实验五食品中还原糖得测定
水果硬糖中还原糖的测定
计算结果表示到小数点后一位。
七、注意事项
滴定必须是在沸腾条件下进行，其原因一是加快还原糖与Cu2＋的反 应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空 气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被 空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝 和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。
滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。因为 亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子 全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧 化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝， 即达滴定终点。根据样液量可计算出还原糖含 量。
三、主要仪器
1、定糖滴定装置：150mL三角瓶，滴定管 架，25mL滴定管
记录消耗葡萄糖V
做三次平行试验,取其平均值，按下式计算。
标定后的计算： 每10ml费林试剂相当于葡萄糖的质量（mg）
A=Vc
A---每10ML费林试剂相当于葡萄糖的质量（mg） V---标定消耗的葡萄糖标准溶液的体积ml C---葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml
（三）样品溶液预备滴定（预测）
（四）样品溶液正式滴定
吸取5.0mL碱性酒石酸甲液及5.0mL乙液， 置于150mL三角锥瓶，加水10mL，加入玻 璃珠3粒，从滴定管加入比预备测定体积V预 少1mL(即V预-1)的样品溶液至三角锥瓶，摇 匀，使其2min内沸腾，以2S每滴的速度滴 定，到蓝色刚好褪去为终点。同法平行操 作三份。
HC OCOONaFra bibliotekCOONa
Cu + 2 H2 O
在加热条件下，检测样品中还原糖与酒石酸
钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产
生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，
食品中还原糖含量的测定-直接滴定法
• 3.试剂：
– 硫酸铜（CuSO4 · 5H2O） – 次甲基蓝 -碱性酒石酸铜甲液（费林试剂甲液） – 酒石酸钾钠 – 亚铁氰化钾 -碱性酒石酸铜乙液（费林试剂乙液） – 乙酸锌 – 冰乙酸 -乙酸锌溶液 – 葡萄糖 -葡萄糖标准溶液（1mg/ mL） – 氢氧化钠 -氢氧化钠溶液 – 盐酸
四、实验步骤
• 2. 碱性酒石酸铜溶液的标定 – 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置 于150mL锥形瓶中（甲液、乙液混合后生成氧 化亚铜沉淀，因此，应将甲液加入到乙液，使 生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加9mL葡萄糖标准溶液， 控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速 度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚 好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总 体积。同法平行操作三份，取其平均值，计算 每10mL（甲液、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶 液相当于葡萄糖的质量（mg）。
• 4. 样品溶液的测定
– 吸取5.0mL碱性酒石酸铜溶液甲液及5.0mL乙 液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加比预测体积少1mL的 样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸以以每 两秒1滴的速度滴定至终点。记录样液消耗的 体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
• 1. 样品处理
– 汽水等含CO2的饮料-雪碧
• 吸取10mL样品置于蒸发皿中，在水浴上除去CO2后， 移入250mL容量瓶，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入 容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。
– 酒精饮料-啤酒
• 吸取10mL样品，置于蒸发皿中，用1mol/L氢氧化钠 溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后， 移入100 mL容量瓶中，加入50 mL水，摇匀后慢慢 加入5 mL乙酸锌溶液和5 mL 10.6%亚铁氰化钾溶液， 加水至刻度，摇匀。静置30min，用干燥滤纸过滤， 滤液备用。
食品中还原糖的测定(修改版)
食品中还原糖的测定--直接滴定法一、实验目的与要求1．学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的方法。
2. 掌握蜂蜜中还原糖的测定的操作技能。
3. 学会控制反应条件，掌握提高还原糖测定精密度的方法。
二、原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈浅黄色而指示滴定终点。
根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。
三、试剂、仪器与样品试剂：除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
1．碱性酒石酸铜甲液：称取7.5 g硫酸铜（CuSO4·5H2O），及0.025 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至500ml。
2．碱性酒石酸铜乙液：称取25 g酒石酸钾钠与37.5 g氢氧化钠，溶于水中，再加入2g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.盐酸溶液（1+1）：量取50mL盐酸加水稀释至100mL.4.氢氧化钠溶液（40g/L）：称取4g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。
5．转化糖标准溶液：准确称取1.0526g蔗糖，用100ml水溶解，置具塞三角瓶中，加5ml盐酸（1+1），在68℃-70℃水浴中加热15min,放置至室温，转移到1000ml容量瓶中并定容至1000ml,每毫升标准相当于1.0毫克转化糖。
6．澄清剂：中性醋酸铅：粗称醋酸铅20g，加新煮沸放冷的蒸馏水溶解，再滴加醋酸使溶液澄清，再加水至200ml。
往醋酸铅溶液里加入两滴酚酞指示剂，再用氢氧化钠溶液调至微红。
注意：醋酸铅试液有毒，禁止用手！7．指示剂：次甲基蓝8．样品：蜂蜜。
9．仪器：酸式滴定管，容量瓶，电炉，坩埚钳，150mL锥形瓶，匹配的胶塞等四、操作方法1．样品处理：称取35-40g样品，加50mL水稀释并洗入250mL容量瓶中，摇匀后慢慢加入少量中性醋酸铅溶液，加水至刻度，摇匀，静止30min.用干燥滤纸过滤，弃初滤液，滤液备用。
滴定法还原糖含量测定
滴定法还原糖含量测定一、实验目的：1、学习和掌握滴定法测定还原糖含量的原理和方法；2、加深对还原糖的特性和测定方法的理解。
二、实验原理：还原糖是具有还原性的单糖和少量的异构体，在碱性条件下能够将还原剂还原为氧化剂，自身被氧化为相应的酸，色变反应用铜离子与氧化的还原糖生成沉淀，滴定沉淀的含量，即可测定还原糖的含量。
三、实验步骤：1、将样品粉碎成细粉末，取 1-2 g由蒸馏水稀释10倍后摇匀并过滤备用。
2、用蒸馏水润洗紫色过滤棉，收集过滤液和洗涤液。
3、取滤液 10.00 mL，加入 1.00mL Fehling's溶液A 和 1.00mL Fehling's溶液B，放在沸水中加热，不停搅拌，约5min后，还原糖会发生反应并生成一种棕色沉淀。
4、用蒸馏水洗涤收集沉淀，连同过滤棉和洗涤液，用蒸馏水冲洗至洗涤液的体积为20.00mL，加入几滴醋酸作为指示剂。
5、转移到滴定管中,用标准 0.1mol/LNaOH滴定至棕色沉淀消失,取得滴定值（V）。
6、根据实验公式计算出还原糖的含量,(含量% =vx1000x正碘量（g）/样品重量（g）*100%）四、实验注意事项：1、取样品后样品应粉碎成细粉末，以充分增加其溶解和反应速率。
2、Fehling's溶液A&B混合后容易发生氧化，必须在使用前彻底振摇，如果出现沉淀就不能使用。
3、滴定前一定要冷却至室温。
4、掌握并准确使用橡胶头滴定管，滴定过程中尽量不要挥霍溶液，避免误差。
五、实验测定数据及处理：还原糖含量公式还原糖含量%=(V*0.1*60.08*1000*100)/m其中，0.1为NaOH标准溶液浓度(M)，60.08为还原糖摩尔质量，1000为体积单位的转换(溶液为毫升，要转化为升)，100为计算单位的转换(要转化为百分数)。
本实验样品用量为2g，测得滴定值为(所用NaOH溶液为0.1mol/L)一二三平均滴定体积 (mL) 26.15 25.90 26.05 26.03平均滴定体积(V)=26.03 mL六、实验结论:本实验利用滴定法对糖含量进行测定，实验结果显示，样品中还原糖含量为0.7865%，满足实验要求。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子，生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液（含CuSO₄的碱性溶液）和斐林B液（含NaOH的碱性溶液）组成，两种试剂混合后，Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂：- 斐林A液：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.1g，溶于100mL水中，加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液：称取NaOH 2g，溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液：准确称取葡萄糖1.0000g，溶于1000mL水中，配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液：取一定量的待测样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器：- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液：准确移取1mL标准葡萄糖溶液，加入9mL蒸馏水，配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂：将斐林A液和斐林B液等体积混合，立即使用。
3. 取一支试管，加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂，混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管，观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6，制作标准曲线。
8. 根据标准曲线，计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标，沉淀颜色深浅为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算：根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅，在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，斐林试剂需现配现用，以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子，影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内，以免沉淀颜色过深，影响准确度。
总糖和还原糖的测定实验报告
总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过测定总糖和还原糖的含量，了解不同食品中糖分的含量及其对人体健康的影响。
二、实验原理总糖是指食品中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。
还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖。
测定总糖和还原糖的方法主要有蒸发法、显色法、高效液相色谱法等，本实验采用显色法测定。
三、实验步骤1.样品制备：将待测样品粉碎并过筛，取2g样品加入100ml锥形瓶中，加入40ml去离子水，振荡混合均匀。
2.制备还原剂：称取0.5g氢氧化钠加入50ml去离子水中，加温搅拌至完全溶解。
3.蒸发：将步骤1中制备好的样品放入沸水浴中加温蒸发至干固。
4.水解：将步骤3中得到的干固样品加入10ml 0.5mol/L盐酸中，加温水解30min。
5.冷却：将步骤4中的样品冷却至室温，加入50ml去离子水稀释。
6.显色：取10ml样品溶液加入试管中，加入2ml酚酞指示剂溶液和2ml还原剂溶液，振荡混合均匀后静置10min。
7.测定：用1mol/L氢氧化钠滴定至颜色变为淡粉色，记录滴定体积V1。
同时进行空白试验并记录滴定体积V0。
8.计算：总糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g），还原糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g）。
四、实验结果本次实验测得样品A的总糖含量为24.5mg/g，还原糖含量为8.7mg/g；样品B的总糖含量为18.3mg/g，还原糖含量为6.9mg/g；样品C的总糖含量为31.7mg/g，还原糖含量为12.4mg/g。
五、实验分析通过本次实验可以发现不同食品中的总糖和还原糖含量存在较大差异。
其中，样品C的总糖和还原糖含量均较高，而样品B的含量最低。
这提示我们在饮食中应该注意控制糖分的摄入，避免过多摄入对身体健康造成影响。
六、实验感想本次实验通过测定总糖和还原糖含量，让我对不同食品中糖分的含量有了更深入的了解。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]
![还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]](https://img.taocdn.com/s3/m/73e5e828cec789eb172ded630b1c59eef8c79ab9.png)
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性，故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL1％淀粉溶液100mL0.1％糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
马铃薯还原测定实验报告
1. 了解还原糖的概念及其检测方法。
2. 掌握马铃薯中还原糖的测定方法。
3. 分析马铃薯中还原糖的含量及其影响因素。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，如葡萄糖、果糖等。
还原糖在碱性条件下，能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
本实验采用斐林试剂法测定马铃薯中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：马铃薯、蒸馏水、斐林试剂、氢氧化钠、硫酸铜、移液管、烧杯、试管、酒精灯等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温箱、试管架、滴定管等。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将氢氧化钠和硫酸铜溶解于蒸馏水中，配制成斐林试剂。
2. 制备马铃薯提取液：称取一定量的马铃薯，用蒸馏水研磨成匀浆，过滤得到马铃薯提取液。
3. 测定还原糖含量：取两支试管，分别标记为A和B。
A管：向A管中加入1ml马铃薯提取液，再加入2ml斐林试剂，混合均匀，放入水浴锅中加热至沸腾，观察颜色变化。
B管：向B管中加入1ml蒸馏水，再加入2ml斐林试剂，混合均匀，放入水浴锅中加热至沸腾，观察颜色变化。
4. 比较A管和B管颜色变化，记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果：A管产生砖红色沉淀，B管无明显变化。
2. 分析：A管中的马铃薯提取液中含有还原糖，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀；B管中的蒸馏水不含还原糖，与斐林试剂反应无明显变化。
通过本实验，我们成功测定了马铃薯中还原糖的含量。
实验结果表明，马铃薯中确实含有还原糖，这与马铃薯的口感有关。
在实验过程中，我们还发现，马铃薯中还原糖的含量受到提取方法、温度等因素的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中，马铃薯提取液的制备对还原糖的测定结果有一定影响。
提取方法不当可能导致还原糖含量测定不准确。
2. 实验过程中，温度对还原糖的测定结果也有一定影响。
温度过高或过低可能导致还原糖含量测定不准确。
3. 本实验仅对马铃薯中还原糖含量进行了测定，未对其他糖类成分进行测定。
在今后的实验中，可以进一步研究马铃薯中其他糖类成分的含量及其影响因素。
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实验八食品(炼乳)中还原糖含量得测定
一、实验目得
1、了解食品中还原糖得含量;
2、学习直接滴定法测定还原糖得原理,并掌握其定糖方法。
3、通过对实验结果得分析,了解影响测定准确性得因素。
二、原理,
食品中得还原糖主要指具有还原性得葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖、麦芽糖等,还原糖之所以具有还原性,就是由于其分子中含有游离醛基(-CHO)或酮基(>C=O)。
测定还原糖得经典化学方法都就是以其能被多种试剂氧化为基础得。
在这些方法中,以各种根据碱性酒石酸铜溶液氧化作用改进方法得应用最广。
本实验就就是采用使用碱性酒石酸铜作为氧化剂得直接滴定法。
碱性酒石酸铜溶液A、B二液等体积混合时生成得天蓝色Cu(OH)2沉淀后,立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色得酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时,二价铜即被还原糖还原为一价得红色氧化亚铜沉淀,氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应,生成可溶性化合物,达到终点时,稍微过量得还原糖将蓝色得次甲基蓝还原成无色,溶液呈淡黄色而指示滴定终点,根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖得质量,以及测定样品液所消耗得体积,计算还原糖含量。
反应式如下:
CuSO4＋2NaOH→Cu(OH)2↓＋Na2SO4
COOK COOK
││
CHOH CHO
│＋Cu(OH)2→│Cu＋2H2O
CHOH CHO
││
COONa COONa
COOK COOK
│CHO COOH │
CHO ││CHOH
│Cu＋(CHOH)4 →(CHOH)4 ＋│＋Cu2O↓
CHO ││CHOH
│CH2OH CH2OH │
COONa COONa
三、仪器与试剂
1、仪器
(1)容量瓶100 ml、250 ml
(2)三角瓶250 ml
(3)碱式滴定管50 ml或25 ml
(4)烧杯100m1
(5)吸管5 ml、50 ml
(6)分析天平
(7)电炉1KW可调
(8)恒温水浴锅
2、试剂
(1) 碱性酒石酸铜溶液A液:称取15、00 g硫酸铜(CuSO4·5H2O)(AR)及0、05g次甲基蓝,
溶于蒸馏水中并稀释至1000 ml。
(2) 碱性酒石酸铜溶液B液:称取50g酒石酸绅钠(AR)与75g NaOH (AR),溶于蒸馏水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后用蒸馏水稀释至1000 ml,贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。
(3)乙酸锌溶液:称取21、9g乙酸锌,加3ml冰醋酸,加水溶解并稀释至100ml。
(4)亚铁氰化钾溶液:称取10、6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100ml。
(5)葡萄糖标准溶液:准确称取1、0000g至(96±2)℃干燥2h得纯葡萄糖,加水溶解后加人5ml 盐酸,并以水稀释至1000ml。
此溶液葡萄糖浓度为l、0 mg/ml。
3、样品
炼乳
四、实验步骤
1、样品制备
称取炼乳样品约2、50 ~ 5、00g于100ml烧杯中,加入50ml水溶解,转移到25Oml容量瓶中,并用少量水洗涤烧杯,洗液并人容量瓶中。
慢慢加入5ml乙酸锌溶液与5ml亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀。
沉淀,静止30min,用干燥小滤纸做成小菊花形干过滤,弃去初始滤液25ml,其余滤液备用。
2、碱性酒石酸铜溶液得标定
于25Oml三角瓶中吸取碱性酒石酸铜A液及B液各5、0ml,加1Oml水与玻璃珠3粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液并摇匀,置于电炉上加热至沸腾(要求控制在2min内沸腾),然而趁热以每2s滴加1滴得速度继续滴加葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液,直至溶液蓝色刚好退去,显示淡黄色即为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液得总体积。
同时平行操作三份,沸腾后滴人得葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液得体积应控制在0、5～1、0ml以内,滴定时间应控制在1min内。
否则,应增加预加量并重新滴定。
按下式计算10ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量(mg)
式中:
F一10 ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量,mg
V—标定时消耗标准葡萄糖溶液得体积,ml
C一标准葡萄糖溶液得质量浓度,mg/ml
3、样品溶液得预备滴定
吸取碱性酒石酸铜A液与B液各5、Oml于25Oml三角瓶中,加1Oml水与玻璃珠3粒并摇匀,在电炉上加热至沸,趁热以先快后慢得速度,从滴定管中滴加试样溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每2s滴加1滴得速度迅速滴定,直至溶液蓝色刚好退去为终点,记录样品溶液消耗体积。
当样品溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释,再进行测定,使每次滴定消耗得体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗得葡萄糖标准溶液得体积相近(约lOml左右),记录消耗样液得总体积,作为正式滴定参考用。
4、样品溶液得正式滴定
吸取碱性酒石酸铜A液与B液各5、0ml于25Oml三角瓶中,加lOml水与玻璃珠3粒,从滴定管加入比预备滴定体积少lml样品溶液至三角瓶中并摇匀,同上法滴定至终点。
同法平行操作三份。
五、计算
食品中还原糖含量(X％)
式中:
X——每百克试样申还原糖得含量(以葡萄糖计),g
F——10 ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量,mg m——试样质量,g
V——正式滴定时平均消耗样品溶液得体积,m1
七、说明与讨论
1、实验中得加热温度、时间及滴定时间对测定结果有很大影响,在碱性酒石酸铜溶液标定与样品滴定时,应严格遵守实验条件,力求一致。
2、加热温度应使溶液在2min内沸腾,若煮沸得时间过长会导致耗糖量增加。
滴定过程中滴定装置不能离开热源,使上升得蒸汽阻止空气进入溶液,以免影响滴定终点得判断。
3、滴定速度应尽量控制在每2s滴加1滴,滴定速度快,耗糖增多;滴定速度慢,耗糖减少。
滴定时间应在lmin内,滴定时间延长,耗糖量减少,因此预加糖液得量应使继续滴定时耗糖量在0、5~1、0ml以内。
4、碱性酒石酸铜溶液A液、B液应分别存放,使用时以等体积混合。
5、本法就是与定量得酒石酸钾钠铜作用,铜离子就是定量得基础,故样品处理时,不能用铜盐作蛋白质沉淀剂。
6、为了提高测定得准确度,根据待测样品中所含还原糖得主要成分,要求用指定还原糖表示结果,就应用该还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
例如,本实验中用葡萄糖表示结果,就用葡萄糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
7、碱性酒石酸铜溶液B液中加入少量亚铁氰化钾得目得就是使生成得红色氧化亚铜配位形成可溶性配合物,消除红色沉淀对滴定终点得干扰,使终点变色更明显。