第15章甾体激素类药物的分析

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甾体激素类药物的分析

甾体激素类药物的分析

炔雌醇
橙红
炔雌醚
橙红
泼尼松

泼尼松龙
深红
荧光
无 黄绿 黄绿
无 无
加水稀释
褪色并澄清 絮状↓玫红
↓红色
黄→蓝绿 絮状↓灰
与四氮唑的呈色反应 1 C17 – α – 醇酮基还原性
A. 呈色反应
肾上腺皮质 激素药物
四氮唑盐 OHˉ
呈色
原理:肾上腺皮质激素类药物的C17-α -醇酮基具有还原性,在碱性条件下可 将四氮唑还原为有色的甲臜,常用的四氮唑盐有两种:氯化三苯四氮唑和二聚 体蓝四氮唑。两种试剂均无色,它们在碱性条件下与α -醇酮基发生氧化还原 反应,a-醇酮基在该反应中失去2个电子,其C21位上醇被氧化为醛。TTC和 BT的结构及还原产物如P279。
1.雄性激素母核有19个碳原子,蛋白同化激素 C10位上一般无角甲基, 母核有18个碳原子。
2. A环△4-3-酮基:UV、与羰基试剂反应
3.C17位上有β-羟基,或由它们形成的酯
雌激素
具有促进女性身体发育、促使皮下脂肪富集、体内 钠和水的深留以及骨中钙的沉积等活性。
雌二醇
炔雌醇
1. 母核有18个碳原子,C10无角甲基
注意事项:醋酸甲地孕酮分子结构中具有C6位双键,其最大吸收波长在 287nm,而C6位无双键的有关杂质的最大吸收波长在240nm。
(四)游离磷酸盐检 查磷 钼酸比色法
原理:磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵[(NH4)3MoO4] 反应,生成磷钼 酸铵(钼蓝)[(NH4)3PO4▪12MoO3],再经1-氨基-2萘酚-4-磺酸溶液 还原成磷钥酸蓝(钥蓝)后,在波长740mn处有最大吸收,通过比较供试 品溶液和对照品溶液的吸光度值大小来控制药物中游离磷酸盐的量。反 应原理如P285。

药物化学 第15章 甾体激素类药

药物化学 第15章  甾体激素类药

H HO
雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,17β -二醇
理化性质
A环芳构化:UV吸收 3-酚羟基:弱酸性 ,与三氯化铁作用显草 绿色,加水稀释后变红色 甾环:与硫酸作用显黄绿色荧光 不稳定,易代谢,口服无效
用途:治疗卵巢功能不全所引起的疾病
炔雌醇Ethinylestradiol
OH CH3 C H CH
可以和炔诺酮,或甲地孕酮配伍制成口服
避孕药
己烯雌酚 Diethylstilbestrol
反式有效,平面结构,
双键氢化无效
CH3
OH
HO
H 3C
OH
雌二醇和己烯雌酚 的立体相似性
HO
OH
HO 1.45nm
己烯雌酚
酚羟基,遇光易氧化变质。
本品加硫酸溶解后显橙黄色,加水稀释颜色即消 失。本品用稀乙醇溶解后,加1%三氯化铁溶液一 滴,生成绿色配合物缓缓变成黄色。 本品为人工合成雌激素代用品,可作为应急事后 避孕药。 口服有效,多制成口服片剂应用,也可溶在植物 油中制成油针剂。
非医疗目的而使用(滥用)此类药物则会导致生理、 心理的不良后果。
☺ 在生理方面,滥用蛋白同化制剂会引起人体内分泌系统 紊乱、肝脏功能损伤、心血管系统疾患甚至引起恶性肿 瘤和免疫功能障碍等等。 ☺ 在心理方面,滥用这类药物会引起抑郁情绪、冲动、攻 击性行为等等。 ☺ 此外,滥用这类药物会形成强烈的心理依赖。 ☺ 蛋白同化制剂和肽类激素的滥用问题伴随着现代竞技体 育运动的发展而出现并日趋严重,又随着人们生活水平 的提高、对健美的渴望和健身运动的普及而向学校体育 和社会体育领域蔓延。 ☺ 一方面,滥用此类药物的人员越发普遍;另一方面,滥 用者的年龄亦日趋减小,严重威胁着公众特别是青少年 的身心健康。

15章 甾体激素类药物分析

15章 甾体激素类药物分析

四、非水溶液滴定法
米非司酮:有碱性 冰醋酸、 结晶紫、 高氯酸
第五节 体内甾体激素类药物分析
药物代谢研究 生物利用度研究 违禁药物监测 专属性强 灵敏度高
LC-MS
GC-MS
1、四氮唑比色法适用于 皮质激素类
药物含量测定的方法,常用的四氮唑盐
有 红四氮唑 和 蓝四氮唑 。
2、甾体激素用四氮唑显色测定时 须在碱性条件下进行,适用的碱 ( )。
一、高效液相色谱法
应用于原料和制剂的含量测定 反相 内标法
应用示例
黄体酮的含量测定
二 、紫外分光光度法
甾体激素药物分子中有△4-3-酮基和 苯环等共轭体系
△4-3-酮基:在240nm有最大吸收 苯环: 在280nm有最大吸收
这些特征吸收可用于含量测定
三、比色法 (一)四氮唑比色法
用于皮质激素药物的含量测定 C17-α醇酮基有还原性,可还原四氮 唑盐成有色甲噆,用于比色法唑(TTC) 其还原产物为不溶于水的深红色三苯甲噆 λmax在480nm~490nm,也称红四氮唑
N C N
N
N+Cl-
(2)蓝四氮唑(BT) 还原产物为暗蓝色的双甲噆(formazan) , λmax在525nm左右。
H3CO
N+ ClN C
OCH3
N+ ClN C
norgestrel
共性
母核21个C原子
18C
△4-3-酮基
C17-甲酮基
乙炔基
四、雌性激素estrogen
H CH3 OH
H H HO H
OH CH3 C CH
雌二醇
estradiol
HO H
H H
炔雌醇

药物分析学(第十五章)甾体激素类药物分析与鉴别实验

药物分析学(第十五章)甾体激素类药物分析与鉴别实验
例: Chp中雌二醇鉴别
取本品约2ml,加硫酸2ml溶解,有黄绿色荧 光,加三氯化铁试液2滴呈草绿色,再加水稀 释,则变为红色。
★ ★(二)官能团的呈色反应
利用官能团的呈色反应可区别不同的药物 ★ ★ 1.C17-α-醇酮基的呈色反应 C17-α-醇酮基有还原性,能与氧化剂四氮
唑盐反应显色。 例:(Chp中醋酸泼尼松鉴别) 醋酸泼尼松在碱性条件下与氯化三苯四氮
b. C=C伸缩振动频率在1620~1585cm-1, (峰尖、中等)
物理常数
★ ★呈色反应
★ (一)与强酸的呈色反应(甾体母核) 与硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸等呈色. 硫酸呈色反应应用最广 1)反应颜色最丰富 2)灵敏度较高 可能机制为浓硫酸与甾体的酮基质子化反
应,形成正碳离子,然后与HSO4-作用。
与硫酸显色反应
显 色 荧光 加水稀释
醋酸可的松 黄或微 带橙
每种化合物都有红外吸收,从红外光谱可以得 到大量信息。官能团区的吸收反映了化合物中 官能团的特征,而指纹区的吸收对于指认分子 提供了可靠的依据。
红外分光光度法的应用
各国药典几乎均采用红外分光光度法鉴 别甾体激素原料药物,中国药典中36种 甾体激素原料药物,其中33种采用该方 法鉴别!
鉴别方法:
例:醋酸酯类药物
R OCOCH 醇制KOH
HSO CHOH
CHCHOCOCH
香 戊酸、己酸酯类药物,有特臭。
制备衍生物测定其熔点
[原理] 1.甾醇、甾酮类药物可与一些试剂反应生成酯、
肟、缩氨脲. 测定其熔点进行鉴别。 2.利用醇制碱液水解甾体酯类生成相应的母体,
测定其熔点进行鉴别。
[特点] 繁琐费时,但专属性强.目前仍为一些国家药典

药物分析 课件 甾体激素类药物的分析

药物分析 课件 甾体激素类药物的分析

3 致突变性评价
评估甾体激素类物质的致 突变性可以了解其对遗传 物质的影响。
结论
通过本课件学习,我们可以深入了解甾体激素类药物的分析方法和质量控制, 以及对其安全性进行评估的重要性。还可以展望甾体激素类药物未来的发展 趋势。
甾体激素类药物的分类及常用药物
类固醇
类固醇是甾体激素类药物的 重要一类,具有抗炎、免疫 调节等作用。
雄激素与雌激素
雄激素和雌激素是甾体激素 的两个主要类型,它们在生 殖和激素替代治疗中起着重 要作用。
肾上腺皮质激素
肾上腺皮质激素是甾体激素 类药物的另一类,常用于抗 炎、免疫调节和治疗肾上腺 功能不足。
甾体激素类药物的分析方法
1
化学方法
高效液相色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是甾体激素类药物分析的常用化学方 法。
2
生物方法
免疫分析法和生物反应器法是甾体激素类药物分析的重要生物方法。
甾体激素类药物的质量控制
1 纯度检测
甾体激素类药物的纯度可以通过物理性质分 析和化学性质检测进行评估。
2 含量测定
准确测定甾体激素类药物的含量是确保药物 质量重要步骤。
3 杂质检测
杂质检测有助于评估甾体激素类药物的纯度 和安全性。
4 物理和化学性质检测
通过物理性质和化学性质的检测,可以进一 步评估甾体激素类药物的质量。
甾体激素类物的安全性评价
1 急性毒性评价
评估甾体激素类药物的急 性毒性对于确保人体安全 至关重要。
2 慢性毒性评价
慢性毒性评价可以揭示甾 体激素类药物的长期使用 对人体的潜在危害。
药物分析 课件 甾体激素类药 物的分析
这是一份关于甾体激素类药物分析的课件。通过本课件,我们将深入探讨甾 体激素的概述、分类、分析方法、质量控制、安全性评价以及未来发展趋势。

甾体激素类药物的分析(一)_真题-无答案

甾体激素类药物的分析(一)_真题-无答案

甾体激素类药物的分析(一)(总分66,考试时间90分钟)一、A型题题干在前,选项在后。

有A、B、C、D、E五个备选答案其中只有一个为最佳答案。

1. 中国药典(2000年版)对收载的甾体激素原料及其制剂的含量测定中约有30%采用紫外分光光度法,其具体方法为A.对照品对照法B.标准曲线法C.吸收系数法D.解线性方程法E.标准加入法2. 取某甾体激素药物约0.02g,置磨口试管中,加氢氧化钾溶液(1→20)10ml使溶解后,加苯甲酰氯0.1g,振摇,滤出沉淀,将沉淀经甲醇重结晶,并于减压或五氧化二磷干燥器中干燥,测其所得衍生物熔点为200-202℃。

该药物应为A.醋酸地塞米松B.炔诺酮C.丙酸倍氯米松D.雌二醇E.炔雌醇3. 本类药物共有的化学结构是A.C17-α醇酮墓B.环戊烷骈多氢菲母核C.炔基D.△4--3-酮基E.酚羟基4. 丙酸睾酮中其他甾体检查的方法应采用A.TLCB.TLC高低浓度对比法C.TLC对照品对比法D.HPLC主成分自身对照法E.HPLC对照品对照法5. 采用HPLC测定醋酸地塞米松含量所用内标物质是A.地塞米松B.可的松C.甲睾酮D.炔雌醇E.泼尼松6. 某甾体激素药物的红外光谱图中,有以下几个主要特征峰νc=c1615、1590、1505cmˉ1(苯环骨架振动)ν≡CH3300cmˉ1(炔基特征峰)ν_OH3610cmˉ1(游离酚羟基伸缩振动)ν_OH3505cm_1(C17-羟基的伸缩振动)该药物应为A.炔诺酮B.泼尼松龙C.炔雌醇D.黄体酮E.雌二醇7. 炔雌醇的乙醇溶液,加硝酸银试液产生白色沉淀反应的依据A.炔雌醇分子结构中的苯环特性B.C3上的酚羟基的酸性C.C17上的β-羟基特性D.C17上乙炔墓和Ag+生成炔银E.C3上酚羟基和Ag+生成白色沉淀8. 有机氟药物鉴别时,应将有机氟转化为无机氟离子后,再与茜素氟蓝试液、硝酸铈试液反应生成蓝紫色。

此处采用的方法是A.水解法B.氧瓶燃烧法C.有机破坏法D.直接回流法E.碱性还原法9. 裴林试液即是A.氨制硝酸银试液B.醇制氢氧化钾试液C.碱性酒石酸铜试液D.碱性枸橼铜试液E.碱性三硝基苯酚试液10. 皮质激素与裴林试液反应的原理是A.皮质激素C17-α醇酮基具还原性B.裴林试液具氧化性C.裴林试液的碱性D.皮质激素将裴林试液中的Cu2+还原为Cu20红色沉淀E.裴林试液中的Cu2+将皮质激素氧化成红色难溶物11. 中国药典(2000年版)采用HPLC测定醋酸泼尼松龙含量时,所用内标物质为A.醋酸氟轻松B.氢化可的松C.醋酸可的松D.醋酸泼尼松龙E.醋酸地塞米松12. 取某甾体激素类药物约5mg,加甲醇0.2ml溶解后,加亚硝基铁氰化钠细粉3mg,碳酸钠与醋酸铵各约50mg,即显蓝色。

药物分析学(第十五章)甾体激素类药物的分析和鉴别实验

药物分析学(第十五章)甾体激素类药物的分析和鉴别实验

高效液相色谱法
主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别
方法:对照品法 一般在含量测定的同时进行鉴别.
要求在含量测定项下记录的色谱图中, 供试品峰的tR与对照品峰的tR一致。
第三节、特殊杂质检查
[必要性]:甾体激素药物多由结构改造来, 可能带来原料、中间体、异构体、降解产 物以及试剂、溶剂等。
[特点]:
(1)可能存在多个甾体杂质 (2)结构类似,多数为未知物质
分析方法必须 具有一定分离 能力
其他甾体检查法
★ (一)TLC检查法(高低浓度对比法)
使用最为普遍的甾体特殊杂质检查法
采用供试品的稀释溶液做对照,以对照溶液斑 点颜色为参比来控制杂质限量。
中国药典2005版36种甾体激素原料药物,其中 33种采用该方法检查特殊杂质!
ν C=O △4 – 3 – 酮1684~1620cm-1
4.此类药物还可能含有羟基、醚键等特
征结构。
甾体激素药物某些基团的红外特征频率
★★见书292-293页表10-3 炔雌醇的红外吸收光谱
结构特征:
苯环、酚羟基、
C17 –OH
C17 –乙炔基
HO
C CH OH
H
HH
亚甲基、角甲基
唑盐反应显色。
例:(Chp中醋酸泼尼松鉴别) 醋酸泼尼松在碱性条件下与氯化三苯四氮
唑试液反应生成红色。
[讨论]:
1).本反应亦可用于薄层色谱法鉴别甾体激 素类药物的显色反应。
(如醋酸泼尼松片及眼膏、醋酸氟氢可的 松软膏等)
2).该呈色反应不仅能用做皮质激素类药物 的鉴别和检查(“其他甾体”的检查),也 是该类药物含量测定的依据。
按规定录制红外光 谱图,要求供试品 光谱图与对照品光 谱图一致。

药物分析15章甾体激素类药物的分析

药物分析15章甾体激素类药物的分析

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第一节 基本结构与性质
母体 结构
12 11 1 2 A 3 4 5 6 10 9 B C 8 7 14 13
17 D 15 16
(环戊烷并多氢菲) 甾烷

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第一节 基本结构与性质
18
母体衍 生结构
18
19
雄甾烷
18
磷钼酸

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第四节 Assay


R
C
CAg ↓
OH C CAg
AgNO 3
炔雌醇
HO
HO

⑦ 酯基

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第二节 Identification
三、UV 四、IR
酚羟基 醇羟基
黄体酮
羰基 炔键

苯环骨架振动
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第二节 Identification
A环Δ4-3-酮基,为 共轭体系,在波长 240nm附近有紫 外吸收,部分药物 在C1-C2之间有双 键,也有紫外吸收

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本类药物结构特征
O
H3C OH H CH3
O CH3
O O O
CH3 CH3
H H F H
O
醋酸曲安奈德 Triamcinolone Acetonide Acetate
4 4
性质
UV、与羰基试剂反应 还原性 UV、与羰基试剂反应 可成酯 UV、与羰基试剂反应 与亚硝基铁氰化钠反应
雌激素

C17-乙炔基 与硝酸银反应 A环为3-OH苯环 UV、与重氮苯磺酸盐反应 C17-乙炔基 与硝酸银反应 C17-羟基 可成酯
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(六) HPLC法
主要用于甾体激素类药物 制剂的鉴别(如:醋酸曲安奈 德软膏、醋酸氟轻松软膏)
三、 杂质检查 (一)有关物质检查
1.定义 与标示药物结构不同的甾
体化合物都称为“有关物质”
(1)TLC法(高低浓度对比法)
判定方法: ❖ 规定杂质斑点数目 ❖ 规定杂质斑点颜色
(2)HPLC法(高低浓度对比法)
与亚硝基铁氰 化纳反应
水解鉴定乙酸
与硝酸银沉淀
4. 雌激素
主要活性基团
性质
A环为3–OH 苯环
UV、与重氮苯 磺酸盐反应
C17 –乙炔基 C17 –羟基
与AgNO3反应 可成酯
二、鉴别试验 (一)与强酸的呈色反应
(母核)
甾体激素 类药物
H2SO4 H3PO4 呈色
HClO4 HCl
与硫酸显色反应
苯环 280nm(±) 雌激素
(三)比色法
弱、非分 光光度活
化学反应
强分光 光度活
性药物
性药物
四氮唑比色法
1. 原理
肾上腺皮质激素类
C17 -α-醇酮基 强还原性
四氮唑盐 C醇酮基有色甲瓒
OH - [还原]
2、方法:以醋酸地塞米松为例
制备对照液 加入四氮唑盐 制备供试液
484nm 有色产物
AX
(甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体 杂质,对利用结构特征设计的比色法有干扰)
特点 用样量少,灵敏度高,分离效 果好,测定速度快
例:黄体酮的含量测定:ODS柱; 甲醇-水(65:35);254nm 内标:己烯雌酚
(二)UV法
△4-3-酮 240nm(±)
肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素
判定方法: ❖ 规定杂质峰数目 ❖ 规定杂质峰面积
(二)游离磷酸的检查 对照品法
地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠
(三)有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮
GC法
甲醇 ≤0.3% 丙酮 ≤0.5%
四、含量测定
(一)HPLC法 USP、BP、JP均采用 RP-HPLC(大多内标法)
醋酸可的松
炔雌醇 炔雌醚 泼尼松 泼尼松龙
显 色 荧光 加水稀
黄或微 带橙
褪色并澄 清
橙红
橙红 橙
黄绿 黄绿
絮状↓玫红
↓红色 黄→蓝绿
深红
絮状↓灰
(二) 官能团的反应
1 C17 – α – 醇酮基
A. 呈色反应
肾上腺 皮质激 素药物
四氮唑盐 费林试液 多伦试液
OHˉ
还原性 呈色
B. 沉淀反应
肾上 腺皮 质激 素药 物
反应过程 反应产物
怕光
O2影响 颜色强 度和稳 定性
→避光、快速
→隔绝空气、 快速、充N2
(4)碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性(pH13.75) 条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序:
皮质激素溶液四氮唑盐 碱试液
(5) 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ ChP 25℃ 40~45′
性质
UV、与羰基试 剂反应
C17 – α – 醇酮基
还原 性
2. 雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基 试剂反应
可成酯
3. 孕激素
主要活性基团
性质
△4 – 3 – 酮
C17 –甲酮基 C17 –乙酰氧基
C17 –乙炔基
UV、与羰基试 剂反应
氨制硝酸银
Ag↓黑色
碱性 酒石酸铜
Cu2O↓橙红色
2. C3–酮基和C20–酮基
甾体类激 羰基试剂 素药物
黄色的腙
#常用的羰基试剂: 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼
3. 甲酮基呈色反应
黄体酮
其他甾体
亚硝基铁 氰化纳
蓝紫色
淡橙色 不显色
4. 酚羟基
雌激素 重氮苯磺酸 红色偶
类药物
氮染料
5. 乙炔基
AR
标示量(%)=
AX× CX
×100%
AR ×V×标示量
3. 讨论 (1) 基团对反应速度的影响
C11= O> C11-OH C21-OH> C21-酯
(2) 溶剂、水分的影响 含水量>5%→ν↓ 含水10%→A↓10% — 无水乙醇 含水30%→几无反应
醛 → A↑ — 无醛无水乙醇
(3) O2与光线的影响
含炔基 的甾体 激素
硝酸银
白色银盐沉淀
AgNO3
R C CH
R C CAg↓
6. 有机卤素
蓝色配合物
有机氟 有机氯
茜素氟蓝 硝酸亚铈
有机破坏 Fˉ
Clˉ
硝酸—硝酸银
AgCl↓
(三) UV法 △4-3-酮 240nm
苯环
280nm
(四) IR法
(五) TLC法
主要用于甾体激素类药物 制剂的鉴别
第十五章
甾体激素类药物 的分析
一、基本结构及分类
C21
11 19 1
18 12
C20
17
C 13D 16
2
A
10
9
B
14 8
15
3 45 6 7
基本结构:环戊烷并多氢菲
分类:
肾上腺皮质激素
甾体激素
雄性激素及蛋 白同化激素
性激素 孕激素
雌激素
二、结构与性质
1. 肾上腺皮质激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮
异烟肼比色法
C3-酮基 1. 原理
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素
C3
酮基 异烟肼 异烟腙(黄)
HCl
(缩合)
2.测定方法
3.讨论 (1)反应速度
C3= O > C17= O 、 C20= O C11= O 不反应
反应专属性 C3-酮基
(2)溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
• .Kober反应是指雌激素类药物与_______共 热呈色。( )
• A.硫酸-甲醇 B.硫酸-乙醇
• C.硫酸-甲醛 D.硫酸-醋酐
用四氮唑比色法测定皮质激素类 药物,是利用C17 –α醇酮基的何种性 质
A.氧化性 B.还原性 C.可加 雌激素 原理
雌激素 H2S O4 乙醇桃红
λmax=515
第十章 复习内容
1、熟悉本类药物的分类,掌握其结构 特征与分析方法的关系
2、熟悉某些官能团的呈色反应,了解 其他鉴别方法
3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法,了解其他特殊杂质的检查
4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了解 UV法、Kober反应比色法及HPLC 法在其含量测定中的应用
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