗？今天我们就共同学习平菇菌种（所谓菌种指的是第一代一级种，也叫原种）的制作过程及应注意的几个问题。
1、培养基的制作：
原料:马铃薯200克，树脂胶30克，葡萄糖粉20克，磷酸二氢钾10克。
制作方法：将马铃薯去皮切块，加200克水，在高压锅内灭菌2小时，然后过滤（80目滤网）；分装试管，以每根试管容量的1/4为宜，放置试管架上（以45度倾斜角为宜），待冷却后，轻塞上无菌棉塞，培养基就算制成了。
2、接种场地的消毒处理：
在培养基放入接种箱之前，用高锰酸钾的2000倍液或福尔马林的2000倍液对接种室的各个地方进行喷洒，不留死角。
对接种箱的消毒，可用高锰酸钾5克在容器内点燃，密闭10分钟即可。
3、种菇的选择：
平菇的种类很多，应选择个大、色泽光亮好并且市场销售快的平菇作为种菇，待菌盖展平时，说明平菇已经成熟，可以弹射孢子了。
一般来说，一个成熟的菌盖可以弹射出1.04亿个孢子。
选取一个个大、无病害的菌盖放置在接种箱内。
4、接种：
接种工作在接种箱内进行。
具体操作步骤为：点燃酒精灯，打开培养基试管的棉塞，将接种刀在酒精灯上烧一下，冷却后在种菇的皱褶部位横竖各切两刀，挖下比黄豆粒稍大一点的种块，用刀面托着从酒精灯上边绕过去，放到试管中的培养基面上，并轻轻塞上棉塞。
到此接种工作就基本完成了，关闭接种箱，温度保持在22度—24度。
5、接种后的观察：
在22度—24度的温度中，5天后会出现一对鞭毛状的菌丝，孢子是分裂生殖，很快就能生长出细白的菌丝体，菌丝长满试管后，又回头生长，丝体浓密，说明成熟。
菌丝成熟后，可进行第二代、第三代的菌种培养。
6、信息反馈：
同志们，今天关于平菇菌种的制作的学习，你从中学到了什么？学会了哪些？还存在哪些方面的问题，请提出来，我们可以共同探讨。
希望我们今天所学的内容对大家勤劳致富有所帮助，今天的课就上到这里。
同志们，再见。
附：板书设计
平菇菌种的制作
1、培养基的制作
2、接种场地的消毒处理
3、种菇的选择
4、接种
5、接种后的观察。
怎样培育平菇菌种
怎样培育平菇菌种菌种分母种、原种和栽培种。
通常也称一级种、二级种、三级种。
1.母种培养：培养母种是指用组织分离或孢子分离得到的菌种。
母种培养基的制备通常用土豆洋菜培养基。
配制1,000毫升培养基，用土豆200 克，琼脂（洋菜）18-20克，葡萄糖20克。
做法：先将土豆洗净去皮，切成蚕豆粒小块，放1 ,000毫升水中煮沸30分钟，用6-8层沙布过滤，补足损失水分。
将琼脂加入溶化后，加进溶解的糖，补充水分至1,000毫升。
以后分装试管，每管装量1/5-1/4，并加棉塞、包纸。
在1.2公斤压力下灭菌30分钟，趁热摆成斜面。
冷却后置于25-27℃条件下观察无杂菌即可接种。
一支母种可转管25-30支。
在无菌操作下接种的试管置于25℃左右恒温条件下培养，半个月左右菌丝可长满试管。
培养过程中应注意除掉杂菌污染的试管。
培养好的母种移人冰箱，在4℃条件下保存半年，或室温保存三个月。
2.原种培养：原种培养原料可用木屑（锯末）或棉籽皮。
木屑培养基配方：木屑78％，麦麸或米糠20％，糖1％，石膏1％（生、熟石膏均可但生石膏一定要磨成粉方可应用）。
棉籽皮培养基配方：河北省晋县用100 斤棉籽皮加上豆浸出汁水3％，(3 斤土豆切成碎泥煮沸30分钟的滤液），糖0.1％，硫酸镁0.1％（按水量的千分之一）。
做法：培养料加水拌合均匀，培养料的湿度以用手紧握料，指缝内见水珠，而滴不下来为宜，一般料水比1:12-1.3（即100斤料加水120-130斤）。
然后装瓶，装瓶方法是边装边将瓶轻轻地抖动，使瓶上下部紧适中，装至瓶肩部将料压平，洗净瓶口内外的培养料，加棉塞包纸捆好放进高压消毒锅内进行灭菌，在1.5 公斤压力下灭菌一小时。
冷却后，在无菌操作条件下接种。
将试管种母种接入瓶中，一支母种可接4-5瓶原种，接种后置于25℃恒温条件下培养一个月左右菌丝可长满瓶，即为原种。
3.裁培种：栽培种的制备实际上就是原种进行一次扩大繁殖。
栽培种木屑培养基的配方同原种培养的配方。
平菇菌种生产要点
平菇菌种生产要点
1、堆高不过60厘米，40一50最好，高了底层厌氧菌多多，失败必然。
2、水分拌料时不能大于60％，水分过大给发酵升温造成障碍，水分大也易产生厌氧菌，升温以后可在每天翻堆前适量添加，装袋前水分不大于62％，或用力握可看见水，而不下滴，或少有1一2滴为宜。
3、PH值:拌料初次加百分之一白灰，装袋前翻堆倒数第二遍加2斤，石膏为1，PH值装袋前8一9，出锅6一7为宜。
4、精料装袋前1一2天添加，特别麸皮，加早了原料易产生酸性细菌，加白灰过多中和，将氨气过大，造成发菌失败。
5、灭菌：一般装袋快速，干半天封锅，提前锅炉烧开，盖锅后用最大火，加大出汽量，使菌包快速升温，达到少产生或不产生酸性细菌的目的，达到80度，最后一次加煤，加水，闷8小时即可起锅。
6、温度计，温度计的放置：应该不论锅的大小，放层高低，将压力式温度计放于最低层上面，避开进汽点，因进汽口处温高，不准确。
一般五千斤原料，出汽四小时可达目的，气温低时会延长。
7、拌料：拌料即第一天上午或下午拌好原料，第二天，第三天早晚各翻一遍，第四天装袋前翻堆增氧，然后装袋。
不要太计较料堆中的温度，50度到75度均可培养放线菌等
有益菌群。
8、接种：袋温35以下即可接种，开放接种，不必棚内杀菌消毒，只打扫一下垃圾，决不污染。
9、低温发菌：接种后因发菌期升温，不易多层排放，日最高温30度以上需单层排放，日最高温30度以下，可适当加高，但要注意通风换气，发菌期氧气需求大。
10、富氧发酵：富氧发酵是半熟料成功之关键，原料富氧，从而减少了酵母菌等酸性细菌的繁殖，给发菌成功打下坚实的基础。
平菇栽培工艺流程
平菇栽培工艺流程平菇是一种营养丰富、味道鲜美的食用菌，其栽培工艺流程相对简单，下面我来为大家介绍一下平菇的栽培工艺流程。
一、菌种培养1.制作菌种：将新鲜的平菇菌盖切割成小块，然后在富含营养的培养基上培养，待其生长出菌丝后，将其取出备用。
2.培养基准备：将糠麸、棉秸、生石灰、红糖等材料按一定比例充分混合，然后添加适量的水进行拌匀，制成湿度适宜的培养基。
二、菌种接种1.接种基质准备：将蘑菇菌种培养好的菌丝均匀地撒在油麦秸或玉米秸中，进行充分的拌匀。
2.接种装袋：将接种好的基质装入编织袋或塑料袋中，每袋重量不宜过多，通风孔的布置数量与大小要适中。
3.菌袋消毒：将装有接种基质的袋子再次进行高温消毒，一般用蒸汽消毒法，将袋子进行蒸1-2小时，杀灭杂菌。
三、菌袋管理1.菌袋温度控制：将经过消毒的菌袋放入温度适宜的环境中，一般菌袋温度维持在18-25℃，可以使用温湿度控制装置进行调控。
2.菌袋光照管理：初期需要暗光培养，待发菌后，为了促使菌丝伸长，可以适量增加光照强度，但是过强的光线会导致产菇时间延长。
3.菌袋通风管理：菌袋内部的氧气充足对菌丝生长有利，因此需要进行适度通风，一般每天通风1-2次，每次通风10-20分钟。
四、发菇管理1.发菇环境：菌袋内的菌丝生长到一定程度后，就会长出小菇丝，此时需要将菌袋放置在适宜的环境中，一般温度在22-28℃，湿度在80%-90%之间。
2.发菇光照：为了促进菇丝的生长，要给予一定的光照，但不能过强，适宜的光照强度为100-300lx。
3.发菇通风：发菇期间要适度通风，保持菌袋内部的氧气充足，但保持适宜湿度。
五、收获管理1.收获时机：平菇一般在菌丝完全覆盖菌基并长出完全展开的菌盖时进行收获，此时的菌肉饱满，口感更佳。
2.收获方式：用手轻轻拧断菌柄，或用小刀剪断，注意避免对菌盖造成损伤。
3.收获后处理：将收获的平菇清洗干净，可以用水冲洗或用湿布擦拭，然后放入清洁的容器中保存。
怎样生产和使用平菇液体菌种？
怎样生产和使用平菇液体菌种？我国最早于20世纪60年代（陈幸美等，1963)试用深层培养（液体培养）平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体，并取得成功。
其后，上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型，并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。
下面介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺。
(1)准备菌种平菇母种若干支。
（2)配制培养基配方一：蛋白陈2.0克，酵母膏2.0克，硫酸镁0．5克，磷酸二氢钾。
．5克，磷酸氢二钾1.0克，葡萄糖20克，加清水至1000毫升。
配方二：蛋白豚2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，硫酸钙0.1克，维生素B，10微克，加清水至1000毫升。
配方三：玉米粉60克，维生素B：10微克。
先将玉米粉加人适量开水中搅成玉米糊，然后加清水至1000毫升，加人维生素Bi。
将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中，每瓶50~100毫升，加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟，冷却后接种。
(3)接种培养按无菌操作要求，每支母种接种4~6瓶。
接种后置于恒温摇床上，在25℃、125转／分钟条件下培养4~6天，合格者即为一级种子液。
(4)质量检查摇培过程中或摇培结束后，均应进行质量检杏．若培养液变混浊、有酸臭味，表示已被细菌污染；若培养液有咐味，菌丝球异常，表示已被霉菌污染。
将污染的培养物重新灭菌后倒掉，以免污染环境。
将具有平菇香味，菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产，或置4℃条件下短期贮存。
液体菌种使用方法液体菌种（一级种子液）的用途有如下三种。
①用来扩大生产二级种子液，用量为5％（体积比），培养基配方及生产方法同上。
②用来扩大生产原种或栽培种（普通棉籽壳培养基或木屑培养基），每瓶（袋）用种量为5~10毫升。
可用刻度吸管（事先灭菌备用）或5毫升进样器作为接种工具，转接液体菌种。
③用作栽培种，每袋用种量为15~30毫升。
没有恒温摇床的单位，每天用人工振荡4~6次，每次30秒左右，也可收到同样的效果。
利用稻谷制作平菇菌种
利用稻谷制作平菇菌种在南方诸省，由于小麦、玉米较少，所以可以利用稻谷来制作谷粒菌种，效果也很理想。
配方：稻谷92％、麸皮5％、石膏2％、石灰1％。
制作方法和注意事项：1、选用上年的晚稻谷，烈日下暴晒1－2天，清水洗净，放入PH 值13的石灰水中浸泡。
将谷粒浸没在水面下,夏季在24小时左右，秋、冬季在36－40小时，使米粒充分湿润，捞起沥干，晾干表面的水分，然后拌入石膏粉及石灰粉后装瓶，并在0.2兆帕的压力下高压灭菌1.5－2小时，常压灭菌需在100℃以上保持10小时以上。
2、瓶口要加封口料。
谷粒培养基表面松散，易失水，不利于菌丝的萌发和定植。
为了使接种后的菌丝萌发及定植快，在培养料的表面加一层约2CM厚的常规散碎的料（如棉壳、木屑等培养料），用石灰水调节PH值至8－8.5，湿度掌握用手紧捏有4－5滴水下滴为宜。
封口料有一定的含水量，利于菌丝的定植，发菌快，封口早，杂菌就不易侵入，有利于提高菌种的成品率。
3、用稻谷制菌种，淀粉及糖份较丰富，容易酸败变质，污染杂菌，故应注意无菌操作。
高温季节菌种的摆放要注意做到疏散、遮光、降温、通风及环境消毒，以确保菌种的成品率。
在管理上的关键是降温和环境消毒。
谷粒菌种的摆放，在自然温度下，尽量做到不挤叠在一起。
因为，菌丝生长发育过程中，会释放出热量，如过分挤叠在一起，会使小环境的温度偏高，不利于菌丝的生长。
温度偏高又会使培养基变质，导致污染。
谷粒菌种培养期间，环境应注意清洁、干燥。
常用计量单位符号1、时间：d（天）、h（小时）、min （分）、s（秒）。
2、长度：km（千米）、m（米）、cm（厘米）、mm（毫米）。
3、面积：m2（平方米）、667m2（亩）、hm2（公顷）。
4、体积：m3（立方米）、L（升）、ml（毫升）、μl（微升）。
5、质量：t（吨）、kg（公斤千克）、g（克）、mg（毫克）、μg（微克）。
6、浓度：mg/L、mg/kg（ppm,1×10-6）。
平菇木条菌种的制作及接种方法
平菇木条菌种的制作及接种方法
平菇木条菌种制作方法如下：
准备木条，在水中浸泡3-5小时。
把木条放入菌种瓶内，经过高压消毒2-3小时，或者常压灭菌（100℃情况下）12小时以上，彻底消灭木条内杂菌。
在接种室无菌条件下接入平菇原种到木条束中。
在25℃的培养条件下，经过25-30天，木条菌种就生长好了。
使用木条菌种接种方法：
用经过消毒的不绣钢条在灭菌的菌袋中，插一个10厘米左右深度的接种孔洞，然后把木条菌种插入到孔洞中，每袋扎入3-4根菌种，套上塑料颈圈或者系尼龙绳封口。
培养温度22℃-25℃。
接种时，要在无菌条件下进行，一般采用必洁仕二氧化氯消毒剂熏蒸消毒接种室（箱）。
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怎样进行YPH9红平菇的原种制作？
怎样进行YPH9红平菇的原种制作？菌种生产在YPH9红平菇栽培过程中是重要的准备性工作，原种制作是菌种生产的重要步骤。
（1）配方：小麦粒98%，白糖和石膏粉各1%。
（2）配制方法：将麦粒称量后，用清水淘洗干净，置清水中浸泡10～15小时，滤水后放入沸水中煮沸25～30分钟（无白心），滤水后与白糖和石膏粉混拌均匀，冷却后装入750毫升菌种瓶内，麦粒装至瓶肩，用棉塞堵封瓶口。
也可将麦粒装入500毫升生理盐水瓶内，装至500毫升刻度线，用棉塞堵封瓶口。
装完后放入高压灭菌锅内，在1.4千克/厘米2蒸汽压力下保持2～3小时离火，当压力表指针自然回到“0”位时，打开锅盖，待热蒸汽散尽，锅内温度降至40℃以下时将料瓶取出。
（3）接种培养：接种在接种箱内进行，操作者依次将上述培养好的YPH9红平菇一级母种斜面菌丝试管、麦粒料瓶（二级原种培养基）、酒精灯、消毒杯、甲醛、高锰酸钾或气雾消毒剂、酒精棉球、接种锄、接种铲、火柴放入接种箱内，按转接母种的操作方法对接种箱进行密闭消毒灭菌。
母种试管口消毒灭菌在酒精灯焰上方3～5厘米处的火焰无菌区内停留，接种锄过火灼烧伸入母种试管5厘米冷却10秒钟，再伸入管底在母种菌丝斜面上从管底自下而上间距1厘米作横切划痕，钩除上端1厘米的菌丝斜面和管壁的气生菌丝，再取接种铲在酒精灯焰上烧烤后伸入母种试管5厘米处冷却10秒钟，用接种铲口在母种菌丝斜面上自上而下从中作一条直线的纵切划痕，把已作横切划痕的菌丝斜面一分为二成两块。
接种铲垂悬于母种试管内。
右手取下麦粒料瓶棉塞，置左手掌心，用拇指按压，右手再取接种铲，分3次从母种试管内挑取3块菌丝块接植于原料培养基的麦粒粒面，将3块菌丝块分布均匀形成三点式，接种铲试管内垂悬，右手取左手掌的棉塞在酒精灯焰上过火后堵封瓶口，依次进行转接。
接毕，置20～28℃洁净环境遮光培养，一般10～15天菌丝可长满瓶，即可用于转接栽培种。
不同类型平菇菌种制作方法
不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。
1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。
2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。
接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。
3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。
枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。
装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。
接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。
4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。
准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。
平菇菌种的生产技术
平菇菌种的生产技术一、母种的培养：母种的培育是制种工作中的关键，它的优劣直接影响到原种、栽培种的质量好坏。
母种可以由孢子萌发而成，也可以从子实体组织分离或用平菇斜面的菌丝体移接扩大转管制作。
1、培养基：平菇母种分离和菌种保存宜用普通培养基（PDA）。
平菇菌丝在此培养基上生长速度较慢。
PDA配方和制作方法是：将马铃薯200克去皮切成蚕豆大小的块加1000毫升蒸馏水，用文火煮沸20-30分钟过滤取汁，加葡萄糖20克，琼脂15克，置于铝锅中加热，待琼脂充分溶化后搅匀，定容至1000毫升，趁热分装于试管中，每管装约12毫升，1000毫升可分装80---100支试管。
分装时要用长管漏斗，不要使培养基沾到试管口上，以免沾湿棉塞污染杂菌。
塞棉塞要用普通棉花，塞入试管要松紧合适。
然后，每10支试管用皮套捆成一小捆，每5小捆再捆成一大捆，棉塞用牛皮纸包好灭菌。
取出试管倾斜排放在桌面上，试管斜面长度应为管长的2/3，冷却凝固后，取一些试管放入恒温箱中27--30度空白培养10天，经无菌观察，确认无杂菌，才能大量用于分离制种或转接生产母种。
2、接种：用无菌操作从平菇子实体组织中分离黄豆粒大小的一块，接入PDA培养基的试管斜面上，置恒温箱或培养室（25℃±2℃）培育，3天后菌丝生长洁白、健壮，7天后菌丝长满斜面。
接种要在严格的无菌条件下进行。
如果没有出现杂菌，分离培养就算成功。
但该菌株是否优良，生产价值如何，还需出菇栽培试验。
二、原种的制备：由试管母种初步扩大繁殖到固体种（原种）。
由原种再扩大繁殖应用于生产，叫生产种或栽培种。
母种菌丝数量太少，在实际生产中必须把一级种扩大繁殖成二级种（即原种）才能满足生产种的需要。
好的原种菌丝密集、洁白、长势均匀、粗壮、呈棉毛状，有爬壁现象。
原种长满瓶之后，应立即扩大为栽培种，否则一旦营养耗尽，菌丝就会衰老甚至死亡。
原种的制作过程是：拌料（含水量60%左右）、装瓶、压实、打洞、洗瓶、用塑料膜包扎瓶口、灭菌、冷却、接种、培养。
平菇菌种的生产技术
平菇菌种的生产技术作者：赵凤贤董娟来源：《新农村》2013年第06期1、母种制作配方（1）：马铃薯（去皮）200克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁15克、琼脂20克、水1000毫升。
配方（2）：小麦500克、蛋白胨2克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁1.5克，维生素B1 3片、琼脂20克、水1000毫升。
以上配方均适应平菇生长。
现介绍配方（2）制作方法：选择质量好的小麦500克，放进铝锅内，加水1500毫升，水烧开后，煮沸10分钟，然后用4层纱布过滤，取其汁液，若滤汁不足1000毫升，则加水补足，然后将琼脂、蛋白胨、糖等全部加入，加热至全部溶化后，分装试管，装量为试管长度的1/4，分装时，注意勿使试管口沾附培养基，装好后，立即用棉花塞口，并要求松紧适度，使之既利于通风，又能防止杂菌侵入，棉花塞入试管口的部分，一般为2/3左右，留1/3在管外便于拨出；装完所有试管后，用绳子每10支试管作一捆缚好，管口棉花塞用牛皮纸或聚丙烯薄膜包好，以防受潮，然后竖直放入高压锅内消毒，在1.2公斤/平方厘米压力下，维持40分钟，灭菌后的培养基要趁热把试管倾斜，使之凝固成斜面，倾斜度以斜面达到管长1/2长度为宜，冷却后即成试管斜面培养基。
制成的斜面培养基不要立即接种，要空白培养3～4天，等管内冷凝水完全风干后才能使用。
2、原种制作（1）棉籽壳培养基。
棉籽壳100公斤，麸皮5～8公斤，石灰0.5公斤，25%多菌灵0.2公斤，水135公斤，复合肥1公斤。
由于棉籽壳吸水较慢，拌料后须整理成小堆，待4小时充分吸湿后，再进行装瓶，装好瓶后，在料中央打一个直径2cm、深3cm的洞穴，有利于接入的母种块加快萌发、生长。
以棉籽壳为主培养基的原种菌龄约为25天左右。
（2）小麦、棉籽壳培养基。
小麦40公斤、棉籽壳60公斤、石膏粉1公斤、水适量。
制种用的小麦要干燥、色鲜、无霉变，先将麦粒浸入1～2%的石灰水和0.2%的多菌灵混合水溶液中。
浸泡时，水面要高出麦粒10～15cm，浸泡时间随气温高低灵活掌握，以麦粒内部浸到无白心时为准，一般水温25℃左右时，大约需浸18～20小时，15～C左右时需浸30～36小时。