载脂蛋白介绍..共32页文档
医学检验·检查项目：载脂蛋白CⅢ_课件模板
医学检验·各论：载脂蛋白CⅢ >>>
临床意义： 升高：高脂血症。
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正常值： 单向免扩散法：90～164mg/L。
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相关检查： 血脂七项、血脂四项、血脂两项、心电图、 动态心电图（Holter监测）。
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医学检验·各论：载脂蛋白CⅢ >>>
简介：
载脂蛋白C是极低密度脂蛋白胆固醇 的主要载脂蛋白，也存在于高密度脂蛋白 -胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇中，有3 种不同的载脂蛋白C，即ApoCⅠ、ApoCⅡ、 ApoCⅢ，它是CM、VLDL他和HDL的少量结 构蛋白。
相关症状： 高血脂性血管损害、血糖值升高、高血压、 血糖升高。
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相关疾病：
急性腹型-高脂血症综合征、老年人高脂 血症、高血脂、高脂血症、家族性混合型 高脂血症、高脂蛋白血症
载脂蛋白PPT课件
④免疫印迹分析
取出转移后的NC膜在洗涤液中洗3次后，置封 闭液中室温封闭3h（或37℃1h
在洗涤液中洗3次
加入1：100稀释的第一抗体并充分混匀，37℃ 温浴6h（或过夜）
用洗涤液洗5次（10min×5）甩干
加入1：500稀释的第二抗体，混匀，37℃作用 2h
洗涤同上
加入新配制的底物溶液于室温下摇动直至出现 紫色（或紫褐色）并看到背景（1～5min）时 用蒸馏水冲洗终止反应，空气干燥封于塑料袋
Marcovina等
应用SDS-1.5%agarose凝胶电泳结合 免疫印迹技术，首次报道人类至少 有35种Apo（a）异构体，此法是在 Kamboh等法基础上发展起来的一种 高分辨的分析方法。
上述两类方法有许多共同点，即首先 采用电泳技术将Apo（a）与其他载 脂蛋白分离，然后Western blotting，灵敏而特异地显示Apo （a）多态区带的位置，最后根据其 与ApoB100电泳速率比较或根据其分 子量大小而确定Apo（a）表型。
免疫印迹反应中也可选用鼠抗人Apo（a） 单克隆抗体作为一抗，用酶标兔抗鼠IgG 作为二抗。
应用酶标抗体反应作为二抗时，底物以 脂溶性4-氯-1-萘酚或联茴香胺较水溶性 DAB溶液为好
金标、I125标抗体作为二抗，通过银染或 放射自显影技术显示Apo（a）蛋白区带
将生物素标记的抗体作为二抗，通过生 物素-亲和素系统放大信号，可大大提高 检测敏感性
③电转移
取此凝胶，切下分子量蛋白带放入SDS洗脱 液中过夜，以固定凝胶大小并洗脱掉未与蛋 白结合的SDS，0.01%考马斯亮蓝G-250染色 室温1h，7%乙酸脱去背景颜色。
剩余凝胶铺在已浸过转移电泳缓冲液的NC膜 上，搭建滤纸/凝胶/NC膜/滤纸一同放在电 泳转移支架上，按层次相夹置于装满转移电 泳缓冲液的电泳槽中。120V电泳6h（30℃以 下）或4℃30V转移过夜
载脂蛋白
载脂蛋白页面功能【字体：大中小】【打印】【关闭】脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白（apolipoprotein/apoprotein，Apo）。
载脂蛋白在脂蛋白代谢中具有重要的生理功能。
Apo构成并稳定脂蛋白的结构，修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性。
作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。
一、载脂蛋白组成与结构特点及生理功用Apo种类很多，一般分为5-7类，其氨基酸序列大多数已阐明，Apo种类的命名是按1972年Alaupovic建议的命名方法，用英文字母顺序编码，即ABC顺，每一类还有亚类。
（一）载脂蛋白A族ApoA可分为ApoAⅠ，AⅡ，AⅣ。
ApoAⅠ和AⅡ大部分分布在HDL中，是HDL的主要载脂蛋白。
1.ApoAⅠApoAⅠ是ApoA族最多的一种组份，先后从人HDL中分离纯化得到ApoAⅠ，并阐明了ApoAⅠ的氨基酸序列，也预测了其二级结构的要点。
人成熟的ApoAⅠ由243个氨基酸残基组成，是单一多肽链，分子量为28.3ku.人及大鼠、猴、兔、牛、鸭、树鼷等动物的ApoAⅠ已分离纯化。
人和其他种属的ApoAⅠ的氨基末端为Asp，羧基末端为Gln，其分子中不含半胱氨酸和异亮氨酸。
经等电点聚焦电泳证实，人和动物的ApoAⅠ都是不均一的，有10种不同的亚组份，至少有6种多态性。
目前所知，ApoAⅠ的氨基酸残基的排列有其自身的特征：①极性氨基酸残基含量较多，并以1，2或1，4相反离子对的形式排列，即Glu-Arg、Glu-Lys或Asp=lys、Asp-Arg.②疏水氨基酸残基一对对地出现在1，2或1，4反离子对的附近，因此很容易形成特有的双性螺旋二级结构。
极性与非极性氨基酸残基排列的方式是载脂蛋白的一个共性。
由疏水氨基酸残基组成螺旋的非极性面，由带电荷亲水的氨基酸残基组成螺旋极性面，故称为双性螺旋。
与一般蛋白质的α-螺旋不同，这种双性螺旋既有亲脂的一面又有亲水的一面。
载脂蛋白分类
载脂蛋白分类以载脂蛋白分类为主题，我们来了解一下载脂蛋白的种类及其功能。
载脂蛋白是一种蛋白质，它的主要功能是将脂质从一个组织转移到另一个组织。
在人体内，脂质是一种重要的能量来源，同时也是细胞膜的重要组成部分。
但是，脂质在血液中不易溶解，因此需要载脂蛋白来帮助它们在血液中运输。
载脂蛋白可以分为五类：chylomicron、VLDL、IDL、LDL和HDL。
1. ChylomicronChylomicron是一种大型的、低密度的脂蛋白，主要由肠道吸收的脂质和蛋白质组成。
它的主要功能是将肠道吸收的脂质转运到肝脏和其他组织中。
在肝脏中，chylomicron会被酯化，然后转化为VLDL。
2. VLDLVLDL是一种低密度的脂蛋白，主要由肝脏合成。
它的主要功能是将肝脏合成的三酰甘油和胆固醇转运到其他组织中。
在血液中，VLDL会逐渐转化为IDL和LDL。
3. IDLIDL是一种中等密度的脂蛋白，主要由VLDL代谢产生。
它的主要功能是将三酰甘油和胆固醇转运到肝脏和其他组织中。
在血液中，IDL会逐渐转化为LDL。
4. LDLLDL是一种低密度的脂蛋白，主要由IDL代谢产生。
它的主要功能是将胆固醇转运到细胞中。
但是，如果血液中的LDL水平过高，就会导致胆固醇在血管壁上沉积，形成动脉粥样硬化。
5. HDLHDL是一种高密度的脂蛋白，主要由肝脏合成。
它的主要功能是将多余的胆固醇从细胞和组织中转运到肝脏中，然后通过胆汁排出体外。
因此，HDL被称为“好胆固醇”，它可以帮助预防动脉粥样硬化和心血管疾病。
载脂蛋白在人体内发挥着重要的作用，它们可以帮助脂质在血液中运输，并将其转运到需要的组织中。
不同种类的载脂蛋白具有不同的功能和作用，因此我们需要保持血液中不同种类载脂蛋白的平衡，以维持身体的健康。
载脂蛋白a1单位
载脂蛋白a1单位载脂蛋白A1是一种与血液中的胆固醇运输有关的蛋白质，它在人体内起着重要的生理功能。
本文将从不同角度介绍载脂蛋白A1的单位。
一、单位定义与功能载脂蛋白A1（Apolipoprotein A1）是一种脂蛋白，由APOA1基因编码。
它是高密度脂蛋白（HDL）的主要成分之一，在体内起着胆固醇运输和代谢调节的重要作用。
其单位的测量通常以mg/dL （毫克/分升）为标准。
二、载脂蛋白A1的生物合成载脂蛋白A1主要由肝脏合成，然后通过血液循环运输到全身各个组织。
它与其他脂蛋白（如载脂蛋白B、载脂蛋白E等）相互作用，形成载脂蛋白复合物，帮助胆固醇从组织中转运到肝脏，促进胆固醇的代谢和排泄。
三、载脂蛋白A1与心血管疾病的关系载脂蛋白A1对心血管健康起着至关重要的作用。
它具有抗动脉粥样硬化的作用，能够促进胆固醇从动脉壁中清除，并将其转运至肝脏进行代谢。
因此，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平的升高与心血管疾病的风险降低密切相关。
四、影响载脂蛋白A1水平的因素1. 遗传因素：APOA1基因的突变可能导致载脂蛋白A1水平的变化，进而影响胆固醇代谢和心血管健康。
2. 生活方式：不健康的饮食习惯、缺乏运动、吸烟等不良生活习惯会降低载脂蛋白A1水平，增加心血管疾病的风险。
3. 疾病状态：一些疾病，如糖尿病、肾脏疾病等，可能导致载脂蛋白A1水平的下降。
五、如何提高载脂蛋白A1水平1. 健康饮食：增加富含健康脂肪的食物摄入，如橄榄油、鱼类等，有助于提高载脂蛋白A1水平。
2. 运动锻炼：适度的有氧运动可以提高载脂蛋白A1水平，促进胆固醇代谢和心血管健康。
3. 戒烟限酒：戒烟和限制酒精摄入可以提高载脂蛋白A1水平，减少心血管疾病的风险。
4. 控制体重：保持适当的体重有助于提高载脂蛋白A1水平，维持良好的胆固醇代谢。
六、临床意义与应用1. 载脂蛋白A1水平的测量可以作为评估心血管疾病风险的重要指标之一。
较高的载脂蛋白A1水平意味着较低的心血管疾病风险。
简述载脂蛋白的主要功能
简述载脂蛋白的主要功能一、引言载脂蛋白是一类水溶性的蛋白质，主要作用是在体内运输和转运各种脂质分子。
它们是构成血浆中颗粒状结构的主要成分，包括低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒等。
二、低密度脂蛋白（LDL）1. LDL的结构和组成LDL是一种含有胆固醇、甘油三酯和磷脂等成分的大球形颗粒。
它由一个单层的磷脂双分子屏障包裹着一个核心，核心内部含有大量的胆固醇酯和甘油三酯。
2. LDL的功能LDL主要作用是将体内过多的胆固醇从肝脏转运到其他细胞中。
但当血液中LDL水平过高时，容易导致动脉粥样硬化等心血管疾病。
3. LDL与健康高水平的LDL与心血管疾病之间有着密切的关系。
因此，通过控制饮食、运动和药物等手段降低LDL水平是预防心血管疾病的重要措施之一。
三、高密度脂蛋白（HDL）1. HDL的结构和组成HDL是一种含有胆固醇和磷脂等成分的小球形颗粒。
它由一个单层的磷脂双分子屏障包裹着一个核心，核心内部含有大量的游离胆固醇和游离磷脂。
2. HDL的功能HDL主要作用是从各个细胞中转运过多的胆固醇到肝脏中代谢。
同时，它还能够清除血液中过多的氧化低密度脂蛋白（ox-LDL），从而减少动脉粥样硬化等心血管疾病发生的风险。
3. HDL与健康高水平的HDL与心血管健康之间存在着正相关关系。
因此，通过改善生活方式、增加运动和适当地使用药物等手段提高HDL水平是预防心血管疾病的重要措施之一。
四、极低密度脂蛋白（VLDL）1. VLDL的结构和组成VLDL是一种含有大量的甘油三酯和胆固醇酯等成分的颗粒。
它由一个单层的磷脂双分子屏障包裹着一个核心，核心内部含有大量的甘油三酯和胆固醇酯。
2. VLDL的功能VLDL主要作用是从肝脏中转运过多的甘油三酯到其他细胞中。
同时，它还能够转化为LDL和HDL等其他类型的载脂蛋白。
3. VLDL与健康高水平的VLDL与心血管疾病之间存在着正相关关系。
载脂蛋白E
蛋白简介
载脂蛋白E(Apo E)主要存在于CM、VLDL、IDL和部分HDL中,正常人血浆Apo E浓度为0.03～0.05g/L。Apo E 的浓度与血浆甘油三酯含量呈正相关。
碱性蛋白，人ApoE是由299个氨基酸残基组成，分子量 为D，含32个Arg和12个Lys存在于血浆的CM、VLDL及其残粒和β-VLDL中均含有ApoE，一部分ApoE在血液中与 ApoAⅡ形成复合体。
图1 VLDL的IEF-PAGE图①人血清VLDL的分离；取血清3.0ml，加入固体NaBr使其密度增加至1.30g/ml。在 BeckmanL8-80离心机Ti80转头离心管中依次加入密度为1.00g/ml,1.20g/ml的NaBr溶液和1.30g/ml的血清样品， 形成1.00～1.30g/ml的不连续密度梯度。10℃，r/min超速离心2h，离心后在管顶层可见白色乳状液体，此即为 VLDL，小心收集0.3～0.5ml并转移至已准备好的脱脂管内脱脂。②VLDL的脱脂：按Scanu(1971)法进行。先用3： 1（V/V）乙醇/乙醚混合液在-20℃脱脂两次，每次9～12h，继用乙醚脱脂1次，2h。每次脱脂后在-15℃离心收 集沉淀，3000r/min,15min。末次离心后在管中加入0.01mol/L Tris-HCl,pH8.2，内含1%SDS，2%两性电解质载 体，5%β-巯基乙醇及13%蔗糖的溶液60μl，并在室温下孵育30min，最后用氮气吹尽残存的乙醚，此即为IEF电 泳的样品。③IEF电泳：按Menzel等（1983）法进行。垂直板PAG浓度为7.5%，内含1.6%pH4.0～6.5的两性电解 质载体。电泳凝胶用0.2%CBBG250染色。脱色后至图像清晰后照像扫描。④ApoE表型判定：根据电泳图谱，依据 E2、E3、E4各区带光密度比例确认ApoE各表型，如图1和表所示。ApoE表型的鉴定
载脂蛋白AⅡ
载脂蛋白AⅡ载脂蛋白AⅡ介绍：载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋白。
目前已经发现的载脂蛋白有20余种。
其中主要有aPOA1、AⅡ、B-100、B48、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E等。
载脂蛋白AⅡ正常值：250～520mg/L。
载脂蛋白AⅡ临床意义：降低：冠心病、糖尿病、肾病综合征、遗传性ApoA -Ⅰ缺乏症(Tangier病)、家族性低α-脂蛋白血症、鱼眼病、重度营养不良、肝炎活动期、肝功能低下。
载脂蛋白AⅡ注意事项：(1)免疫透射比浊法：①关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。
比浊法以用多克隆抗体为宜。
抗血清中必须不含杂抗体。
必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅱ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。
抗血清效价(滴度)不可低于16。
目前国内某些商品试剂中，apoA-Ⅱ抗血清效价极低，选购试剂盒时必须注意。
如果没有在选购前鉴定抗血清质量的经验，应请有条件的单位鉴定之。
②上法中标本(血清)稀释200倍是为了便于手工操作(加样100μl)，如有精密加样器，可作20倍稀释(用10μl)。
为了适合不同实验室的条件(如不同类型的自动化仪器)，作适当修改时应注意抗原抗体的比例，必须十分注意反应体系中不可有抗原过量，线性上限不可低于2.5g/L。
换言之，抗血清用量必须充裕，否则标本中apoA-Ⅰ高水平时测出结果偏低。
目前国内某些商品试剂盒不但抗血清效价过低，操作中所定标本用量又过大(如3～5μl)，抗体明显不足，测出结果必然不准确。
③为了达到准确测定的目的，apoA-Ⅱ与B比浊测定(终点法)中必须作校准曲线计算结果。
一定范围(低标本用量)浓度(X)与浊度(Y)基本上成直线关系，直线回归计算出在Y轴上有一定截距(A值<0.1)，所以用单点校准计算结果偏差较大，使测出结果不能准确反映浓度的高低(高的偏低，低的偏高)。
千万不要因为单点法简便而忽略了测定的准确性。