实验七-食品中还原糖的测定(综合性)
食品中还原糖的测定
碱 性 酒 溶 石 液 酸 的 铜 标 定
准确吸取碱性酒 石酸铜甲液和乙 液各5ml，置于 250ml 锥形瓶中， 加水10ml ，加玻 璃珠4 粒。
碱 性 酒 溶 石 液 酸 的 铜 标 定
从滴定管滴加约 9 ml 葡萄糖标准溶液， 加热使其在 2 分钟内沸腾，准确沸腾 30 秒，趁热以每 2 秒一滴的速度滴加葡萄糖 标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。 记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行 操作 3 次，取其平均值。
样 品 溶 液 测 定
吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5 ml，置于250 ml 锥形瓶 中，加水10 ml ，加玻璃珠4粒。从滴定管加入比预测时样 品溶液消耗总体积少1ml 的样品液，使其在 2 分钟内加热 至沸腾，准确沸腾 30 秒钟，趁热以每 2 秒一滴的速度继 续滴定，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品液的体 积。平行操作3次，取其平均值
The end Thank you
反应液碱度：碱度越高，反应速度越快，样液消耗也越多， 故样品测定时样液的滴定体积要与标准相近，原理在此， 这样误差要小。 锥形瓶规格：不同体积的锥形瓶会致使加热的面积及样液 的厚度有变化，同时瓶壁的厚度不同影响传热速率，故有 时甚至是同一规格但不同批的锥形瓶也会引起误差 。 加热功率：加热的目的一是加快反应速度，二是防止次甲 基兰与滴定过程中形成的氧化亚铜被氧气氧化，使结果偏 高。加热功率不同，样液沸腾时间不同，时间短，样液消 耗多，同时反应液蒸发速度不同，即碱度的变化也就不同， 故实验的平行性也就受影响。 滴定速度：滴定速度越快，样液消耗也越多，结果会偏低。
滴定必须在沸腾条件下进行。
滴定时丌能随意摇动锥形瓶，更丌能把锥形瓶从热源上取下来滴定， 以防空气进入反应液中。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告还原糖的测定实验报告引言：还原糖是一类具有还原性质的糖类物质，它们能够将其他物质还原为较低的氧化态。
测定还原糖的含量对于食品、医药等领域具有重要意义。
本实验旨在通过一系列的化学反应和分析方法，测定某种食品中还原糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备首先，我们需要准备样品。
选取一种食品，如苹果汁，将其过滤并稀释至适当浓度。
确保样品中没有其他干扰物质的存在。
2. 还原糖的测定将准备好的样品分别取10ml放入两个试管中。
标记为A和B。
3. 试剂的添加在试管A中加入5ml硫酸铜溶液，并加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
4. 还原糖的反应在试管B中加入5ml硫酸铜溶液，并加入适量的还原糖试剂。
搅拌均匀后，加热至沸腾。
观察溶液颜色的变化。
5. 比色测定待试管A和B冷却后，使用分光光度计分别测定它们的吸光度。
根据吸光度的差异，计算出还原糖的含量。
结果与讨论：通过实验，我们得到了样品中还原糖的含量。
根据试管A的吸光度，我们可以推测样品中还原糖的含量较低。
而试管B的吸光度明显高于试管A，表明样品中含有较高浓度的还原糖。
这一结果与我们的预期相符。
苹果汁中含有大量的果糖和葡萄糖等还原糖，因此我们可以得出结论，该苹果汁样品中还原糖的含量较高。
然而，我们也要注意到实验中存在的一些限制因素。
首先，我们只测定了还原糖的总含量，并没有对具体的还原糖种类进行分析。
其次，实验中的试剂和操作条件也可能对结果产生影响。
因此，在实际应用中，我们需要综合考虑多种因素，进行更为准确的分析。
结论：通过本实验的测定，我们成功地测定了某种食品中还原糖的含量。
这一实验方法简便易行，可以在食品、医药等领域中得到广泛应用。
然而，在实际应用中，我们需要注意实验条件的控制和结果的解读，以确保测定结果的准确性和可靠性。
实验七 食品中还原糖的测定(综合性)教学文稿
实验七食品中还原糖的测定(综合性)实验七面粉中还原糖的测定（综合性实验）课程：食品检验与分析班级：2011级食品1、2班地点：A13-0405 指导教师：蔺芳（一）直接滴定法一、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，达到终点时，稍过量的还原糖把蓝色的次甲基蓝指示剂还原为无色，而显出氧化亚铜的鲜红色。
根据样品液消耗体积，计算出样品中还原糖的含量。
各步反应式（以葡萄糖为例）如下：(1) Cu2SO4＋2NaOH = 2Cu(OH)2↓＋Na2SO4(2) Cu(OH)2＋KNaC4H4O6= KNaC4H2O6Cu ＋2H2O(3) C6H12O6＋6KNaC4H2O6Cu＋6H2O = C6H12O7＋6KNaC4H4O6＋3Cu2O↓＋H2CO3从上述反应式可知，1mol葡萄糖可以将 6mol Cu2＋还原为Cu+。
但实际上此反应为非定量反应，即不能根据反应式直接计算出还原糖含量。
因此在测定过程中要严格遵守所规定的操作条件，如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。
二、适用范围及特点本法又称快速法，特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。
适用于各类食品中还原糖的测定。
但测定酱油、深色果汁等样品时因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。
本法是国家标准分析方法。
三、试剂及玻皿配置仪器 1. 200mL 烧杯 2 个 2. 100mL、250mL、1000mL 容量瓶各 1 个3. 5.0mL 移液管 4 支 4. 25mL、 100mL 量筒各 1 个 5. 250mL 锥形瓶 4 个6. 800W 电炉 1 个7. 恒温水浴锅、干燥箱8. 碱式滴定装置 1 套9. 玻璃珠（适量） 10. 滤纸、漏斗及过滤装置 11. 分析天平试剂 1. 碱性酒石酸铜甲液：称取 15g硫酸铜(Cu2SO4·5H2O )及 0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到 1000mL。
还原糖的测定实验报告
还原糖的测定实验报告实验目的：通过实验，掌握还原糖的测定方法，了解还原糖在生活中的应用。
实验原理：还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在碱性条件下，还原糖能与铜离子发生氧化还原反应，将Cu2+还原为Cu+，同时还原糖被氧化为酸。
通过测定还原糖溶液对氧化铜的还原作用，可以确定还原糖的含量。
实验仪器和试剂：1. 分光光度计。
2. 玻璃烧杯。
3. 还原糖试剂。
4. 氢氧化钠溶液。
5. 硫酸铜溶液。
6. 蒸馏水。
实验步骤：1. 取一定量的还原糖溶液放入玻璃烧杯中。
2. 加入适量的氢氧化钠溶液，并混合均匀。
3. 加入适量的硫酸铜溶液，再次混合均匀。
4. 将混合溶液放入水浴中加热，使其发生反应。
5. 反应结束后，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度线。
6. 用分光光度计测定溶液吸光度，记录数据。
实验数据处理：根据实验数据，利用标准曲线法计算出还原糖的含量。
实验结果：通过实验测定，得到还原糖的含量为Xg/L。
实验结论：通过本次实验，我们成功掌握了还原糖的测定方法，并且得到了还原糖的含量。
还原糖在食品工业中有着重要的应用，我们需要进一步了解还原糖的性质和用途，为日后的实际应用提供参考。
实验注意事项：1. 实验过程中要注意安全，避免溶液溅出。
2. 操作仪器时要轻拿轻放，避免损坏。
3. 实验后要及时清洗玻璃器皿，保持实验台面整洁。
总结：本次实验成功测定了还原糖的含量，掌握了还原糖的测定方法。
通过实验，我们深入了解了还原糖的性质和应用，为今后的学习和工作打下了良好的基础。
希望大家能够在日常生活中多加利用所学知识，不断提高自己的实践能力。
以上是本次实验的实验报告，谢谢！。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告实验目的，通过实验测定食品中还原糖的含量，了解食品的营养成分，为食品质量的评价提供依据。
实验原理，还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在酸性条件下，还原糖能够与费林试剂发生还原反应，生成红色沉淀。
通过比色计测定沉淀的光吸收值，可以计算出还原糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备，取不同种类的食品样品，如水果、果酱、饼干等，分别制备成样品提取液。
2. 提取还原糖，将样品加入酸性乙醇中，进行提取，得到含有还原糖的提取液。
3. 进行费林试剂反应，取一定量的提取液，加入费林试剂，混合均匀后，在水浴中加热，观察是否生成红色沉淀。
4. 测定光吸收值，将反应后的样品溶液置于比色皿中，使用比色计测定其光吸收值。
5. 计算含量，根据测定的光吸收值，利用标准曲线计算出还原糖的含量。
实验结果：通过实验测定，不同食品样品中还原糖的含量差异较大。
水果中的还原糖含量较高，果酱次之，而饼干等加工食品中的含量较低。
这与食品的制作工艺、原料成分等有关。
实验结论：通过本次实验，我们成功测定了食品样品中还原糖的含量，并且得出了不同食品样品中还原糖含量的差异。
这对于我们了解食品的营养成分，评价食品质量具有一定的指导意义。
同时，也为我们提供了一种简单、快速、准确的测定方法，为食品质量监测和评价提供了技术支持。
实验注意事项：1. 实验中需注意操作规范，避免溶液外溅，保持实验台面整洁。
2. 在进行测定时，需保持仪器的准确性，避免外界干扰。
3. 对于不同食品样品的提取液制备，需注意样品的选择和制备方法，保证提取液的准确性。
4. 实验中需严格按照操作步骤进行，确保实验结果的准确性和可靠性。
总结：本次实验通过测定食品样品中还原糖的含量，为我们了解食品的营养成分提供了重要依据。
同时，实验方法简单、快速、准确，具有一定的实用性和推广价值。
希望本实验能够对大家有所启发，为食品质量监测和评价提供技术支持。
食品中还原糖的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握食品中还原糖的测定方法。
2. 了解还原糖在食品中的分布和作用。
3. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
在碱性条件下，还原糖能够将斐林试剂中的铜离子还原成氧化亚铜，生成砖红色的沉淀。
根据沉淀颜色的深浅，可以判断食品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 食品样品（如水果、蔬菜、糖果等）- 斐林试剂- 氢氧化钠溶液- 硫酸铜溶液- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 滴管- 移液器- 电子天平2. 实验仪器：- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管架四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液按比例混合，配制成斐林试剂。
2. 称取一定量的食品样品，加入蒸馏水，充分溶解。
3. 取少量溶液，加入斐林试剂，混合均匀。
4. 将混合溶液放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
5. 取出混合溶液，观察沉淀颜色，并与标准比色卡进行对比。
6. 记录食品样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：| 食品样品 | 还原糖含量（%） || :-------: | :-------------: || 甜橙 | 6.5 || 苹果 | 4.2 || 红糖 | 99.8 || 白砂糖 | 0.2 |2. 结果分析：从实验结果可以看出，甜橙和苹果中含有一定量的还原糖，而红糖和白砂糖中的还原糖含量较高。
这可能与食品的来源和加工过程有关。
六、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制实验条件，如温度、时间等，以保证实验结果的准确性。
2. 斐林试剂的配制和使用过程中，应注意避免交叉污染，以保证实验结果的可靠性。
3. 实验结果受多种因素影响，如食品样品的来源、处理方法等，因此在实际应用中，应结合具体情况进行分析。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了食品中还原糖的测定方法，了解了还原糖在食品中的分布和作用。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液，在加热条件下，Cu2+被还原成Cu2O，形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂：斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器：试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合，现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液：准确称取1.0g葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至100ml，配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理：准确称取待测样品0.1g，用蒸馏水溶解并定容至10ml，配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤：a. 取一支试管，加入1ml斐林试剂；b. 取另一支试管，加入1ml样品溶液；c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟；d. 观察颜色变化，记录结果。
5. 结果处理：a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照；b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果：样品溶液加入斐林试剂后，加热至沸腾，观察到样品溶液变为浅蓝色，随后逐渐变为棕色，最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析：根据实验结果，样品溶液中加入斐林试剂后，发生了还原反应，生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖，且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中，样品溶液加热至沸腾时，需保持沸腾状态2分钟，以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中，样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀，说明还原糖在加热条件下，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖 测定实验报告
还原糖测定实验报告还原糖测定实验报告引言：还原糖是一类具有还原性的糖类物质，能够还原某些化学试剂。
测定还原糖的含量在食品工业和生化实验中具有重要意义。
本实验旨在通过还原糖的测定实验，掌握还原糖的测定方法以及实验操作技巧。
实验材料和仪器：1. 实验材料：葡萄糖溶液、蔗糖溶液、还原糖标准溶液、硫酸铜溶液、碱式碘液、硫酸、氢氧化钠溶液等。
2. 仪器：分光光度计、试管、移液管、烧杯、量筒等。
实验步骤：1. 制备还原糖标准溶液：取一定量的葡萄糖溶液，用蒸馏水稀释至一定体积，得到一定浓度的还原糖标准溶液。
2. 实验组的操作：取一定体积的蔗糖溶液，加入硫酸铜溶液和碱式碘液，混合均匀后加入硫酸，使溶液变为无色。
然后加入氢氧化钠溶液，使溶液呈现深蓝色。
最后，用分光光度计测定溶液的吸光度。
3. 对照组的操作：取一定体积的还原糖标准溶液，按照实验组的操作步骤进行操作。
4. 分光光度计测定：将实验组和对照组的溶液分别放入分光光度计中，设置适当的波长，测定吸光度。
结果与分析：根据实验数据，在分光光度计上测得实验组和对照组的吸光度值，通过计算可以得到实验组中还原糖的含量。
通过对比实验组和对照组的含量，可以得出蔗糖溶液中还原糖的含量。
实验误差的分析：1. 实验操作误差：由于实验操作中的仪器使用、试剂的取用等步骤，可能会产生一定的误差。
为减小误差，应严格按照实验步骤进行操作，尽量减少操作上的差异。
2. 仪器误差：分光光度计的测量结果也可能存在一定的误差。
为减小仪器误差，应在测量前校准分光光度计，确保其准确性。
实验结论：通过本实验的测定，可以得出蔗糖溶液中还原糖的含量。
实验结果可用于食品工业中对糖类产品的质量控制和生化实验中对还原糖的研究。
总结：本实验通过测定蔗糖溶液中还原糖的含量，掌握了还原糖的测定方法和实验操作技巧。
同时，还了解了实验误差的来源，并提出了减小误差的方法。
这些知识和技能对于食品工业和生化实验具有重要意义。
通过实验的过程，我们不仅学到了实验操作的技巧，还加深了对还原糖测定原理的理解。
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实验七-食品中还原糖的测定(综合性)实验七面粉中还原糖的测定（综合性实验）课程：食品检验与分析班级：2011级食品1、2班地点：A13-0405 指导教师：蔺芳（一）直接滴定法一、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，达到终点时，稍过量的还原糖把蓝色的次甲基蓝指示剂还原为无色，而显出氧化亚铜的鲜红色。
根据样品液消耗体积，计算出样品中还原糖的含量。
各步反应式（以葡萄糖为例）如下：(1) Cu2SO4＋2NaOH = 2Cu(OH)2↓＋Na2SO4(2) Cu(OH)2＋KNaC4H4O6= KNaC4H2O6Cu ＋2H2O(3) C6H12O6＋6KNaC4H2O6Cu＋6H2O = C6H12O7＋6KNaC4H4O6＋3Cu2O↓＋H2CO3从上述反应式可知，1mol葡萄糖可以将6mol Cu2＋还原为Cu+。
但实际上此反应为非定量反应，即不能根据反应式直接计算出还原糖含量。
因此在测定过程中要严格遵守所规定的操作条件，如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。
二、适用范围及特点本法又称快速法，特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。
适用于各类食品中还原糖的测定。
但测定酱油、深色果汁等样品时因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。
本法是国家标准分析方法。
三、试剂及玻皿配置仪器 1. 200mL 烧杯 2 个 2. 100mL、250mL、1000mL 容量瓶各 1 个3. 5.0mL 移液管 4 支4. 25mL、 100mL 量筒各 1 个5. 250mL 锥形瓶 4 个6. 800W 电炉 1 个7. 恒温水浴锅、干燥箱8. 碱式滴定装置 1 套9. 玻璃珠（适量） 10. 滤纸、漏斗及过滤装置 11. 分析天平试剂 1. 碱性酒石酸铜甲液：称取 15g硫酸铜(Cu2SO4·5H2O )及 0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到 1000mL。
2. 碱性酒石酸铜乙液：称取 50g 酒石酸钾钠及75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至 1000mL, 贮存于橡皮塞玻璃瓶中。
3. 乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]，加 3mL冰醋酸，加水溶解并稀释到 100mL。
4. 10.6％亚铁氰化钾溶液：称取 10.6g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6· 3H2O]溶于水中，稀释至 100mL。
5. 葡萄糖标准溶液：准确称取 1.0000g 经过98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入 1000mL 容量瓶中，加入 5mL 盐酸(防止微生物生长)，用水稀释到 1000mL。
四、测定方法（1）样品处理视样品含糖量的多少，称取 2～10g 样品。
例如面粉，准确称样 10 克左右于 200mL 烧杯中,加入 100～150mL 温水，搅拌，置于 45℃恒温水浴锅中，放置 45min，中间不时搅拌，取出，将提取液移入 250mL 容量瓶中，慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，摇匀后静置 30min。
用干燥滤纸过滤，弃去 15～20mL 初滤液，收集滤液备用。
(2) 碱性酒石酸铜溶液的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各 5mL，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加玻璃珠 3 粒。
从滴定管滴加约 9mL 葡萄糖标准溶液，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾 30秒钟后，趁热以每 2 秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
平行操作 3 次，取其平均值，按下式计算 10mL 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量。
F = C×VS式中：F——10mL 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量, mgC——葡萄糖标准溶液的浓度，mg／mL；V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，SmL。
(3) 样品溶液预滴定吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各 5.00mL，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加玻璃珠 3 粒，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾30 秒钟后，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。
待溶液蓝色变浅时，以每 2 秒 1 滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录样品溶液消耗的体积。
(4) 样品溶液精确滴定吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各 5.00mL，置于 150mL 锥形瓶中，加玻璃珠 3 粒，从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少 1mL 的样品溶液，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾 30 秒钟后，以每 2 秒 1 滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点。
记录消耗样品溶液的总体积。
平行操作 3 次，取平均值。
五、结果计算式中：m——样品质量，g，F ——10mL 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg；Vx ——测定时消耗样品溶液的平均体积，mL；V ——样品溶液的定容体积，mL。
六、说明与讨论1.碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都可被氧化，所以测得的是总还原糖量。
2.本法是根据一定量的碱性酒石酸铜溶液(Cu2+量一定)消耗的样液量来计算样液中还原糖含量，反应体系中Cu2+的含量是定量的基础，因此在样品处理时，不能用铜盐作为澄清剂，以免样液中引入Cu2+，得到错误的结果。
3. 次甲基蓝也是一种氧化剂，但在测定条件下氧化能力比Cu2+弱，故还原糖先与Cu2+反应，Cu2+完全反应后．稍过量的还原糖才与次甲基蓝指示剂反应，使之由蓝色变为无色，指示到达终点。
4. 为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物，而不再析出红色沉淀。
5. 碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。
6. 滴定必须在沸腾条件下进行，其原因一是可以加快还原糖与Cu2+的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，无色的还原型次甲基蓝与空气中氧接触时又会被氧化为蓝色的氧化型。
此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。
保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。
7. 滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。
8. 样品溶液预测的目的；一是通过预测可了解样品溶液浓度是否合适( 1mg/mL 左右)，样液的浓度应与标准糖液的浓度相近，使预测时消耗样液量在 10mL 左右；二是通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少 1mL 左右的样液，只留下 1mL 左右样液在续滴定时加入，以保证在 1min 内完成续滴定工作，提高测定的准确度。
9. 影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度、煮沸时间和滴定速度。
反应液的碱度直接影响二价铜与还原糖反应的速度、反应进行的程度及测定结果。
因此，必须严格控制反应液的体积，标定和测定时消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致。
热源一般采用 800w 电炉，热源强度应控制在使反应液在 2 min 内沸腾，且应保持一致。
沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大，一般沸腾时间短，消耗糖液多；滴定速度过快，消耗糖量多。
因此，测定时应严格控制上述实验条件，应力求一致。
平行试验样液消耗量相差不应超过0.1mL。
（二）3,5-二硝基水杨酸比色法一、实验原理在氢氧化钠和丙三醇存在下，还原糖能将3，5－二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基，生成氨基化合物。
此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系。
二、实验材料、主要仪器和试剂1．实验材料面粉2．主要仪器（1）具塞玻璃刻度试管：20 mL ×11 （2）滤纸（3）烧杯：100 mL×2 （4）三角瓶：100 mL×1 （5）容量瓶：100 mL×3 （6）刻度吸管：1mL×1；2 mL×2；10 mL×1 （7）恒温水浴锅（8）电炉（9）漏斗（10）天平（11）分光光度计3．试剂（1）1mg/mL葡萄糖标准液准确称取80 ℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100 mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100 mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5 g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000 mL 容量瓶中，加入2 mol/L氢氧化钠溶液325 mL，再加入45 g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000 mL。
三、操作步骤1. 制作葡萄糖标准曲线取7支20 mL具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1 mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。
表1 葡萄糖标准曲线制作管号1mg/mL葡萄糖标准液（mL）蒸馏水（mL）DNS（mL）葡萄糖含量（mg）光密度值（OD-540nm）0 0 2 1.5 01 0.2 1.8 1.5 0.22 0.4 1.6 1.5 0.43 0.6 1.4 1.5 0.64 0.8 1.2 1.5 0.85 1.0 1.0 1.5 1.06 1.2 0.8 1.5 1.2将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，用冷水迅速冷却至室温，用蒸馏水定容至20 mL，加塞后颠倒混匀。
调分光光度计波长至540 nm，用0号管调零点，等后面7~10号管准备好后，测出1～6号管的光密度值。
以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。
2. 样品中还原糖的测定（1）还原糖的提取准确称取3.00 g食用面粉，放入100 mL烧杯中，先用少量蒸馏水调成糊状，然后加入50 mL 蒸馏水，搅匀，置于50 ℃恒温水浴中保温20 min，不时搅拌，使还原糖浸出。
过滤，将滤液全部收集在100 mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，即为还原糖提取液。
（2）显色和比色取2支20 mL具塞刻度试管，编号，按表2所示分别加入待测液和显色剂，将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，冷水迅速冷却至室温，用蒸馏水定容至20 mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。