抗毒清瘟汤
清瘟败毒散很常见,但用法有大讲究

清瘟败毒散很常见,但用法有大讲究清瘟败毒散是清代著名瘟病学家余师愚所创制的经典名方,载于其所著的《疫疹一得》书中。
由石膏、地黄、水牛角、黄连、栀子、牡丹皮、黄芩、赤芍、玄参、知母、连翘、桔梗、甘草、淡竹叶十四味药组成,是集“白虎汤”、“黄连解毒汤”和“犀角地黄汤”三方加减化裁而成,具有清热泻火,凉血解毒之功效。
临床上广泛用于败血症、流行性出血热等由细菌、病毒单纯或混合感染引起的气血两燔证的紧急治疗。
其适应症状包括:大热躁动、渴饮、昏狂、发斑、便血、舌绛、脏器严重出血等。
由于多数养殖户专业知识匮乏,加上部分药厂的长期错误引导,经常出现应用错误,因此在使用清瘟败毒散时应注意以下几点:一、不能作为保健中药长时间使用由于当前畜禽所发疾病以传染病居多,药物预防就成为许多养殖户的首选控制手段,由于西药长期使用会产生严重的副作用,因此人们将用药重点放于中药上。
在畜禽的饲料中不经辨证地随意加入清瘟败毒散或者水煮该散剂滤渣后饮用,美其名曰“清瘟败毒”以预防、治疗某些瘟疫病(包括近年常说的高热症),这一现象在兽医临床上较为普遍,但丢掉了中医辨证论治的基础,等同于盲子夜行。
畜禽没有气血两燔证,使用清瘟败毒散会人为制造阴阳的不平衡,这样用药不但预防不了疾病的发生,甚至机体阴阳平衡失调后更易生病。
特别是清热方在使用时,由于多为大苦大寒之剂,应先辨明里热的真假。
如真热假寒,当用清热法;真寒假热,则应使用温里回阳之剂。
屡用清热剂而热仍不退者,属阴虚火旺之证,当用滋阴壮水之法,使阴复而热自退。
此外,使用清热剂,还应根据病情轻重和患畜体质强弱来选定药量,故不宜多服久用,以免损伤脾胃。
二、不宜作为早期治疗药(方、证不对应)兽医临床中发生的传染病,大多属于温热病之范畴,因此多采用卫气营血辨证。
从分析清瘟败毒散的方义可以知道,它主要针对温病之热毒深重,亦即气分、血分热盛之证。
所谓“气分证”,是指温热病邪内入脏腑,正盛邪实,阳热亢盛。
可表现发热,不恶寒反恶热,心烦口渴,或兼咳喘、痰稠色黄等。
解读连花清瘟胶囊:古方中的大智慧,再一次的于瘟疫中拯救了中华子孙!

解读连花清瘟胶囊:古方中的大智慧,再一次的于瘟疫中拯救了中华子孙!相信各位家人都早就对连花清瘟不陌生了,因为最近实在是太火了,实际上这个药早就有了,是在非典时期由吴以岭院士研发的一个方子,主要的功效就是清瘟解毒,宣肺泄热,治疗轻型和普通型的新冠肺炎患者有确切的疗效。
知道名字还不行,我们还要知道它为什么有疗效。
其实这个方子里包含了4个子方,除了板蓝根是现代应用以外,其他的三个方都是经典古方,银翘散是辛凉平剂,麻杏石甘汤是辛凉重剂,还有防风通圣散。
由此可知,连花清瘟并不是空穴来风,而是源自古方,参考了历史上的成功经验,所以效果才会这么好。
下面我们一起来学习连花清瘟的方剂原理。
❶、连花清瘟适应症连花清瘟胶囊成份:连翘、金银花茶、炙麻黄、炒苦杏仁、熟石膏、板蓝根冲剂、绵马贯众、鱼腥草根、广藿香、黄连、红景天、薄荷脑、甘草。
主治病症:清瘟解毒,宣肺泄热。
用以医治流行性感冒属热毒袭肺证,症见:发热或高烧,畏寒,肌肉痛,鼻塞流涕,咳嗽,头痛,咽干咽痛,舌偏红,苔黄或黄腻等。
首先我们要知道瘟疫是如何形成的:瘟疫在明朝吴又可的《瘟疫论》中是这样描述的:夫瘟疫之为病,非风非寒,非暑非湿,乃天地间别有一种异气所感。
病疫之由,昔以为非其时有其气,春应温而反大寒,夏应热而反大凉,秋应凉而反大热,冬应寒而反大温,得非时之气,长幼之病相似以为疫。
余论则不然。
夫寒热温凉,乃四时之常,因风雨阴晴,稍为损益。
假令秋热必多晴,春寒因多雨,较之,亦天地之常事,未必多疫也。
伤寒与中暑,感天地之常气。
疫者,感天地之厉气。
在岁运有多寡;在方隅有厚薄;在四时有盛衰。
此气之来,无论老少强弱,触之者即病。
邪之所着,有天受,有传染,所感虽殊,其病则一。
凡人口鼻之气,通乎天气,本气充满,邪不易入:本气适逢亏欠,呼吸之间,外邪因而乘之。
昔有三人,冒雾早行,空腹者死,饮酒者病,饱食者不病,疫邪所着,又何异耶?若其年气来之厉,不论强弱,正气稍衰者,触之即病,则又不拘于此矣。
中医药与抗病毒免疫(下)

中医药与抗病毒免疫(下)王学兵/ 河南农业大学牧医工程学院一、具有抗病毒作用的中药复方具有抗病毒作用的复方主要集中在清热方、解表方和补虚方里。
代表性的方剂有清瘟败毒散、公英散、郁金散、白头翁汤、清肺散、龙胆泻肝汤、茵陈篙汤、黄连解毒散、小柴胡汤、桑菊饮、银翘散、玉屏风散、四君子汤、参岑白术散、补中益气汤、养真方、白虎汤等等。
1. 直接抗病毒作用。
主要是指对病毒的直接杀灭,以及阻断病毒对正常细胞的吸附、穿入、复制等环节而达到抗病毒的目的。
(1)直接杀灭。
是指药物对病毒侵入细胞前的杀灭作用。
王志玉报道,大黄醇提液中的蒽醌类对病毒有直接杀灭作用:李铁民报道,甘草甜素对带状疱疹病毒具有直接杀灭作用;张其威报道,板蓝根对疱疹病毒有杀灭作用而非抑制作用。
(2)阻止病毒对细胞的吸附和穿入。
张为民等人报道,黄芪组分对流感病毒包膜功能及病毒对敏感细胞的吸附和穿入有较明显的阻止作用。
许小琴等人报道,中药抗病毒活性成分中的黄酮类,多糖及衍生物,三萜类化合物及其衍生物( 如甘草甜素衍生物)、生物碱及苷类等,都是阻止病毒颗粒对宿主细胞的吸附过程,而发挥抗病毒作用的。
(3)抑制病毒的复制。
日本科学家研究发现,甘草对艾滋病病毒有较强的抑制增殖作用,如1 ml 感染艾滋病病毒的细胞,加入0.25 ml 甘草甜素,或者等计量静脉注射,就可使感染艾滋病病毒的细胞全部死亡,且无任何毒副作用。
杨海燕等人报道,中药中的多酚类物质,可以抑制流感病毒蛋白质和RNA 的合成,同时也可以抑制流感病毒的吸附作用。
(4)阻止病毒由感染细胞向未感染细胞侵染。
李铁民等人报道,带状疱疹体外感染细胞16 h 后加入甘草甜素,可抑制病毒从感染细胞向未感染细胞扩散。
许小琴等人报道,硫酸葡聚糖和硫酸戊聚糖能够抑制合胞体的形成和抑制HIV-1P24 原向培养液的释放,从而阻止病毒由感染细胞向未感染细胞的侵染。
2. 免疫调节作用(间接抗病毒作用)由于病毒感染机体后,必定寄生在机体的细胞中才能生存、繁殖,因而通过增强机体的免疫力,激发调动机体的免疫防御系统来间接发挥抗病毒作用这一途径尤为重要,更符合中兽医的“扶正祛邪”、“正气存内、邪不可干”的基本思想。
清瘟败毒散

清瘟败毒散--提高机体抗病毒能力,维护猪群健康体系【兽药名称】通用名:清瘟败毒散汉语拼音: Qingwen Baidu San【主要成分】玄参、连翘、地黄、水牛角、黄连、黄芪、栀子、牡丹皮等。
【性状】本品为灰黄色的粉末;气微香,味苦、微甜。
【功能主治】泻火解毒,凉血清热,清瘟祛邪。
提高机体抗病毒能力,维护猪群健康体系。
增加畜禽采食量,提高蛋禽产蛋量,降低死亡率。
【适应症】广泛用于畜禽细菌性、病毒性和细菌病毒混合感染性疾病。
1、本方能清热生津、清热解毒、保肝利胆、增强免疫、促进食欲。
对无名高热征、温和性猪瘟、猪高热病、伪狂犬病、细小病毒等有很好的辅助治疗作用。
(1)能使高热病变异病毒造成免疫缺陷性疾病的猪只免疫体系得到快速恢复。
(2)无名高热、伪狂犬、细小病毒等病毒引起的精神沉郁,厌食或食欲废绝,皮肤发红,毛囊、腹下、四肢末梢等有出血点;耳朵发绀呈蓝紫色,结膜炎,眼睑肿胀;咳嗽、打喷嚏、流鼻涕,气喘,呼吸困难;粪便燥结,腹泻下痢,小便赤黄量少;后躯瘫痪,站立困难,出现神经症状等,以及仔猪体质虚弱、呼吸困难、反复拉稀、腹泻不止、逐渐消瘦、脱水、走路摇摆等。
(3)高热病引起的:母畜体温升高全身红紫、耳朵发蓝、心力衰竭、呼吸困难、浑身发抖、四肢无力。
早产或流产、产死胎、木乃伊胎、产后无乳等。
2、主要针对禽新城疫、禽霍乱,传染性法氏囊炎、鸭瘟、鸡痘等病毒引起的家禽精神沉郁、缩头垂萎、眼睑流泪,甩头流鼻、排黄、绿色粪便、嗉胀、口流黏液、食欲减少、产蛋下降、便血腹泻等症。
对于大肠杆菌引起的输卵管炎、泄殖腔炎、腹膜炎、败血型大肠杆菌如包心、包肝等效果明显。
对沙门氏杆菌引起的白痢、伤寒、腹泻也有特效。
用后能迅速提高禽的采食量,改善家禽的精神状况,显著改善蛋壳颜色,增加蛋壳厚度。
3、母猪产前、产后一周给药,可提高仔猪免疫力和抗病力,减少腹泻等疾病的发生。
【用法用量】控制猪严重的高热病感染及其并发症建议使用方案参考文献:猪药(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)。
传统名方清瘟败毒散禽病临床应用

传统名方清瘟败毒散禽病临床应用清瘟败毒散:源于清代乾隆年间温病名家余师愚(名霖)所著的书籍-《疫疹一得》。
余霖,字师愚,安徽桐城人。
其原方呢,原名为“清瘟败毒饮”,即煎煮饮服,取汤饮荡速之意。
此方重用生石膏,原方有大剂,中剂,小剂之分。
据传,纪晓岚《阅微草堂笔记》载“乾隆年间京师大疫,诸医按张景岳,吴又可法多无效,有桐城医士用大剂生石膏治疗,便应手而愈,活人无数”。
此桐城医士便是余师愚!清温败毒饮转用到动物方剂上,应该是建国以后六七十年代左右(参考中兽医方剂学),而改名为《清瘟败毒散》。
清瘟败毒散配伍成分生石膏,生地,水牛角(原犀牛角),川黄连,栀子,桔梗,黄芩,知母,赤芍,玄参,连翘,丹皮,淡竹叶,甘草。
主治功能原文载:注解(括弧)内为禽病临床所见瘟疫热毒(传染病,高热),充斥内外(表里皆热),气血两燔(内火之象)证--(病因)。
大热渴饮(贪饮喜水饮),头痛如劈(肿头),干呕狂躁(吐酸水),谵语神昏(昏迷发呆),视物错瞀--(外证象)。
或发斑疹(肌肉红斑),或吐血、衄血(内脏出血),四肢或抽搐(瘫痪发抖,神经指征),舌绛唇焦(鸡冠发紫脱水发绀)--(内证象)。
脉数,沉(里热)细而数(心跳快,呼吸快),或浮大(心脏衰竭,脱水,虚脱)而数。
(脉象)用药含义此十二经泄火之药也。
(方之归经)斑疹虽出于胃,亦诸经之火有以助之。
(病位)重用石膏直入胃经,使其敷布于十二经,退其淫热;(君药之理)佐以黄连、犀角、黄芩泄心肺火于上焦;(泻心肺火)丹皮、栀子、赤芍泄肝经之火;(泻肝火)连翘、玄参解散浮游之火;(一散火于外,一补水于内,互为佐)生地、知母抑阳扶阴,泄其亢甚之火,而救欲绝之水(滋阴泻火)桔梗、竹叶载药上行,(引药)使以甘草和胃也。
(使药)此皆大寒解毒之剂,故重用石膏,先平甚者,而诸经之火自无不安矣。
(以上清热解毒,即补水泻火,阴阳生克,五脏同调之理)。
禽病临床实际辨证诸鸡冠发紫,鸡爪发热,鸡翅下烫,机体高热,神昏沉郁,肌肉发斑,内脏出血,易燥乱,胃肠便秘或湿热腹泻。
中药配方:兽医临床使用率最高的抗病毒中药之清瘟败毒散

灰黄色粉末,气味香,味苦,微甜
功能:
泻火解毒,凉血
主治:
热毒Байду номын сангаас斑,高热神昏
用量:
马牛300-450克,猪羊50-100克,家禽1-3克。预防每公斤拌料500-1000斤料
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中药配方:兽医临床使用率最高的抗病毒中药之清瘟败毒散
清瘟败毒散:
石膏120,地黄30,水牛角60,黄连20,栀子
30,牡丹皮20,黄芩25,赤芍25,玄参25,知母30,连翘30,桔梗25,甘草15,淡竹叶25(单位:克)
清瘟败毒饮的解热抗炎作用研究
清瘟败毒饮的解热抗炎作用研究黄谦;宋晓红【摘要】为了验证清瘟败毒饮的解热抗炎作用,本试验采用耳缘静脉注射内毒素的方法建立家兔发热模型,观察清瘟败毒饮的解热作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法,观察清瘟败毒饮的抗炎作用.结果显示:清瘟败毒饮能明显抑制内毒素引发的家兔发热反应,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具有明显的抑制作用.说明清瘟败毒饮具有一定的解热抗炎作用.【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)006【总页数】3页(P22-23,25)【关键词】清瘟败毒饮;解热;抗炎【作者】黄谦;宋晓红【作者单位】四川省绵阳市动物疫病预防控制中心,四川绵阳621000;重庆布尔动物药业有限公司,重庆荣昌402460【正文语种】中文【中图分类】S853.74清瘟败毒饮是清代著名温病学家余师愚所创制的名方,载于其所著的《疫疹一得》一书中,该方综合了《伤寒论》白虎汤、《千金要方》犀角地黄汤、《肘后备急方》黄连解毒汤三方加减而成,其清热泻火、凉血解毒的作用颇强,《疫疹一得》将其称为“十二经泻火之药”,《历代名医良方注释》称其为“大寒解毒之剂”,是临床治疗温病的代表性方剂。
本试验对清瘟败毒饮的解热、抗炎作用进行了药理学研究,为其进一步应用于兽医临床提供理论依据。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 实验动物日本大耳白兔,体重1.8~2.2kg,雌雄均可,雌兔无孕,由西南大学荣昌校区实验动物房提供。
用笼子单独饲养,自由饮水,采食,饲喂全价颗粒料,饲养环境的温度为22±1℃。
清洁级雄性小白鼠,体重20±2 g,重庆医科大学实验动物中心提供。
饲养环境及实验环境为SPF级动物实验室,环境温度在22±1℃,湿度为65%。
1.1.2 药品与试剂中药饮片:生石膏、地黄、水牛角、黄连、栀子、牡丹皮、黄芩、赤芍、玄参、知母、连翘、桔梗、甘草、淡竹叶,购自荣昌县石家药行;复方阿司匹林片,北京市永康药业有限公司产品,规格:0.5g/片,批号:20090318;大肠杆菌O128∶B8内毒素,Sigma 公司产品,货号:L3129,用无菌生理盐水配制成2μg/mL溶液备用;二甲苯和分析纯试剂(AR)均为成都东金化学试剂有限公司生产。
经典中药方剂:清瘟败毒散
经典中药方剂:清瘟败毒散
【产品组方】
由水牛角,石膏,生地,黄连,栀子,知母,桔梗,黄芩,赤芍,丹皮,玄参,连翘,竹叶,甘草组成,由清代温病学家余师愚所创,载于《疫疹一得》中。
【组方分析】
本方是由白虎汤,犀角(水牛角)地黄汤,黄连解毒散组合而成。
具有清热泻火,凉血解毒之功效。
方中重用石膏、知母清气分热为君药,水牛角,生地,玄参,赤芍,清营凉血解毒,黄连,黄芩栀子,连翘泄三焦实热为辅药。
竹叶利尿,导热下行,桔梗载热下行,共为佐药,甘草调和阴阳,调和药性,药物配合,气血两清,热毒可迅速清除。
临床上广泛的把本品用于各种热症。
【临床应用】
1、本放清热凉血,泻火利尿等作用,能够很好的解除由于各种原因导致的热证,如猪无名高热的防治,肉鸭热射病的治疗,夏季养殖中的暑热,大肠湿热造成的便秘等,表现症状多为精神亢奋,冠髯艳红,体温持续高热,瘫痪,脑膜出血等。
2、本品是治疗性质的药物,是大寒类药物,所以对初产鸡群,雏鸡鸡群,有一定影响,根据鸡群情况斟酌使用。
抗毒汤的功效与作用
抗毒汤的功效与作用
我们都知道中药方剂抗毒汤是由纯天然的中药材制成的,副作用很小,几乎可以忽略不计,但每个人的身体状况都是不一样的,所以大家在食用的时候还是按照正确的食用方法来,下面我们就来看一下。
【处方】
板蓝根30克,鱼腥草30克,贯众30克,虎杖18克,紫草15克,丹皮18克,赤芍21克。
【功能主治】
清热解毒,化瘀散结。
主热毒内结,瘀阻胸胁。
【用法用量】
水煎服,每日1剂,日服2次。
【摘录】
高文武方
以上就是关于抗毒汤的一些简单的介绍了,虽然说抗毒汤可以很方便服用,但是长期吃药还是不好的,所以对于我们来说日常最
重要的还是从根本上提高身体的抵抗力,这样才能减少疾病的危害,让自己拥有一个健康的身体。
清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及对铁死亡的影响
㊃基础研究㊃基金项目:天津市医学重点学科(专科)建设项目(TJYXZDXK⁃009A);天津医科大学肿瘤医院肿瘤转化医学种子基金(1910);天津市中医药管理局中医中西医结合科研课题(2021206㊁2023157)作者单位:300202 天津医科大学肿瘤医院重症监护科(武玉琳㊁王东浩),中西医结合科(崔亚萌);天津市中西医结合医院感染性疾病科(王翠菡);天津市河东区直沽中医医院中医内科(周钧)作者简介:武玉琳(1991-),硕士,住院医师㊂研究方向:肿瘤危重症的中西医结合诊疗㊂E⁃mail:wuyulin718@ 通信作者:王东浩(1970-),本科,主任医师㊂研究方向:肿瘤重症的临床及基础工作㊂E⁃mail:donghaow@清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及对铁死亡的影响武玉琳 王翠菡 崔亚萌 周钧 王东浩【摘要】 目的 研究清瘟败毒饮对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及机制研究㊂方法 取75只SD 健康雄性大鼠,按随机数字表法分为假手术组,模型组,清瘟败毒饮低㊁中㊁高剂量组,共5组㊂假手术组只切开腹壁并缝合,不进行CLP,灌胃等体积生理盐水,其余各组运用CLP 建立脓毒症肺损伤大鼠模型㊂检测治疗后各组大鼠生存率㊁肺组织的湿干重比㊁肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总蛋白含量㊁BALF 总细胞数㊁肺组织脂质过氧化水平及肺组织HE 染色,研究清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤的治疗作用㊂运用Western⁃Blot 法,检测各组大鼠肺组织中铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)㊁铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)㊁转铁蛋白(transferrin)㊁谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达情况,探讨清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠模型中铁死亡相关因子的影响,初步研究其作用机制㊂结果 模型组生存率为40.00%,清瘟败毒饮低㊁中㊁高剂量组生存率分别为53.33%㊁60.00%㊁73.33%;同假手术组相比,模型组能明显增加脓毒症肺损伤大鼠肺湿干重比(W /D)(P <0.01),模型组BALF 上清液总蛋白含量显著增多(P <0.01),总细胞数显著增多(P <0.01)㊂同模型组相比,清瘟败毒饮中㊁高剂量组能减少脓毒症肺损伤大鼠肺W /D(P <0.05,P <0.01),清瘟败毒饮低㊁中㊁高剂量组均能显著减少BALF 上清液总蛋白含量(P <0.05,P <0.01),减少总细胞数(P <0.05);同假手术组相比,模型组大鼠白细胞介素⁃6(interleukin⁃6,IL⁃6)㊁白细胞介素⁃1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)㊁肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)㊁丙二醛(malondialdehyde,MDA)㊁4⁃羟基壬烯醛(4⁃hydroxide,4⁃HNE)㊁总谷胱甘肽(total⁃glutathione,T⁃GSH)㊁氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)和二价铁离子(Fe 2+)水平显著升高(P <0.01)㊂同模型组相比,清瘟败毒饮中剂量和高剂量组大鼠IL⁃6㊁IL⁃1β和TNF⁃α水平显著降低(P <0.01),清瘟败毒饮高剂量组大鼠MDA 和4⁃HNE 水平显著降低(P <0.01);清瘟败毒饮各剂量组均能降低GSSG 和Fe 2+水平,尤其以清瘟败毒饮高剂量组更为显著(P <0.01)㊂同假手术组相比,模型组大鼠中T⁃GSH㊁GSH 水平和GSH /GSSG 比值明显降低,清瘟败毒饮各剂量组均能显著提高T⁃GSH㊁GSH 水平和GSH /GSSG 比值(P <0.01),模型组大鼠FTH㊁FTL㊁Transferrin 蛋白表达量显著增加(P <0.01),GPX4蛋白表达明显下降(P <0.01)㊂同模型组相比,经各剂量清瘟败毒饮干预后FTH㊁FTL 的蛋白表达量显著降低(P <0.01),而中㊁高剂量清瘟败毒饮干预同样可以降低Transferrin 的蛋白表达量(P <0.01);此外,清瘟败毒饮各剂量组可明显升高GPX4蛋白表达(P <0.01)㊂结论 清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用明确,其治疗机制可能同抑制铁死亡相关㊂【关键词】 脓毒症肺损伤; 铁死亡; 清瘟败毒饮; 铁蛋白重链; 铁蛋白轻链; 转铁蛋白; 谷胱甘肽过氧化酶4【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】 A doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2024.05.005The therapeutic effect of Qingwen Baidu Decoction sepsis⁃induced lung injury in rats and its influence on ferroptosisWU Yulin,WANG Cuihan,CUI Yameng,ZHOU Jun,WANG DonghaoIntensive Care Unit of Tianjin Medical University Cancer Institute&Hospital,Tianjin300202,China Corresponding author:WANG Donghao,E⁃mail:donghaow@【Abstract】 Objective To investigate the therapeutic effect and mechanism of Qingwen Baidu Decoction on sepsis⁃induced lung injury in rats with cecal ligation and puncture(CLP).Methods A total of75healthy male SD rats were randomly divided into sham operation group,model group,and low, medium,and high dose Qingwen Baidu Decoction groups,with30rats in each group.The sham operation group only underwent laparotomy and suture without CLP and was orally administered with an equal volume of normal saline.The remaining groups underwent CLP to establish a sepsis⁃induced lung injury rat model. The therapeutic effect of Qingwen Baidu Decoction on sepsis⁃induced lung injury was investigated by detecting the survival rate,wet⁃to⁃dry weight ratio of lung tissue,total protein content and total cell count in bronchoalveolar lavage fluid(BALF),lung tissue lipid peroxidation level,and HE staining after treatment.In addition,the method of western blot was used to detect the expression of FTH,FTL, transferrin,and GPX4proteins in lung tissue of each group of rats,to explore the effect of Qingwen Baidu Decoction on iron death⁃related factors in sepsis⁃induced lung injury rat model,and to preliminarily study its mechanism of action.Results Qingwen Baidu Decoction intervention could effectively reduce the lung W/D ratio,total protein content,and total cell count in BALF of sepsis⁃induced lung injury rats.It could also decrease the levels of IL⁃6,IL⁃1β,TNF⁃α,MDA,and4⁃HNE in sepsis⁃induced lung injury rats, reduce the levels of GSSG,and Fe2+,increase the level of T⁃GSH,GSH,and improve the GSH/GSSG ratio.Moreover,Qingwen Baidu Decoction could reduce lung tissue pathological changes such as alveolar rupture or fusion and inflammatory cell infiltration caused by sepsis⁃induced lung injury.In addition, Qingwen Baidu Decoction could reduce the protein expression levels of iron death⁃related factors FTH,FTL and transferrin,while increase the protein expression level of GPX4.Conclusion Qingwen Baidu Decoction has a clear therapeutic effect on sepsis⁃induced lung injury in rats,and its therapeutic mechanism may be related to the inhibition of iron death.【Key words】 sepsis⁃induced lung injury; ferroptosis; Qingwen Baidu Decoction; ferritin heavy chain; ferritin light chain; transferrin; glutathione peroxidase4 脓毒症是机体在重症感染㊁严重创伤等情况下常见的并发症,可累及肺㊁肾㊁心等多个器官㊂肺脏作为脓毒症病理变化中最易受损害的靶器官之一,有高达68.2%的脓毒症患者合并肺损伤,若不及时救治,死亡率可达43%[1]㊂因此,脓毒症肺损伤是脓毒症器官衰竭中最主要的致死性并发症之一,也是当今急危重病医学面临的重大难题㊂脓毒症肺损伤发病机制错综复杂,致病环节层出不穷㊂因此,寻找安全有效的干预措施改善脓毒症肺损伤至关重要㊂研究发现,脂质过氧化物的堆积引起肺泡上皮细胞铁死亡,是脓毒症肺损伤的重要环节[2]㊂在脓毒症肺损伤小鼠肺组织中,铁离子和转铁蛋白水平较正常小鼠显著升高[3],脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平上升[4]㊂在脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤模型中,同样发现总铁离子㊁活性氧(reactive oxygen species,ROS)㊁MDA处于较高水平㊂由此可见,通过调控铁死亡,抑制肺泡上皮细胞铁死亡,缓解脓毒症肺损伤可能是新的治疗手段㊂大量研究表明,中药复方及其有效成分在改善脓毒症肺损伤炎症反应,减轻脓毒症肺损伤等方面具有明显优势㊂研究发现,四逆汤可以通过调节ACE2⁃Ang(1⁃7)⁃Mas轴和抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路来改善脓毒症诱导的急性肺损伤[5]㊂甘草酸作为甘草的主要活性成分,能明显降低脓毒症小鼠炎症因子的表达,并可通过抑制HMGB1/TLR9通路,减少肺组织中中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的形成,缓解脓毒症小鼠的肺损伤[6]㊂在脓毒症小鼠模型中,五味子甲素可以通过减少炎症因子的产生和细胞的异常凋亡而发挥抗炎作用,进一步减轻肺损伤[7]㊂清瘟败毒饮是清代著名温病学家余师愚在1794年所创制的名方,具有 清热解毒,凉血泻火”之功,广泛应用于脓毒症肺损伤的治疗[8]㊂临床研究表明,清瘟败毒饮可显著缓解脓毒症患者肺损伤症状,延缓疾病进展,有利于长期预后[9⁃10]㊂清瘟败毒饮缓解脓毒症肺损伤的作用不言而明,但是其具体作用机制尚不明确㊂基于此,本研究首先采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)法建立脓毒症肺损伤大鼠模型,灌胃不同剂量的清瘟败毒饮,明确清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤的治疗作用,并研究清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠铁死亡相关因子表达的影响,另外初步探讨清瘟败毒饮是否为通过调控铁死亡治疗脓毒症肺损伤的作用机制㊂1 材料和方法1.1 实验动物SPF级健康雄性SD大鼠75只,6~8周龄,体质量(200±20)g,购买于北京华阜康生物科技股份有限公司,合格证号:110322210100331916㊂饲养环境温度保持在(25±2)℃,相对湿度为(50±15)%,明暗周期12小时/12小时的环境下,自由饮水和进食㊂该实验经天津市肿瘤医院伦理委员会批准,批准号:NSFC⁃AE⁃2023135㊂1.2 实验药物及制备按原方比例,称取生石膏24g㊁生地黄6g㊁黄连3g㊁栀子9g㊁桔梗4.5g㊁黄芩9g㊁知母9g㊁赤芍9g㊁玄参9g㊁连翘9g㊁竹叶6g㊁甘草4.5g㊁牡丹皮9g,加入8倍体积水煎煮30分钟,浓缩成2g生药/mL, 4℃冷藏备用㊂1.3 主要试剂和仪器白细胞介素⁃6(interleukin⁃6,IL⁃6),批号:H007⁃1⁃1;白细胞介素1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β),批号H002⁃1⁃2;MDA,批号C003⁃1⁃2;谷胱甘肽(glutathione,GSH);批号C006⁃2⁃1;总谷胱甘肽(total⁃glutathione,T⁃GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG),即T⁃GSH/GSSG,批号:A061⁃1⁃2;铁离子浓度测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所㊂铁载蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH),批号:ab75973;铁载蛋白轻链(ferritin light chain,FTL),批号:ab75973;转铁蛋白(transferrin),批号:ab278498;谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase4,GPX4),批号:ab252833;β⁃肌动蛋白(β⁃actin),批号:ab179467;β⁃actin相应的二抗均购自Abcam公司;8%~12%SDS⁃PAGE,货号:P1200,购于Solarbio㊂PVDF膜,货号: YA1701,购于Solarbio㊂Eclipse Ci显微镜,日本Nikon公司;Infinite F50酶标仪,瑞士Tecan公司;全自细胞计数仪,美国BIO⁃RAD公司,506BR1436;5810型台式冷冻离心机,德国Eppndorf公司;DYCZ⁃24DN型垂直电泳槽,北京六一仪器厂;SH⁃523型化学发光成像系统,杭州申花科技有限公司㊂1.4 实验分组㊁造模及给药方法将75只大鼠,根据随机数字表法分为假手术组,模型组及清瘟败毒饮低㊁中㊁高剂量组5组,每组15只㊂除假手术组外,其余各组运用CLP法建立脓毒症肺损伤大鼠动物模型,CLP术后12小时插管监测大鼠平均动脉压,当平均动脉压下降30%或以上,认为造模成功[11]㊂造模过程中,模型组存活6只;清瘟败毒饮低剂量组存活8只;清瘟败毒饮中剂量组存活9只;清瘟败毒饮高剂量组存活11只㊂全部造模成功后,假手术组只切开腹壁并缝合,不进行CLP,用等体积生理盐水灌胃,按照人 大鼠体表面积给药剂量换算表计算,清瘟败毒饮组低㊁中㊁高剂量组每天给药剂量分别为0.7g/kg㊁1.3g/kg㊁2.5g/kg,每天1次,连续7天㊂末次给药24小时后,戊巴比妥麻醉动物,颈椎脱臼法予以安乐死,取肺组织备用㊂1.5 观察指标及检测方法1.5.1 大鼠生存率 造模给药后,每天统计各组大鼠存活的数量,连续观察7天㊂生存率(%)=存活大鼠数量/15×100%㊂1.5.2 肺组织的湿干重比 造模给药24小时后,取肺脏,生理盐水洗净吸干后,进行肺湿干重(W/ D)比测定㊂取右中叶肺组织称重(W)后,置于烤箱中,60℃烘烤至恒重后称干重(D),计算W/D㊂1.5.3 大鼠肺泡灌洗液总蛋白(total protein,TP)含量检测 造模给药24小时后,运用腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉大鼠并后仰卧固定于操作台,进行颈部解剖充分暴露气管和肺部,行气管插管并固定㊂随后用5mL无菌生理盐水分3次经导管注入轻轻按摩肺部30秒并收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),BALF回收率大约为85%~90%㊂用双层纱布过滤,以3000r/ min离心(离心半径=15cm)15分钟后,取上清液保存于-20℃冰箱内,采用ELISA法测定BALF中TP 的含量㊂1.5.4 大鼠BALF总细胞数检测 用500μL4℃预冷的PBS将BALF离心后得到的细胞沉淀重新悬浮,轻柔吹散混合均匀,取10μL细胞悬浮液注入细胞计数板中,使用全自动细胞计数仪测定总细胞数㊂1.5.5 肺组织脂质过氧化及铁离子水平检测 造模给药24小时后,收集各组大鼠肺组织,试剂盒检测造模给药后各组大鼠肺组织中IL⁃6㊁IL⁃1β㊁MDA㊁GSH和GSSG水平,并分别计算GSH总量(T⁃GSH =GSH+GSSG)和GSSG/T⁃GSH比值,免疫组化法检测脂质过氧化产物,4⁃羟基壬烯醛(4⁃hydroxide, 4⁃HNE)表达水平㊂同时试剂盒检测造模给药后各组大鼠肺组织中二价铁离子(Fe2+)水平㊂1.5.6 肺组织病理染色 各组大鼠肺组织经10%福尔马林溶液固定24小时,水洗20分钟后梯度酒精脱水,随后二甲苯透明后石蜡包埋,切片5μm,随后将肺组织石蜡切片于60℃烘烤,于二甲苯和梯度酒精中脱蜡并水化㊂苏木精染细胞核,伊红染细胞质,脱水封片后在光学显微镜下观察各组肺组织形态㊂1.5.7 肺组织中铁死亡相关因子表达 Western blot检测大鼠肾组织中FTH㊁FTL㊁Transferrin㊁GPX4蛋白的表达㊂收集大鼠肾组织,并加入150μL RIPA裂解缓冲液,匀浆离心后留取蛋白上清液㊂采用BCA蛋白测定试剂盒测定TP浓度,将样品蛋白浓度进行均一化㊂每个样品取等量蛋白20μg,8% ~12%SDS⁃PAGE电泳后分离的蛋白质转移到PVDF膜㊂将膜在室温下用5%脱脂奶粉封闭2小时后,分别加入不同的兔抗大鼠一抗FTH(稀释比例1∶3000)㊁FTL(稀释比例1∶3000)㊁Transferrin (稀释比例1∶2000)㊁GPX4(稀释比例1∶3000)㊁β⁃actin(稀释比例1∶5000),4℃孵育过夜㊂洗膜后加入二抗(羊抗兔IgG稀释比例按1∶9000),室温孵育2小时㊂TBST洗膜后加ECL化学发光法显影检测,之后使用Image Pro Plus6.0软件对条带灰度值进行量化分析㊂计量原理根据目的蛋白的着色深浅及分布面积来确定目的蛋白的表达量,通过测量出每张图片的累积光密度值(integrated option density,IOD)以及区域面积(area)值,再计算出平均光密度值(mean density),即mean density=IOD/ area,此值反映了目标蛋白的单位面积浓度㊂最后取每个样本的5个随机区域mean density的平均值作为此样本值㊂1.6 统计学方法采用SPSS25.0统计软件进行数据统计,计量数据以均数±标准差(x±s)表示,各组数据符合正态分布且方差齐,组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD⁃t检验㊂P<0.05代表有统计学差异㊂2 结果2.1 各组大鼠生存率造模后24小时假手术组生存率100.00%,存活数量15只;模型组生存率为40.00%,存活数量6只;清瘟败毒饮低剂量组生存率53.33%,存活数量8只;清瘟败毒饮中剂量组生存率60.00%,存活数量9只;清瘟败毒饮高剂量组生存率73.33%,存活数量11只㊂见表1㊂表1 各组大鼠生存率组别初始数量(只)24小时后存活数量(只)存活率(%)假手术组1515100.00模型组15640.00清瘟败毒饮低剂量组15853.33清瘟败毒饮中剂量组15960.00清瘟败毒饮高剂量组151173.33 2.2 清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠肺屏障功能的影响2.2.1 清瘟败毒饮对各组大鼠肺组织的湿干重比的影响 造模给药后,与假手术组相比,模型组能明显增加脓毒症肺损伤大鼠肺W/D值(P<0.05, P<0.01)㊂与模型组相比,清瘟败毒饮各剂量组均能一定程度减少脓毒症肺损伤大鼠肺W/D值(P<0.05,P<0.01),但清瘟败毒饮低剂量组无明显差异(P>0.05)㊂见表2㊂2.2.2 清瘟败毒饮对各组大鼠BALF总蛋白的影响 造模给药后,与假手术组相比,模型组BALF上清液TP含量显著增多(P<0.01)㊂与模型组相比,清瘟败毒饮低㊁中㊁高剂量组均能显著减少TP含量(P<0.01)㊂见表2㊂2.2.3 清瘟败毒饮对各组大鼠BALF总细胞数的影响 造模给药后,与假手术组相比,模型组BALF 的总细胞数显著增多(P<0.01)㊂与模型组相比,清瘟败毒饮各剂量组均能一定程度减少BALF中的总细胞数,其中清瘟败毒饮中㊁高剂量组有统计学差异(P<0.01)㊂见表2㊂2.3 清瘟败毒饮对各组大鼠脂质过氧化及铁离子水平的影响造模给药后,与假手术组相比,模型组大鼠IL⁃6㊁IL⁃1β㊁TNF⁃α㊁MDA和4⁃HNE水平显著升高(P<0.01)㊂与模型组相比,清瘟败毒饮中剂量和高剂量组大鼠IL⁃6㊁IL⁃1β和TNF⁃α水平显著降低(P<0.01),清瘟败毒饮高剂量组大鼠MDA和4⁃HNE水平显著降低(P<0.01)㊂另外,同假手术组相比,模型组大鼠GSSG和Fe2+水平显著升高(P<0.01),清瘟败毒饮各剂量组均能降低GSSG和Fe2+水平,尤其以清瘟败毒饮高剂量组更为显著(P<0.01)㊂同时,与假手术组相比,模型组大鼠中T⁃GSH㊁GSH水平和GSH/GSSG 比值明显降低(P<0.01),清瘟败毒饮各剂量组均能显著提高T⁃GSH㊁GSH水平和GSH/GSSG比值(P<0.05,P<0.01)㊂见表3㊂2.4 清瘟败毒饮对各组大鼠肺组织病理学形态的影响结果发现,正常组大鼠肺组织结构正常,肺间质未见明显炎性细胞浸润;模型组大鼠肺组织结构严重破坏,呈弥漫性病变,肺泡形状发生改变,肺泡膨胀不全,部分肺泡断裂或融合,肺泡间隔变厚,肺间质充满大量炎性细胞浸润;与模型组相比,清瘟败毒饮各组肺组织见肺泡间隔逐渐变薄,肺泡壁完整,肺泡腔逐渐清晰,肺间质间隙炎症细胞浸润逐渐减少㊂见图1㊂表2 清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠肺屏障功能的影响(x±s)组别鼠只肺组织W/D BALF中的TP(mg/mL)BALF中的总细胞数(×105/个)假手术组15 4.90±0.548.62±0.6170.00±4.79模型组68.15±0.69a25.19±1.21a195.00±18.51a清瘟败毒饮低剂量组87.92±1.0720.43±1.01c174.50±10.19清瘟败毒饮中剂量组97.15±0.57b14.51±1.06c156.22±10.43c清瘟败毒饮高剂量组11 6.20±0.62c12.17±1.03c141.27±13.63c注:与假手术组相比,a P<0.01;与模型组相比,b P<0.05,c P<0.01㊂表3 清瘟败毒饮对各组大鼠脂质过氧化及铁离子水平的影响(x±s)组别鼠只IL⁃6(pg/mL)IL⁃1β(pg/mL)TNF⁃α(pg/mL)MDA(μmol/L)4⁃HNE(μmol/L)假手术组1595.31±11.9475.21±13.6582.81±9.59 1.53±0.4276.14±45.60模型组6688.24±106.99a405.53±102.21a646.72±86.79a 3.68±0.69a232.83±83.06a 清瘟败毒饮低剂量组8642.60±87.95397.90±393.45547.93±108.29b 3.28±0.42248.29±54.06清瘟败毒饮中剂量组9398.23±76.98c242.27±33.31c425.72±63.41c 2.72±0.59c203.21±34.58清瘟败毒饮高剂量组11298.46±45.09c194.87±27.43c292.26±47.30c 2.19±0.52c147.17±44.65c 组别鼠只T⁃GSH(μmol/L)GSH(μmol/L)GSSG(μmol/L)GSH/GSSG Fe2+(μmol/L)假手术组1514.59±3.7411.82±3.46 1.38±0.6211.04±7.61 1.00±0.18模型组6 6.17±1.40a 1.21±0.93a 2.48±0.57a0.52±0.35a 2.35±0.17a 清瘟败毒饮低剂量组89.98±2.19c 5.50±2.21c 2.24±0.71 2.86±1.49c 2.18±0.27清瘟败毒饮中剂量组910.04±3.02b 6.69±2.79c 1.68±0.68b 4.88±3.04c 1.44±0.28c 清瘟败毒饮高剂量组1112.07±3.88c9.00±3.73c 1.53±0.56c 6.88±4.22c 1.38±0.26c 注:与假手术组相比,a P<0.01;与模型组相比,b P<0.05,c P<0.01㊂ 注:A 假手术组;B 模型组;C 清瘟败毒饮低剂量组;D 清瘟败毒饮中剂量组;E 清瘟败毒饮高剂量组㊂图1 各组大鼠肺组织病理学形态学观察(HE,×100)表4 清瘟败毒饮对大鼠肺组织中FTH㊁FTL㊁Transferrin㊁GPX4表达的影响(x ±s )组别鼠只FTH /b ⁃actin FTL /b ⁃actin Transferrin /b ⁃actin GPX4/b ⁃actin 假手术组150.34±0.030.44±0.02 1.05±0.04 1.25±0.12模型组6 1.55±0.10a 1.53±0.04a 2.26±0.14a 0.57±0.02a 清瘟败毒饮低剂量组8 1.23±0.06b 1.12±0.03b 2.05±0.17 1.05±0.09b 清瘟败毒饮中剂量组9 1.21±0.08b 1.03±0.04b 1.71±0.10b 1.08±0.10b 清瘟败毒饮高剂量组111.06±0.02b0.98±0.03b1.20±0.15b1.26±0.13b注:与假手术组相比,a P <0.01;与模型组相比,b P <0.01㊂2.5 清瘟败毒饮对各组大鼠肺组织中铁死亡相关因子表达的影响与假手术组相比,模型组大鼠FTH㊁FTL㊁Transferrin 的蛋白表达量显著增加(P <0.01),GPX4蛋白表达明显下降(P <0.01);与模型组相比,经各剂量清瘟败毒饮干预后FTH㊁FTL 的蛋白表达量显著降低(P <0.01),而中㊁高剂量清瘟败毒饮干预可以降低Transferrin 的蛋白表达量(P <0.01);此外,清瘟败毒饮各剂量组可明显升高GPX4蛋白表达(P <0.01)㊂见表4和图2㊂注:A 假手术组;B 模型组;C 清瘟败毒饮低剂量组;D 清瘟败毒饮中剂量组;E 清瘟败毒饮高剂量组㊂图2 各组大鼠肺组织中FTH㊁FTL㊁Transferrin㊁GPX4蛋白表达Western Blot 结果3 讨论本研究通过运用CLP 建立脓毒症肺损伤大鼠动物模型,灌胃不同剂量的清瘟败毒饮,以明确清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用,探讨清瘟败毒饮治疗脓毒症肺损伤大鼠的作用机制㊂肺屏障功能与肺损伤程度密切相关,肺W /D㊁BALF 总蛋白和BALF 总细胞数是直接反映肺屏障破坏情况的重要指标[12]㊂结果发现,清瘟败毒饮各组均能一定程度减少脓毒症肺损伤大鼠肺W /D㊁BALF 中的TP 含量和BALF 中的总细胞数㊂此外,当脓毒症肺损伤发生时,机体会释放大量的炎症细胞和ROS,这些物质会导致脂质分子中的不饱和脂肪酸受到氧化损伤,从而引发脂质过氧化反应,生成大量过氧化脂质㊂这些过氧化脂质可破坏细胞膜,影响细胞的结构和功能,进而影响细胞的生存能力[13]㊂IL⁃6㊁IL⁃1β㊁TNF⁃α㊁MDA 和4⁃HNE 与脂质过氧化有密切关系,T⁃GSH㊁GSH㊁GSSG㊁GSH /GSSG 是与细胞内氧化还原状态相关的指标,可以反映细胞内抗氧化能力和氧化应激水平[14⁃16]㊂Fe 2+的存在可以促进脂质过氧化反应的进行,从而导致细胞及组织的损伤㊂结果表明,清瘟败毒饮干预后可降低脓毒症肺损伤大鼠IL⁃6㊁IL⁃1β㊁TNF⁃α㊁MDA㊁4⁃HNE㊁GSSG 和Fe 2+水平,提高T⁃GSH㊁GSH 水平和GSH /GSSG 比值㊂最后,病理检查也发现清瘟败毒饮各剂量组可明显改善脓毒症肺损伤大鼠肺组织相关病理形态变化㊂由此可见,清瘟败毒饮各剂量组可不同程度上改善脓毒症肺损伤大鼠相关生化指标,缓解肺组织病理学变化,提示清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤具有治疗作用㊂铁死亡是一种由铁依赖的不饱和脂肪酸磷脂氧化累积导致的细胞死亡方式,与脓毒症肺损伤的发生发展密切相关[17]㊂结果发现,清瘟败毒饮可以降低铁死亡相关因子FTH㊁FTL和Transferrin 的蛋白表达水平,同时升高GPX4蛋白表达水平㊂研究发现尿嘧啶(uridine)可以通过抑制巨噬细胞的铁死亡来缓解脓毒症所引起的急性肺损伤[18]㊂粘蛋白1是一种大分子跨膜糖蛋白,研究发现粘蛋白1通过GSK3抑制铁死亡可以减轻脓毒症诱导的急性肺损伤[19]㊂体外试验发现,异质核核糖核蛋白(AU⁃rich binding factor1,AUF1)作为一种RNA结合蛋白质,可以通过调控NRF2和ATF3来保护细胞免受铁死亡所导致的氧化损伤,从而减轻脓毒症所引起的急性肺损伤[20]㊂铁蛋白(ferritin)是人体内最主要的铁储存仓,可以通过储存细胞内的游离铁离子维持细胞铁稳态[21]㊂ferritin由铁蛋白轻链和重链(FTL㊁FTH)两种多肽链组成,其中FTL主要参与铁的储存,它能够与FTH结合形成二聚体,进而形成四聚体和八聚体的铁蛋白团簇,将多余的铁离子以安全㊁可控的方式储存㊂FTH主要参与铁的释放,它能够将铁蛋白团簇中的铁离子释放出来,以满足机体对铁的需求[22]㊂转铁蛋白(transferrin)是一种铁结合蛋白,主要由两个相同的多肽链组成,每个链上含有一个铁结合位点,能够结合两个三价铁离子㊂在体内,转铁蛋白通过循环系统运输铁离子,以满足机体各种细胞的铁需求㊂此外,转铁蛋白还与细胞表面的转铁蛋白受体结合,进入细胞内部,在细胞质中释放铁离子,以参与细胞内的生化反应[23]㊂GPX4是已知的唯一能够直接清除脂质过氧化物的酶,在铁死亡的过程中发挥核心调控的作用㊂抑制GPX4活性或使其表达缺失,都会引发不受控制的多不饱和脂肪酸氧化和脂肪酸自由基生成,随后进一步通过脂质ROS依赖性方式促进铁死亡的发生㊂反之,通过上调GPX4的表达则可以减少脂质ROS诱导的细胞铁死亡[24]㊂综上所述,本研究揭示了清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用,同时研究发现,清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤的作用机制可能与调节细胞中FTH㊁FTL㊁Transferrin和GPX4铁死亡相关因子水平相关,揭示了清瘟败毒饮通过调控铁死亡治疗脓毒症肺损伤的作用机制㊂参考文献[1] Zambon M,Vincent J L.Mortality rates for patients with acutelung injury/ARDS have decreased overtime[J].Chest,2008,133(5):1120⁃1127.[2] LIU P,FENG Y,LI H,et al.Ferrostatin⁃1alleviates lipopo⁃lysaccharide⁃induced acute lung injury via inhibitingferroptosis[J].Cellular&Molecular 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抗毒清瘟汤主要成分:连翘、金银花、炙麻黄、炒苦杏仁、石膏、板蓝根、绵马贯众、鱼腥草、广藿香、大黄、红景天、薄荷脑、甘草;功能主治:清瘟解毒,扶正祛瘀,宣肺泄热。
适用症:畜禽DNA、RNA病毒感染。
鸡新城疫、传染性法氏囊病、禽流感,鸭肝炎、小鹅瘟、猪瘟、猪流感、猪呼吸与繁殖综合症等病毒感染。
产品特点:深厚中医理论+现代生物技术+先进生产工艺+科学生产管理=抗毒清瘟汤一、深厚的中医理论支撑抗毒清瘟汤在世界科技发展史上,一项重大的发明往往伴随着一个理论的诞生。
抗毒清瘟汤的投产,正是有深厚的中医理论依托,并大胆创新的结果。
病毒性疾病,均具有较强的传染性,可形成全球范围的广泛流行,属于中医“瘟疫”范畴。
早在《黄帝内经》中就有类似的记载:“五疫之至,皆相染易,无问大小,症状相似”。
明代吴又可在《瘟疫论》中也指出:“此气之来,无论老少强弱,触之者即病。
”流感等疫毒侵袭,热毒壅肺,壅阻肺络的病机特点,治疗当以“清瘟解毒,扶正祛瘀、宣肺泄热”为大法。
抗毒清瘟汤选药重在病因治疗,选用对病毒有明显拮抗作用的药物,针对病毒侵袭机体所造成的热毒偏盛临床特征应用重药清解热毒。
热毒壅肺,壅阻肺络,病位在肺,所以重用宣肺泄热,宣畅肺气,清泄肺中壅闭之毒热。
纵观抗毒清瘟汤在运用中医理论并大胆创新方面具有以下三个特点:1卫气同治,表里双解无论是DNA病毒还是RNA病毒感染,发病初期表证未除,内热已炽,显属卫气同病。
抗毒清瘟汤方源于银翘散与麻杏石甘汤,连翘,薄荷,麻黄,外疏卫表,佐贯众,板蓝根助银花,连翘清热解毒,石膏为清气分热之重剂,与麻黄配伍既可遏制其温散之性,又能协同加强扶正祛瘀、宣肺泄热之效。
如此,在疏散外邪的同时重用清热解毒之品,直清气分热毒,可收卫气同治,表里双解之功。
方中麻黄与大黄同用,也含防风通圣表里双解之深意。
2先证用药,截断病势病毒性疾病具有发病急,传变快的特点。
治疗不能遵循温病“卫之后方言气,营之后方言血”的规律,正如吴又可所说:“数日之法,一日引之,因其毒甚,传变亦速,用药不得不紧”。
因此中药治疗应先证用药,截断病势,抗毒清瘟汤在病变早期即应用麻杏石甘汤宣泄肺热,配伍大黄,通腑泄肺逐瘀,肺与大肠相表里,腑气下通,肺热自降。
从而扭转病机,截断病势,切断向营血的传变。
防止机体好热后发生肺炎、心肌炎等疾病。
3整体调节,多靶治疗抗毒清瘟汤虽以“清瘟解毒,扶正祛瘀、宣泄肺热”为治疗大法,但适当配伍了活血化瘀,通腑泄热,芳香避秽等药物,尤其是配伍了益气养阴的红景天调节免疫,扶正祛邪,既能调动机体抗病康复能力,又防大黄攻下之弊。
现代药理研究证明红景天能提高机体对氧的耐受性,兼有生脉饮和丹参、川芎合剂的效果。
对肺水肿有明显改善作用。
抗毒清瘟汤的药理研究表明,既有广谱抗病毒作用,又能抗菌、退热消炎、止咳、化痰,调节免疫功能,从而阻断多个病理环节的恶性循环,显示出该药多靶点、多环节的整体治疗优势。
未病先防,既病防变。
二、现代微生物发酵先进生产工艺我国远在四千多年以前就懂得利用微生物发酵来酿酒,其后又相继用微生物发酵来生产酱、醋、豆豉和臭豆腐等食品。
早在千余年前,我国已开始将微生物发酵应用于中药炮制,成为世界上最早利用微生物对天然药物进行生物转化的国家之一。
中药是中华民族的瑰宝,而中药炮制是其中一颗璀璨的明珠。
中药炮制是根据中医药理论,依照辨证施治用药的需要和药物自身的性质,以及调剂、制剂的不同要求,所采取的一项制药技术。
本品是传统中药发酵炮制的机理、炮制和发酵工艺结合科学现代的微生物发酵技术打造而成。
1 传统中药的发酵炮制概述古代医药典籍将中药炮制又称为“炮炙”、“修治”、“修制”、“修事”。
经净制或处理后的药物,在一定的温度和湿度条件下,由于霉菌和酶的催化分解作用,使药物发泡、生衣的方法称为发酵法。
中药通过微生物的发酵达到增强中药药效、改变药性、降低毒副作用等目的。
1.1 传统中药发酵炮制的作用机理传统中药发酵炮制的作用机理较为复杂,主要是依靠微生物的生物转化来实现。
酶是一类具有高度催化效率的生物催化剂,它可以使复杂的生物化学反应在常温常压下迅速完成。
微生物在生长代谢过程中产生纤维素酶、木质素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂酶等多种胞内和胞外酶类。
微生物有着非常强大的分解转化物质的能力,并能产生丰富的次生代谢产物。
不同种类的微生物具有不同的代谢方式,能分解各式各样的有机物质。
通过微生物的新陈代谢和生长繁殖来炮制中药,可以比一般的物理或化学的炮制手段更大幅度地增强和调整药性,提高疗效,降低毒副作用,扩大适应症。
1.2 传统中药发酵炮制工艺的探讨传统中药经发酵炮制后其质量的高低与许多因素都密切相关,如发酵菌种,培养基成分,培养条件(温度、湿度、氧气、pH值等)等因素。
因此,应通过对传统中药发酵炮制影响因素的研究,从而确定其最佳的发酵炮制工艺。
在长期传统中药发酵炮制的生产实践活动中,中药炮制人员对影响中药发酵炮制的质量因素积累了较为丰富的实践经验。
一般而言,发酵最佳温度以30~37℃为宜,相对湿度控制在70%~80%为宜。
在此培养条件下,适合大多数霉菌、酵母菌和细菌等的生长繁殖。
但限于当时的科学技术发展水平,温度和湿度的控制只能凭经验,例如,混和发酵时以“握之成团,指间可见水迹,放下轻击则碎”为宜。
因此,在传统中药的发酵炮制过程存在较大的主观性,影响了其质量的稳定性。
培养基成分对传统中药发酵炮制后其质量的高低也有较大的影响,因此对组成培养基的药材质量和相互间的比例都有较严格的要求。
不同的培养基经同样的微生物处理后会产生药性的差异,可利用此来生产不同适应证的中药。
例如,发酵淡豆豉时,以桑叶、青蒿发酵者,药性偏于寒凉,多用于风热感冒或热病胸中烦闷之证;以麻黄、紫苏发酵者,药性偏于辛温,多用于风寒感冒头痛之证。
1.3传统中药发酵炮制工艺和现代中药发酵炮制工艺的比较中药的发酵炮制经过一千多年的发展,现已成为中药炮制中一种常用和重要的炮制方法。
特别是近几十年来发酵工程等现代生物技术用于传统中药的研究开发,从现代科学的角度探讨了发酵炮制的作用机理和炮制工艺,极大地丰富和发展了中药的炮制理论。
传统中药的发酵炮制是多菌种混合自然发酵,参加发酵的菌种种类和数量都存在一定的波动;同时传统中药的发酵炮制采用的是传统的固体发酵,整个发酵炮制的过程都是凭主观经验来控制。
因此,传统中药发酵炮制后其质量的稳定性难于保证。
现代中药的发酵炮制根据微生物生长所用培养基状态的不同可分为固体发酵炮制和液体发酵炮制。
现代中药的固体发酵炮制采用了现代生物技术,在整个发酵炮制过程中可以较好地控制参与发酵的菌种的种类和数量,同时对温度、湿度、酸碱度、通气等也能较好地实现动态控制,因而通过现代固体发酵炮制的中药其质量的稳定性得以较大的提高。
在抗生素工业发展起来后,逐渐将液体发酵应用到中药的发酵炮制中,开启了对液体发酵炮制中药的研究。
由于液体发酵较固体发酵具有更高的物质传递效率,也易于实现发酵炮制工艺的自动化控制,从而保证发酵炮制后中药质量的稳定性,所以此项工艺未来发展空间巨大。
2 发酵炮制中药的本草考证传统中药的发酵炮制因品种不同而采用不同的方法进行加工处理后,再置温度、湿度适宜的环境下进行微生物发酵。
根据所采用方法的不同,可将传统中药的发酵炮制分为两大类[2]。
一类为药料与面粉混合发酵,如六神曲、建神曲、半夏曲、沉香曲等;另一类为直接用药料进行发酵,如淡豆豉、百药煎等。
2.1 神曲神曲一名始载于《药性论》,又有六神曲(《本草便读》)的异名。
明代李时珍在《本草纲目》中记述了神曲得名的由来[3],“盖取诸神聚会之日造之,故得神名。
”我国制造神曲始于北魏,贾思勰在《齐民要术》中叙述了神曲的制法。
神曲为辣蓼、青蒿、杏仁等药加入面粉或麸皮混合后,经发酵制成曲剂,含酵母菌、淀粉酶、复合维生素B等成分,有消食化积、健脾和胃等功效。
神曲还可炮制加工成炒神曲、麸炒神曲、焦神曲。
生神曲健脾开胃,并有发散作用;麸炒后以醒脾和胃为主,用于食积不化、脘腹胀满、不思饮食、肠鸣泄泻等;炒焦后消食化积力强,以治食积泄泻为主。
2.2 建神曲建神曲一名载于《纲目拾遗》,又有百草曲(《纲目拾遗》)、泉州神曲(《药性考》)、范志曲、老范志神曲等异名。
建神曲主产于福建泉州,为麦粉、麸皮、紫苏、荆芥、防风、厚朴、白术、木香、枳实、青皮等数十种药物经发酵专制而成。
建曲性味苦微温,消食化积功效与神曲相似,并能理气化湿、健脾和中。
2.3 半夏曲半夏曲一名载于《韩氏医通》。
半夏曲为半夏加面粉、姜汁等制成的曲剂。
《本草纲目》中叙述了半夏曲的制法[4],云:“半夏研末,以姜汁、白矾汤和作饼,楮叶包置篮中,待生黄衣,晒干用,谓之半夏曲。
”半夏曲有化痰湿,消食滞的功效。
而未发酵的半夏则性味温辛,有毒,有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结等功效。
《饮片新参》载:“内热烦渴者慎服。
”2.4 采云曲采云曲是以六曲为基础,再加桔梗、白术、紫苏、陈皮等二十多种药品加工制成的,性味作用与建曲相似,对于夏秋暑热伤中引起的食滞消化不良作用较好。
2.5 沉香曲沉香曲一名载于《饮片新参》。
沉香曲为沉香等多种药末和以神曲糊制成的曲剂。
用沉香、木香、檀香、砂仁、蔻仁等20多种药材研成粉再加1/4的面粉,搅和压制而成。
《饮片新参》称沉香曲有“理脾胃气,止痛泻,消胀满”的功用。
2.6 红曲红曲一名载于元代《饮膳正要》,又有丹曲(《天工开物》)、赤曲(《摘元方》)等异名。
李时珍在《本草纲目》中记述了红曲的制法[5],云:“红曲,本草不载,法出近世,亦奇术也。
其法:白粳米……入曲母……其米……鲜红可爱。
未过心者不甚佳。
入药以陈久者良。
”从李时珍叙述中的“法出近世”,可推测出红曲的制造大约始于元代。
红曲为曲霉科真菌红曲霉的菌丝体寄生在粳米上而成的红曲米,有健脾消食、活血化瘀的功效。
《本草纲目》中称:“治女人血气痛,及产后恶血不尽,擂酒饮之,良。
”《本草经疏》中称:“红曲,消食健脾胃与神曲相同,而活血和伤,惟红曲为能,故治血痢尤为要药。
”2.7 淡豆豉淡豆豉一名载于《本草汇言》,《伤寒论》中称为香豉,《名医别录》中称为豉,《本草纲目》中称为淡豉和大豆豉。
淡豆豉的制造历史悠久,在《伤寒论》中即有记载。
《本草纲目》还详细叙述了其制作方法。
淡豆豉为豆科植物大豆黑色的成熟种子经蒸罨发酵等加工而成,有解肌发表、宣郁除烦的功效。
《本草汇言》称:“淡豆豉,治天行时疾,疫疠瘟瘴之药也。
”《药性论》载:“治时疾热病发汗;熬末,能止盗汗,除烦;生捣为丸服,治寒热风,胸中生疮;煮服,治血痢腹痛。
”2.8 百药煎百药煎一名载于《本草蒙筌》。
百药煎为五倍子同茶叶等经发酵制成的块状物。
李时珍在《本草纲目》中记述了百药煎的制法,云:“用五倍子为初末。
每一斤,以真茶一两煎浓汁,入酵糟四两。