Waters e2695高效液相色谱仪操作规程
Waters_2695_型高效液相色谱仪操作方法
Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机（或氦气脱气机），可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时，仪器进入待命状态。
2 溶剂管理系统的准备2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按【Menu/Status 】，进入“Status （1 ）”屏幕，光标选“Degasser ”，按【Enter 】，显示选项屏幕，光标下移选“Continuous ”，按【Enter 】。
2.2 启动溶剂管理系统2.2.1 干启动，当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status （1 ）”屏幕下，按【Direct Function 】，光标选“Dry Prime ”，按【Enter 】，显示“Dry Prime ”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如【OpenA 】，光标选“Duration ”，按数字键输入5min ，按【Continue 】，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2 湿启动在“Status （1 ）”屏幕下，光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相，输入10 0％，按【Direct Function 】，光标选“Wet Prime ”，按【Enter 】，显示“Wet Prime ”屏幕，输入7.5Ml/min 和6min ，按【OK 】，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
Waters2695操作规程
Waters2695高效液相色谱操作规程[开机程序]1. 状态检查：1）检查仪器外观是否完好2）检查各种线缆连接是否稳固，外表有无损伤痕迹3）确认环境温度在15至35℃之间4）相对湿度在20%至80%之间2．配件安装：无3. 接线要求：1）高效液相色谱主机电源2）连接电脑主机和显示器电源4. 开机步骤：1）打开电脑电源，进入windows系统2）打开高效液相色谱电源，仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。
[测试步骤]1. 进入软件1）双击电脑桌面上的Empower快捷图标，出现Empower登陆窗口。
输入用户名与密码，默认账号为“system”，密码为“manager”，点击“OK”进入Empower 工作站。
2）选择“运行样品”界面，点击“确定”,然后选择待选定的操作项目以及色谱系统2 编辑仪器方法和方法组1）在“运行样品”界面中，监视区单击方法组编辑向导。
2）选择新建按钮，弹出仪器方法编辑器。
3）通用编辑页面中，可设置单次输送体积，查看脱气选项，确认设置正确，选择等度或者梯度，总流量以及流动相配比等选项。
4）单击2475图标，弹出2475编辑界面，在波长模式中选择相应的波长模式，单波长或者双波长，输入所需的波长，选择相应的采样速率，一般为2点/秒。
5）点击“文件”，选择“另存为”，输入仪器方法名称，点击“保存”，退出。
6）在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步”。
7）在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有合适的方法选择"无处理"、"无报告"），点击“下一步”。
8）输入方法组名称，单击"完成"。
3 运行方法进样1）在“运行样品”界面中，选择相应的仪器方法，点击“监视器”，在监视窗口监视基线至系统平衡，停止系统监视状态，点击停止按钮。
单进样，点击参数编辑快捷方式进入定义单进样参数编辑界面，输入样品名、功能、方法组等参数。
液相色谱仪操作规程
1 目的规范Waters e2695液相色谱仪的操作规程，正确使用本仪器，保证检测工作顺利进行以及操作人员、设备、周围环境的安全。
2 适用范围本指导书适用于Waters e2695液相色谱仪、2489紫外检测器及随机工作站。
3 职责3.1操作人员按本规程操作仪器，对仪器进行日常维护，作使用登记。
3.2保管人员负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期维护，保养。
3.3科室负责人负责对仪器综合管理。
4 仪器性能指标4.1.Alliance e2695系统4.1.1 泵/溶剂管理系统：相互独立控制的线性双柱塞驱动装置,双压力传感器反馈回路, 无脉动, 无需混合器和阻尼器。
4.1.1.1溶剂数：44.1.1.2流速范围：0.001--10.000ml/min, 以0.001ml为增量4.1.1.3流速精度：±0.075%RSD4.1.1.4流速准确度：±1.0%RSD4.1.1.5操作压力：0-6000psi(0-410bar) ，可设上 ,下限4.1.1.6混合范围：0.0~100.0%，以 1% 增量4.1.1.7梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化4.1.1.8梯度精度：±0.15%，不随反压变化4.1.1.9压缩补偿：自动，连续4.1.1.10梯度曲线：多种梯度曲线: 线性, 凸线和凹线等11种4.1.1.11系统体积：< 650μL, 不随反压变化4.1.2 自动进样器/样品管理系统：4.1.2.1样品盘数：120位,分5个样品盘,每个样品盘可放置24个2ml样品瓶4.1.2.2进样次数：每个样品可进样1到99次4.1.2.3进样精度：<0.5%RSD4.1.2.4样品污染度：<0.1%4.1.2.5进样准确度：±1 uL4.1.2.6进样体积：0.1 to 100 uL4.1.2.7进样线性度：> 0.999 coefficient of deviation4.1.3 在线柱塞清洗装置：可在线清洗柱塞杆，可防止因缓冲盐溶液结晶而造成的堵塞，延长密封圈的使用寿命。
waters2695操作规程
进样器进样量范围
0.1-100 μL，进样精度：<±1%。
检测器波长范围
UV-Vis检测器通常为190-600 nm，荧光 检测器则根据具体型号而定。
色谱柱规格
内径2.1-4.6 mm，长度50-300 mm，填 料粒径1.5-5 μm。
02
安装与调试
安装前准备工作
确认waters2695仪 器型号和配置，准备 相应的安装工具和材 料。
样品前处理要求
01
02
03
样品清洁度
确保样品中无颗粒物或杂 质，以避免对仪器造成损 害或影响分析结果。
适当的溶剂
选择与样品相容的溶剂， 确保样品在溶剂中均匀分 散，提高分析的准确性。
样品浓度
根据分析方法的要求，调 整样品的浓度至合适范围 ，避免过高或过低的浓度 导致分析误差。
进样针使用注意事项
选择合适的进样针
实验前准备
1
2
检查waters2695系统状态，确保各部件正常工作 。
3
准备实验所需试剂和标准品，检查其纯度和有效 期。
实验操作规范流程
01
清洁实验台面和仪器表面，避免污染。
02
实验操作过程
03 按照实验需求设置waters2695参数，如流速、压 力、温度等。
实验操作规范流程
01 连接色谱柱和检测器，确保流路畅通。
THANKS
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软件功能概述
方法开发与管理
支持多种液相色谱方法的创建 、编辑和管理。
数据采集与处理
实时采集色谱数据，提供多种 数据处理选项，如峰检测、积 分、校正等。
报告生成与导出
生成定制化的分析报告，支持 多种数据格式导出。
Waters e2695高效液相色谱仪操作规程
Waters e2695下效液相色谱仪支配规程之阳早格格创做1 手段指挥战典型Waters e 2695下效液相色谱仪的支配.2适用范畴该支配规程适用于Water e 2695下效液相色谱仪的支配.3工做考验员应按支配规程举止仪器支配，品量监督员控造监督该支配规程的粗确实止.4支配本仪器由Waters e 2695分散单元、Waters 2998两极管阵列检测器、Waters ELSD 2424挥收光集射检测器、Empower3色谱处事站战挨印机组成. Waters e2695分散单元包罗四元梯度洗脱的溶剂输支系统，四通道正在线实空脱气，可容纳120个样品瓶的自动分散单元，柱温箱，内置的柱塞杆稀启垫荡涤系统，溶剂瓶托盘；隐现器，键盘用户界里.4.1.2.1依次交通Waters e 2695分散单元、检测器、估计机战挨印机的电源.4.1.2.2交通Waters e2695分散单元后，约20s仪器开初自检，约3mn内各部件的初初化完成，待主屏幕上圆题目区出现“Idle”时，仪器加进待命状态.确认所有溶剂管路皆充谦溶剂，按[Menu／Status】，加进“Status(1)”屏幕，光标选“Degasser”，按[Enter】.当色谱仪流路不溶剂大概系统中有气氛时，需举止搞灌注(DryPrime)，注进震动相.可则，举止干灌注(Wet Prime)以驱除气泡.搞灌注：按主机里板上[Menu／Status】，加进“Status(1)”隐现，按[Direct Function】，采用“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选“DurationIIi按数字键输进5分钟，按”COntinue”，待规定时间中断后，沉复支配，使所需的溶剂通道注谦震动相.干灌注：加进“Status(1)”隐现，选溶剂通道，输进100％，按[DirectFunction]，选“Wet Prime”，按【OK】，根据里板提示树坐流速即时间(默认流速为7．5ml／min，普遍不必变动，时间可树坐为5min)，按【0K】.正在“status(1)”，屏幕下，光标选“Composition”，输进震动相的组成.按【Direct Function]，光标选“Purge Injector”，按【Enter]，隐现“Purge Injector”屏幕，输进“Sam ple Loop Volumes6．0”，光标下移“Compression Check”，按任性数字键，按【OK].正在主屏幕下，按【Diag]，隐现“Diagnostics”屏幕，按【Prime Ndl Wash】，隐现“Prime Needle Wash”屏幕，按[Start]，30s内应睹溶剂从兴液排搁心流出.按【Close】、【Exit】.正在主屏幕下，按【Diag]，隐现”Diagnostics”屏幕，按【Prime Seal Wash】，隐现“Prime Seal Wash”屏幕，按[Start]，30s内应睹溶剂从兴液排搁心流出.按【Close】、【Exit】.待排搁心有火流出，按【Half】、【Close】、【Exit】.挨开样品舱门，隐现"Door is Open"屏幕，将样品盘与出，把样品瓶拔出样品盘后，拆进样品盘，按【Next】直至所有样品盘拆毕，关好舱门.换上考验所需的色谱柱战震动相，加进"Status(1)”隐现，采用流路、设定流速、柱温，按【Enter】开初注进震动相，常常情况下约1 5～30分钟色谱柱可达到仄稳，不妨开初进样，支集数据.5 Empower 3硬件的应用5.1 建数据支集要领5.1.1单打电脑屏幕上的"Empower"快速图标，出现Empower登录界里，输进用户名战暗号.5.1.2单打下档键，采用用户典型战QuickStart界里.5.1.3采用QuickStart界里，面打“决定”，而后采用选定的支配名目以及色谱系统(仅查看数据可采用色谱系统中的“不系统”)，单打“决定”.5.1.4登录Empower的QuickStarlt界里.5.2 编写仪器要领战要领组（以e2695_2998为例）.5.2.1．支集栏单打“要领组编写背导”：5.2.2采用“新建”选项.5.2.3弹出仪器要领编写器.5.2.4单打“2695”，弹出2695编写界里.5.2.4.1 Aliance系统(包罗2695、2795战2695D)通用编写页里中，可采用“单次输支体积”，请针对于分歧的流速选定适合的单次输支体积，以保证最好的流速粗度与准度.5.2.4.2查看脱气选项，确认树坐粗确.5.2.4.3流量选项中树坐“泵模式”、“总流量”以及震动相配比.5.2.5单打2998，弹出2998编写界里.5.2.5.1 3D数据支集：正在通用栏中采用开用3D数据，输进检测波少的范畴；5.2.5.2支集2D数据，面打“2D通道”，最多可共时支集8个分歧波少的通道的数据.5.2.6面打“文献”，采用“另存为”：输进仪器要领称呼，面打“保存”；面打“文献”，采用“退出”.5.2.7正在被选项中采用所需的仪器要领称呼，面打“下一步(N)”.5.2.8正在下推菜单中采用所需的处理要领战报告要领（如果不符合的要领采用“无处理”、“无报告”)，面打下一步.5.2.9输进要领组称呼，单打“完成”.面打加进“仄稳系统／监视基线”界里，采用相映的仪器要领，面打“仄稳／监视器，正在监视窗心监视基线至系统仄稳，停止系统监视状态，面打“进样”.5.3.1．单进样：面打，加进“定义单进样参数”编写界里，输进样品名、功能、要领组等参数，面打“进样”.5.3.2使用背导建坐样品组战样品组要领.5.3.2.1采用“运止样品”，而后单打“样品行列”，加进样品列表.5.3.2.2单打“新建样品组背导”，建坐样品组.5.3.2.3采用创造样品组要领典型为“Lc大概PDA”，而后面打“定义样品板”.5.3.2.4正在“采用尺度进样正在何处开初”中采用符合的选项.查看开初加载样品瓶的位子是可粗确，面打“下一步”.5.3.2.5正在形貌标样中需要树坐一下实量：样品组中的标样数：×；每瓶标样进样次数：X；进样体积：x；运止时间：XX；要领组XXX；面打“选项”：输进下一进样延缓时间X；面打下一步.5.3.2.6样品数：X；每瓶样品进样次数：X；进样体积：X；运止时间：X；要领组X；面打选项：输进下一进样延缓时间X；面打下一步.5.3.2.7正在辨别尺度样界里中，输进标样称呼，删量后缀使用1．正在辨别样品界里中，输进样品称呼，删量后缀使用a.面打下一步.5.3.2.8运止模式选项中采用“只尝试”.查看纲要，面打下一步.【注：弹出组分编写器，输进标样中每个组分的称呼(内标不需要输进含量).不妨直交关关该窗心，正在处理数据的时间再增加】.5.3.2.9面打完成，正在菜单栏中采用文献.5.3.2.10为要领组命名并保存样品组要领.5.3.2.11单打“样品行列”，挨开运止样品窗心，面打运止目前样品组要领键，采用运止.5.3.2.11采用需运止的样品组称呼，面打运止.5.3.2.13样品组运止历程中，正在“正正在运止”栏中正正在运止以及运止完成的样品以红色隐现.(注：以背导建坐的样品组尾止功能普遍为扫除矫正，普遍正在运止样品前简略该止大概改为“仄稳”.)5.4.1 2D数据处理要领5.4.1.1单打“欣赏名目”键，正在“样品组”中采用目标样品组.5.4.1.2正在样品组上面打鼠标左键采用“查看相关→通道”，样品组正在单个通道中隐现.5.4.1.3采用定最矮浓度的标样，面打鼠标左键，采用下推菜单中的查看，会隐现已处理的色谱图形.5.4.1.4面打处理要领背导快速键，采用创造新处理要领，面打决定.5.4.1.5确认处理典型为LC，积分办法可采用为保守，再面打使用处理要领背导，采用决定.5.4.1.6常按鼠标左键，采用色谱图上最窄峰.(注：正在色谱图天区圆不妨搁大某个需要监测的峰.面打鼠标左键齐视图不妨还本色谱图.)5.4.1.7正在色谱图的积分界里采用一段典型基线动做积分的阈值，面打下一步.5.4.1.8常按鼠标左键，正在基线上采用积分的起止时间面.5.4.1.9提议采用最小峰下，采用所要积分的下度最小峰(大概键进相映数值).小于此峰下90％的峰将不被积分.面打下一步.5.4.1.10定量要领采用里积，组分疑息采用含量，矫正典型采用线性.面打下一步.5.4.1.11跨通道内标样界里面打可.5.4.1.12果为采用的是标样，面打峰1不妨瞅到一个下推菜单采用相映的组分称呼大概者键进运止样品相映的称呼.增加组分称呼相匹配的尺度含量，而后面打下一步.5.4.1.13如果是多面矫正样品，跳过增加含量的窗心直交面打下一步.(单面矫正可正在那里增加含量).5.4.1.14采用中标法：5.4.1.15采用简单内标样，需要正在下推菜单中采用大概键进内标相映的称呼，而后面打下一步.5.4.1.16采用多沉内标需要输进所有内目标称呼.5.4.1.17为处理要领命名，面打完成.色谱图界里会隐现该处理要领应用后的色谱结果，包罗积分.5.4.1.18如需为积分要领增加积分事变，鼠标左键面打色谱图窗心，采用增加积分事变.积分事变所示功能会坐刻应用于处理要领中.5.4.1.19编写处理要领的下档功能需要采用快速键.有所有变动均需再次保存处理圆法.5.4.1.20面打峰表底部可预览2D通道战峰.5.4.1.21面打“欣赏名目”键，采用“通道”大概“样品组”标签栏，左键面打目标样品组大概通道并采用处理.5.4.1.22正在处理界里，采用使用指定的处理要领，采用相映的处理要领称呼，面打浑除矫正，采用矫正并定量.5.4.1.23面打决定，数据处理，爆收截止.可正在截止栏中查看.5.4.2.1面打“欣赏名目”键，正在“样品组”中采用目标样品组.5.4.2.2正在样品组上面打鼠标左键采用查看相关通道，样品组中各个数据正在单个通道中隐现.5.4.2.3采用定量最矮浓度的标样，面打鼠标左键，采用下推菜单中的查看.5.4.2.4正在预览界里采用“表面线”标签栏，会隐现已处理的表面图.5.4.2.5从处理大概左键下推菜单中采用提与色谱选项.5.4.2.6键进所需要提与的波少，按回车键，得到该波少的色谱图.5.4.2.7面打处理要领快速键，采用创造新处理要领，确认处理典型为PDA，积分办法可采用为保守，再面打使用处理要领背导，面打决定.5.4.2.8常按鼠标左键，采用色谱图上最窄峰.(注：正在色谱图天区内不妨搁大某个需要监测的峰.面打鼠标左键采用齐视图不妨还本色谱图.)5.4.2.9正在色谱图的积分界里采用一段仄滑的基线动做积分的阈值，面打下一步.5.4.2.10常按鼠标左键，正在基线上采用积分的起止时间面.5.4.2.11提议采用最小峰下，采用所要积分的下度最小峰(大概键进相映数值).小于此峰下90％的峰将不被积分.面打下一步.5.4.2.12定量要领采用里积，组分疑息采用含量，矫正典型采用线性.面打下一步.5.4.2.13跨通道内标样界里面打可.5.4.2.14果为采用的是标样，面打峰1不妨瞅到一个下推菜单采用相映的组分称呼大概者键进运止样品相映的称呼.增加组分称呼相匹配的尺度含量，而后面打下一步.5.4.2.15如果是多浓度面的一组标样，跳过增加含量的窗心直交面打下一步.(简单浓度不妨正在那里增加含量).5.4.2.16采用中标法：5.4.2.17采用内标法简单内标样矫正，需要正在下推菜单中采用大概键进内标相映的称呼，而后面打下一步.5.4.2.18采用多沉内标需要输进所有内目标称呼.5.4.2.19 PDA杂化及匹配选项：5.4.2.20为处理要领命名，面打完成.色谱图界里会隐现该处理要领应用后的色谱结果，包罗积分.5.4.2.21正在“文献”下推菜单中采用“另存为”要领组，将该处理要领存进要领组.(注：3D数据必须用要领组处理.)5.4.2.22如需为积分要领增加积分事变，鼠标左键面打色谱图窗心，采用增加积分事件.积分事变所示功能会坐刻应用于处理要领中.5.4.2.23编写处理要领的下档功能需要采用快速键.5.4.2.24面打“欣赏名目”键，采用“通道”大概“样品组”标签栏，左键面打目标样品组大概通道并采用处理.5.4.2.25正在处理界里，采用使用指定的处理要领，采用相映的处理要领称呼，面打浑除矫正，采用矫正并定量.5.4.2.26面打决定，数据处理，爆收截止.可正在截止栏中查看.6查看截止战视图筛选6.1采用“截止”标签栏，使用视图筛选器从下推菜单中采用即日.6.2采用需查看的截止，左键面打采用查看.6.3查看截止面打快速键，查看每个组分的矫正直线.切换至主窗心面打.7预览截止并创造报告要领7.1面打“预览名目”切换回截止表隐现状态.7.2选中一个大概多个截止，面打鼠标左键采用预览.7.3若采用一个截止，正在预览窗心采用使用一下要领：使用缺省单个报告，单打决定.7.4预览报告并查看数据.面打“编写要领”键建改报告要领.7.5单打色谱图大概峰截止表编写报告属性.7.6面打文献，采用保存，为新建的报告要领命名.面打预览报告.7.7如需将报告保存为PDF要领，面打.8要领组的建坐以上道解了怎么样建坐仪器要领、处理要领战报告要领，推拢不妨得到一个要领组.8.1监视区单打要领组编写背导：8.2弹出新要领组：采用仪器要领界里.采用相映的仪器要领，面打下一步.8.3采用缺省要领界里采用相映的处理要领战报告要领，导出要领缺省.面打下一步.8.4命名要领组，面打完成.8.5正在运止样品时，要领组／报告要领中调用该要领组，不妨自动完成支集、处理、报告数据过程.9数据管造9.1.1正在QuickStart界里，采用菜单“管造一备份目前名目”.9.1.2出现“名目备份背导”，面打下一步.9.1.3出现“名目备份背导一采用手段天’’通过欣赏采用手段天，提议采用正在非支配系统拆置的硬盘分区内.采用完成，单打“决定”关关后，回到名目备份窗心，单打“下一步”.9.1.4出现“名目备份背导一备份隐现”.确认数据的复造已经乐成，再单打“下一步”.9.1.5出现备份数据背导一开初界里.面打完成，中断备份. 9.2.1正在QuickStart界里，采用菜单“管造”，下推菜单中采用“还本名目”.9.2.2出现“还本名目背导”.通过“欣赏”采用被还本的名目天圆的路径，单打“确定”.9.2.3单打下一步.9.2.4如出现类似以下实量的对于话框(名目名test已经被使用.请输进另一个名目名)，则需为还本的名目另起一个名字.9.2.5正在“输进磁盘空间配额’’页中，输进名目名，并注意此处的“表空间配额”应不得小于欲还本的名目本有的配额(数据文献大小)，而后单打“下一步”.9.2.6如果需要，不妨正在此页里中，采用该名目是可属于某个女名目.9.2.7正在“还本隐现’’中，如果出现如下对于话框(还本的名目需要被革新到下一个版本)，单打“决定”.(注：当还本由Millennium大概Empower的先前版本创造的名目时，需要为该名目采用时区.)9.2.8正在“还本隐现”中，等待数据还本中断后，单打“完成”.(注：提示：正在沉拆Empower硬件之后，不妨通过还本名目将相关的名目数据举止还本.) 10名目管造10.1.1加进到Empower3的QuickStart界里.正在菜单中采用“管造一创造新名目”.10.1.2出现“新名目背导”的对于话框，采用新建名手段女名目：10.1.3单打“下一步”，弹出“新建名目背导一表空间”，表空间50MB为默认树坐，可根据需要删减.10.1.4出现“新建名目背导一选项”页.采用用于本名手段选项，如果无法决定适合的树坐，请交受默认选项.单打“下一步”.10.1.5新建名目背导一考察统造：根据需要采用树坐对于您所创造的名目具备考察权力的用户战用户组，大概者交受缺省的选项，而后单打“下一步”.10.1.6新建名目背导一复造所选项：需要采用复造的名目，普遍采用Defaults名目.(注：此页的复造是指从另一个名目复造现有树坐，不妨复造名手段“视图筛选器”、“黑定义字段”、“要领”战“参数”.所以，普遍不允许变动大概使用Defaults名目中的所有数据.)正在建坐了新名目以去，不妨根据需要正在分歧的名目之间举止切换.10.2.1加进Empower3的Quick$tart界里，采用菜单“管造一改变系统／名目”.10.2.2改变系统／名目：根据需要举止采用名目大概者采用系统(如果存留两个大概者两个以上的系统).采用完成后，单打决定.如果采用了“正在该窗心切换名目／系统”，目前的名目／系统会被新选中的名目／系统所代替，如果采用了“为名目／系统挨开新窗心”，则会为选中的名目沉新挨开其余一个QuiekStart的界里.10.2.3正在新的名目／系统的QuickStart界里内即可举止下一步的支配.10.3.1正在QuickStart界里，采用菜单“视图一系统”，查看系统.10.3.2出现系统疑息窗心.正在该窗心中，不妨正在天面栏中查看隐现的天面是可与仪器的树坐相共.别的，可从“仪器”选项卡里的“仄常?”一栏中查看仪器状态，正在仄常状态下，应隐现“是”字样.如有仪器正在“仄常?”一栏出现“可”，可单打“扫描仪器”举止查看.如查看后隐现“是”，即回复仄常.(注：当仪器联机出现过失，大概者出现“仪器堕落”字样的时间，即可通过支集服务器属性去查看仪器状态，推断大概引起该问题的本果.)10.3.3.1正在QuickStart界里，选菜单“管造一新建系统”. 10.3.3.2出现“新建色谱系统背导一输进典型”页里，采用系统典型为“新建系统”.而后单打“下一步”.10.3.3.3出现“新建色谱系统背导一采用系统”页里，正在“可用仪器”组中，选中新系统的组件，而后用鼠标拖拽至左侧“新系统仪器”组中.采用完成，单打“下一步”.如有误选，则如法，将误选的新系统仪器，用鼠标拖拽回“可用仪器”组中.(注：可沉复使用已摆设系统中的仪器，但是一次只可有一个使用共享仪器的系统不妨正在线.)10.3.3.4出现“新建色谱系统背导一考察统造”页里.(注：您创造系统时，您即为系统的所有者.系统创造后，不妨建改系统的属性及变动所有者、考察权力战摆设等仔细疑息.) 11关机11.1使用完成，按确定用适合的溶剂浑洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针战柱塞杆稀启垫，保证2695分散单元已实足浑洗搞洁后，关关电源开关.11.2数据支集完成后，关关所用检测器的电源开关.11.3数据处理并挨印报告后，关关估计机战挨印机电源开关.11.4考查中断，正在仪器使用记录表上备案，仪器管造人员考查签名.12仪器维护与调养12.1屡屡使用前后，查看分散单元上各溶剂瓶中溶剂的量，即时补充各瓶中相映的溶剂.12.2屡屡使用前后，挨开分散单元最底下的分散泵的舱门，查看各管路交心，有无慢冲盐析出的情况.如出现红色盐渍，应拆下其天圆的部件，先后用火战甲醇超声荡涤，并安拆好.12.3随时查看仪器的使用记录.12.4如万古间不使用该仪器，则需每半年依照《下效液相色谱仪功夫核查规程》查看一次，并搞好维护记录.。
WATERS_2695操作流程
WATERS_2695操作流程WATERS 2695仪器操作简明流程2695分离单元使用操作：1)开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。
2)脱气（Degas）按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
3)设定柱温（可选项）在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。
（可在工作站方法中设置）4)Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。
5)Wet Prime在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
6)Purge Injector（注射器排气泡及清洗）进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。
7)Prime Needle Wash（清洗注射针）进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。
注：以上4）-7）为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。
若发现注射器中有气泡，则可重复6）直至排除。
如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4））。
WATERS e2695 高效液相色谱仪使用说明书
WATERS e2695 高效液相色谱仪使用说明书（入门用前必读）青岛科技大学化工测试中心2015-12-22安全指南遵守安全指南可以防止对系统或设备造成损害。
注意：不要将设备置于阳光直射的地方或靠近空调通风口。
注意：在不确定的情况下，不要删除工作站中的任何文件。
注意：为了避免损坏检测器的流动池，不要触摸流动池窗口。
小心：为避免被灼伤，在拆下灯泡进行更换或调整前，请至少提前30 分钟关闭灯泡。
小心：为避免电击事故和人身伤害，请务必在执行维护工作前关闭高压泵、检测器并拔下电源下电源线。
小心：为避免化学或电气危险，在操作系统时，请务必遵守实验室的安全规定。
目录第一章 WATERS 600 简介 (1)第二章基本操作要领 (2)2.1 操作规程 (2)2.2 运行分析样品 (2)第三章数据的处理 (15)3.1 创建方法组定量分析 (15)外标法：单点校正 (15)未知样结果计算 (26)外标法：多点校正 (29)内标法校正 (32)3.2 定性结果 (39)3.3 打印报告 (42)第四章文件管理 (46)第一章 WATERS 600 简介该高效液相色谱系统是由Waters600高压泵及控制器、氦气脱气系统、Waters 2996二极管阵列检测器和Millennium324.02版本（中文版）工作站构成。
该系统所有的控制指令和数据处理都可以通过计算计完成。
该系统是分析实验室不可缺少的仪器设备，是有机物定量分析的最佳手段之一，另外的突出优点是可以对色谱峰的纯度进行判断。
建立色谱库后可以实现定性分析。
第二章基本操作要领2.1 操作规程2.1.1 制备标样和样品：配置合适浓度的标样；制备的样品进样前要过滤。
2.1.2使用HPLC级流动相，必要时自行制备；水为实验室2级水。
用前均需过0.45μm 滤膜。
2.1.3 流动相脱气：打开氦气(99.999%)钢瓶，调节减压阀输出压力0.3~0.6MPa。
确认流动相管线和相对应的脱气管线。
Waters e2695操作规程
2
Status / Control 画面下： (1) Status (1) 画面
n n n
n
清洗柱塞密封垫(Seal Wash)的溶液配制： 含5%-10%甲醇的 超纯水； 洗针液(Needle Wash)的配制： 50%甲醇： 50%水(反相实验)； 95% 乙腈： 5%水(HILIC方法)；
6
附录一
反相色谱柱的使用注意事项 说明：
n
新色谱柱的安装和平衡
使用新色谱柱前需要对色谱柱进行润湿和平衡， 注意确保 您所使用的流动相和色谱柱储存溶剂 “相溶” 。 Symmetry/ Sunfire反相色谱柱是在100%乙腈中储存的。 a) 依次用水和乙腈（或甲醇） 冲洗液相色谱泵系统中含有 缓冲盐的流路， 然后将色谱柱按照标签上的箭头方向`` 连接到进样器或保护柱的出口端， 标签上的箭头指向 检测器流向(先不要接检测器)。 b) 在0.1ml/min流速条件下用100%纯甲醇或乙腈冲洗色谱 柱， 然后在5分钟内将流速升至1 ml/min。 c)当溶液均匀地从柱子出口流出时， 停掉流速， 将色谱柱 出口端接到检测器上 （这样操作可以避免气泡进入检 测系统， 并且可快速达到基线平衡） 。 d) 按照步骤b)的方法逐渐提高流速。 e)当压力达到稳定值并且基线平稳后， 缓慢降低流速， 停泵。 f)用5:95乙腈:水（体积比） 冲洗色谱柱30分钟(注意流速 要从0.1 ml/min缓慢上升至1 ml/min)。 g) 换上含有离子对试剂的流动相， 对色谱柱进行平衡， 直 到基线平稳 。 h)进标准溶液和样品溶液进行分析。
操作步骤：
1.回到Main的画面， 选择Diag， 选择 Prime Ndl Wash。 2.缺省设定值为30秒， 若想要多清洗几次时， 请按Start Again。
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Watｅrs e2６95高效液相色谱仪操作规程1 目得指导与规范Ｗaters e2６９5高效液相色谱仪得操作。
２适用范围该操作规程适用于Wａter e 26９5高效液相色谱仪得操作。
３职责检验员应按操作规程进行仪器操作,质量监督员负责监督该操作规程得正确执行。
4操作４、1仪器组成与开机4．1.1仪器组成本仪器由Watｅrs e 26９5分离单元、Waｔers2998二极管阵列检测器、Ｗaters ELＳD ２42４蒸发光散射检测器、Ｅｍpoｗeｒ3色谱工作站与打印机组成。
Wａtｅｒｓe269５分离单元包括四元梯度洗脱得溶剂输送系统,四通道在线真空脱气，可容纳120个样品瓶得自动分离单元,柱温箱,内置得柱塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘;显示器,键盘用户界面。
４．1.2开机4.1.2、1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机与打印机得电源。
4．1.２、2接通Waterｓe2695分离单元后,约２0s仪器开始自检,约3ｍn内各部件得初始化完成,待主屏幕上方标题区出现“Iｄle”时,仪器进入待命状态。
４、2溶剂管路系统得准备4.2.1流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂,按［Mｅnｕ/Stａtus】,进入“Ｓｔａｔｕｓ(1)”屏幕,光标选“Degassｅｒ”,按［Enteｒ】。
4.2.2灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时,需进行干灌注（DryPriｍe),注入流动相。
否则,进行湿灌注(WeｔＰｒiｍe)以驱除气泡。
干灌注:按主机面板上［Menu／Sｔａｔus】,进入“Ｓtatus（1）”显示,按[Direct Fuｎｃtion】,选择“Dry Prime”,选溶剂通道,如Ｏｐｅn A，选“DｕｒａｔionＩIi按数字键输入5分钟，按”ＣOntｉｎｕe”,待限定时间结束后,重复操作,使所需得溶剂通道注满流动相。
湿灌注:进入“Ｓｔaｔuｓ(１)”显示,选溶剂通道，输入100%，按[DirectFunction],选“Wｅt Ｐrｉme”，按【OK】,根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7、5ml ／min,一般不用更改,时间可设置为5ｍin),按【０K】。
4、3样品管理系统得准备4.3．1冲洗自动进样器在“statｕs(1)”,屏幕下,光标选“ｐositｉon”,输入流动相得组成。
按【DｉrecｔFｕｎcti ｏｎ],光标选“PurｇｅIｎjecｔoｒ”，按【Ｅnｔeｒ]，显示“Ｐurｇe Injecｔor”屏幕，输入“Sample Loop Vｏｌumes6、0”,光标下移“presｓｉon Check”,按任意数字键,按【OK]。
４.３．2冲洗进样针在主屏幕下,按【Dｉag]，显示“Diａgnosｔics”屏幕，按【PrｉmｅNdｌＷash】,显示“PrimｅNeedle Wash”屏幕，按［Start],３０s内应见溶剂从废液排放口流出。
按【Cl ｏse】、【Exit】。
４．3．３冲洗柱塞杆密封垫在主屏幕下,按【Diag]，显示”Dｉagnｏstｉcｓ”屏幕，按【Ｐrime Seal Wash】,显示“PrｉmｅSeａｌWaｓｈ”屏幕,按[Sｔaｒt］,３０s内应见溶剂从废液排放口流出。
按【Ｃlｏｓe】、【Exit】。
待排放口有水流出,按【Hａlｆ】、【Ｃlose】、【Exit】。
4.3.4装入样品与转盘打开样品舱门,显示"Ｄoor ｉs Ｏｐｅn"屏幕,将样品盘取出,把样品瓶插入样品盘后, 装入样品盘,按【Ｎext】直至所有样品盘装毕,关好舱门。
4、4色谱柱平衡换上检验所需得色谱柱与流动相,进入"Statuｓ(１)”显示，选择流路、设定流速、柱温, 按【Enter】开始注入流动相,通常情况下约1 5～30分钟色谱柱可达到平衡，可以开始进样, 采集数据。
5 Emｐｏwer 3软件得应用５、1 建数据采集方法５.1.1双击电脑屏幕上得"Ｅｍpowｅr"快捷图标,出现Eｍpower登录界面,输入用户名与密码。
5.1．2单击高级键，选择用户类型与QuickStａrｔ界面。
5.1．3选择QｕickSｔaｒt界面，点击“确定”，然后选择选定得操作项目以及色谱系统(仅查瞧数据可选择色谱系统中得“没有系统”),单击“确定”。
5.１.4登录Emｐowｅr得QuｉckStarlt界面。
5、２编辑仪器方法与方法组(以e２６9５_2998为例)。
5.2.1、采集栏单击“方法组编辑向导”：5．2.2选择“新建”选项。
5.２．3弹出仪器方法编辑器。
５.２.4单击“２695”,弹出2６95编辑界面。
５.2.4、1 Alｉaｎce系统(包括２695、2795与2６95D）通用编辑页面中,可选择“单次输送体积”，请针对不同得流速选定适当得单次输送体积，以确保最佳得流速精度与准度。
5.2.4、2查瞧脱气选项,确认设置正确。
５.2．4、3流量选项中设置“泵模式”、“总流量”以及流动相配比。
5.2.5单击2９98,弹出2998编辑界面。
５．２.5、1 3Ｄ数据采集:在通用栏中选择启用3D数据,输入检测波长得范围;５.2.５、2采集2D数据,点击“2D通道”,最多可同时采集8个不同波长得通道得数据。
5.2.６点击“文件”,选择“另存为”:输入仪器方法名称,点击“保存”;点击“文件”,选择“退出”。
5.２.7在被选项中选择所需得仪器方法名称,点击“下一步(N)”。
５.2.8在下拉菜单中选择所需得处理方法与报告方法(如果没有合适得方法选择“无处理”、“无报告”),点击下一步。
5.2．9输入方法组名称，单击“完成”。
５、3进样点击进入“平衡系统／监视基线”界面,选择相应得仪器方法,点击“平衡／监视器,在监视窗口监视基线至系统平衡,停止系统监视状态,点击“进样”。
5.3.１、单进样:点击，进入“定义单进样参数”编辑界面,输入样品名、功能、方法组等参数，点击“进样”。
5.3．2使用向导建立样品组与样品组方法。
5.3.2、1选择“运行样品”,然后单击“样品队列”，进入样品列表。
5.3.２、2单击“新建样品组向导”,建立样品组。
5.３.2、３选择创建样品组方法类型为“Lc或PDA”,然后点击“定义样品板”。
5．3.２、4在“选择标准进样在那里开始”中选择合适得选项。
检查开始加载样品瓶得位置就就是否正确，点击“下一步”。
5.3.2、5在描述标样中需要设置一下内容：样品组中得标样数:×;每瓶标样进样次数:Ｘ;进样体积:x;运行时间:XX;方法组XXX;点击“选项”:输入下一进样延迟时间Ｘ;点击下一步。
5.3.2、6样品数:X;每瓶样品进样次数：Ｘ;进样体积:X；运行时间:X;方法组X;点击选项:输入下一进样延迟时间X;点击下一步。
５.3.2、7在识别标准样界面中,输入标样名称,增量后缀使用1、在识别样品界面中,输入样品名称,增量后缀使用a。
点击下一步。
5.3.2、8运行模式选项中选择“只测试”。
查瞧摘要，点击下一步。
【注:弹出组分编辑器,输入标样中每个组分得名称(内标不需要输入含量）。
可以直接关闭该窗口,在处理数据得时候再添加】。
5．3.２、9点击完成,在菜单栏中选择文件。
5．3.2、10为方法组命名并保存样品组方法。
5.３.2、１1单击“样品队列”，打开运行样品窗口,点击运行当前样品组方法键，选择运行。
5.3.2、1１选择需运行得样品组名称,点击运行。
５.3.２、13样品组运行过程中,在“正在运行”栏中正在运行以及运行完毕得样品以红色显示。
(注:以向导建立得样品组首行功能一般为清除校正，一般在运行样品前删除该行或改为“平衡”。
)５、４建立数据处理方法５、4、1 2D数据处理方法5．4．１、1单击“浏览项目”键,在“样品组”中选择目标样品组。
５.4.1、2在样品组上点击鼠标右键选择“查瞧相关→通道”,样品组在单个通道中显示。
5.4.1、3选择定最低浓度得标样，点击鼠标右键,选择下拉菜单中得查瞧,会显示未处理得色谱图形。
5.４.1、４点击处理方法向导快捷键,选择创建新处理方法,点击确定。
5．4.1、5确认处理类型为LＣ,积分方式可选择为传统，再点击使用处理方法向导,选择确定。
５.4.１、6常按鼠标左键,选择色谱图上最窄峰。
（注：在色谱图区域方可以放大某个需要监测得峰。
点击鼠标右键全视图可以还原色谱图。
)5.4.1、７在色谱图得积分界面选择一段典型基线作为积分得阈值，点击下一步。
5．４．1、８常按鼠标左键,在基线上选取积分得起止时间点。
5．４.1、9建议选择最小峰高,选择所要积分得高度最小峰(或键入相应数值)。
小于此峰高90％得峰将不被积分。
点击下一步。
5.4.1、10定量方法选择面积,组分信息选择含量,校正类型选择线性。
点击下一步。
５.4.1、11跨通道内标样界面点击否。
5．4.1、12因为选择得就就是标样,点击峰１可以瞧到一个下拉菜单选择相应得组分名称或者键入运行样品相应得名称。
添加组分名称相匹配得标准含量,然后点击下一步。
5.4．1、1３如果就就是多点校正样品,跳过添加含量得窗口直接点击下一步。
(单点校正可在这里添加含量)。
５.4.1、１４选择外标法:5．4．1、1５选择单一内标样,需要在下拉菜单中选择或键入内标相应得名称,然后点击下一步。
5．4.1、16选择多重内标需要输入所有内标得名称。
5.４．1、17为处理方法命名,点击完成。
色谱图界面会显示该处理方法应用后得色谱结果，包括积分。
5.4.1、１8如需为积分方法添加积分事件,鼠标右键点击色谱图窗口，选择添加积分事件。
积分事件所示功能会立刻应用于处理方法中。
5．4.１、１9编辑处理方法得高级功能需要选择快捷键。
有任何更改均需再次保存处理方法。
5.4.１、２0点击峰表底部可预览2D通道与峰。
5．4.1、２1点击“浏览项目”键,选择“通道”或“样品组”标签栏,右键点击目标样品组或通道并选择处理。
５.４.1、22在处理界面,选择使用指定得处理方法,选择相应得处理方法名称，点击清除校正,选择校正并定量。
5.4.1、23点击确定,数据处理,产生结果。
可在结果栏中查瞧。
５．4.2建立3D数据处理方法5.4.2、１点击“浏览项目”键,在“样品组”中选择目标样品组。
5.4．２、2在样品组上点击鼠标右键选择查瞧相关通道,样品组中各个数据在单个通道中显示。
５．4．2、3选择定量最低浓度得标样,点击鼠标右键,选择下拉菜单中得查瞧。
5.４．2、４在预览界面选择“轮廓线”标签栏,会显示未处理得轮廓图。
5.4.2、5从处理或右键下拉菜单中选择提取色谱选项。
5.4.2、6键入所需要提取得波长,按回车键，得到该波长得色谱图。
5.4.2、７点击处理方法快捷键,选择创建新处理方法，确认处理类型为PDA,积分方式可选择为传统,再点击使用处理方法向导,点击确定。