2001级本科微生物学试验五课件
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微生物学实验(详细介绍)ppt课件
厚标本和薄标本
4 - 5 um 2um
基础知识
三、 实验步骤
•
(一) 显微镜的使用
(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯，观察时要 双眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。 (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备 好。 (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否 完整和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上
微生物学实验( 详细介绍)
课程组人员: 王淑军 暴增海 马桂珍
王洪斌 陈静
制作人员: 马桂珍
暴增海
课 程 简 介
微生物学实验课是微生物学课程教学中的一个重要环节。
本课程总计36学时，使用教材是沈萍主编的《微生物学试验》
（第三版）。通过本课程的学习，使学生了解微生物学的基 本知识；巩固和加深所学理论知识；掌握微生物学最基本的
DIC显微镜下的硅藻
（伪彩色）
8. 倒置显微镜
9. 透射电子显微镜
莱卡超薄切片机
JEM-1011透射电子显微镜
内质网透射电镜图（伪彩色）
冰冻蚀刻电镜照片
10. 扫描电子显微镜
JEOL扫描电子显微镜
人类血细胞SEM照片
11. 显微操作技术
尼康NT-88NE显微操作/注射 仪
显微镜的分辨率: 也称为分辨力，它是指能把两个物点辨清的最小距离， 分辨距离越大，则分辨率越低。所以，分辨率是以分辨
操作技能。同时，通过实验，培养学生培养学生独立思考和
理论联系实际能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度， 以及敢于创新的开拓精神；并在实验中进一步提高学生的科 学素质修养。
实 验 内 容
实验一 显微镜使用及微生物形态观察
微生物的生物学特性ppt课件
喹诺酮：为人工合成的含4-喹诺酮 类抗生素。其靶部位是DNA旋转酶， 两个A亚基、两个B亚基组成的II型拓 扑异构酶。由gyrA、gyrB基因编码。 大肠杆菌可因gyrA基因突变，引起酶 结构改变，阻止药物结合。物结合，。
磺胺类耐药菌：改变二氢叶酸合 成酶结构，使磺胺类抗生素失去集合 的靶部位而耐药。
微生物的生物学特性
2、质粒：Plasmid：
定义? 特点： 1）体积小
2）有复制性、传递性，而且是自主 复制传代,控制某些性状。
3）宿主范围： 4）具有相容性、不相容性 5）可以丢失 意义。传递遗传物质；遗传工程的载体
微生物的生物学特性
异 染 颗 粒
（四）、细胞核（核质）： 作用——控制细菌的遗传变异；
蛋白是病毒的主要成分，分非结构 抑制细胞生物合成的蛋白。转录酶， 蛋白水解酶作为研究抗病毒药物靶部 位，倍受观注。有的非结构蛋白具有
微生物的生物学特性
三、病毒的增殖周期：
病毒复制的过程分为： 吸附; 穿入; 脱壳; 生物合成; 装配释放五个步骤，
又称复制周期(Replication cycle)。
二、细菌的结构
Essential structures 基本结构
cell wall 细胞壁 cell membrane 细胞膜 Cytoplasm 细胞质 nuclear material 核质
Particular structures 特殊结构
capsule 荚膜
flagella 鞭毛
pili 菌毛
微生物的生物学特性
蛋白质衣壳的功能是： （1）赋予病毒固有的形状； （2）保护内部核酸 （3）衣壳蛋白质具有免疫原性，
可刺激机体产生抗病毒免疫应答和鉴 定病毒；
微生物实验课件
实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验原理
油镜头的识别和重要参数
• 放大倍数
• 数值口径 • 工作距离
基础生物学实验教学中心
教师：姚璐晔
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实验四 细菌的染色法和光学显微镜的使用 实验原理
2. 革兰氏染色原理
G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽 聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增 加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗 出，结果细菌就被脱色，再经复红复染后就成红色。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经 脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因 此细菌仍保留初染时的颜色。
基础生物学实验教学中心
教师：姚璐晔
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实验一
培养基的配置、分装与灭菌 实验方法
培养基的制备过程：
称 量 溶 解 定容，调pH 分装，包扎 灭菌 若有不溶物 则要求过滤
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教师：姚璐晔
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实验一
培养基的配置、分装与灭菌 实验方法
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教师：姚璐晔
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教师：姚璐晔
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实验二
环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法
斜面接种
基础生物学实验教学中心
教师：姚璐晔
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实验二
环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法
液体接种
接种环
斜面
液体培养基
将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接 触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再 轻轻摇动均匀，即可培养。如果菌种是培养在液体培 养基中时，一般用移液管或滴管接种。
微生物学教程ppt课件
2019
-
19
细菌的鉴别染色法
——革兰氏染色法
C.Gram 丹麦医生
细菌的形态和染色
步骤：
涂片固定； 结晶紫初染1min； 碘液媒染1min； 95%乙醇脱色0.5min； 番红复染1min。
结果:
阳性菌——紫色； 阴性菌——红色。
2019 20
革兰氏染色图片
2019
-
21
二、细菌细胞的基本结构
-
54
细菌细胞的基本结构
b . 球状体（spheroplast)： 还保留有部分细胞壁的菌体细 胞,多见于Gˉ菌。 特点： 除具原生质体特点外 a)可有一定抗性，可培养 b)可重新合成细胞壁
2019 5： 自发突变形成的细胞壁缺陷(部分 或全部),具多形性。可以生长繁殖, 在培养基上形成油煎蛋菌落。有些可 重新合成细胞壁。
2019
-
11
3. 螺旋菌（spirilla)
弧菌
2019
螺旋菌
-
螺旋体
12
细菌的形态和染色 4. 细菌的特殊形态：
柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫 细菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子 实体的粘细菌等是特殊形态的细菌。
2019
-
13
细菌的形态和染色
(二)细菌的异常形态： １. 畸形： 理化刺激
结核杆菌的正常形态:
2019 -
结核杆菌的异常形态:
14
细菌的形态和染色
(三)细菌的大小： (1)测量：测微尺 (2)长度单位：
微米(μm)
(3)表示：
球菌：直径 杆菌： 宽×长 螺菌： 宽、长、 螺距
2019 15
球菌：一般不超过1μm，最大的旋动泡硫菌为 7~8μm.
医学微生物学实验课件
医学微生物学实验课件xx年xx月xx日contents •实验准备•细菌的分离与培养•细菌的鉴定•病毒的分离与鉴定•医学寄生虫实验•医学微生物学实验总结目录01实验准备1 2 3通过本次实验，学生将学习到微生物学实验的基本技能，包括实验操作、显微观察、分离培养等。
掌握微生物学实验基本技能通过实验过程中的生理生化反应，学生将了解微生物的生理生化特性，初步掌握微生物分类鉴定的基本方法。
了解微生物的生理生化特性通过本次实验，学生将了解微生物在医学中的应用，包括致病微生物的检测、防治和免疫等方面的应用。
认识微生物在医学中的应用微生物学实验基本原理微生物学实验的基本原理包括显微镜技术、无菌技术、分离培养技术、生理生化反应等。
这些技术的基本原理是进行微生物学实验的基础。
微生物的生理生化反应微生物的生理生化反应是微生物学实验中的重要内容。
通过观察和测定微生物的生理生化反应，可以初步鉴定微生物的种类和特性。
微生物在医学中的应用微生物在医学中有着广泛的应用，例如致病微生物的检测、防治和免疫等。
通过本次实验，学生将了解这些应用的基本原理和方法。
实验前的准备包括实验器材和试剂的准备、实验室环境的消毒等。
分离培养将样品接种在适宜的培养基上，分离培养出特定的微生物。
样品采集和预处理根据实验目的和要求采集样品，并对样品进行预处理，以备后续实验使用。
生理生化反应将分离培养出的微生物接种在适宜的生理生化反应管中，观察和记录微生物的生理生化反应结果。
显微观察将样品制成涂片或压片，在显微镜下观察微生物的形态和结构。
数据分析和总结对实验数据进行整理和分析，得出结论，并撰写实验报告。
实验步骤02细菌的分离与培养选择适合细菌生长的培养基，通常包含碳源、氮源、无机盐、水等。
培养基成分按照规定的步骤，将所需成分按比例混合、溶化、调PH值、过滤、分装等步骤制备成培养基。
制备流程确保培养基的质量和无菌，需要进行灭菌处理和细菌学检测。
质量控制培养基制备根据不同的分离要求，可采用划线分离法、稀释分离法、组织研磨法等。
实验动物微生物学和寄生虫学质量控制(共43张PPT)
犬、猴和鸡的微生物学以及寄生虫学等级标准。目前有关实验动物的 标准有28个。颁布年代主要在2001年，最近对标准又进行了部分修订。
GB14925
实验动物环境与设施
GB14923
实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制
GB14922.1
实验动物寄生虫学等级及检测
GB14922.2
实验动物微生物学等级及检测
法、解剖镜下通体检查法等，主要适用于检查蚤、虱、螨等节肢动物。
（2）体内寄生虫：主要检查蠕虫和原虫，可用直接涂片法(粪便、血液、脏器、肠内容物
)、饱和盐水漂浮法或沉淀法、透明胶纸肛门周围粘取法、
组织或器官剖面压印法、病变组织切片或压片法、尿液的离心法
(如检查鼠膀胱线虫)等。
我省近5年实验动物微生物、寄生虫感染状况
实验动物质量保障体系
第二节 实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测
(一)实验动物的微生物、寄生虫感染的危害
1、影响实验结果。如仙台病毒感染引起小鼠肺鳞状化病变；小鼠肝炎病毒感染引起血清谷丙转氨酶、谷
草转氨酶升高。
2、影响动物生产。如鼠痘、兔出血热病毒、犬细小病毒性肠炎的感染导致动物的大批死亡。 3、威胁人类健康。如汉坦病毒、钩端螺旋体感染人致病或致死。
4、污染实验材料。如用于疫苗生产的原材料SPF鸡胚污染病毒，接种疫苗导致病原的扩散。
5、寄生虫对实验动物的影响。 1）掠夺宿主的营养；
2）体外寄生虫对动物的骚扰；
3）对宿主机体产生机械性损伤;
4）对宿主产生毒性作用；
5) 对宿主生理、生化和免疫系统产生影响。
（二）监测意义
1、保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康。
北美 0.02 0.00 0.00 0.01 0.02 0.04 1.57
GB14925
实验动物环境与设施
GB14923
实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制
GB14922.1
实验动物寄生虫学等级及检测
GB14922.2
实验动物微生物学等级及检测
法、解剖镜下通体检查法等，主要适用于检查蚤、虱、螨等节肢动物。
（2）体内寄生虫：主要检查蠕虫和原虫，可用直接涂片法(粪便、血液、脏器、肠内容物
)、饱和盐水漂浮法或沉淀法、透明胶纸肛门周围粘取法、
组织或器官剖面压印法、病变组织切片或压片法、尿液的离心法
(如检查鼠膀胱线虫)等。
我省近5年实验动物微生物、寄生虫感染状况
实验动物质量保障体系
第二节 实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测
(一)实验动物的微生物、寄生虫感染的危害
1、影响实验结果。如仙台病毒感染引起小鼠肺鳞状化病变；小鼠肝炎病毒感染引起血清谷丙转氨酶、谷
草转氨酶升高。
2、影响动物生产。如鼠痘、兔出血热病毒、犬细小病毒性肠炎的感染导致动物的大批死亡。 3、威胁人类健康。如汉坦病毒、钩端螺旋体感染人致病或致死。
4、污染实验材料。如用于疫苗生产的原材料SPF鸡胚污染病毒，接种疫苗导致病原的扩散。
5、寄生虫对实验动物的影响。 1）掠夺宿主的营养；
2）体外寄生虫对动物的骚扰；
3）对宿主机体产生机械性损伤;
4）对宿主产生毒性作用；
5) 对宿主生理、生化和免疫系统产生影响。
（二）监测意义
1、保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康。
北美 0.02 0.00 0.00 0.01 0.02 0.04 1.57
《微生物学实验》PPT课件
完整版课件ppt
2
一.药品的微生物限度检查（一）
1.口服药物的微生物检查: ①大肠杆菌的检查： ②细菌总数的检查
2.外用药物的微生物检查: ①绿脓杆菌的检查： ②金黄色葡萄球菌的检查：
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3
药品的微生物限度检查实验方法（一）
1.药品的预处理
口服药 外用药
2克药品加20毫升生理盐水， 研磨制成悬液
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32
完整版课件ppt
33
1、制片 涂片、干燥、固定
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34
2.结晶紫初染 1min——水洗
完整版课件ppt
35
3. 碘液媒染
1min——水洗
完整版课件ppt
36
4. 95% 酒精脱色 30s——水洗
完整版课件ppt
37
5.沙黄复染 1min——水洗、滤纸吸干
完整版课件ppt
28
完整版课件ppt
29
完整版课件ppt
30
完整版课件ppt
31
※革兰染色步骤
• 1.制片：取标本（球杆混合物、牙垢） 涂片、干燥、固定
• 2.初染：结晶紫——1min——水洗 • 3.媒染：碘液——1min——水洗 • 4.脱色：95% 酒精——30s——水洗 • 5.复染：沙黄——1min—水洗、滤纸吸干 • 6.油镜观察：
对照菌
(产气杆菌)
蛋白胨水培养 接种1支管 基2支管
接种1支管ห้องสมุดไป่ตู้
葡萄糖蛋白胨 接种2支管 水培养基4支管
接种2支管
枸橼酸盐培养 接种1支管 基2支管
接种1支管
完整版课件ppt
44
抗酸染色步骤
微生物实验课PPT幻灯片
看你还想走去哪！
-潜在的危险： 在实验室内追逐嬉戏， 很容易碰倒其它同学或仪器， 而发生意外的机会因此增加。
-避免意外发生的方法： -在实验室内不准奔跑或玩耍
长头发的男、女同学要注意
-潜在的危险： -长头发的学生在使用酒精灯时，
头发没有束起因而有机会会着火。 -避免意外发生的方法： -在实验室内同学要把长头发束好，
3.认真及时做好实验记录。对于当前不能得到 的结果而需要连续观察的实验，则需记下每次 观察的现象和结果，以便分析。
4.做实验前先弄清操作原理，再小心、严格按 操作规程进行，试验中万一发生意外，如划破 皮肤以及细菌污染实验台或地面等处时，应立 即报告教师，及时处理，切勿隐瞒。
5.实验过程中，切勿使乙醇、乙醚、丙酮等易 燃品接近火焰。如遇火焰，应立即用湿布掩盖 灭火，必要时用灭火器。
等我看下试管里面的液体有无变色！
-潜在的危险（二）： -当学生把试管用酒精灯来加热化物品时没有带
上安全眼镜，化学品可能会溅，出对身体造作 损害。 -避免意外发生的方法（二）： -在处理化学品和使用酒精灯时，我们要带上安 全眼镜。
等我看下试管里面的液体有无变色！
-潜在的危险（三）： -酒精灯下没有防火垫，会使桌子受热。 -避免意外发生的方法（三）： -我们使用酒精灯时，应把酒
本课程讲授按每周8学时安排， 全学期共 4周(集中四天)，计32学时
四.微生物实验课的规则和要求
普通微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生 物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识； 加深理解课堂讲授的某些微生物学理论，同时，通 过实验，培养学生观察、思考、分析问题、解决问 题和提出问题的能力；养成实事求是、严肃认真的 科学态度，以及敢于创新的开拓精神；树立勤俭节 约、爱护公物的良好作风。
微生物学实验1公开课课件
血清学试验原理及方法
血清学试验原理
利用已知特异性抗体与待测细菌或 其成分进行反应，通过观察凝集、 沉淀等现象来判断待测细菌的种类。
血清学试验方法
包括玻片凝集试验、试管凝集试验、 间接血凝试验等。例如，通过玻片 凝集试验可以快速检测某些细菌的 表面抗原。
常见细菌生化鉴定与血清学试验举例
01
葡萄球菌的生化鉴定与血清学试验
03
链球菌的生化鉴定与血清学试验
通过检测链球菌对糖类的发酵能力、触酶试验、杆菌肽敏感试验等生化
特征进行鉴定；同时，可利用链球菌属特异性抗原进行血清学检测。
06
CATALOGUE
微生物学实验中的无菌操作技术
无菌操作的概念和重要性
无菌操作是指在微生物学实验 中，采取一系列措施，避免或 最小化微生物污染的操作技术。
无菌操作技术
在接种过程中，必须严格 遵守无菌操作技术，避免 杂菌污染。
细菌的生长条件与培养类型
细菌的生长条件
细菌生长需要适宜的温度、pH值、 渗透压、氧气和营养等条件。
培养基类型
根据细菌的营养需求和生长条件， 可选择不同的培养基，如基础培养 基、营养培养基、选择培养基等。
培养方式
细菌的培养方式有液体培养、固体 培养和半固体培养等。
用两种或两种以上染料染色，可根据染料的 不同颜色或亲和力，将细菌各部分染成不同 颜色，以观察细菌的内部结构。
荧光染色法
染色原理
利用荧光染料在特定波长光照射下发出荧光 的特性，对细菌进行染色，以提高检测的灵 敏度和特异性。
基于物理吸附和化学结合两种原理，使染料 与细菌结合，从而实现对细菌的染色。
03
调pH值
用酸或碱调节pH值至适宜范围。
[课件]微生物学基础实验PPT
细菌的基本形状有球状、杆状、螺旋（弧状）状三种， 分别称之为球菌、杆菌、螺旋（弧）菌。 芽孢是芽孢细菌典型特征。
短杆菌
单球菌
细 菌 三 型 染 色 涂 片
双球菌
螺旋菌
杆菌
四大类微生物菌落的区分
各种类型的霉菌菌落
各种类型的细菌菌落
各 种 类 型 的 放 线 菌 菌 落 各 种 类 型 的 酵 母 菌 菌 落
实验主要内容
观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落 ，并对所观 察的菌落特征进行描述，记录各指标填入表格； 在油镜下（100× ）观察细菌三型涂片、枯草杆菌涂 片。绘图。 在10 ×或40 ×物镜下观察放线菌装片；匍枝根霉装 片、有隔菌丝及无隔菌丝装片、曲霉示菌丝和孢子装 片，并绘图。
注意事项
显微镜观察细菌涂片（细菌三型涂片、枯草杆菌涂片） 使用油镜： 低倍镜（10× ） 高倍镜（40× ） 油镜 （100× ） 显微镜观察放线菌、曲霉示菌丝及孢子、匍枝根霉、 有隔菌丝与无隔菌丝等装片时： 低倍镜（10× ） 高倍镜（40× ） 用油镜观察时，观察完毕应将镜头、玻片标本上的液 体石蜡油用干净的擦镜纸擦干净。
实验报告
实验目的要求、实验原理、涂片观察结果绘图、菌落观察结果填 表。 观察平皿的培养基上生长的各种微生物的菌落，简单分类，详细 记录其特征填入下表。细菌、真菌、放线菌，以下以细菌为例记 录指标。
细菌、真菌、放线菌等菌落观察记录指标
（注意选取单个菌落，进行目测观察，描述菌落特征） 1）大小：大、中、小、针尖状，可用米尺测量菌落的直径（mm）. 2）颜色：黄、浅黄、乳白、灰白、红、粉红等。 3）干湿：干燥、湿润、粘稠。 4）质地：腊状、液滴状、皱褶状。 5）形态：圆形、不规则、同心圆状、丝状、假根状、棉絮状、网 状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 6）表面：扁平扩展或蔓延生长、隆起、凹、凸、脐状、凸脐状、 乳头状、褶皱凸面。 7）透明：透明、半透明、不透明。 8 ）边缘：整齐、不整齐、圆锯齿状、裂叶、不定形、边缘波状。来自四大类微生物区分要 点
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用于专性厌氧菌的培养
方法：
1)将普通培养基置于无氧环境中培养 如:焦性没食子酸法
2)厌氧培养基:在培养基中加氧化还原剂 如:庖肉培养基
（1）焦性没食子酸法
a. 原理：焦性没食子酸在碱性溶 液中能迅速吸收氧气，生成深棕色 焦性没食子橙，利用此法可除去试 管或平皿等容器中的氧气。
焦性没食子酸培养基
石蜡
多细胞 丝状菌落
酵
酵
母
母
样
型
菌
菌
落
落
酵
酵
母
母
样
型
菌
菌
落
落
五、病毒学试验
• 1、病毒包涵体形态 • 2、病毒感染的细胞病变（录像）
什么是包涵体？
病毒感染细胞后，在胞浆或 胞核内出现嗜酸或嗜碱性的圆形、 椭圆形、不规则形斑块结构。
狂犬病病毒包涵体（内基小体）
巨细胞病毒包涵体
六、分枝杆菌与抗酸染色
•1、 形态 •2、结构特点 •3、抗酸染色
结核杆菌（抗酸染色）
结核杆菌（抗酸染色）
2、结构特点：
• 细胞壁含有大量脂质，主要是分
枝菌酸 ，一般不易着色，如果经加温 或延长染色时间而着色后能抵抗强脱 色剂盐酸酒精的脱色，所以又称抗酸 杆菌。
3、抗酸染色
（1）温染：石炭酸复红溶液 5 min （2）脱色：3%盐酸酒精溶液 0.5-1 min （3）复染：碱性美兰 溶液 0.5 min
痢疾杆菌 —
—
+
大肠杆菌 +
—
⊕
动力 + — +
• 2、血清学试验（示教）
选取沙门氏菌或痢疾杆菌属的 诊断血清，与双糖铁基斜面上的菌 苔作玻片凝集反应。
二、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1、形态观察 破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
破伤风梭菌
破伤风梭菌（芽胞）
破伤风梭菌（鞭毛）
产气荚膜梭菌
2、厌氧培养法
医学微生物学 实验五
实验五
其他细菌、真菌、病毒学试验
主要内容：
• 1、上次试验结果观察 • 2、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 • 3、螺旋体形态观察 • 4、真菌的形态与培养 • 5、病毒学试验 • 6、分枝杆菌与抗酸染色
一、上次试验结果观察
• 1、双糖铁基培养基结果观察
乳糖
H2S
伤寒杆菌 —
—
葡萄糖 +
四、真菌的形态与培养
1、形态: 单细胞—酵母菌 如白色念 珠菌 新型隐球菌 多细胞—丝状菌
白色念珠菌
白色念珠菌
新型隐球菌（墨汁染色）
2、培养特性:
沙保培养基
成份： 蛋白胨 琼脂 葡萄糖 蒸馏水 pH
1g 2g 4g 100ml 4—5左右
菌落特征:
酵母型菌落 新型隐球菌
单细胞
酵母样菌落 白色念珠菌
血平板 纱布
焦性没食子酸培养基示意图
b.培养结果观察 产气荚膜梭菌血平板厌氧培养
（2）疱肉培养基
a.原理 动物组织耗氧法
① 不饱和脂肪酸 ② 还原型氨基酸
—— 谷胱甘肽
③ 凡士林
破
产
正
伤
气
常
风
荚
对
梭
膜
照
菌
梭
菌
三、螺旋体
1、形态特点： 原核细胞型微生物 菌体细长柔软，弯曲呈螺旋状， 运动活泼
2、分类： 根据抗原性、螺旋的数目、大
小、规则程度、螺旋间距分类。
பைடு நூலகம் 与疾病有关的：
• 疏螺旋体属 • 密螺旋体属 • 钩端螺旋体属
如 伯氏疏螺旋体 如 梅毒螺旋体 如 钩端螺旋体
回归热疏螺旋体
梅毒螺旋体
钩端螺旋体
钩端螺旋体
钩端螺旋体（镀银染色）
3、暗视野显微镜
普通光学显微镜上 安装一个特制的集 光器—暗视野集光 器，其中央为不透 光的黑板，视野背 景是暗的，标本上 的光线弥散反射
方法：
1)将普通培养基置于无氧环境中培养 如:焦性没食子酸法
2)厌氧培养基:在培养基中加氧化还原剂 如:庖肉培养基
（1）焦性没食子酸法
a. 原理：焦性没食子酸在碱性溶 液中能迅速吸收氧气，生成深棕色 焦性没食子橙，利用此法可除去试 管或平皿等容器中的氧气。
焦性没食子酸培养基
石蜡
多细胞 丝状菌落
酵
酵
母
母
样
型
菌
菌
落
落
酵
酵
母
母
样
型
菌
菌
落
落
五、病毒学试验
• 1、病毒包涵体形态 • 2、病毒感染的细胞病变（录像）
什么是包涵体？
病毒感染细胞后，在胞浆或 胞核内出现嗜酸或嗜碱性的圆形、 椭圆形、不规则形斑块结构。
狂犬病病毒包涵体（内基小体）
巨细胞病毒包涵体
六、分枝杆菌与抗酸染色
•1、 形态 •2、结构特点 •3、抗酸染色
结核杆菌（抗酸染色）
结核杆菌（抗酸染色）
2、结构特点：
• 细胞壁含有大量脂质，主要是分
枝菌酸 ，一般不易着色，如果经加温 或延长染色时间而着色后能抵抗强脱 色剂盐酸酒精的脱色，所以又称抗酸 杆菌。
3、抗酸染色
（1）温染：石炭酸复红溶液 5 min （2）脱色：3%盐酸酒精溶液 0.5-1 min （3）复染：碱性美兰 溶液 0.5 min
痢疾杆菌 —
—
+
大肠杆菌 +
—
⊕
动力 + — +
• 2、血清学试验（示教）
选取沙门氏菌或痢疾杆菌属的 诊断血清，与双糖铁基斜面上的菌 苔作玻片凝集反应。
二、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1、形态观察 破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
破伤风梭菌
破伤风梭菌（芽胞）
破伤风梭菌（鞭毛）
产气荚膜梭菌
2、厌氧培养法
医学微生物学 实验五
实验五
其他细菌、真菌、病毒学试验
主要内容：
• 1、上次试验结果观察 • 2、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 • 3、螺旋体形态观察 • 4、真菌的形态与培养 • 5、病毒学试验 • 6、分枝杆菌与抗酸染色
一、上次试验结果观察
• 1、双糖铁基培养基结果观察
乳糖
H2S
伤寒杆菌 —
—
葡萄糖 +
四、真菌的形态与培养
1、形态: 单细胞—酵母菌 如白色念 珠菌 新型隐球菌 多细胞—丝状菌
白色念珠菌
白色念珠菌
新型隐球菌（墨汁染色）
2、培养特性:
沙保培养基
成份： 蛋白胨 琼脂 葡萄糖 蒸馏水 pH
1g 2g 4g 100ml 4—5左右
菌落特征:
酵母型菌落 新型隐球菌
单细胞
酵母样菌落 白色念珠菌
血平板 纱布
焦性没食子酸培养基示意图
b.培养结果观察 产气荚膜梭菌血平板厌氧培养
（2）疱肉培养基
a.原理 动物组织耗氧法
① 不饱和脂肪酸 ② 还原型氨基酸
—— 谷胱甘肽
③ 凡士林
破
产
正
伤
气
常
风
荚
对
梭
膜
照
菌
梭
菌
三、螺旋体
1、形态特点： 原核细胞型微生物 菌体细长柔软，弯曲呈螺旋状， 运动活泼
2、分类： 根据抗原性、螺旋的数目、大
小、规则程度、螺旋间距分类。
பைடு நூலகம் 与疾病有关的：
• 疏螺旋体属 • 密螺旋体属 • 钩端螺旋体属
如 伯氏疏螺旋体 如 梅毒螺旋体 如 钩端螺旋体
回归热疏螺旋体
梅毒螺旋体
钩端螺旋体
钩端螺旋体
钩端螺旋体（镀银染色）
3、暗视野显微镜
普通光学显微镜上 安装一个特制的集 光器—暗视野集光 器，其中央为不透 光的黑板，视野背 景是暗的，标本上 的光线弥散反射