【CN109880786A】一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法【专利】
一种提高凝结芽孢杆菌细胞形成芽孢的方法及培养基[发明专利]
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专利名称：一种提高凝结芽孢杆菌细胞形成芽孢的方法及培养基
专利类型：发明专利
发明人：孙建新,徐中文,张金燕,闫海,李锴骁
申请号：CN201811240024.9
申请日：20181024
公开号：CN109207406A
公开日：
20190115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用乳酸盐和/或乳酸作为凝结芽孢杆菌生长的唯一或主要碳源促进其细胞形成芽孢的方法，该方法利用如下培养基培养凝结芽孢杆菌，对凝结芽孢杆菌进行好氧培养，培养基组成为：酵母膏10.0g/L；牛肉膏10.0g/L；蛋白胨10.0g/L；碳酸氢钠1.5g/L；磷酸二氢钾1.5g/L；七水硫酸镁1.0g/L；硫酸锰0.1g/L；氯化钙1.0g/L；去离子水1L；乳酸盐和/或乳酸含量为10‑30g/L。
本发明在培养凝结芽孢杆菌过程中可以促进凝结芽孢杆菌细胞形成芽孢，芽孢形成率高达90％以上。
申请人：广东绿百多生物开发有限公司
地址：524000 广东省湛江市坡头区官渡工业园D区业兴路8号
国籍：CN
代理机构：广州广信知识产权代理有限公司
代理人：张文雄
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促使芽孢杆菌大量生成芽孢的方法
促使芽孢杆菌大量生成芽孢的方法芽孢杆菌是一种广泛存在于土壤中的细菌，其具有形成芽孢的能力，这种芽孢具有高度的抵抗力，能够在极端环境下存活。
芽孢杆菌的芽孢可以应用于食品工业、制药工业和农业等领域，因此大量生成芽孢具有重要的意义。
以下是促使芽孢杆菌大量生成芽孢的方法：1. 营养物质的添加：芽孢杆菌的生长需要一定的营养物质，例如碳源、氮源和矿物质等。
在培养芽孢杆菌时，可以添加适量的营养物质，以促进其生长和芽孢的形成。
2. 温度的调节：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成受到温度的影响。
一般来说，芽孢杆菌的最适生长温度为30-37℃，而芽孢的形成温度为50-60℃。
因此，在培养芽孢杆菌时，可以通过调节温度来促进其芽孢的形成。
3. 氧气的控制：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成受到氧气的影响。
芽孢杆菌喜欢在低氧环境下生长和形成芽孢。
因此，在培养芽孢杆菌时，可以通过控制氧气的供应量来促进其芽孢的形成。
4. pH值的调节：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成受到pH值的影响。
一般来说，芽孢杆菌的最适生长pH值为7-8，而芽孢的形成pH值为5-6。
因此，在培养芽孢杆菌时，可以通过调节pH值来促进其芽孢的形成。
5. 添加适量的盐：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成受到盐的影响。
在培养芽孢杆菌时，可以添加适量的盐，以促进其生长和芽孢的形成。
6. 添加适量的营养因子：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成需要一些特殊的营养因子，例如维生素和氨基酸等。
在培养芽孢杆菌时，可以添加适量的营养因子，以促进其生长和芽孢的形成。
7. 适当的培养时间：芽孢杆菌的生长和芽孢的形成需要一定的时间。
在培养芽孢杆菌时，需要适当延长培养时间，以促进其芽孢的形成。
总之，促使芽孢杆菌大量生成芽孢需要综合考虑多种因素，通过合理的营养物质添加、温度、氧气、pH值、盐、营养因子和培养时间的控制，可以有效地促进芽孢的形成。
一种凝结芽孢杆菌及其用途[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710161862.6(22)申请日 2017.03.17(83)生物保藏信息CGMCC No.12125 2016.02.01(71)申请人 哈尔滨中科生物工程有限公司地址 266109 山东省青岛市城阳区正阳路196号国际商务港507(72)发明人 隋利涛 曹亚彬 梁晓彤 (74)专利代理机构 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340代理人 陈永宁(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)A61K 35/742(2015.01)A61P 1/00(2006.01)A61P 37/04(2006.01)A23K 50/75(2016.01)A23K 10/18(2016.01)C12R 1/07(2006.01)(54)发明名称一种凝结芽孢杆菌及其用途(57)摘要本发明公开了一种凝结芽孢杆菌及其用途，属于生物工程技术领域。
本发明所述凝结芽孢杆菌(Bacillus Coagulans)zkng160127，于2016年02月01日保藏于中国微生物菌种保藏中心，保藏单位为哈尔滨中科生物工程有限公司，保藏编号为CGMCC No.12125。
本发明的凝结芽孢杆菌具有耐酸、耐胆盐、抑制病原菌生长的特性，能够有效提高免疫力，促进生长和改善肠道微环境，具有优异的益生作用。
权利要求书1页 说明书10页序列表1页 附图2页CN 106754579 A 2017.05.31C N 106754579A1.一种凝结芽孢杆菌，其特征在于：所述凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)zkng160127，保藏编号为CGMCC No.12125。
2.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌，其特征在于：分离于健康散养鸡肠道内容物。
3.根据权利要求2所述凝结芽孢杆菌，其特征在于：菌落形态为不透明白色，圆形有光泽，边缘整齐，表面较平且湿润。
一种促进芽孢杆菌生长的方法[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911004204.1(22)申请日 2019.10.22(71)申请人 北京大学地址 100871 北京市海淀区颐和园路5号(72)发明人 鲁安怀 朱莹 丁竑瑞 李艳 王长秋 (74)专利代理机构 北京万象新悦知识产权代理有限公司 11360代理人 李稚婷(51)Int.Cl.C12N 1/38(2006.01)C12N 1/20(2006.01)(54)发明名称一种促进芽孢杆菌生长的方法(57)摘要本发明公开了一种促进芽孢杆菌生长的方法，将一定量的矿物材料加入水中加热煮沸，过滤，取滤液配制培养基培养芽孢杆菌，其中所述矿物材料不溶于水，主要成分为方解石和白云石。
本发明利用天然易得的矿物材料在短时间内加快芽孢杆菌的生长，见效明显，成本低廉，且安全无毒，有利于在工业、农业、食品安全等领域大规模推广和应用。
权利要求书1页 说明书6页 附图4页CN 112695007 A 2021.04.23C N 112695007A1.一种促进芽孢杆菌生长的方法，将一定量的矿物材料加入水中加热煮沸，过滤，取滤液配制培养基培养芽孢杆菌，其中所述矿物材料不溶于水，主要成分为方解石和白云石。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述矿物材料主要成分为质量比为2.5:1～3:1的方解石和白云石。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述矿物材料为天然矿物材料，其中包含质量分数为70％～75％的方解石和20％～25％的白云石，以及质量分数为5％的石英。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述矿物材料的颗粒粒径为微米级级别至纳米级别。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，每升去离子水中加入50～150g所述矿物材料，然后加热至沸腾，冷却后通过抽滤将矿物材料和水溶液分离，取矿物材料处理后的水溶液配制培养基。
促进芽孢杆菌属孢子萌发的方法[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201880021048.7(22)申请日 2018.01.25(30)优先权数据62/450,735 2017.01.26 US(85)PCT国际申请进入国家阶段日2019.09.25(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2018/015125 2018.01.25(87)PCT国际申请的公布数据WO2018/140542 EN 2018.08.02(83)生物保藏信息NRRL B-21661 1997.03.07NRRL B-50421 2010.10.05NRRL B-50455 2010.12.06(71)申请人 拜耳作物科学有限合伙公司地址 美国密苏里州(72)发明人 A ·希尔林 V ·P ·托马斯 周鳳玲 (74)专利代理机构 北京北翔知识产权代理有限公司 11285代理人 孙占华 张广育(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)A01N 63/00(2006.01)C05B 17/00(2006.01)C05F 11/08(2006.01)C12R 1/07(2006.01)C12R 1/01(2006.01)(54)发明名称促进芽孢杆菌属孢子萌发的方法(57)摘要本发明提供了促进促进植物生长的芽孢杆菌属或类芽孢杆菌属分离株的孢子萌发和/或营养生长的方法，所述方法包括将无机磷酸盐和促进植物生长的芽孢杆菌属或类芽孢杆菌属分离株同时或惯序地施用到植物、植物部分、植物繁殖体、植物种子和/或植物在其中生长或意欲在其中生长的位置。
权利要求书3页 说明书24页 附图19页CN 110462021 A 2019.11.15C N 110462021A1.一种促进促进植物生长的芽孢杆菌属(Bacillus)或类芽孢杆菌属(Paenibacillus)分离株的孢子萌发和/或营养生长的方法，所述方法包括将无机磷酸盐和促进植物生长的芽孢杆菌属或类芽孢杆菌属分离株同时或惯序地施用到植物、植物部分、植物繁殖体、植物种子和/或植物在其中生长或意欲在其中生长的位置。
一种促进芽孢生成的培养基[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201811241570.4(22)申请日 2018.10.24(71)申请人 亚太星原农牧科技海安有限公司地址 226600 江苏省南通市海安县城东镇开发区晓星大道115号(72)发明人 兰玉华 赖水明 张诗 李炯明 陈志敏 吴有林 (74)专利代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225代理人 褚明伟(51)Int.Cl.C12N 3/00(2006.01)C12R 1/07(2006.01)C12R 1/01(2006.01)(54)发明名称一种促进芽孢生成的培养基(57)摘要本发明涉及一种促进芽孢生成的培养基，所述培养基包括如下重量份的组分：玉米粉：3-5，蛋白胨：0.3-0.5，豆粕粉：2-3，镁盐：0.01-0.03，氯化物：0.001-0.01，钾盐：0.01-0.03，钙盐：0.01-0.05，锰盐：0.003-0.005。
所述培养基用作液体发酵培养基使用。
与现有技术相比，本发明培养基能够有效缩短芽孢生成的时间，操作简易，并显著提高芽孢产率。
权利要求书1页 说明书5页CN 109468259 A 2019.03.15C N 109468259A1.一种促进芽孢生成的培养基，其特征在于，所述培养基包括如下重量份的组分：玉米粉：3-5，蛋白胨：0.3-0.5，豆粕粉：2-3，镁盐：0.01-0.03，氯化物：0.001-0.01，钾盐：0.01-0.03，钙盐：0.01-0.05，锰盐：0.003-0.005。
2.根据权利要求1所述的一种促进芽孢生成的培养基，其特征在于，所述培养基包括如下重量份的组分：玉米粉：3-5，蛋白胨：0.3-0.5，豆粕粉：2-3，葡萄糖：1-2，镁盐：0.01-0.03，氯化物：0.001-0.01，钾盐：0.01-0.03，钙盐：0.01-0.05，锰盐：0.003-0.005。
一种凝结芽孢杆菌及其高密度发酵方法以及干菌粉制备方法[发明专利]
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(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201510435242.8(22)申请日 2015.07.22CCTCC NO: M 2015273 2015.05.03C12N 1/20(2006.01)C12R 1/07(2006.01)(71)申请人江南大学地址214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号申请人江苏大有生物科技发展有限公司(72)发明人张梁 石孔泉 辛瑜(74)专利代理机构无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228代理人聂启新(54)发明名称一种凝结芽孢杆菌及其高密度发酵方法以及干菌粉制备方法(57)摘要一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)ZS-007，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015273；采用液体发酵工艺，发酵液中凝结芽孢杆菌活菌数1.52×1010cfu/mL 以上、芽孢数1.38×1010cfu/mL 以上、芽孢率90.8％以上。
喷雾干燥获得的干菌粉中，活菌数8.0×1011cfu/g 以上；干菌粉可与淀粉、葡萄糖等填充剂混合后得到凝结芽孢杆菌微生态制剂。
本发明凝结芽孢杆菌具有高密度发酵和高菌体含量的特点，有利于降低产品成本，有助于产品市场推广，对于促进畜禽健康养殖具有积极意义。
(83)生物保藏信息(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书4页 附图1页(10)申请公布号CN 104974966 A (43)申请公布日2015.10.14C N 104974966A1.一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)ZS-007，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015273。
2.一种权利要求1所述的凝结芽胞杆菌的高密度发酵方法，其特征在于具体步骤如下：(1)菌种活化将凝结芽孢杆菌菌种接种至营养琼脂斜面培养基上，25-37℃下培养24-48hr；然后划线转接于营养琼脂茄子瓶斜面，25-37℃下培养24-48hr；营养琼脂斜面培养基及营养琼脂茄子瓶的组成均为：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，琼脂15-20g/L，pH7.2-7.4；(2)摇瓶培养将步骤(1)得到的菌种接种至摇瓶中，振荡培养18-30hr；摇瓶培养基配方：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，pH7.2-7.4；250mL摇瓶装液量为20mL，500mL摇瓶装液量为50mL；培养条件：摇瓶转速200r/min，温度25-37℃；(3)种子罐扩培种子罐培养基组成：蛋白胨10g/L，牛肉膏3g/L，氯化钠5g/L，pH7.2-7.4；种子罐体积10-1000L，装液量50-80％；培养条件：搅拌转速180-250r/min，通气量0.5-1.0vvm，温度25-37℃，培养时间18-30hr；(4)发酵罐发酵以0.1％-10％的接种量将步骤(3)得到的种子液接入发酵罐，发酵培养基组成：葡萄糖25g/L，蛋白胨15g/L，酵母粉10g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸镁0.5g/L，初始pH7.0；发酵罐体积1-50m3，装液量50-80％；培养条件：搅拌转速100-200r/min，通气量0.5-0.8vvm，温度25-37℃，培养时间16-48hr；取发酵液镜检时，当90％以上的菌体都形成芽孢时，即到发酵终点，得到发酵液。
一种凝结芽孢杆菌的发酵装置[实用新型专利]
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专利名称：一种凝结芽孢杆菌的发酵装置专利类型：实用新型专利
发明人：王昆
申请号：CN201921085578.6
申请日：20190711
公开号：CN210620787U
公开日：
20200526
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本实用新型公开了一种凝结芽孢杆菌的发酵装置，包括用于进行菌体发酵过程的顶筒，还包括起到搅拌作用的搅拌轴，同时还包括固定在搅拌轴顶端位置处的电动机，所述顶筒的底端设置有底筒，且顶筒的内部插接有输水管，所述输水管上靠近端头位置处固定安装有控制阀，所述底筒的底端中心位置处连通有出料口。
本实用新型所述的一种凝结芽孢杆菌的发酵装置，通过螺纹接头和螺纹接槽进行顶筒与底筒之间的连接，能够实现装置的组合使用，以此方便进行装置内部的清洗，提高装置清洗的干净程度，通过增设在输水管内部的内辅管，能够方便远距离水源与装置之间的连接，以此方便进行水源的供给，减少装置移动带来的不便，适用不同工作状况，带来更好的使用前景。
申请人：陆良佰佳益康生物科技有限公司
地址：650000 云南省曲靖市陆良县工业园区大莫古片区
国籍：CN
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910196065.0
(22)申请日 2019.03.15
(71)申请人 河南科技大学
地址 471000 河南省洛阳市涧西区西苑路
48号
(72)发明人 吴影 田晶晶 古绍彬 孙建瑞
李长福 周艳林 周子吕
(74)专利代理机构 洛阳公信知识产权事务所
(普通合伙) 41120
代理人 时亚娟
(51)Int.Cl.
C12N 1/38(2006.01)
C12N 1/20(2006.01)
C12R 1/07(2006.01)
(54)发明名称
一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法
(57)摘要
本发明涉及一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形
成的方法，属于生物发酵技术领域，所述方法是
在凝结芽孢杆菌发酵培养的对数生长初期向培
养基中依次间隔流加葡萄糖溶液和碳酸钙，促进
芽孢的形成。
与现有技术相比，所述方法碳源的
补充能够促进活菌数的增加，提高菌体密度，加
快芽孢的形成，而碳酸钙的添加能够有效地缩短
芽孢形成时间，提高芽孢数量的同时增加了芽孢
的耐受性。
权利要求书1页 说明书6页CN 109880786 A 2019.06.14
C N 109880786
A
1.一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：在凝结芽孢杆菌发酵培养的对数生长初期向培养基中依次间隔流加碳源和碳酸钙。
2.如权利要求1所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：所述碳源为葡萄糖。
3.如权利要求2所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：将凝结芽孢杆菌原始菌种按照体积比为1:15
~25的接种量接种于一级培养基
中进行活化培养，培养条件为：摇床转速200～220rpm、温度35～38℃、时间20～22h，培养结束得一级菌种；所述一级培养基按质量百分比，由以下组分组成：葡萄糖 1.6～1.8%、蛋白胨 1.0～1.4%、酵母粉 0.6～1.0%、硫酸镁 0.4～0.6%，余量为水；pH 7.8～8.2；
步骤二、将步骤一所得一级菌种按照体积比为1:30的接种量接种于二级培养基中进行发酵培养，培养条件为：摇床转速200～240rpm、温度35～38℃，时间为40-50h；当培养至第8～10h时一次性补入葡萄糖溶液，所述葡萄糖溶液的补入量为二级培养基总体积的1.2～1.6%，所述葡萄糖溶液的浓度为1.0g/mL；继续培养发酵至第14～18h时一次性补入终浓度为40～80g/L的碳酸钙固体；
所述二级培养基按质量百分比，由以下组分组成：葡萄糖 1.2～1.6%、蛋白胨 1.2～1.6%、酵母粉 0.8～1.2%、硫酸镁 0.4～0.6%，余量为水；pH 7.8～8.2。
4.如权利要求3所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：将经步骤一活化的一级菌种接种于二级培养基中经至少一次扩大培养后再进行步骤二所述发酵培养；所述扩大培养的培养条件为：接种量体积比为1:30、摇床转速200～240rpm、温度35～38℃、时间16～20h。
权 利 要 求 书1/1页
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CN 109880786 A。