大豆胰蛋白酶抑制因子论文
不同还原剂对大豆胰蛋白酶抑制剂的钝化研究

Abstr act:The a im of this p a p e r wa s to s tud y the ina c tiva tion of STI b y d ithiothre itol (DTT), Na 2SO3 a nd Cys . Afte r inc ub a tion a t 80℃ , p H 7.5, STI wa s me a s ure d b y a n imp rove d BAPNA me thod . The c ha ng e s of STI we re d e te rmine d b y s ize e xc lus ion c hroma tog ra p hy (SEC) a nd SDS - PAGE, re s p e c tive ly. The re s ults re ve a le d tha t STI wa s ina c tiva te d b y re d uc ing a g e nts , a nd the inhib ition e ffe c tive ne s s wa s a s follows : DTT>Na 2SO3 >Cys , whic h wa s a ls o p rove d b y SDS - PAGE. By SEC we c ould know tha t the d is ulfid e b ond s of STI we re b roke n, a nd the s truc ture of STI wa s c ha ng e d , a nd s ome ne w c omp ound s we re p rod uc e d . The re fore , the s ta b ility of STI is c los e ly re la te d to d is ulfid e b ond s .
大豆制品中胰蛋白酶抑制剂失活方法的研究进展

大豆制品中胰蛋白酶抑制剂失活方法的研究进展陈婉【摘要】大豆胰蛋白酶抑制剂是大豆中主要的抗营养因子,降低了大豆制品的营养质量和食用安全性,在大豆制品加工过程中必须使其失活。
介绍了通过热处理、微波技术、压力处理、超声波处理、高压脉冲电场、化学还原、酚类化合物络合、酶法水解、微生物发酵及亲和色谱分离等钝化大豆胰蛋白酶抑制剂的方法。
%As the main antinutriton factor in soybean, soybean trypsin inhibitor decreases the nutritional value and edible security of the soybean products. Soybean trypsin inhibitor must be inactivated during the processing of the soybean products. In this review, the methods that inactivated the soybean trypsin inhibitor, including heat treatment, microwave technique, pressure treatment, ultrasonic treatment, high intensity pulsed electric field, chemical reduction, phenol complexation, enzyme hydrolysis, microbe fermentation and affinity chromatography, were introduced.【期刊名称】《漳州职业技术学院学报》【年(卷),期】2013(000)002【总页数】6页(P24-29)【关键词】大豆;胰蛋白酶抑制剂;失活【作者】陈婉【作者单位】福建中检华日食品安全检测有限公司,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】Q5031 大豆胰蛋白酶抑制剂大豆(Glycine max (L.)Merr.)蛋白含量丰富,多年的研究发现大豆具有降低血浆胆固醇含量及预防癌症、糖尿病和肥胖症等疾病等保健功能,是人类日常饮食和动物饲料的优质植物蛋白来源。
豆制品中胰蛋白酶抑制剂的研究

·食品科技·豆制品中胰蛋白酶抑制剂的研究杨丽杰吴非霍贵成孙占海(东北农业大学)【摘要】对豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性进行了调查,发现水解蛋白、乳用蛋白、组织蛋白、水豆腐、干豆腐中胰蛋白酶抑制剂活性均被钝化了以上;对腐乳、豆酱中胰蛋白酶抑制剂活性进行检测,结果未检出。
无糖豆粉、豆粉、豆浆以及内酯豆腐中胰蛋白酶抑制剂钝化率低于。
比较了种热处理方式对胰蛋白酶抑制剂的钝化效果,得到巴氏杀菌可钝化胰蛋白酶抑制剂;高压杀菌可钝化,超高温灭菌可钝化。
【关键词】豆制品;胰蛋白酶抑制剂;热处理中图分类号:文献标识码:文章编号:()大豆营养价值高,是人和动物的主要蛋白质来源,但其中含有胰蛋白酶抑制剂,有碍营养素的吸收,导致食用后身体不适或豆制食品感官上的缺陷,严重时会造成人或动物的死亡。
豆制品中胰蛋白酶抑制剂的存在还没有引起人们足够的重视。
目前失活胰蛋白酶抑制剂主要采用热处理,为达到彻底钝化而采用的过度加热可使大豆中的蛋白质溶解度降低,营养物质遭到破坏。
而且,胰蛋白酶抑制剂比较耐热,热处理的效果也很有限。
本研究对市场上多种豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性进行了测定调查,比较了常用热处理方式对胰蛋白酶抑制剂的钝化效果,有利于人们对豆制品安全性的认识,为更彻底地失活胰蛋白酶抑制剂提供依据。
材料与方法材料与设备腐乳、干豆腐、内酯豆腐、豆浆、水豆腐、豆酱、豆粉为市售;无糖豆粉、水解蛋白、乳用蛋白、组织蛋白为大豆蛋白食品公司提供;生豆粉为实验室自备;所用化学试剂为分析纯或生化试剂。
牛胰蛋白酶、、均由美国公司生产。
仪器设备:振荡培养箱(上海医用仪表厂)、离心机(北京医用离心机厂)、型凯氏定氮仪(北京宜兴科教仪器研究所)、多功能恒温水浴锅型(沈阳市医疗器械厂)、紫外可见分光光度计型(日本岛津公司)、高压灭菌器(上海医用核子仪器厂)。
试验方法豆制品中常规营养成分测定d水分含量测定:常压干燥法。
i粗蛋白测定:微量凯式定氮法。
发酵豆粕脲酶活性、胰蛋白酶抑制因子、凝集素和大豆抗原的测定研(精)

发酵豆粕脲酶活性、胰蛋白酶抑制因子、凝集素和大豆抗原的测定研究彭辉才1粱明振1’张宏福2(1广西大学动物科技学院,广西南宁530005;2北京畜牧兽医研究所营养学国家重点实验室, 北京海淀区100094摘要:豆粕中最主要的抗营养因子是胰蛋白酶抑制因子、凝集素和大豆抗原;本试验对8种发酵豆粕进行测定,前两者含量极低未检出。
用SDS-PAGE凝胶电泳定性检测大豆抗原中的B一伴大豆球蛋白(B--Conglycinin和大豆球蛋白(Glycinin,6种条带模糊,抗原消失,结果表明,生物发酵是一种有效的钝化抗营养因子的方法。
关健词:胰蛋白酶抑制因子凝集素13一伴大豆球蛋白大豆球蛋白测定发酵豆粕指是通过现代生物发酵技术对原料豆粕进行发酵处理后的产物。
发酵过程中可产生蛋白酶、非淀粉多糖酶和植酸酶等多种酶活,其目的就是消除抗营养因子,把大分子量的大豆蛋白质分解为多肽、寡肽、小肽,从而增加水溶性,提高消化率,利于动物消化吸收。
这些酶把纤维类物质分解为糖,部分糖被转化为乳酸,并产生大量有益微生物,使豆粕转化成高营养价值的功能性饲料。
发酵豆柏可替代日粮中血浆蛋白粉、鱼粉、肠膜蛋白和乳清粉等动物性饲料原料,可替代日粮中控制腹泻的预防性抗生素,大大降低生产成本,减少畜禽养殖对动物性饲料原料的依赖,杜绝动物性饲料原料所带来的疾病传播,提高养殖业的安全与效益。
大豆的抗营养因子有蛋白酶抑制因子(protease inhibitors,大豆凝集素(SBA、大豆抗原、非淀粉多糖(NSP、植酸(phytic acid、单宁、大豆寡糖、脲酶、.大豆异黄酮、大豆皂甙、致甲状腺肿因子、生氰糖甙等。
这些抗营养因子会导致人和动物胰腺肿大、过敏反应、生长缓慢、日粮养分利用率下降以及其他一些不良生理反应。
本试验测定起主要抗营养作用的胰蛋白酶抑制因子、凝集素及大豆抗原中的大豆球蛋白和B一伴大豆球蛋白。
1材料与方法1.1腮酶的测定脲酶活性测定参照国标GB8622--88执行。
豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性测定方法研究 (2)

收稿日期 :2005 - 11 - 03 ;修回日期 :2005 - 12 - 09
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
一个胰蛋白酶单位 (AU) ,是 10ml 反映溶液在 本文叙述的条件下 ,于 410nm 处测得反映前后所增 加 0. 01 光密度为 1 单位 (Absorbance Unit) ,胰蛋白酶 抑制剂活力用胰蛋白酶抑制剂单位 ( TLU) 表示 。 2 结果计算
用 TLUΠml 对分析所用提取液体积 (ml) 做标准 曲线 ,并外推到零 。每克样品的 TLU 值 = 延伸值 × 稀释倍数 ,当用分析的提取液的 TLUΠml 对分析液体 积做图并不是直线关系时 ,则计算出每单位体积提 取液中 TLU 平均值 ,则 TLUΠg 样品 = 平均值 ×稀释 倍数 , 测出常见豆制品结果见附图 。
王英男1 ,修建成2 ,富校轶1 ,李家栋1
(1. 国家大豆工程技术研究中心 ,哈尔滨 150050 2. 哈药总厂哈尔滨康铃科技开发有限责任公司 ,哈尔滨 150086)
摘要 :利用紫外分光光度计 ,对豆制品中胰蛋白酶抑制剂在抑制牛胰蛋白酶活性反应前后的吸光 值差异制作差值曲线 ,从而得出斜率与抑制剂活性之间关系的方法 。并通过反复的实验对比 ,最 终可以快速准确地测定大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性 。 关键词 :豆制品 ;胰蛋白酶抑制剂活性 ;测定方法
Measurement of Trypsin Inhibitor Activities in Soybean Product Wang Yingnan1 ,Xiu Jiancheng2 ,Fu Xiaoyi1 ,Li Jiadong1
有用大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂_SKTI_研究进展

第21卷 第3期2002年 8月大 豆 科 学SOYBEAN SCIENCEVol.21 No.3Aug. 2002大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKT I)研究进展赵洪锟 李启云 王玉民 庄炳昌(吉林省农业科学院吉林省生物技术重点开放实验室,公主岭136100)摘要 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKT I)是一种典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂,主要集中在大豆的子叶中。
近60年来,对其生化特性及结构已有较多研究,通常认为这种蛋白酶抑制剂具有贮藏、调节内源蛋白酶活性及植物防御等作用。
研究表明,这种蛋白酶抑制剂抗虫谱广,能显著抑制幼虫的生长发育不易产生抗性,对人畜无害,因此对其进行研究及开发利用具有重要的经济和社会效益。
迄今为止,至少已有4种基因被克隆,通过转基因技术在烟草、水稻、小麦等作物获得了抗性植株.本文从SKT I的类型、基因克隆及生理功能等方面作一简单综述。
关键词 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKTI);类型;基因克隆;生理功能中图分类号 S565 1 文献标识码 A 文章编号 1000-9841(2002)03-0218-05大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂属典型丝氨酸蛋白酶抑制剂,自从1945年由Kunitz发现以来,科学家们从此展开了大量的研究,在生理生化及分子生物学等多方面都取得了进展,发现其生理功能除了作为种子贮藏蛋白,调节内源蛋白酶的活性以外,更重要的是具有保护种子不受昆虫和病原菌等的侵害。
随着分子生物学的发展,一些基因已经被克隆,而对于其抗虫的分子机制的研究有相当大一部分工作集中在转基因植物上,已经培育出了抗虫烟草、水稻及小麦等转基因植物。
为了更好的进一步开展大豆胰蛋白酶抑制剂方面的研究,本文将从以下几个方面对其国内外研究进展做一简单综述。
1 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的发现、类型及分布频率变化20世纪40年代人们发现了植物中含有蛋白酶抑制剂,在植物的贮藏器官特别是种子中,其含量常常高达总蛋白的10%[1]。
大豆胰蛋白酶抑制因子论文

大豆胰蛋白酶抑制因子论文大豆胰蛋白酶抑制因子动科1112班 2011230054 夏娉摘要:大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中的主要抗营养因子,是一种蛋白质或多肽,可与胰蛋白酶结合形成稳定的化合物,从而抑制胰蛋白酶活性。
本文主要从胰蛋白酶抑制因子的理化性质,作用机理,危害,应对措施,展望等方面进行综述。
关键词:胰蛋白酶抑制因子作用机理危害应对措施展望引言:在生大豆中胰蛋白酶抑制因子含量约30毫克/克,它对植物本身有保护作用,可防止大豆自身发生分解代谢,并具有抗虫作用,因此是大豆的含需成分。
[1]。
但随着养殖业的不断发展,为达到更好地养殖效益以及产品质量,对饲喂养殖动物的食品和饲料的要求日益增加,因此对饲料中常见到的抗营养因子的研究越来越受关注,胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中含量高,对畜禽危害最大的一种抗营养因子,可抑制鸡、猪等畜禽的生长,引起胰腺肿大,抑制蛋白酶活性。
本文主要是针对目前已有的大豆胰蛋白酶抑制因子研究作一综述。
1 大豆胰蛋白酶抑制因子的种类和理化性质大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆中的主要抗营养因子。
目前从大豆中分离出的胰蛋白酶抑制因子主要是Kunitz型胰蛋白酶抑制因子(KTI)和Bowman- Birk 型胰蛋白酶抑制因子( BBI)。
KTI由181个氨基酸和少量的半胱氨酸形成的2个二硫键组成。
活性中心位于第63号精氨酸和第64号异亮氨酸之间,主要对胰蛋白酶直接且专一的起作用,与胰蛋白酶1:1定量结合[2]。
KTI不溶于乙醇;遇酸和蛋白酶易失活;热不稳定:80℃时短时间加热变性;90℃不可逆失活。
BBI是由71个氨基酸所组成的单肽链,包含7个二硫键,其分子量约为8kDa。
BBI分子中有两个活性中心:一个是赖氨酸16-丝氨酸17,为胰蛋白酶结合位点;另一个是亮氨酸44-丝氨酸45,为胰凝乳蛋白酶结合位点。
[3]BBI不溶于丙酮;对热、酸较稳定;105℃干燥10min仍能保持活性;不易被蛋白酶水解。
大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

中国食品学报Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology第20卷第7期2 0 2 0 7 月Vol. 20 No. 7Jul. 2 0 2 0大豆Bowman-Birk 胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定王 耀“ 李燕虹“ 吴佳蓿!邢云瑞2曹金博!陈秀金!李兆周!邓瑞广2胡骁飞2#(1河南科技大学食品与生物工程学院 食品加工与安全国家级实验教学示范中心 河南洛阳4710232河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室 郑州450002)摘要 为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk 胰蛋白酶抑制因子(BBI "单克隆抗体(mAb ),以50憾/只的免疫剂量将BBI 免疫BALB/c 小鼠,采用间接ELISA 和间接竞争ELISA 试验鉴定多抗血清效价和敏感性$选择 血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI mAb 的稳定杂交瘤细胞株$采用体内诱生腹水法制备BBI mAb 并对其免疫学特性进行鉴定。
结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半 数抑制浓度(IC 50)为868.58 ng/mL 。
经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb 效价达到1 : 4.096X105以上,亚型为IgG 1型,IC (0为83.07 ng/mL ,具有亲和力较高且特异性强的优F ,表明所制备的mAb 免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制(中BBI 的免疫学检测方法提供良好的抗体基础$关键词 大豆Bowman-Birk 胰蛋白酶抑制因子;单克隆抗体;免疫学特性文章编号 1009-7848(2020)07-0216-06doi : 10.16429/j.1009-7848.2020.07.026大豆富含蛋白质、脂肪和碳水化合物等物质, 可为机体提供丰富的营养,是非常重要的食用蛋白、油脂及饲料来源叫大豆中也存在一些致敏蛋 白和抗营养因子(Antinutritional factors ,ANF )D 2E , 胰蛋白酶抑制因子(Trypisin inhibitor ,TI )是其中重要的一类#TI 可引发过敏反应,也可抑制胰蛋白 酶和糜蛋白酶活性,影响消化吸收,阻碍机体生 长TI 主要包括2种类型比一种是Kunitz 胰蛋白酶抑制因子(Kunitz trypsin inhibitor , KTI ),分 子质量为20#25 ku ,主要作用于胰蛋白酶,可与胰 蛋白酶等比例结合,不溶于乙醇,对热和酸较敏感,易失活叫另一种是Bowman-Birk 胰蛋白酶抑 制因子(Bowman-Birk inhibitor ,BBI ),分子质量为6~10ku ,含有2个独立的活性中,又称为双头 抑制因子, 可与胰蛋白酶 糜蛋白酶等比例结合或与两种酶同时结合叫不溶于酮,耐热和酸且收稿日期:2019-07-27基金项目:国家自然科学基金项目(31702218);国家科技支撑计划项目(2014BAD13B05);河南省自然科学基金项目(182300410038);河南省高等学校重点科研项目(18B550001);河南省动物免疫学重点实验室开放课题(PKLAI20170603)作者简介:王耀(1986—),男,博士,副教授通讯作者:胡骁飞 E-mail : ****************不易被酶水解,相比KTI 较为稳定[8-9]o 传统检测 TI 的于酶化学分析法,其在灵敏和稳性 存在不足,且 结 分TI 的体类型[10]o 酶吸附试验(Enzyme linked im munosorbent assay ,ELISA )可通过特异性抗体准TI , 、 敏分 , 是 来 TI 的主要一问。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
大豆胰蛋白酶抑制因子动科1112班 2011230054 夏娉摘要:大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中的主要抗营养因子,是一种蛋白质或多肽,可与胰蛋白酶结合形成稳定的化合物,从而抑制胰蛋白酶活性。
本文主要从胰蛋白酶抑制因子的理化性质,作用机理,危害,应对措施,展望等方面进行综述。
关键词:胰蛋白酶抑制因子作用机理危害应对措施展望引言:在生大豆中胰蛋白酶抑制因子含量约30毫克/克,它对植物本身有保护作用,可防止大豆自身发生分解代谢,并具有抗虫作用,因此是大豆的含需成分。
[1]。
但随着养殖业的不断发展,为达到更好地养殖效益以及产品质量,对饲喂养殖动物的食品和饲料的要求日益增加,因此对饲料中常见到的抗营养因子的研究越来越受关注,胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中含量高,对畜禽危害最大的一种抗营养因子,可抑制鸡、猪等畜禽的生长,引起胰腺肿大,抑制蛋白酶活性。
本文主要是针对目前已有的大豆胰蛋白酶抑制因子研究作一综述。
1 大豆胰蛋白酶抑制因子的种类和理化性质大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆中的主要抗营养因子。
目前从大豆中分离出的胰蛋白酶抑制因子主要是Kunitz型胰蛋白酶抑制因子(KTI)和Bowman- Birk 型胰蛋白酶抑制因子( BBI)。
KTI由181个氨基酸和少量的半胱氨酸形成的2个二硫键组成。
活性中心位于第63号精氨酸和第64号异亮氨酸之间,主要对胰蛋白酶直接且专一的起作用,与胰蛋白酶1:1定量结合[2]。
KTI不溶于乙醇;遇酸和蛋白酶易失活;热不稳定:80℃时短时间加热变性;90℃不可逆失活。
BBI是由71个氨基酸所组成的单肽链,包含7个二硫键,其分子量约为8kDa。
BBI分子中有两个活性中心:一个是赖氨酸16-丝氨酸17,为胰蛋白酶结合位点;另一个是亮氨酸44-丝氨酸45,为胰凝乳蛋白酶结合位点。
[3]BBI不溶于丙酮;对热、酸较稳定;105℃干燥10min仍能保持活性;不易被蛋白酶水解。
这两种抑制因子通过结合位点的作用与胰蛋白酶络合,从而使胰蛋白酶失活,起到对昆虫、动物及人类的抗营养作用。
根据大豆胰蛋白酶抑制因子的结构特点和理化性质,可以破坏分子中的二硫键、结构从而使其失活。
2 大豆胰蛋白酶抑制因子的作用机理胰蛋白酶抑制因子本身即为蛋白质或多肽,可与蛋白酶结合形成稳定的化合物,使酶的活性被抑制。
胰蛋白酶抑制因子的抗营养机理主要表现在抑制动物生长和引起胰腺增生、胰腺肿大两个方面[4]。
①胰蛋白酶抑制因子与小肠中胰蛋白酶结合,生成无活性的复合物,降低胰蛋白酶的活性,导致低蛋白质的利用率和消化率下降。
②引起动物机体蛋白质内源性消耗。
胰蛋白酶与胰蛋白酶抑制因子结合排出体外,引起胰腺进一步分泌更多的胰蛋白酶,造成动物胰腺增生和肿大,同时胰蛋白酶中含硫氨基酸较高,造成机体S-AA缺乏不平衡。
3 大豆胰蛋白酶抑制因子对动物的危害大豆胰蛋白酶抑制因子可与动物小肠液中的胰蛋白酶结合,降低胰蛋白酶的活性,导致蛋白质消化利用率下降,并能引起动物生长抑制作用,如引起老鼠、小鸡的胰腺肿大和增生等。
李素芬等[5]结果表明随着饲料中的胰蛋白酶抑制因子含量的增加,肉仔鸡的采食量随之下降而且随着胰蛋白酶抑制因子含量的提高在一段时间内肉仔鸡胰腺质量明显增加,胰腺细胞数量增多、体积增大且伴有空泡样变性。
黄少文等(1994)[6]胰蛋白酶抑制因子能降低禽类小肠胰蛋白酶活性和日粮蛋白质消化率并引起胰腺代偿性肿大和生产性能下降。
侯水生等(1996)[7]研究也表明胰蛋白酶抑制因子会造成肉用仔鸡胰腺增生和肿大。
Grant等(1995)[8]报道,胰蛋白酶抑制因子的浓度越高,胰腺肿大程度越高;胰蛋白酶抑制因子浓度低时,胰腺甚至不肿大。
此外,胰蛋白酶抑制因子会严重影响仔猪及生长肥育猪的生长速度和饲料利用率[6]。
Herkelman等(1990)[9-10]用生大豆为唯一蛋白质来源饲喂断奶仔猪或幼年生长猪,导致其生长速度下降。
在哺乳期使用生大豆为唯一蛋白质来源会引起断奶仔猪数和断奶体重的下降。
仔猪成活率降低,母猪体重损失过大。
4 大豆胰蛋白酶抑制因子的失活方法胰蛋白酶抑制因子结构中活性部位的氨基酸是其具有抑制活性的必要条件,因此破坏其分子中的二硫键即可使其失活。
目前对胰蛋白酶抑制因子失活的研究有很多,主要在物理失活、化学失活、生物学失活等几个方面获得明显的进展[11]。
物理失活方法包括热失活法、超声波失活法和其他物理失活法。
大豆中的胰蛋白酶抑制因子对热具有不稳定性,热失活法是最早发现、研究,也是最常用的失活方法。
马得莹等(2000)[12]对大豆进行湿热处理,认为在120℃(0.1Mpa)条件下加热10min,大豆中的抗营养因子失活,并且较好地保存大豆的营养价值[12]。
过度加热能引起大豆蛋白必需氨基酸损失。
因此,对大豆产品进行加热处理时应使用最佳条件(温度、时间、水分、含量和压力),以便在最大程度失活胰蛋白酶抑制因子同时使大豆蛋白溶解度减少和必需氨基酸损失降到最低[1]。
杨汝德等(1998)用超声波处理大豆制品,钝化其中的胰蛋白酶抑制剂[13]。
化学失活法,用化学试剂作用于胰蛋白酶抑制因子,破坏其分子中的二硫键,从而使其失去活性。
Friedman和Gumbman(1986)报道在生豆粕中加入0.3mol Na2SO3,同时用75℃处理1h,可完全钝化大豆胰蛋白酶抑制因子,且亚硫酸残留量极地[14]。
Wedzicha等(1984)研究利用偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)和亚硫酸钠(Na2SO3)钝化大豆胰蛋白酶抑制因子,使其二硫键重组成为不可逆的失活分子基团[15]。
生物还原失活法,生物还原剂的作用在于使STI和BBI中的二硫键还原成巯基,胰蛋白酶抑制因子的活性中心受到破坏而失活。
Boihon C.等(1992)实验证明了大豆胰蛋白酶抑制剂能够被NADP-氢化氧还原蛋白(LA-Trxh)还原而失活[16].5 发展前景目前对于胰蛋白酶抑制因子种类和理化性质、作用机理、危害等的研究日益成熟,但对于胰蛋白酶抑制因子的失活的方法还有待完善。
如热失活法的温度、时间等较难控制,易破坏氨基酸的活性;化学失活法会有一定的化学试剂残留,影响饲料安全。
除了胰蛋白酶抑制因子的抗营养作用,大豆胰蛋白酶抑制因子同时还具有重要的防护功能,并且大豆胰蛋白酶抑制因子含有丰富的含硫氨基酸,降低其含量就会降低其营养性,因此最好的途径是培育或发现无活性胰蛋白酶抑制因子,而不是统统的去除,这需要我们寻找一些大豆胰蛋白酶抑制因子突变新品种。
TI的基因工程研究,Surekha等[17]将芥类植物大辣芥种子中含有的TI的基因转移到烟草或番茄中,发现这些植物都获得了明显的抗虫性,而且TI随着植物生长的发育成熟而逐渐丧失了其抑制活性,从而可以抵制各种病虫害的侵害,而在种子成熟后,抑制活性逐渐消失,对食用其种子的人畜则没有毒害。
对胰蛋白酶抑制因子(TI)在医药产业和农业产业的研究也有不同的进展并且具有广阔的进展前景。
而且在之后的研究中可能会向TI的有利价值方面的进展。
参考文献[1]金蓓,田少君.大豆胰蛋白酶抑制剂研究概况[J].粮食与油脂,2005(6):3-6.[2]王长良,张永忠,孙志刚.Bowman- Birk 型大豆胰蛋白酶抑制剂研究进展[J].大豆科学,2007,26( 5) : 757- 760.[3]Odani S,IKenaka T.Studies on soybean trypis inhibitiors VIII.disulfide bridges in soybean bowman-birk protease inhibitiors [J].Biochem,1994,74:697.[4]Naim M,Gerlter A,Birk Y.The effect of dietary raw and autoclaved soybean protien fractionson on growth,pancreatic enlargement and pancreatic enzymes in rats[J].The Journal of Nutrition,1982,47:281-288.[5]李素芬,杨立杰,霍贵成等.肉仔鸡对胰蛋白酶抑制因子的耐受性研究[J].中国家禽,2000(3):8-10.[6]黄少文.大豆产品中胰蛋白酶抑制因子及其对猪禽生产性能的影响综述[J].湖南畜牧兽医,1994(1):11-14.[7]侯水生,黄俊纯,赵玲,王述容.生豆粕胰蛋白酶抑制因子对肉用仔鸡生长发育的影响[J].营养学报,1996(1):103-107.[8]Grant G et al.1995.Consumption of diets containing raw so ybeans,kidney beans,cow peas or lupinseed by rat for up to 700 days:effect on body composition and organ weights[J].Brit.J.Nutr,73:174-29.[9]Herkelman,K.L.et al.1990,J.Anim.Sci.68(suppl.1),(abst).[10]Herkelman,K.L.et al.1990,J.Feedstuffs 62 (52)13,16,17,22.(abst).[11]刘欣,冯杰.大豆胰蛋白酶抑制因子(TI)的研究进展[J].浙江大学饲料科学研究所,2005,14(6):39-40.[12]马得莹,谢幼梅,曲强.湿热处理对全脂大豆抗营养因子的影响[J].山东农业大学学报:自然科学版,2000,(2).[13]杨汝德,梁汉华,郭乾初.超声波钝化大豆胰蛋白酶抑制素的研究[J].华南理工大学学报,1998,26(4):66-71.[14]Friedman M,Gumbman M.R.Nutritional improvement of soy flour through Inactivation of trypsin inhibitors by sodium sulfite[J].Food Sci,1986,51(5):1239-1241.[15]Wed B L.Chemistry of Sulfur Dioxide in Foods.Elsevier Applied SciencePubishers[J].London and New York,1984,69.[16]Boihin C,Jin-an J,Roberbel K,Bob B B.Stability of Thioredoxin-linked Reduction on the Activity and Stability of the Kunitz and Bowman-Birk Soybean Trypsin Inhibitor[J].American Chem Soci,1992,40:2333-2336.[17]Mandal S,Kundu P,Roy B,Precoursor of the inactive 2S sced storage protein from the Indian mustard Brassico junceu is a novel trypsin inhibitor[J].J Biol Chem,2002,227(40):37161-37168.。