现代生化技术练习题汇总复习提纲
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（3）组氨酸的脱羧作用产生组胺。
12、酶的竞争性抑制剂，非竞争性抑制剂对酶的Km和Vmax有什么影响？
①竞争性抑制剂存在时，Km增大，且Km随[I]的增加而增加，Vmax的数值不变；
②非竞争性抑制剂的动力学特点为：a:当有I存在时，Km不变而Vmax减小，Km/Vmax增大；b：Vappmax随[I]的加大而减小；c:抑制程度只与[I]成正比，而与[S]无关。
12、第二信使：水溶性激素不能自由的通过细胞膜，当他们与靶细胞表面膜上相应的受体结合后形成激素和受体复合物，通过某种手段激活定位在细胞膜内侧特定的酶导致某些小分子物质的合成，被合成的小分子物质可以看成是第二信使。
第二信使有：cAMP、cGMP、IP3、二酰甘油、神经酰胺、花生四烯酸、NO等
13、级联放大：在体内的不同部位，通过一系列酶的酶促反应来传递一个信息，并且初始信息在传递到系列反应的最后时，信号得到放大，这样的一个系列叫做级联放大。
4、必需氨基酸：机体需要但机体不能合成或合成量少，不能满足要求，必须由食物供给的氨基酸
5、酮体：肝脏中一些脂肪酸氧化分解的中间产物乙酰乙酸，ß-羟丁酸及丙酮的统称。
蛋白质一级结构：构成蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序，又称共价结构或基本结构。
6、酶的活性中心：酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。
是糖、脂肪、氨基酸三大营养素的最终代谢通路
是糖、脂肪、氨基酸代谢联系的枢纽，在提供生物合成的前提中其重要作用。
16、简述调节血糖水平的几种激素的作用机理
胰岛素：体内唯一降低血糖的激素，唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。血糖升高—>胰岛素分泌。
促进肌肉、脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转运入细胞
生化复习大纲
第一章1.现代生物技术包括：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程2.生物技术的特点：①多学科综合性的科学技术②过程中需要生物催化剂的参与③最终目的是建立工业生产过程或为社会服务3.生物反应过程：当采用活细胞(主要是整体的微生物细胞)为催化剂时，称为发酵过程；而利用从细胞中提取得到的酶为催化剂时，则称为酶反应过程。
4.生物反应过程特点①利用生物催化剂生产②反应条件温和，生产设备简单、能耗少③多以光合作用产物为原料（可再生资源）④废弃物的危害程度小，产品价值高第二章2.1 微生物的特点1.微生物定义：存在于自然界中的一些个体微小，需借助显微镜才能看清其外形、构造简单的低等生物。
2.微生物的特点体积小、（比）表面大（最基本特点）：有利于与周围环境进行物质、能量和信息交换吸收快、转化快种类多、分布广生长旺、繁殖快易变异、适应强3.微生物具有惊人的繁殖速度，以二均分裂最突出。
2.2 工业生产中常见的微生物1.微生物的分类原核生物类：有核区，没有核膜、核仁，仅有一条DNA；如细菌、放线菌、蓝线菌等真核生物类：有细胞核、核膜、核仁、一至数条DNA构成的染色体；如酵母菌、霉菌非细胞生物类：无完整的细胞结构，仅含一种类型的核酸（DNA或RNA)；如病毒2.细菌的结构基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、类核特殊结构：荚膜、鞭毛（细菌的运动器官）、菌毛、芽胞3.芽胞：某些细菌在一定条件下，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成的圆形或椭圆形的小体。
因含水量少，具有致密而不易渗透的芽孢壁，具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药品能力。
芽孢是细菌的休眠状态。
由于芽胞抵抗力强，在临床上常以杀灭芽胞作为灭菌是否彻底的标准。
发酵工业中常用的细菌主要是杆菌。
4. 放线菌：广泛存在于偏碱土壤中，抗生素大约2/3由放线菌产生酵母菌：主要生长在偏酸性的含糖环境中霉菌：多在偏酸环境中生长2.3 微生物菌种的分离选育与保藏1.从自然界分离菌种的一般步骤：采样、增殖培养、纯种分离（划线法、稀释法）、筛选较优菌株2.诱变育种的实质：通过适当方法或途径使微生物的遗传物质（DNA）的分子结构发生改变，从而形成异常的遗传信息。
现代生化手艺练习题汇总复习提纲
《第一章生命大分子物质的制备》习题1、作为现代生化制备的主要对象的蛋白质、核酸等生物大分子有何特点？（1）成分复杂：生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几千种化合物。
有的生物大分子在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准方法是不可能的。
（2）含量甚微：许多生物大分子在生物材料中的含量极微，只有万分之一、几十万分之一，甚至几百万分之一。
分离纯化的步骤繁多，流程又长，有的目的产物要经过十几步、几十步的操作才能达到所需纯度的要求。
（3）易变性易被破坏：许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物大分子提取制备最困难之处。
过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本身的自溶等都会使生物大分子变性而失活，所以分离纯化时一定要选用最适宜的环境和条件。
（4）具经验性：生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，很难准确估计和判断，因而实验结果常有很大的经验成份，实验的重复性较差，个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。
（5）均一性的相对性：生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定，通常只采用一种方法是不够的，必须同时采用2～3种不同的纯度鉴定法才能确定。
2、生物物质制备方案的设计基本原则是什么？生物物质的制备一般包括初始阶段、中间阶段和精制阶段。
在制备方法的选择上，初始阶段宜选择粗放、分辨率低、快速、有利于缩小样品体积和减少后工序的方法，主要考虑样品量和处理速度两个指标；中间阶段选择的方法应在考虑样品处理量的基础上适当提高分辨率。
精制阶段宜选择精确、分辨率高、需样品少的方法。
在安排各种分离纯化方法的使用程序时应注意：（1）不适宜连续使用同一种分离纯化方法，应该交叉使用，因为每一步分离后，性质相似的物质聚在一块；（2）使用顺序还要考虑到有利于减少工序、提高效率。
生化复习重点及试题酶
生化复习重点及试题（酶）一、知识要点在生物体的活细胞中每分每秒都进行着成千上万的大量生物化学反应，而这些反应却能有条不紊地进行且速度非常快，使细胞能同时进行各种降解代谢及合成代谢，以满足生命活动的需要。
生物细胞之所以能在常温常压下以极高的速度和很大的专一性进行化学反应，这是由于生物细胞中存在着生物催化剂——酶。
酶是生物体活细胞产生的具有特殊催化能力的蛋白质。
酶作为一种生物催化剂不同于一般的催化剂，它具有条件温和、催化效率高、高度专一性和酶活可调控性等催化特点。
酶可分为氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂解酶类、异构酶类和合成酶类六大类。
酶的专一性可分为相对专一性、绝对专一性和立体异构专一性，其中相对专一性又分为基团专一性和键专一性，立体异构专一性又分为旋光异构专一性、几何异构专一性和潜手性专一性。
影响酶促反应速度的因素有底物浓度（S）、酶液浓度（E）、反应温度（T）、反应pH值、激活剂（A）和抑制剂（I）等。
其中底物浓度与酶反应速度之间有一个重要的关系为米氏方程，米氏常数（Km）是酶的特征性常数，它的物理意义是当酶反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。
竞争性抑制作用、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制作用分别对Km值与Vmax的影响是各不相同的。
酶的活性中心有两个功能部位，即结合部位和催化部位。
酶的催化机理包括过渡态学说、邻近和定向效应、锁钥学说、诱导楔合学说、酸碱催化和共价催化等，每个学说都有其各自的理论依据，其中过渡态学说或中间产物学说为大家所公认，诱导楔合学说也为对酶的研究做了大量贡献。
胰凝乳蛋白酶是胰脏中合成的一种蛋白水解酶，其活性中心由Asp102、His57及Ser195构成一个电荷转接系统，即电荷中继网。
其催化机理包括两个阶段，第一阶段为水解反应的酰化阶段，第二阶段为水解反应的脱酰阶段。
同工酶和变构酶是两种重要的酶。
同工酶是指有机体内能催化相同的化学反应，但其酶蛋白本身的理化性质及生物学功能不完全相同的一组酶；变构酶是利用构象的改变来调节其催化活性的酶，是一个关键酶，催化限速步骤。
生化简答题复习纲要
1.什么是酶？酶与一般催化剂有何区别？酶是有活细胞产生的、对特异底物具有高效催化作用的生物大分子，包括蛋白质和核酸。
酶与一般催化剂的区别：1.高效性：酶能够大幅度地降低反应的活化能。
2.特异性：酶仅能作用于一种或一类化合物，或作用于一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。
分为绝对特异性、相对特异性和立体特异性三种。
3.可调节性：酶促反应可以受多种因素的调控，使机体能够适应不断变化的内外环境。
4.反应条件温和，可在常温常压下进行。
2.什么是酶原？某些酶以酶原形式存在具有什么生物学意义？酶原：无活性的酶的前体。
酶以酶原形式存在的意义：A.保护和定位作用：避免细胞产生的酶对自身消化，同时保证酶在特定的部位和环境发挥作用，保证机体代谢正常进行。
B.酶原是酶的贮存形式。
一旦机体需要，可发挥其催化作用。
3.简述酮体代谢的特点和生理意义。
特点：A.肝内合成，肝外利用：肝是生成酮体的器官，但是不能利用胴体；肝外组织不能生成酮体，却能利用酮体，肝外组织最终把酮体转变成乙酰辅酶A，后进入三羧酸循环彻底氧化利用。
B.游离脂肪酸是合成酮体的前体，调节脂肪动员释放游离脂肪酸的因素能影响酮体的合成。
平时血液中酮体较少，有大量乙酰辅酶A必需代谢时酮体增多，可引起代谢性酸中毒，如糖尿病。
生理意义：A.酮体是肝脏输出能源的一种形式，并且酮体可以透过血脑屏障，是肌肉尤其是脑组织的重要能源。
B.酮体利用的增加可减少糖的利用，有利于维持血糖水平稳定，节省蛋白质的消耗。
4.简述体内氨基酸代谢库的来源与去路。
来源：A.从食物中消化吸收获B.组织蛋白降解C.自身合成非必需氨基酸去路：A.脱氨基作用：①氨气：尿素、谷氨酰胺、其他含氮物质②α-酮酸：转变为糖、酮体、非必需氨基酸与氧化供能B.脱羧基作用：生成胺类C.转化或合成某些含氮化合物D.合成组织蛋白5.参与大肠杆菌（原核生物）复制的酶类和蛋白质因子有哪些？:辨认复制起始点(解螺旋酶）：解开双链：运送和协同(引物酶）:催化引物的合成:维持模板处于单链状态并保护单链的完整拓补酶：理顺链:复制延长中起主要作用的酶I:水解引物、填补空隙、修复作用连接酶：催化双链中单链缺口的连接6.试述肽链的延伸步骤。
生化复习题完整版汇编
第二章1、蛋白质的定义定义：是由多种α-氨基酸按一定的序列通过肽键（酰胺键）缩合而成的，具有一定功能的生物大分子2、氨基酸三字缩写符号、PITC、PTH、DNFB 、GSH 、ACTHPITC:异硫氰酸苯脂、PTH：苯硫乙内酰脲、DNFB：2，4—二硝基氟苯、GSH：谷胱甘肽、ACTH：促肾上腺皮质激素3、氨基酸的两性解离和等电点计算等电点的计算方法：(1).先找A ±，氨基酸的pI相当于两侧基团pK值之和的一半。
(2). pI=（pKn+ pKn+1）/21-NH2-1-COOH n=11-NH2-2-COOH n=12-NH2-1-COOH n=25、几种重要肽的生理作用（1）谷胱甘肽：一个重要的三肽，简称GSH（含有一个活泼的SH（巯基）），由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成。
作用：是某些酶的辅酶，在体内氧化还原过程中起重要作用。
二分子GSH脱氢生成GSSG（以二硫键相连成的氧化型的谷胱甘肽）。
（2）催产素和升压素：9肽，有环状结构，仅第3第8位两个氨基酸不同，生理功能不同。
作用：催产素具有催产及使乳腺排乳的作用；升压素促进血管平滑肌收缩，从而升高血压。
（3）促肾上腺皮质激素（ACTH）：作用：刺激肾上腺皮质的生长和肾上腺激素的合成分泌。
（4）脑肽：脑啡肽，在中枢神经系统中形成，是体内自己产生的一类有镇痛作用的活性肽。
（5）胃肠道活性肽胆囊收缩素33肽（6）胰高血糖素：29肽作用：促进肝糖原降解产生葡萄糖，以维持血糖平衡；还能引起血管舒张，抑制肠的蠕动及分泌。
6、蛋白质的一级结构的概念蛋白质分子中氨基酸残基的排列顺序（序列）就是蛋白质的一级结构。
8、蛋白质二级结构和结构域的概念及二级结构和超二级结构的分类二级结构主要指多肽主链有一定周期性的，由氢键维持的局部空间结构。
结构域：是多肽链在超二级结构基础上进一步绕曲折叠成的近似球状的紧密结构。
分类：二级结构：α螺旋：存在于纤维状蛋白和球蛋白中β折叠：又称β结构、β构象(存在于纤维状蛋白和球蛋白中）β转角、β凸起、无规卷曲超二级结构：αα，βαβ，βαβαβ，ββ，β-曲折和希腊图案拓扑结构。
现代生化技术复习题
现代⽣化技术复习题. 第⼀章提取与分离技术⼀、名词解释1、机械破碎法2、物理破碎法3、温度差破碎法4、压⼒差破碎法5、超声波破碎法6、渗透压变化法7、化学破碎法8、酶促（学）破碎法9、⾃溶法10、抽提11、盐溶12、盐析13、沉淀分离法14、分段盐析15、K S分段盐析16、β分段盐析17、等电点沉淀法18、有机溶剂沉淀法19、复合沉淀法20、⾦属盐沉淀法21、选择性变性沉淀法⼆、填空题1、细胞破碎的⽅法有、和。
2、机械破碎法按照使⽤机械的不同可分为、和。
3、常⽤的物理破碎法有、和等。
4、常⽤的压⼒差破碎法有、和等。
5、化学破碎法采⽤的表⾯活性剂有和两种。
其中之⼀按其带电荷性质⼜可分为和两种。
6、根据抽提时所采⽤的溶剂或溶液的不同。
抽提的⽅法主要有、、和等7、常⽤的沉淀分析法有、、、、和等。
8、常⽤的⾦属盐沉淀法有和。
9、蛋⽩质盐析时，带⼊⼤量盐离⼦杂质，可采⽤、和⽅法脱盐。
10、要分离和提纯核酸过程中，常⽤来沉淀DNA和RNA。
11、常⽤的使蛋⽩质沉淀的⽅法有、、、和等。
12、三、是⾮题（对的打√、错的打×）1、渗透压变化法可⽤于⾰兰⽒阳性菌的破碎。
（）2、有机溶剂破碎细胞主要是使细胞膜磷脂结构破坏，从⽽使细胞膜的透过性增强。
（）3、⽤化学法破碎细胞提取酶时，经常⽤离⼦型表⾯活性剂。
（）4、⽤化学法破碎细胞提取酶时，⽤⾮离⼦型表⾯活性剂最好。
（）5、对于具有细胞壁结构的细胞采⽤酶法破碎时，应根据细胞壁结构选择不同的酶。
（）6、酸性物质易溶于酸性溶剂中，碱性物质易溶于碱性溶液中。
（）7、在等电点时两性电解质溶解度最⼩。
（）8、抽提两性电解质时应避开其等电点。
（）四、选择题1、利⽤突然降压法破碎⾰兰⽒阴性⼤肠杆菌应选择期的细胞破碎效果最佳。
A 调整期B 对数⽣长期C 平衡期D衰退期2、提取膜结合酶采⽤法破碎细胞最佳。
A ⾼压冲击法B 突然降压法C 渗透压变化法3、超声波破碎法最适合于破碎。
青医现代生化技术复习题——详细答案,可以自行省略
2011年现代生化复习题1、简述天平的种类、电子天平的使用方法及注意事项1、天平的种类: 台秤（感量1000mg,称实验动物体重）托盘天平（感量100mg,粗称固体试剂）电子天平（感量1mg, 0.1mg，0.01mg 称固体试剂）按精度分可分为两类①粗天平：（感量）十分之一（100mg）（感量）百分之一（10mg）粗天平主要用来称取较多样品或用于配制浓度要求不高的试剂称量。
②分析天平：（感量）千分之一（1mg）万分之一（0.1mg）十万分之一（0.01mg）分析天平则用于基准物的称量和配制标准溶液及少量样品的称量。
2、电子天平的使用（1）电子天平使用方法①核实天平是否处于水平状态；②开机预热；③取称量纸一张，对折后方天平称量台上；④按去皿键，使天平显示值为0.00g；⑤轻轻叩打试剂瓶，徐徐倒入试剂；⑥取除过量的试剂弃掉；⑦关闭电源；⑧清理称量台及天平周围。
（2）使用电子天平几个注意事项：①将天平置于稳定的工作台上避免振动、气流及阳光照射。
②在使用前调整水平仪气泡至中间位置。
③电子天平应按说明书的要求进行预热。
④称量易挥发和具有腐蚀性的物品时，要盛放在密闭的容器中，以免腐蚀和损坏电子天平。
⑤经常对电子天平进行自校或定期外校，保证其处于最佳状态。
⑥如果电子天平出现故障应及时检修，不可带“病”工作。
⑦操作天平不可过载使用以免损坏天平。
⑧若长期不用电子天平时应暂时收藏为好。
2、简述微量移液器的使用及注意事项微量移液器的握法：手掌握住器液器，拇指按压。
微量移液器的使用：（1）设定容量：调节体积至所需的刻度。
（不允许超出额定范围调整）（2）吸液:①接上Tip头。
连续按压数次，以调节空气。
②按下控制钮至第一档；③将移液器吸嘴垂直进入液面下1-6mm （视移液器容量大小而定）；④为使测量准确可将吸嘴预洗 3 次，即反复吸排液体 3 次。
⑤使控制钮缓慢滑回原位；⑥移液器移出液面前略等待1-3 秒；缓慢取出吸嘴，确保吸嘴外壁无液体。
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《第一章生命大分子物质的制备》习题1、作为现代生化制备的主要对象的蛋白质、核酸等生物大分子有何特点？（1）成分复杂：生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几千种化合物。
有的生物大分子在分离过程中还在不断的代谢，所以生物大分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准方法是不可能的。
（2）含量甚微：许多生物大分子在生物材料中的含量极微，只有万分之一、几十万分之一，甚至几百万分之一。
分离纯化的步骤繁多，流程又长，有的目的产物要经过十几步、几十步的操作才能达到所需纯度的要求。
（3）易变性易被破坏：许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物大分子提取制备最困难之处。
过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本身的自溶等都会使生物大分子变性而失活，所以分离纯化时一定要选用最适宜的环境和条件。
（4）具经验性：生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种组成的综合影响，很难准确估计和判断，因而实验结果常有很大的经验成份，实验的重复性较差，个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。
（5）均一性的相对性：生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定，通常只采用一种方法是不够的，必须同时采用2～3种不同的纯度鉴定法才能确定。
2、生物物质制备方案的设计基本原则是什么？生物物质的制备一般包括初始阶段、中间阶段和精制阶段。
在制备方法的选择上，初始阶段宜选择粗放、分辨率低、快速、有利于缩小样品体积和减少后工序的方法，主要考虑样品量和处理速度两个指标；中间阶段选择的方法应在考虑样品处理量的基础上适当提高分辨率。
精制阶段宜选择精确、分辨率高、需样品少的方法。
在安排各种分离纯化方法的使用程序时应注意：（1）不适宜连续使用同一种分离纯化方法，应该交叉使用，因为每一步分离后，性质相似的物质聚在一块；（2）使用顺序还要考虑到有利于减少工序、提高效率。
3、综合评价生物物质制备步骤方法的好坏应从哪些方面进行？每一个制备步骤方法的好坏，除了从分辨本领和重现性二方面考虑外，还注意方法本身的回收率和纯化倍数，特别是制备某些含量很少的物质时，回收率的高低十分重要。
因此综合评价试验方案的优劣应从分辨本领、重现性、回收率和纯化倍数等方面进行。
一个好的制备方法应该使纯化倍数和收得率都同时有较大提高。
但在实际过程中，随纯化倍数的提高，收得率是逐渐降低的。
因此应该根据材料的来源难易（难——收得率优先考虑，易——纯化倍数优先考虑）和制备物的目的等方面来综合评定方法的优劣。
4、利用下表中的方案制备长春花Strictosidine合成酶，现已测得各步骤总蛋白和总活力结果，试完成下表。
步骤总蛋白（mg）总活力（nKat）比活力（nKat/mg）产率（%）提纯倍数（1）粗抽提液（2）硫酸铵沉淀6544665.25.1（3）DEAD纤维素柱层析（4）羟基磷灰石柱层析（5）Sephadex G-75凝胶柱层析（6）等点聚焦38.75.90.720.083.93.82.00.55、提取生物活性物质时，活性保护性措施有哪些？提取一些具有生理活性的物质时，除了考虑被提取物溶解度外，还应考虑被提取物活性的保护。
对于一些生物大分子如蛋白质、酶和核酸来说，主要措施有如下几点：（1）采用缓冲系统；（2）加入保护剂；（3）抑制水解酶的破坏；（4）其它一些特殊要求的保护措施。
6、蛋白质、DNA和RNA的常用提取方法有哪些？（1）蛋白质和酶的提取方法：水溶液提取、、有机溶剂提取（2）DNA的提取方法：浓盐法、、阴离子去污剂法、苯酚抽提法、水抽提法（3）RNA的提取方法：苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。
7、提取组织中的胰岛素时，为什么采用68％乙醇溶液（用草酸调溶液的pH为2.5～3.0）为溶剂进行提取。
胰岛素可溶于稀酸、稀碱和稀醇溶液，但在组织中与其共存的糜蛋白酶对胰岛素有极高的水解活性，采用68％乙醇溶液（用草酸调溶液的pH为2.5～3.0）进行提取，可以从下面三个方面抑制了糜蛋白酶的水解活性：①68％的乙醇可以使糜蛋白酶暂时失活；②草酸可以除去激活糜蛋白酶的Ca++；③选用pH2.5～3.0，是糜蛋白酶不宜作用的pH值。
《第二章常用生物化学检验技术》习题1、蛋白质的化学物理检测方法主要有哪些？各方法的基本原理是什么？紫外吸收法：苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸等氨基酸在280nm波长左右具有紫外吸收，且吸光度与其浓度成线性，根据此性质可用于蛋白质的定量测定。
凯氏定氮法：该法根据一般蛋白质含氮量为16%的特点，将样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。
根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。
双缩脲法：双缩脲在碱性溶液中与Cu2+结合生成紫色络合物，这一呈色反应称为双缩脲反应。
蛋白质分子中的肽键类似双缩脲结构，故亦能呈双缩脲反应。
在一定的浓度范围内，颜色深浅与蛋白质含量呈线性关系。
蛋白质浓度越高，体系的颜色越深。
反应产物在540nm处有最大光吸收。
福林酚试剂法：Folin-酚试剂由试剂A和试剂B两部分组成。
在Folin-酚试剂法中，蛋白质中的肽键首先在碱性条件下与酒石酸钾钠-铜盐溶液（试剂A）起作用生成紫色络合物（类似双缩脲反应）。
由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸的存在，该络合物在碱性条件下进而与试剂B（磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成）形成蓝色复合物，其呈色反应颜色深浅与蛋白质含量成正比。
考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝G-250存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。
考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色，最大光吸收在595nm。
2、糖类的化学检测方法主要有哪些？兰－爱农（Lane-Eynon）法、斐林试剂快速法（GB法）、碘量法、铜试剂法、高锰酸钾法3、核酸的化学检测方法主要有哪些？定磷法、二苯胺法和地衣酚法4、凯氏定氮法的基本原理是什么？其主要操作步骤包括哪些？该法中加入硫酸钾和硫酸铜的作用是什么？原理：样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。
根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。
主要操作步骤：消化、蒸馏、滴定加入硫酸钾可以提高溶液的沸点而加快有机物的分解，硫酸铜主要作为催化剂，同时可以指示消化终点的到达。
5、放射自显影技术的基本原理是什么？其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。
然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量。
6. 生物检测内容主要有哪些？安全性检测包括哪些内容？生物检测内容主要包括生物效价测定和安全性试验。
安全性检测主要包括毒性试验、局部刺激性试验、溶血实验、热原试验、过敏试验和变异原试验。
7. 兰-爱农法测定糖类的基本原理是什么？兰-爱农法是指以次甲基蓝作为指示剂，直接将还原糖滴定到斐林试剂中进行测定的方法。
斐林试剂中的酒石酸钾钠铜氧化还原糖分子中的游离羰基，本身被还原氧化亚铜红色沉淀。
由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜全部还原后，过量1滴还原糖使次甲基蓝还原，蓝色消失而达滴定终点。
《第三章电泳技术》习题1、什么是电渗现象？其对电泳过程有何影响液体在电场中，由于支持介质表面可能会存在一些带电基团，吸附一些带相反电荷的离子，在电场的作用下向电极方向移动，形成介质表面溶液的流动，这种现象就是电渗。
如果电渗方向与电泳方向相同，则加快电泳速度；如果电渗方向与电泳方向相反，则降低电泳速度。
2、现有电泳技术按照原理及支持介质的不同，分为哪几类？按原理不同可分为：移动界面电泳、区带电泳、等电聚焦电泳和等速电泳按支持介质形状不同可它为：薄层电泳、板电泳和柱电泳。
3、蛋白质在不连续PAGE中实现分离的基本原理是什么？不连续PAGE电泳体系中由于缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应，故分离效果比连续系统更好。
（1）样品浓缩效应：①凝胶孔径的不连续性：浓缩胶为大孔胶，分离胶为小孔胶。
在电场作用下，样品颗粒在大孔胶中泳动的阻力小，移动速度快；当进入小孔胶时，受到的阻力大，移动速度减慢。
因而在两层凝胶交界处，样品迁移受阻而压缩成很窄的区带。
②缓冲体系离子成分及pH值的不连续性：HCl 在任何pH溶液中均易解离出(Cl-)，在电场中迁移率快，走在最前面称为快离子。
在电极缓冲液中，除有Tris 外，还有甘氨酸(glycine)，其pI=6.0，在pH8.3的电极缓冲液中，易解离出甘氨酸根(NH2 CH2COO-)，而在pH6.7的凝胶缓冲体系中，甘氨酸解离度仅有0.1%-1%，因而在电场中迁移很慢，称为慢离子。
当进入pH8.9的分离胶时，甘氨酸解离度增加。
③电位梯度的不连续性：电泳开始后，快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低的低电导区，使局部电位梯度增高，将蛋白质浓缩成狭窄的区带。
（2）分子筛效应：大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径分离胶时，受阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率，这就是分子筛效应。
（3）电荷效应：在pH8.9的分离胶中，各种带净电荷不同的蛋白质有不同的迁移率。
净电荷多，则迁移快；反之，则慢。
因此，各种蛋白质按电荷多少、相对分子质量及形状，以一定顺序排成一个个区带，因而称为区带电泳。
4、SDS-PAGE测定蛋白分子量的原理是什么？由于SDS带有大量负电荷，当其与蛋白质结合时，所带的负电荷大大超过了天然蛋白质原有的负电荷，因而消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异，使蛋白质均带有相同密度的负电荷，因而主要利用蛋白分子量的差异而将各种蛋白质分开，因此根据未知蛋白和标准系列蛋白的移动距离可测定出未知蛋白的分子量。
5、蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA琼脂糖凝胶电泳中，凝胶浓度与被分离分子的大小有何关系？聚丙烯酰胺凝胶浓度越大，允许通过的蛋白分子越小；琼脂糖凝胶浓度越大，允许通过的DNA片段短。
6、某同学在进行SDS-PAGE时，发现电压很高而电流却很低，试分析其原因，并提出处理措施。
这种现象主要是由于电泳槽没有正确装配，电流未形成通路。
包括：a.内外槽装反；b.外槽液过少；c.电泳槽底部的绝缘体未去掉（比如倒胶用的橡胶皮）。