ACQUITYUPLC-ELSD测定奶粉和牛奶中八种糖的含量-Waters
使用ACQUITY UPLC I-Class系统和ACQUITY QDa检测器筛查牛奶中氯霉素
口 沃特世公司 供稿
Ａ ＣＱ Ｕｆ Ｔ Ｙ 水 溶液 ； 氯 霉素是 一种 价 格廉 宜 的广谱 抗 提 高 仪 器 可 用 性 和 稳 定 性 。
生素 氯 霉素在 某些易感个体 中涉及毒 Ｑ Ｄ ａ 检测器 易于使 用， 不 需 要 专业 的 质
进 样体 积 ： １ ０ ｕ Ｌ 。
因而可 以 方便地 整 合 到Ｌ Ｃ 工 检测条件 性作用。 作 为致 癌物质和基 因毒 性化合 谱 知 识 ， 物的可疑对象 ， 氯 霉素 相 关 的再 生 障 碍 作 流 程 中。
对 管 制 抗 生 素 进 行 简 单 而 灵 敏 的 脂 肪 去 除 和 蛋 白 质 沉 淀 。 振 摇 样 品 然 后在３ ９ ０ ０ Ｇ（ ４ ￣ Ｃ） 下离 ６１ ０ ｍｌ ｎ 。 去 除下
缺 点 是 假 阳 性 结 果 很 多， 据 报 某 些 案 例 检 测 中的 假 阳 Ｉ ＇ Ｓ Ｌ 水平 达 到 １ ６ ％。
校 准 曲线 。
结果 与讨 论
在 分 析 牛 奶 提取 物 之 前 调试 氯 霉 素 的最 佳 源 条 件 ， 确 定Ａ Ｃ Ｑ Ｕ Ｉ Ｔ Ｙ Ｑ Ｄ ａ 检 测 器 的 预优 化 源 参 数可 以提供 最 有 效 和 最 灵敏 的检 测 结 果 。 氯 霉 素在 １ ５ Ｖ 锥 孔 电压 的 负离 子 模 式 下 灵敏 度 最 高 。 使 用上 述 方 法 通 过 基 质 匹配 校 准 曲线 可 以 对
１ ８ ｍ ２ １ Ｘ１ ０ ０ｍ ｍ ：
用１ ０ ％ 甲醇 溶液 （ ３ ０ ０ ｕ Ｌ ） 复溶 后转入
使用ACQUITY UPLC I-Class 系统和ACQUITY QDa 检测器筛查牛奶中氯霉素
使用ACQUITY UPLC I-Class 系统和ACQUITY QDa 检测器筛查牛奶中氯霉素作者：暂无来源：《食品安全导刊》 2014年第9期沃特世公司供稿氯霉素是一种价格廉宜的广谱抗生素。
氯霉素在某些易感个体中涉及毒性作用。
作为致癌物质和基因毒性化合物的可疑对象，氯霉素相关的再生障碍性贫血（骨髓抑制）致命病例已有广泛记载。
因此，在欧盟、加拿大、美国以及一些亚洲和南美国家均禁止将其用于食用性动物、昆虫和水产养殖。
欧盟委员会指令20 03/181/EC规定，任何用于检测食品中氯霉素的方法的最小性能限值（MRPL）为0.3μg/kg。
由于产品保质期较短，需要快速的处理时间，因此乳制品检测实验室以往都采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对大量样品进行筛查。
虽然ELI SA可以对氯霉素进行灵敏而快速的筛查，但它的一个缺点是假阳性结果很多，据报某些案例中的假阳性水平达到16%。
免疫吸附剂与干扰基质之间的交叉反应经常会导致牛奶中氯霉素的误检，从而造成不必要的产品销毁。
质谱检测可以提高选择性，有助于区分氯霉素和污染基质。
此外，质谱检测结合液相色谱（LC）可以避免采用气相色谱法筛查氯霉素时所需的费时衍生化处理步骤。
为了让实验室能够充分利用这些优势，近期的技术进展着重于提高仪器可用性和稳定性。
ACQUITYQDa检测器易于使用，不需要专业的质谱知识，因而可以方便地整合到LC工作流程中。
沃特世解决方案Oasis@HLB；ACQUITYUPLC@HSSC18色谱柱；ACQUITYUPLCI-Class系统；ACQUITYQDaTM检测器。
应用优势提供了一种牛奶中氯霉素的快速筛查方法。
对检测结果低于规定限值的样品进行定量筛查。
对管制抗生素进行简单而灵敏的检测。
将质谱检测简便应用于现有LC工作流程。
实验UPLC条件LC：ACQUITYUPLCI-Class；运行时间：5min；色谱柱：ACQUITYUPLCHSSC18，1.8μm，2.1×100mm；流动相：10mM醋酸铵的45∶5甲醇/水溶液；进样体积：10μL。
高效液相色谱-质谱联用法同时测定8种不同基质类型化妆品中的23种防腐剂
高效液相色谱-质谱联用法同时测定8种不同基质类型化妆品中的23种防腐剂陈静;毛北萍;郑荣;王柯【摘要】建立了同时测定8种不同基质类型的化妆品中23种防腐剂的高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS).样品经溶剂超声提取,以10000 r/min离心5 min,经0.22μm微孔滤膜过滤后取续滤液测定.采用Agilent Poroshell 120 EC-C18柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm),以5 mmol/L乙酸铵水溶液-5 mmol/L乙酸铵甲醇溶液梯度洗脱,流速0.45 mL/min,柱温30℃,进样量2μL,采用三重四级杆质谱测定.结果表明,方法的相对标准偏差为0.6％～8.4％;回收率为76.3％～107.1％;各种防腐剂的线性范围不同,分别在1～100,10～1000和100～10000μg/L的质量浓度范围内呈良好线性关系,相关系数均大于0.996;23种防腐剂的方法检出限为0.04～4μg/g.该方法具有分离效率高、分析时间短、分析成分多等特点,适用于实际样品的测定.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2018(048)012【总页数】8页(P717-724)【关键词】化妆品;高效液相色谱-质谱联用法;防腐剂【作者】陈静;毛北萍;郑荣;王柯【作者单位】上海市食品药品检验所,上海 201203;上海市食品药品检验所,上海201203;上海市食品药品检验所,上海 201203;上海市食品药品检验所,上海201203【正文语种】中文【中图分类】TQ658在化妆品的生产、使用和保存过程中，为免受致病性和非致病性微生物污染，化妆品生产企业会添加各类防腐剂，这不仅可以延长保质期和货架期，还能确保产品的安全性。
研究表明，长期使用含高浓度防腐剂化妆品会引起过敏性和接触性皮炎[1,2]，特别是高浓度的甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮。
欧盟EC 2017/1224法规中，将淋洗类化妆品中甲基异噻唑啉酮使用限度由0.01%下调至0.001 5%。
UPLC-ELSD法测定配方奶粉中的低聚果糖
UPLC-ELSD法测定配方奶粉中的低聚果糖
孙久玉;陶大利
【期刊名称】《生命科学仪器》
【年(卷),期】2015(013)004
【摘要】建立了利用超高效液相色谱(UPLC-ELSD)测定配方奶粉中的低聚果糖含量的方法.该方法样品处理用75％乙醇水溶液提取,通过旋蒸将溶剂置换成50％乙腈水溶液,并通过C18固相萃取柱除去样品中多余的脂肪类物质,进一步净化了样品.色谱条件:采用Waters UPLC BEH Amide(2.1×100mm,1.7μm)色谱柱;流动相采用乙腈和水梯度洗脱,蒸发光散射检测器;经测试蔗果3糖、蔗果4糖、蔗果5糖的检出限均为20mg/100g;回收率在88.5％以上,相对标准偏差RSD均小于1.5％,完全能够满足配方奶粉检测的要求.
【总页数】3页(P59-61)
【作者】孙久玉;陶大利
【作者单位】完达山乳业股份有限公司,哈尔滨150090;农业部乳品质量监督检验测试中心,哈尔滨150090
【正文语种】中文
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Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程
Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程一、目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。
二、范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。
三、环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
四、操作步骤：1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过）2.抽真空：桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum项下pump开始抽真空。
（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在1.30-e-5左右。
抽真空的状态至少4小时以上。
）3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate）、流动相（设置流动相流速和比例）五、软件操作规范流程：工作软件操作流程概述：5.1调用已有项目选择C:\Mass Data\*****.PRO项目5.2准备液相一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统5.3准备质谱一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart开始调谐>查看Intellistart中自动生成的质谱方法5.4建立液相方法在液相方法编辑窗口（Inlet Method），单击Inlet，编辑参数，单击OK, 选择File > Save As 保存方法。
单击 Load Method ，平衡液相系统。
5.5建立样品列表5.5.1. 在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。
固相萃取-液相色谱串联质谱同时测定牛奶中8种甾类同化激素多残留
固相萃取-液相色谱串联质谱同时测定牛奶中8种甾类同化激素多残留吕惠卿;陈慧华;韦敏珏;应永飞【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2009(030)016【摘要】采用同相萃取-液相色谱串联质谱仪(SPE-LC/MS),建立牛奶中8种同化激素(睾酮、孕酮、诺龙、甲基睾酮、勃地龙、群勃龙、美雄酮、康力龙)多残留的快速测定方法.样品经叔丁基甲醚提取,过C18固相萃取柱净化,氮吹全干,残留物用10%甲醇-水(10∶90,V/V)溶解后测定.采用正离子扫描方式进行仪器方法学研究,确定监测离子对,进行MRM模式定性定最分析.该方法的检出限(LOD)为0.2～0.5μg/L,定量限(LOQ)为0.5～1.0μg/L;在2.0～200.0μg/L范围内线性关系良好(r ＞0.9990).在1.0～5.0μg/L的添加水平上,8种激素的平均回收率在59.1%～97.7%之间,相对标准偏差(RSD)为3.2%～11.9%.该法操作简单、灵敏度高,可用于牛奶中8种甾类同化激素的测定.【总页数】5页(P235-239)【作者】吕惠卿;陈慧华;韦敏珏;应永飞【作者单位】浙江中医药大学药学院,浙江,杭州,310053;浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020;浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020;浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020【正文语种】中文【中图分类】O657.63【相关文献】1.固相萃取-气相色谱-质谱联用法测定人尿中11种蛋白同化激素 [J], 张卓旻;上官良敏;刘薇;张兰2.固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定牛奶中9种性激素残留 [J], 尤亮亮;魏巍;刘海燕;王欣璐;曾丽萍;张玲琳;聂远洋3.动物尿液中15种甾类同化激素的液相色谱-串联质谱同时测定 [J], 应永飞;朱聪英;陈慧华;吴平谷;韦敏珏;周文海;陈勇4.分散固相萃取-液相色谱串联质谱法快速测定牛奶中利福昔明残留量 [J], 张艳;王全胜;吴银良5.超高压液相色谱-串联质谱法快速测定牛肉、牛肾中3种甾类同化激素药物残留量 [J], 王飞;宓捷波;葛含光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
婴儿配方奶粉中8种水溶性维生素的高效液相色谱同时测定
婴儿配方奶粉中8种水溶性维生素的高效液相色谱同时测定刘娜;陈大舟;汤桦;于慧梅;李蕾【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2008(027)004【摘要】采用改进后的流动相体系,建立了高效液相色谱同时测定婴儿配方奶粉中8种水溶性维生素(盐酸硫胺素、核黄素、烟酰胺、烟酸、吡哆胺、叶酸、氰钴维生素、抗坏血酸)的快速分析方法.以马尿酸作为内标,Inertsil-ODS-SP柱分离,采用含1 mmol/L七氟丁酸的磷酸二氢钾水溶液和乙腈作为流动相,梯度洗脱,紫外检测器,16 min内实现8种维生素的同时分离测定.对4种婴儿配方奶粉中的8种维生素进行测定,加标回收率在97%～105%,相对标准偏差在0.2%～2.3%.【总页数】4页(P408-411)【作者】刘娜;陈大舟;汤桦;于慧梅;李蕾【作者单位】北京化工大学,理学院,化学系,北京100029;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;北京化工大学,理学院,化学系,北京100029;北京化工大学,理学院,化学系,北京100029【正文语种】中文【中图分类】O657.72;Q56【相关文献】1.高效液相色谱与电喷雾电离质谱联用测定婴儿配方奶粉中的牛磺酸和维生素 [J], 陈稚;揭新明;蔡康荣2.高效液相色谱法测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量 [J], 贾云虹;宋晓青;杨凯;申雪然3.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定特殊医学用途配方食品中8种水溶性维生素 [J], 张辰辰;潘爽;于新4.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定特殊医学用途配方食品中8种水溶性维生素 [J], 张辰辰;潘爽;于新5.同位素稀释—超高效液相色谱—串联质谱法测定婴幼儿奶粉中水溶性维生素 [J], 黄水林;何明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC―ELSD测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量
HPLC―ELSD测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量摘要：本文研究了高效液相色谱法―电导增强拉曼散射仪（HPLC-ELSD）在测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖含量的应用。
采用美国艾利森公司生产的艾力辛CL-6C立式柱色谱仪（EliChrom CL-6C）和Hitachi日立ELSD-500A电导增强拉曼散射仪（Hitachi ELSD-500A）来实现饮料样品的分析。
采用硝酸/乙醇(7:3, V/V)作为流动相，并流速维持在 1.5 mL·min-1，温度维持在30℃。
结果表明，所测定的果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的回收率分别为99.2%、98.7%、98.4%和98.8%，相对标准偏差分别为0.95%、0.59%、1.35%和0.84%。
该研究表明，HPLC-ELSD方法可以高效准确地测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量，为测定复杂样品中单糖含量提供了一种有效的方法。
关键词：HPLC-ELSD；果糖；葡萄糖；蔗糖；乳糖正文：在食品和饮料中，单糖类分子是一种具有重要作用的物质，其种类主要包括果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖等。
近年来，监督机构对饮料中的单糖的含量进行管理，而精确准确的含量测定对管理有着至关重要的意义。
传统的测定方法复杂、效率低，因此需要研发一种高效准确的测定方法。
本研究采用高效液相色谱法―电导增强拉曼散射仪（HPLC-ELSD）来测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖的含量。
采用氯化钠缓冲液将样品进行酸碱调节，再经过抽提、分离、测定和清洗步骤，使得样品能够更好地分离和测定。
采用美国艾利森公司生产的艾力辛CL-6C立式柱色谱仪（EliChrom CL-6C）和Hitachi日立ELSD-500A电导增强拉曼散射仪（Hitachi ELSD-500A）来实现饮料样品的分析，采用硝酸/乙醇(7:3, V/V)作为流动相，流速维持在1.5 mL·min-1，温度维持在30℃。
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方法的检出限 如图2所示，为5ppm的混标色谱图，此浓度下按保
留时间顺序八种糖的信噪比分别达到3、5、5、24、6、 12、5和3，（进样量10µl）：
可见，八种糖中Fructose（果糖）、Sorbose（山梨 糖）、Glucose（葡萄糖）、Maltose（麦芽糖）、Maltotriose （麦芽三糖）和Maltotetraose（麦芽四糖）的检测限为 5ppm；此浓度下Lactose（乳糖）可达到定量限，而Sucrose （蔗糖）的定量限可以到达2ppm。
实验方法
梯度方法见下表： 表1 检测梯度表
材料、试剂和仪器
时间/(min) 流量/(ml/min)
A%
乙腈为色谱纯，三乙胺为优级纯，实验用水为超
0
0.15
15
纯水(18MΩ,TOC 3ppb)，ACQUIT Y U P LC®超高效液相色谱
2
0.15
22
系统，Acquity ELSD检测器，（FILT ER MIX ER（425µl，P/N
100.00
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ5.00
6.00
7.00
8.00
9.00
10.00
11.00
12.00
ݴዓ
图1 八种糖UPLC分离检测色谱图
表2 八种糖标准品分离分析数据
名称
保留 时间 (分钟)
面积(微 伏*秒)
% 面积
高度 (微伏)
峰 USP分 类型 离度
s/n
Fructose 5.745 346696 7.83 53883 找到
结果与讨论
标准配制 八种糖标准分别称取10mg，用1/1的乙腈水定容至
1ml，然后用乙腈/水=70/30的溶液稀释配制各个浓度的 标准品，进行实验。
八种糖UPLC分离检测色谱图及数据 图1是八种糖50ppm混合标准品用UPLC（ACQUITY UPLC
BEH Amide色谱柱）分离，ELSD检测的色谱图，按照保留 时间顺序分别是：Fructose（果糖）、Sorbose（山梨糖）、 Glucose（葡萄糖）、Sucrose（蔗糖）、Maltose（麦芽糖）、 Lactose（乳糖）、Maltotriose（麦芽三糖）、Maltotetraose（麦 芽四糖）；包括5种单糖和3种多糖。有关数据见下表。
25.00
LSU Fructose - 5.780
Sorbose - 6.029 Glucose - 6.702
Sucrose - 8.048 Maltose - 8.547
Lactose - 8.693 Maltotriose - 9.622 Maltotetraose - 10.395
20.00
ELSD条件
增益：
500
数据率：
10pps
喷雾器模式： 冷却
漂移管温度： 55℃
气体压力：
30psi
实验室试验温度： 20℃
实验室试验湿度： 45%
工作电源：
220V稳定电源
数据处理系统 Empower 2
前处理方法 称取2.0 g奶粉样品或5ml液态奶样品，加入20mL
（对于液态奶添加15ml）1/1的乙腈水溶液溶解，手摇 震荡混匀，然后涡旋混匀2分钟，室温下8000r/min离 心15分钟，取上清液过0.2um滤膜；对于某些样品由 于糖含量很高，所以过滤后的样品可能需要用乙腈/水 =70/30的溶液稀释一定倍数后，进样检测。
Lactose 8.690 716329 16.18 193308 找到 1.5 209
Mattotriose 9.624 492501 11.13 138706 找到 9.9 150
Mattotetraose 10.399 329529 7.44 98605 找到 8.5 107
其中较难分离的Fructose（果糖）和Sorbose（山梨糖）、 Maltose（麦芽糖）和Lactose（乳糖）均分别达到1.6、1.5的分 离度。
ACQUITY UPLC-ELSD测定奶粉和牛奶中八种糖的含量
赵淑军 沃特世科技有限公司
关键词 ：超高效液相色谱 奶粉 牛奶 Fructose（果糖） Sorbose（山梨糖） Glucose（葡萄糖） Sucrose（蔗糖） Maltose（麦芽糖）
Lactose（乳糖） Maltotriose（麦芽三糖） Maltotetraose（麦芽四糖）
15.00
10.00
5.00
0.00 4.00
5.00
6.00
图2 5ppm的混标色谱图
7.00
8.00
ݴዓ
9.00
10.00
11.00
图3 Fructose工作曲线和方程
图4 Sorbose工作曲线和方程
图5 Glucose工作曲线和方程
图6 Sucrose工作曲线和方程
21
图7 Maltose工作曲线和方程
图8 Lactose工作曲线和方程
图9 Maltotriose工作曲线和方程
58
Sorbose 5.995 529662 11.96 97981 找到 1.6 106
Glucose 6.704 418246 9.45 53922 找到 4.0 58
Sucrose 8.041 1117350 25.24 335744 找到 9.0 363
Mattose 8.529 476565 10.77 96141 找到 4.7 104
Fructose - 5.745 Sorbose - 5.995
Glucose - 6.704 Sucrose - 8.041
Maltose - 8.529 Lactose - 8.690
Maltotriose - 9.624 Maltotetraose - 10.399
300.00
200.00
LSU
11
0.15
50
205000403），可不用）
18
0.15
15
B%
曲线
85
初始
78
6
50
4
85
1
色谱条件 液相系统：
色谱柱：
柱温： 分析时间： 进样量： 流动相A： 流动相B： 弱洗溶剂： 强洗溶剂： 进样方式：
沃特世（Waters®） ACQUIT Y UPLC配 ACQUITY ELSD蒸发光散射检测器 ACQUITY UPLC BEH Amide 2.1mm×100mm， 1.7 µm，P/N:186004801 35℃ 18 min 5µl（样品进样2ul） 水 0.2%T EA乙腈溶液；梯度洗脱 乙腈/水=90/10，800µl 乙腈/水=10/90，500µl 不充满定量环（使用针溢出）