锌离子的分光光度法测定
荧光分光光度法测定痕量锌
荧光分光光度法测定痕量锌摘要：荧光试剂水杨醛缩邻氨基苯酚在六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液介质中，能与锌离子形成稳定络合物使其荧光强度增强且荧光增强的程度与锌质量浓度成正比，据此建立了测定痕量锌离子的直接荧光分析方法。
研究了试剂与锌的荧光反应的最佳测定条件，讨论了共存离子的影响。
在λex/em=405/517nm处，锌量在0.7-158.0 μg/L范围内呈良好的线性关系。
平行测定Zn2+（100ug/L）标准溶液11次，RSD为1.98％，方法检出限为0.23ug/L。
该方法重复性好、灵敏度高，简便、快速，试剂合成方法简单。
可用于水样中锌的测定，回收率为101％-102%。
关键词：合成荧光增强锌水杨醛缩邻氨基苯酚锌元素是人体所必需的微量元素，缺乏锌元素会引起人体一系列的机能紊乱，一些组织器官，生理功能障碍，甚至还有可能发生病理改变和疾病。
目前，微量锌的测定常用原子吸收光谱法、吸光光度法、伏安法等[1-6]。
荧光法作为分析金属离子的手段近来多用一些席夫碱类[7，8]和腙类[9-10]化合物作为荧光试剂，诸种方法或需要价格昂贵的仪器、或合成方法复杂、操作繁琐或选择性和灵敏度有很大的局限性。
本文用水杨醛缩邻氨基苯酚作为荧光试剂，在pH 5.44的六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液介质中锌离子能使其荧光强度增强，据此建立了直接荧光法测定锌离子的方法。
该方法重现性好，简便、快速，试剂合成方法简单、灵敏度高。
用于水样中锌的测定，结果满意。
一、实验部分1.主要仪器和试剂仪器：LS-30荧光光度计；970CRT荧光分光光度计；pHS-PL酸度计；HH-4数显恒温水浴锅；BS210S电子分析天平。
试剂：锌离子标准储备溶液：100mg/L，用时稀释为2.0 mg/L的工作液；水杨醛缩邻氨基苯酚（H2L）溶液：1.0×10-4 mol/L，称取适量水杨醛缩邻氨基苯酚（自制），加入一定量无水乙醇溶解，然后用水定容；六亚甲基四胺—盐酸（CH2）6N4-HCl缓冲溶液：pH5.44。
双硫腙分光光度法测定锌含量
双硫腙分光光度法测定锌含量（吉林省临江市刘伯田）概述1．方法原理在pH为4.0—5.5的醋酸盐缓冲介质中。
锌离子与双硫腙形成红色螯合物，其反应为：该螯合物可被四氯化碳（或三氯甲烷）定量萃取。
以混色法完成测定。
用四氯化碳萃取，锌一双硫腙螯合物的最大吸收波长为535 nm，其摩尔吸光系数约为9.3×104。
2．干扰及消除在本法规定的实验条件下，天然水中正常存在的金属离子不干扰测定。
水中存在少量铋、镉、钴、铜、金、铅、汞、镍、钯、银和亚锡等金属离子时，对本法均有干扰，但可用硫代硫酸钠掩蔽剂和控制溶液的pH值来消除这些干扰。
三价铁、余氯和其它氧化剂会使双硫腙变成棕黄色。
由于锌普遍存在于环境中，而锌与双硫腙反应又非常灵敏，因此需采取特殊措施防止污染。
3．方法的适用范围当使用光程为20mm比色皿，试份体积为100ml时，锌的最低检出浓度为0.005mg/L。
本法适用于测定天然水和轻度污染的地表水中的锌。
4. 仪器（l）分光光度计，应用10 mm或更长光程的比色皿。
（2）分液漏斗：容量为125和150ml，最好配有聚四氟乙烯活塞。
（3）玻璃器皿：所有玻璃器皿均先后用1＋l硝酸浸泡和无锌水清洗。
5. 试剂（1）无锌水：将普通蒸馏水通过阴阳离子交换柱以除去水中痕量锌，用于配制试剂。
（2）四氯化碳（CCl4）。
（3）高氯酸（ρ＝1.75g／ml）。
（4）盐酸（ρ＝1.18g／ml）。
（5）6mol/L盐酸：取500ml浓盐酸用水稀释至1000ml。
（6）2mol/L盐酸：取100ml浓盐酸用水稀释至600ml。
（7）0.02mol/L盐酸：取2mol／L盐酸10ml用水稀释到1000ml。
（8）乙酸（含量36%）。
（9）氨水（ρ＝0.90g／ml）。
（10）1＋100氨溶液：取氨水10ml用水稀释至1000ml。
(11) 硝酸(ρ＝1.4g／ml）。
(12) 2％（V／V）硝酸溶液：取硝酸20ml 用水稀释至1000 ml。
水质 锌的测定 双硫腙分光光度法
FHZHJSZ0010 水质锌的测定双硫腙分光光度法F-HZ-HJ-SZ-0010水质双硫腙分光光度法ｌ 范围 本方法规定了用双硫腙分光光度法测定水中的锌有关干扰问题见附录Aµ±Ê¹Óùâ³Ì³¤20mm比色皿检出限为5ìg/LÔÚ×î´óÎü¹â²¨³¤535nm测量时１０4 L/mol本方法规定水样经酸消解处理后2 原理在pH为4.0~5.5的乙酸盐缓冲介质中用四氯化碳萃取后进行分光光度测定铜镉铋金银对锌的测定有干扰３ 试剂 本方法所用试剂除另有说明外实验中均用不含锌的水将普通蒸馏水通过阴阳离子交换柱以除去水中锌３．２ 高氯酸(HClO4) 1. 75g/mLñ3.3.1 盐酸取500mL盐酸(3.3)用水稀释至1000mL2mol/L溶液３．３．３盐酸取10mL盐酸(3.3.2)溶液用水稀释到1000mL3.5 氨水(NH3ñ3.5.1 氨水 取10mL氨水(3.5)用水稀释至1000mLñ3.6.1 硝酸溶液 取20mL硝酸(3.6)用水稀释到1000mL0.032mol/L3.7 乙酸钠缓冲溶液３Ｈ2O)溶于水中另取1份乙酸将上述两种溶液按等体积混合直到最后的萃取液呈绿色3.8 硫代硫酸钠溶液5H2O)溶于100mL水中直到双硫腙溶液呈绿色为止3.9 双硫腙称取0.25g双硫腙(C13H12N4S)溶于250mL四氯化碳(3.1)·ÅÖÃÔÚ±ùÏäÄÚ¿É°´ÏÂÊö²½ÖèÌá´¿ÂËÒºÖ÷ÖҺ©¶·ÖдËʱ˫Áòëê½øÈëË®²ãÈ»ºóÓÃÑÎËá(3.3.1)中和合并四氯化碳层保存于冰箱内备用0.1g/L四氯化碳溶液3.11 双硫腙取40mL双硫腙四氯化碳溶液(3.10)当天配制0.004g/L四氯化碳溶液用四氯化碳(3.1)稀释至100mL(此溶液的透光度在500nm波长处用10mm比色皿测量时）3.13 柠檬酸钠溶液2H2O)溶解在90mL水中此试剂用于玻璃器皿的最后洗涤称取0.1000g锌粒(纯度99.9ÒÆÈë1000mL容量瓶中此溶液每毫升含100ìg锌取锌标准贮备溶液(3.14)10.00mL置于1000mL容量瓶中此溶液每毫升含1.00ìg¹â³Ì10mm或更长的比色皿容量为125和150mL4.3 玻璃器皿５ 试样制备 5.1 实验室样品根据水样的类型提出的特殊建议进行采样使用前用硝酸然后用无锌水冲洗干净每1000mL水样立即加入2.0mL硝酸(3.6)加以酸化(pH约1.5)ÀýÈç·ñÔòÒª°´ÏÂÊö¶þÖÖ·½·¨´¦Àíÿ100mL水样加入1mL硝酸(3.6)冷却后用快速滤纸过滤然后用硝酸(3.6.2)稀释至一定体积5.2.2 含悬浮物和有机质较多的地面水或废水在电热板上加热消解到10mL左右再加入5mL硝酸(3.6)和2mL高氯酸(3.2)Õô·¢ÖÁ½ü¸ÉÀäÈ´ºóÂËÖ½ÓÃÏõËá(3.6.2)洗涤数次供测定用5.3 试份如果水样中锌的含量不在测定范围内如锌的含量太低如果取加酸保存的试样以除去过量酸(注意因为此类试剂中的含锌量往往过高)¼ÓÈÈÖó·Ð5min2~3之间6 操作步骤 6.1 测定6.1.l 显色萃取取10mL(含锌量在0.5~5置于60mL 分液漏斗中混匀后振摇4min½«ËÄÂÈ»¯Ì¼²ãͨ¹ýÉÙÐí½à¾»ÍÑÖ¬ÃÞ¹ýÂËÈë20mm 比色皿中采用合适的(如20mm)光程长的比色皿第一次采用本方法时以后的测定中均使用此波长)´ÓУ׼ÇúÏßÉϲé³ö²âÁ¿Ð¿Á¿6.2 空白试验 用适量(如10°´5.3和6.1的方法进行处理分别加入锌标准溶液(3.15)0 1.00 3.005.00mL向各分液漏斗中加入5mL 乙酸钠溶液(3.7)和1mL 硫代硫酸钠溶液(3.8)6.3.2 显色萃取上述溶液(6.3.1)用10.0mL 双硫腙四氯化碳溶液(3.12)摇动萃取4min ½«ËÄÂÈ»¯Ì¼²ãͨ¹ýÉÙÐí½à¾»ÍÑÖ¬ÃÞ¹ýÂËÈë20mm 比色皿中采用20mm 光程长的比色皿6.3.4 校准曲线的绘制从6.3.3测得的吸光度扣去试剂空白(零浓度)的吸光度后这条校准线应为通过原点的直线特别是分析一批水样或每使用一批新试剂时要检查一次Vm c =式中ìg mL8 精密度和准确度46个实验室曾用本方法分析过一个合成水样其他离子含量(以ìg/L计)为镉50铜470铅70得到的相对标准偏差为18.2相对误差为25.9 9 参考文献GB7472-87附录Ａ 干扰及其消除 （补充件） 水中存在少量铋钴金汞钯对本方法均有干扰三价铁由于锌普遍存在于环境中因此需要采取特殊措施防止污染这种现象往往是起源于含氧化锌的玻璃橡胶制品试剂级化学药品或蒸馏水单独放置。
锌离子的分光光度法测定
水质锌离子的测定锌试剂分光光度法1.主要内容锌试剂与锌离子在pH=8.5~9.5的碱性溶液中生成蓝色络合物，对620nm单色光产生最大吸收。
本方法适用于锅炉用水和冷却水中微量锌的测定，测定范围为0.4~5.0mg/L。
2.仪器和试剂本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。
2.1分光光度计，10mm比色皿；2.2锌贮备溶液准确称取已除去氧化膜的优级纯锌0.5000g （或基准氧化锌0.6224g）于烧杯中，加少量水和1+1盐酸20mL，缓缓加热溶解，冷却后转移入1000mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL中含锌0.5mg（即500μg/mL）；2.3硼酸盐缓冲溶液pH=8.8~9.0，称取37.8g氯化钾和31g硼酸、8.34g氢氧化钠，用60~80℃水溶解，冷却后稀释为1000mL；2.4锌试剂溶液称0.2g锌试剂溶于250mL乙醇中，放置过夜使之全部溶解，贮于棕色瓶中，可稳定一个月，溶液由红变黄表示失效；2.5过硫酸铵溶液1mL溶液含4mg过硫酸铵，临用前配制。
3.测定步骤3.1绘制标准曲线吸取50.00mL（或20.00，10.00，5.00mL）500μgZn2+/mL的锌贮备溶液于1000mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度。
此锌标准溶液含锌离子为25μg/mL（或10，5，2.0μg/mL）。
取此锌标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00mL分别置于5只50mL容量瓶中，用去离子水稀释至约30mL时，再加10mL硼酸盐缓冲溶液和5.0mL锌试剂溶液，最后用去离子水稀释至刻度，摇匀。
放置10min后于620nm 处用10mm比色皿以一号溶液为参比，测定各溶液的吸光度并绘制吸光度-锌离子微克数标准曲线。
3.2测定水样3.2.1含有机膦酸盐的水样取水样10.0mL（视试样中锌含量可适当增减取水样的量）于100mL锥形瓶中，另一锥形瓶不加水样作空白，各加0.5mLc(H2SO4)=0.5mol/L溶液和1mL过硫酸铵溶液，再加去离子水至约30mL，加热煮沸约5min后取下冷却至室温，各加1滴0.02%甲基橙溶液，用1mol/L氢氧化钠溶液调节至溶液呈黄色，再分别加入10mL硼酸盐缓冲溶液及5.0mL锌试剂溶液，转移入50mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
分析化验 分析规程 锌含量的测定
锌含量的测定方法一配位滴定法1 适用范围本方法适用于测定锅炉用水和冷却水系磷锌预膜液中的锌离子，测定范围为10～40mg/L。
2 分析原理在pH 5.5时，加入过量的氟化铵掩蔽铁、铝离子，以二甲酚橙为指示剂，用EDTA标准溶液滴定试样中锌离子。
3 试剂和仪器3.1 试剂3.1.1 1g/L二甲酚橙水溶液(贮于棕色滴瓶中，有效期两周)。
3.1.2 80g/L氢氧化钠溶液。
3.1.3 盐酸溶液(1+1)。
3.1.4 乙酸—乙酸钠缓冲溶液(pH=5.5)称取200g乙酸钠，溶解于150mL 水中，再加9mL 冰乙酸，用水稀释至1L3.1.5 氟化铵固体试剂。
3.1.6 无水乙醇。
3.1.1 EDTA标准滴定溶液[C(EDTA)=0.01mol/L]3.2 仪器3.2.1 微量滴定管(10mL)。
3.2.2 移液管(50和100mL)。
4 操作步骤4.1 准确吸取经中速滤纸过滤后的水样50～100mL 于250mL 锥形瓶中，加2滴(1+1)盐酸溶液，2g固体氟化铵和10mL 无水乙醇，再加水50mL。
4.2 温热至40～50℃，搅拌1 min ，用80g/L 氢氧化钠溶液调节水样pH 至5.5左右。
4.3 加20mL 乙酸—乙酸钠缓冲溶液和5～6滴1g/L 二甲酚橙指示剂至溶液呈鲜红色。
立即用EDTA 标准滴定溶液滴定至溶液由红色突变为亮黄色为终点(快摇慢滴)。
5 分析结果水样中锌的含量按下式计算：100038.65)/(0)()(2⨯⨯=+V V C L mg Zn EDTA EDTA 式中：C (EDTA)—滴定用EDTA 标准溶液的浓度，mol/L ；V (EDTA)—滴定消耗EDTA 标准溶液体积，mL ；V 0—取样量，mL ；65.38—Zn 2+的毫摩尔质量，mg/mmol 。
6 允许差单位:mg/L范围室内允许差室间允许差10.0～15.00.89 1.0215.1～20.00.90 1.8220.1～25.00.90 1.3125.1～30.0 1.02 2.5530.1～40.01.421.88取平行测定两结果的算术平均值作为水样的锌含量。
双硫腙分光光度法测定锌含量
双硫腙四氯化碳溶液10ml萃取，直到双硫腙溶液呈绿色不变为止。然后再用四氯化碳萃取以除去多余的双硫腙。 (16)0.05%(m,V)双硫腙四氯化碳贮储溶液: 称取0.10g双硫腙(CHNNCSNHNH?CH)溶解于200ml四氯化碳，6565
(7)0.02mol/L盐酸:取2mol,L盐酸10ml用水稀释到1000ml。
(8)乙酸(含量36%))1，100氨溶液:取氨水10ml用水稀释至1000ml。
(11) 硝酸(ρ,1.4g,ml)。
(12) 2,(V,V)硝酸溶液:取硝酸20ml 用水稀释至1000 ml。
贮于棕色瓶中，放置在冰箱内，如双硫腙试剂不纯，可按下述步骤提纯:
将上述双硫腙四氯化碳溶液滤去不溶物，滤液置分液漏斗中，每次用1+100氨水20ml提取，共提取 5次，此时双硫腙进入水层，合并水层。然后用6 mol,L盐酸中和，再用200ml四氯化碳分三次提取,合并四氯化碳层。将此双硫腙四氯化碳溶液放入棕色瓶中，保存于冰箱内备用。
此时溶液的pH为2.8，备作测定用。
试 样
如果水样中锌的含量太高而不在测定范围，可将试样作适当的稀释或减少取样量。如锌的含量太低，也可取较大量试样置于石英皿中进行浓缩。如果取加酸保存的试样，则要取一份试样放在石英皿中,蒸发至干，以除去过量酸(注意:不要用氢氧化物中和，因为此类试剂中的含锌量往往过高)。然后加无锌水，加热煮沸5min，用稀盐酸或经提纯的氨水调节试样的pH在2—3之间，最后以无锌水定容。 样 品 测 定
(17)0.01%(m,V)双硫腙四氯化碳中间溶液:临用前将0.05,(m,V)双硫腙四氯化碳溶液用四氯化碳稀释5倍。 (18)0.0004%(m,V)双硫腙四氯化碳溶液:量取0.01%(m/V)双硫腙四氯化碳溶液10m1，用四氯化碳稀释至250ml(此溶液
水质铜、锌、铅、镉的测定原子吸收分光光度法
水质铜、锌、铅、镉的测定原子吸收分光光度法本方法规定了测定水中铜、锌、铅、镉的原了吸收光谱法。
本方法分为两部分。
本方法分为两部分。
第一部分为直接法，第一部分为直接法，第一部分为直接法，适用于测定地下水、适用于测定地下水、适用于测定地下水、地面水和废水地面水和废水中的铜、锌、铅、镉第二部分为螯合萃取法，适用于测定地下水和清洁地面水中低浓度的铜、铅、镉。
1．定义1.1 溶解的金属：未酸化的样品中能通过0.45µ0.45µm m 滤膜的金属成分。
1.2 金属总量：未经过滤的样品经强烈消解后测得的金属浓度，或样品中溶解和悬浮的两部分金属浓度的总量。
2．采样和样品2.1 用聚乙烯塑料瓶采集样品。
采样瓶先用洗涤剂洗净，再在硝酸溶液（5.6）中浸泡，使用前用水冲洗干净。
分析金属总量的样品，采集后立即加硝酸（5.1）酸化至pH=l~2，正常情况下，每1000mL 样品加2mL 硝酸（5.1）。
2.2 试样的制备分析溶解的金属时，样品采集后立即通过0.45µ0.45µm m 滤膜过滤，得到的滤液再按（2.1）中的要求酸化。
第一篇直接法3．适用范围3.1 测定浓度范围与仪器的特性有关，表1列出一般仪器的测定范围。
表1 元素浓度范围，mg/L 铜0.05~5 锌0.05~1 铅0.2~10 镉0.05~1 3.2 地下水和地面水中的共存离子和化合物在常见浓度下不干扰测定，地下水和地面水中的共存离子和化合物在常见浓度下不干扰测定，但当钙的但当钙的浓度高于1000mg/L 时，抑制镉的吸收，浓度为2000mg/L 时，信号抑制达19%。
铁的含量超过100mg/L 时，抑制锌的吸收。
当样品中含盐量很高，特征谱线波长又低于350nm时，可能出现非特征吸收。
如高浓度的钙，因产生背景吸收，使铅的测定结果偏高。
的测定结果偏高。
4．原理将样品或消解处理过的样品直接吸入火焰，在火焰中形成的原子对特征电磁辐射产生吸收，将测得的样品吸光度和标准溶液的吸光度进行比较，确定样品中被测元素的浓度。
循环水中锌离子测定方法的探讨
定结果不变 ,即测定结果不受显色剂用量的影响。
浓度为 2 mol/ L 的氢氧化钠溶液中 ,锌试剂能完
3. 3 锌试剂的配制方法对测定结果的影响
全溶解 。
在用乙醇溶液配制锌试剂时发现 ,锌试剂在
当采用锌试剂 A 溶液作为显色剂时 ,样品的
乙醇中溶解度不高 ,即使放置较长的时间也不会
吸光值随取样体积和显色剂用量的变化而变化 ,
不同时间测定其吸光度 ,结果见表 5 。
表 5 不同反应时间下的吸光度
样品放置时间 (min) 吸光度
5 0. 259
10 0. 263
15 0. 267
20 0. 272
25 0. 271
30 0. 271
35 0. 272
40 0. 272
从表 5 得知 ,样品在放置 20 min 后吸光度趋 于稳定 ,且吸光值达到最大 。因此确定 20 min 为 样品的反应时间 。 3. 5 样品中有机膦的干扰
10. 0 1. 82
15. 0 1. 83
20. 0 1. 81
25. 0 1. 81
从表 2 可以看出 ,采用锌试剂 B 溶液作为显 色剂时 ,样品在不同取样体积下其测定结果基本 相同 ,即测定结果不受取样体积的影响 。 3. 2 锌试剂用量对测定结果的影响 3. 2. 1 锌试剂 A 溶液的用量对测定结果的影响
此溶液ml含有机膦50仪器721型分光光度计一般样品的测定取适量样品于50ml比色管中加去离子水30ml左右分别加入10ml硼酸缓冲溶液ml锌试剂溶液摇匀放置10min再采用721型分光光度计620nmcm比色皿测定吸光度100ml锥形瓶ml硫酸溶液和ml过硫酸铵溶液30ml在电炉上煮沸min取下冷却至室滴甲基橙指示溶液用氢氧化钠溶液调至试样呈黄色然后分别加入10ml硼酸缓冲溶液ml锌试剂溶液转入50ml比色管内再用去离子水稀释至刻度摇匀放置10min后进行测定溶液为显色剂时样品体积对测定结果的影响分别取不同体积的样品于50ml比色管中加入10ml硼酸缓冲溶液分别加入锌试剂ml其余步骤同溶液为显色剂时样品体积对测定结果的影响样品体积可以看出当采用锌试剂溶液作为显色剂时样品在不同的取样体积下其测定结果不相同且随取样体积增大测定结果反而降低溶液为显色剂时样品体积对测定结果的影响分别取不同体积的样品于50ml比色管中加入10ml硼酸缓冲溶液分别加入锌试剂ml其余步骤同溶液为显色剂时样品体积对测定结果的影响样品体积可以看出采用锌试剂样品在不同取样体积下其测定结果基本相同即测定结果不受取样体积的影响溶液的用量对测定结果的影响分别取10ml样品于50ml比色管中各加入10ml硼酸缓冲溶液和不同体积的锌试溶液其余步骤同溶液的用量对测定结果的影响锌试剂可以看出当锌试剂ml时吸光度最高但随着用量的增大吸光度降低溶液的用量对测定结果的影响分别取10ml样品于50ml比色管中10ml硼酸缓冲溶液和不同体积的锌试剂溶液其余步骤同溶液的用量对测定结果的影响锌试剂溶液的体积锌离子测定结果可见锌试剂ml时测定结果达到最大且随着锌试剂用量的增大测53定结果不变即测定结果不受显色剂用量的影响锌试剂的配制方法对测定结果的影响在用乙醇溶液配制锌试剂时发现锌试剂在乙醇中溶解度不高即使放置较长的时间也不会完全溶解而且是有大量的锌试剂没有溶解明锌试剂微溶于乙醇溶液中
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水质锌离子的测定锌试剂分光光度法
1.主要内容
锌试剂与锌离子在pH=8.5~9.5的碱性溶液中生成蓝色络合物，对620nm单色光产生最大吸收。
本方法适用于锅炉用水和冷却水中微量锌的测定，测定范围为0.4~5.0mg/L。
2.仪器和试剂
本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。
2.1分光光度计，10mm比色皿；
2.2锌贮备溶液准确称取已除去氧化膜的优级纯锌0.5000g （或基准氧化锌0.6224g）于烧杯中，加少量水和1+1盐酸20mL，缓缓加热溶解，冷却后转移入1000mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL中含锌0.5mg（即500μg/mL）；
2.3硼酸盐缓冲溶液pH=8.8~9.0，称取37.8g氯化钾和31g硼酸、8.34g氢氧化钠，用60~80℃水溶解，冷却后稀释为1000mL；
2.4锌试剂溶液称0.2g锌试剂溶于250mL乙醇中，放置过夜使之全部溶解，贮于棕色瓶中，可稳定一个月，溶液由红变黄表示失效；
2.5过硫酸铵溶液1mL溶液含4mg过硫酸铵，临用前配制。
3.测定步骤
3.1绘制标准曲线吸取50.00mL（或20.00，10.00，5.00mL）500μgZn2+/mL的锌贮备溶液于1000mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度。
此锌标准溶液含锌离子为25μg/mL（或10，5，2.0μg/mL）。
取此锌标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，
4.00mL分别置于5只50mL容量瓶中，用去离子水稀释至约30mL时，再加10mL硼酸盐缓冲溶液和
5.0mL锌试剂溶液，最后用去离子水稀释至刻度，摇匀。
放置10min后于620nm 处用10mm比色皿以一号溶液为参比，测定各溶液的吸光度并绘制吸光度-锌离子微克数标准曲线。
3.2测定水样
3.2.1含有机膦酸盐的水样取水样10.0mL（视试样中锌含量可适当增减取水样的量）于100mL锥形瓶中，另一锥形瓶不加水样作空白，各加0.5mLc(H2SO4)=0.5mol/L溶液和1mL过硫酸铵溶液，再加去离子水至约30mL，加热煮沸约5min后取下冷却至室温，各加1滴0.02%甲基橙溶液，用1mol/L氢氧化钠溶液调节至溶液呈黄色，再分别加入10mL硼酸盐缓冲溶液及5.0mL锌试剂溶液，转移入50mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
放置10min后，在与标准曲线测定的相同条件下以空白溶液为参比测定吸光度。
3.2.2不含有机膦酸盐的水样在两只50mL容量瓶中，一只加水样，另一只不加水样，再加入30mL水，分别加入10mL 硼酸盐缓冲溶液及5.0mL锌试剂溶液，以下步骤与绘制标准
曲线的操作相同。
以不加水样的空白为参比，测定吸光度。
4.结果的表述根据所测吸光度在标准曲线上查出试样中锌
的微克（μg）数，水样中锌的含量X为X=a/V mg/L
式中a——从标准曲线上查得的锌的微克数，μg
V——所取水样的体积，mL
5注意事项和说明
5.1参考表决定取样的体积；
取样体积
水中锌含量/（mg/L）比色皿/mm 取样量/mL 标准系列溶液浓度/（μg/50mL）
0.2 50 25 0.00，2.50，5.00，7.50，10.0
0.5 30 20或25 0.00，5.00，10.0，15.0，20.0
1.0 30或20 10 0.00，10.0，20.0，30.0，40.0
2.0 10 10 0.00，25.0，50.0，75.0，100
4.0 10 10 0.00，2
5.0，50.0，75.0．100
7.2 10 5 0.00，25.0，50.0，75.0，100 5.2水样酸化后再取样测得总锌含量，不酸化过滤后取样测得可溶性
锌含量，两者之差为不溶性锌含量。