免疫组化抗体手册范本

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免疫组化实验报告范文

免疫组化实验报告范文

免疫组化实验报告范文一、实验名称。

免疫组化(Immunohistochemistry)实验。

二、实验目的。

1. 学习和掌握免疫组化的基本原理和实验操作流程。

2. 通过免疫组化染色方法,检测组织切片中的特定蛋白表达情况。

三、实验原理。

免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究。

简单来说,就像是给我们想要找的蛋白分子安上一个“小标签”,这个“小标签”还能发出信号让我们看到,这样就能知道这种蛋白在组织里到底在哪里,多还是少啦。

四、实验材料。

1. 组织样本:[具体组织名称]的石蜡切片。

2. 试剂。

一抗(针对目标蛋白的特异性抗体)。

二抗(与一抗特异性结合,并且带有标记物的抗体,这里我们用的是[标记物类型,比如辣根过氧化物酶标记])。

DAB显色剂(辣根过氧化物酶的底物,能在酶的催化下产生棕色沉淀,这样就能显示出目标蛋白的位置啦)。

抗原修复液(用于暴露被石蜡包埋过程中可能被掩盖的抗原表位)。

封闭液(防止非特异性结合,一般是用血清)。

PBS缓冲液(用于清洗切片,就像给切片洗个澡,把不需要的东西冲走)。

3. 仪器设备。

光学显微镜。

恒温箱。

移液器。

五、实验步骤。

# (一)石蜡切片脱蜡至水。

1. 把石蜡切片放到二甲苯Ⅰ中浸泡10分钟,这时候切片就像是在“泡澡”,二甲苯就像强力清洁剂,把石蜡都溶解掉。

然后再放到二甲苯Ⅱ中浸泡10分钟,确保石蜡去得干干净净。

2. 经过二甲苯的洗礼后,切片再依次放入100%乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇中各浸泡5分钟,就像从高浓度的酒慢慢过渡到低浓度的酒里,最后再用蒸馏水冲洗,这个过程就像是给切片逐渐“解酒”,让它慢慢适应水环境。

# (二)抗原修复。

1. 将切片放入盛有抗原修复液的容器中,放到微波炉里加热。

这个过程可有点像给蛋白分子做“按摩”,让那些被石蜡藏起来的抗原位点暴露出来。

免疫组化分型诊断抗体选用表

免疫组化分型诊断抗体选用表

免疫组化分型诊断抗体选用表(2016年3.15版)注:红字提示目前未购买到,或者抗体预试验未完成,或观点尚未证实。

一、间叶肿瘤:Vimentin+ Cytokeratin- LCA-1、肌源性肉瘤:Actin (广谱肌动蛋白HHF35),Actin(平滑肌肌动蛋白SMA)+,Desmin(结蛋白)+,横纹肌肉瘤P63/MyoD1/Myogenin+,平滑肌瘤或肉瘤高分子量钙结合蛋白(H-caldesmon)浆+,平滑肌瘤或乳腺肌上皮Calponin肌动蛋白结合蛋白+。

2、组织细胞肿瘤(注:恶纤组CD68阴性、CD10阳性):CD68(PG-M1单核细胞)+,CD68(KP-1组织细胞/巨噬细胞)+,CD163+。

脂肪肉瘤:S-100和Ki-67脂母细胞核浆+。

骨巨细胞瘤(软组织巨细胞瘤):单核细胞P63+CD68-,多核细胞P63-Ki67-CD68+3、滑膜肉瘤:Cytokeratin+,Vim+,CK19+,CK7+,CK17+,EMA+,SYT基因+。

胃肠间质瘤:CD34+、CD117+、DOG-1+。

4、神经源性:PNET:CD99/CgA/Syn/S-100/Nue-N+, PNET/髓母: INI-1+(恶性横纹肌样瘤-)。

恶性神经鞘瘤:S-100/CD57/PGP9.5/Leu-7+。

室管膜瘤EMA+(中枢神经用EMA点状胞浆阳性)、CK+,GFAP+,S-100+。

脉络膜瘤GFAP-,S-100+。

星型胶质瘤:GFAP+,少突细胞瘤:Olig2,黄色瘤样星型细胞瘤CD34阳CR阴(节细胞胶质瘤CD34阴CR阳)神经元细胞、:NeuN+,Nestin+,NF+,Syn+。

嗅母NeuN-,Syn+,CgA+,NSE+,S-100癌巢周围支持细胞+、脑膜瘤Vim+, EMA+, PR+,CK+, S-100+。

副神经节瘤:Syn+, CgA+, S-100支持细胞+。

血管母细胞瘤:间质细胞аinhibin/VEGF/NSE/Vim/S-100/D2-40+,GFAP/CK/CD10/EMA-;CD34及CD31血管内皮阳性。

免疫组化抗体手册范本

免疫组化抗体手册范本

免疫组织化学抗体手册目录中间丝细胞角蛋白AE1/AE3Cam5.2MNF-11634βE12CK5/6常见肿瘤中的特殊角蛋白CK1CK7CK8CK13CK14CK18CK19CK20TTF-1,CK7和CK20的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌Vimentin(波形蛋白)Desmin(结蛋白)GFAP(胶质纤维酸性蛋白)Neurofilament proteins(神经细丝蛋白)Acid phosphatase(酸性磷酸酶)Actins(肌动蛋白)Muscle-specific actin(HHF35)肌肉特异性肌动蛋白(MSA)Smooth muscle actin(SMA)平滑肌肌动蛋白α-actinin(α-肌动蛋白)NPM/ALK(间变性淋巴瘤激酶)AAT、AACT (α1-抗胰蛋白酶、α1-抗糜蛋白酶)AFP (甲胎蛋白)α-lactalbumin (α-乳清蛋白)Angiotensin-converting enzyme(血管紧素-转换酶)Anti- Mullerian hormone(AMH),Mullerian-抑制因子Cyclin D1(PRAD-1,bcl-1,CCND1)细胞周期蛋白D1bcl-2Bcl-6Ber-EP4Ca15.3B72.3 (BRST-3)BCA-225CA125CA19.9CEA(CD66e)CadherinsCalcitoninh-CaldesmonS-100CalponinCalretininCD1CD2CD3CD4CD5CD7CD8CD9(运动相关蛋白,MRP-1)CD10(CALLA,NEP)CD11CD13CD14CD15(LeuM1)CD16CD19CD20CD21CD22CD23CD25CD30(Ki-1)CD31CD33CD34CD35CD38CD43CD44CD45(白细胞共同抗原,LCA)CD45RA(4KB5,MB1,KiB3,MT2)CD45RO(UCHL1,A6,OPD4)CD56(神经细胞粘附分子,NCAM,Leu19)CD57(Leu 7)CD68(Kp1,PG-M1)CD74CDw75CD79aCD99(MIC2)CD101CD117(c-kit癌基因)黑色素瘤细胞粘附分子,Mel-CAM,CD146Chromogranin(嗜铬蛋白)C-mycCAN.42Collagen (胶原)DBA44DesmoplakinEndosialin(FB5)Endothelin(ET-1)上皮膜抗原(EMA、MUC1)Oestrogen Receptor(ER)Factor VIII-related antigen(von willibranel factor ,VWF)Factor XIII aFascinFerritinFli-1Glucose-transporter-4,GLUT-4HBME-1Heppar 1 ,Hepatocyte paraffin 1HLA-DRHMB-45(anti-gp100)Human chorionic gonadotrophin(hCG)Human placental lactogen(hPL)α-InhibinInvolucrinKi-67Ki-S2Laminin(层粘连蛋白)MAC387(巨噬细胞标志物)Melan-A(一种黑色素细胞分化标志物)Microphthalmia transcrftion Factor (mitf)MOC-31MucinsMyogenin和Myo-D1MyoglobinLow-affinity Nerve goowth Factor receptor低亲和力神经生长因子受体 (P75NGFR)NSEOsteocalcin and other putative markers of ostoblastic differantiationgu g 骨钙蛋白和成骨细胞分化其它标志物Osteonectin(SPARC,BM-40)P504SParathyroid hormore-related peptide(PTHrP) 甲状旁腺激素相关肽Pax gene products (Pax 基因产物)Proliferatiny Cell Nucrear Antigen(PCNA)增殖细胞核抗原Placental alkaline phosphataseProgesterone receptor(孕酮受体)Prostate-specific antigen(PSA) 前列腺特异抗原Prostatic acid phosphatase(PAP) 前列腺酸性磷酸酶Protein gene Product 9.5(PGP9.5)蛋白基因产物P53P63Renal cell careinoma marker(RCC Ma)肾细胞癌标志物Rb2/P130Sarcomeric contractile proteins肌肉收缩蛋白Sialosy1-TNSurfactant proteins表面活性蛋白TauSynaptophysin(突触素)Telomerase reverse transcriptase ,TERT端粒酶逆转录因子Tenascin-CTerminal deoxynuckotide transferase(TdT)末端脱氧核苷酸转移酶Thrombomodulin血栓调节蛋白Thyroglobulin甲状腺球蛋白Thyroid transcription factor-1甲状腺转录因子-1Tyrosinase酪氨酸酶VS38Wilms tumor gene ,WT1中间丝这是一组构成细胞骨架的蛋白质,它们形成直径8~10nm的胞浆细丝。

免疫组化教程范文

免疫组化教程范文

免疫组化教程范文免疫组化(immunohistochemistry,IHC)是一种用于检测组织切片中特定蛋白质、抗原或其他分子的方法。

通过IHC技术,可以在组织切片中观察到染色物质的分布和定位,从而研究蛋白质表达、分布和定位在正常生理和病理状态下的变化。

IHC的基本原理是将待检测的抗原与特异性抗体结合,然后通过染色剂标记该抗体,使得抗原可以在显微镜下被直接或间接观察到。

以下是IHC的基本步骤:1. 制备组织切片:从病理标本或实验动物中取得需要研究的组织,并用形alin固定和包埋成蜡块。

然后,用切片机切出厚度约为4-6微米的组织切片,然后将切片贴附到载玻片上。

2.抗原修复:组织切片在生理条件下(如溶液中)固定后,可能会导致抗原的结构和形态发生改变。

因此,需要进行抗原修复来恢复抗原的结构。

常用的抗原修复方法包括热敏抗原修复(如蒸汽加压或热水浴)和酶解抗原修复(如消化蛋白酶)。

3.阻断非特异性结合位点:组织切片中存在一些非特异性的结合位点,容易和标记抗体结合,导致假阳性结果。

因此,需要使用一种非特异性抗体(例如牛血清白蛋白)在切片上进行预处理,阻断非特异性结合位点。

4. 标记抗体:选择适当的抗体来结合待检测的抗原。

这些抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体,且必须能够特异性地结合到待检测的抗原上。

此外,还需要选择一种染色剂将抗体标记,常用的染色剂有酶标记和荧光标记。

酶标记常用的包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),而荧光标记则常用的有荧光素(FITC)、罗丹明(Rhodamine)等。

5.洗涤:在标记抗体过程中需要进行多次洗涤步骤,以去除未结合的抗体和其他非特异性结合物质。

洗涤的目的是提高特异性和灵敏度。

6.反应-可视化:将标记抗体溶液加到组织切片上,使其与待检测的抗原结合。

如果使用酶标记抗体,则需要加入底物使其转化为可见的染色产物;如果使用荧光标记抗体,则直接在显微镜下观察荧光信号。

7.染色和显微镜观察:使用显微镜观察切片染色后的结果。

SMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书

SMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书

SMA抗体试剂(免疫组织化学)说明书【产品名称】通用名称:SMA抗体试剂(免疫组织化学)英文名称:FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Smooth Muscle Actin, Clone 1A4, Ready-to-Use (Dako Omnis)【包装规格】12mL【预期用途】体外诊断用途。

在常规染色(如:HE染色)基础上进行免疫组织化学染色,为医师提供诊断的辅助信息。

SMA抗体试剂/检测试剂盒(免疫组织化学),预期与Dako Omnis全自动免疫组化染色设备配合使用,进行免疫组化(IHC)分析。

该抗体可标记福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织中的平滑肌细胞、肌成纤维细胞和肌上皮细胞。

其结果有助于区分平滑肌瘤、平滑肌肉瘤(1)和多形性腺瘤(2)。

该抗体与其他相关抗体联合使用有助于疾病的鉴别诊断。

临床上解释任何染色或其缺失都需辅以使用恰当对照的形态学研究,并应由有资质的病理医师结合患者临床病史和其他诊断检测进行评价。

该抗体预期在使用非免疫组化法的常规病理学染色对肿瘤进行初步诊断的基础上使用。

【检验原理】胞质肌动蛋白属于细胞骨架蛋白微丝系统中的一员,是哺乳动物和鸟类中表达最保守的一类蛋白。

肌动蛋白包含六种亚型,其氨基酸序列不同,但分子量均为42 kDa。

这些亚型显示了超过90%的总体序列同源性,但在肽链N端的18个残基中仅有50-60%的同源性。

因此N端区域是区分不同亚型的主要抗原区域(3)。

在不同的肌肉组织中又有不同特异性的α亚型,如骨骼肌α-、心肌α-和平滑肌α-肌动蛋白(4)。

β-和γ-肌动蛋白可能存在于肌肉细胞以及身体其他大多数细胞类型中,包括非肌肉细胞(5)。

参考Dako“免疫组化染色一般说明”或“IHC程序检测系统说明”,以获取以下信息:程序原理、所需未提供材料、储存、标本制备、染色程序、质量控制、故障排除、染色判读和一般局限性。

【主要组成成份】1.提供的试剂即用型单克隆小鼠抗体以液体形式提供,缓冲液中含有稳定蛋白和0.015 mol/L的叠氮钠。

免疫组化报告单

免疫组化报告单

免疫组化报告单
免疫组化报告单
姓名:XXX 性别: XX 年龄:XX岁
病理号:XXX 标本号:XXX 报告日期:XXXX年XX 月XX日
送检医生:XXX 送检科室:XXX 标本种类:XXX
临床诊断:XXXXXX
免疫组化检测项目及结果:
1. 细胞角蛋白(CK):强阳性。

表达于上皮细胞,提示肿瘤起源于上皮细胞。

2. 维门(EMA):弱阳性。

表达于上皮细胞,较CK的表达更特异。

3. CK7:强阳性。

表达于许多上皮细胞,并被用于鉴别肺癌和其他肿瘤。

4. CK20:阴性。

通常在肠上皮细胞中表达,阴性结果与原发性肠癌有关。

5. CD20:阴性。

常表达于B细胞,阴性结果与B细胞肿瘤无
关。

6. CD3:阳性。

常表达于T细胞,提示可能存在T细胞浸润。

综合分析:根据检测结果显示,标本中的肿瘤细胞表达CK、EMA、CK7和CD3,而不表达CK20和CD20。

这提示这个病人的肿瘤可能起源于上皮细胞,而不是B细胞。

同时,T细胞的存在暗示可能存在免疫系统的激活。

结论:根据免疫组化检测的结果和分析,推测本病人的肿瘤为上皮细胞源性,并伴有T细胞浸润。

进一步的病理学和临床
检查有助于明确诊断和制定适当的治疗计划。

提示:本报告为免疫组化检测结果,仅供参考。

备注:本报告仅针对特定的免疫组化检测项目提供结果和分析,不包括其他相关病理学报告。

请综合考虑其他病理和临床信息进行诊断和治疗决策。

常用乳腺癌免疫组化

常用乳腺癌免疫组化

常用乳腺癌免疫组化常用乳腺癌免疫组化文档范本:一、引言乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤,目前免疫组化已被广泛应用于乳腺癌的诊断和治疗中。

本文档将介绍乳腺癌常用的免疫组化检测方法和相关指标。

二、免疫组化检测方法1、组织标本制备(1)组织固定:使用10%中性缓冲福尔马林(pH 7.4)固定肿瘤组织标本,时间为24-48小时。

(2)切片制备:将固定好的组织标本进行蜡块嵌入,使用旋转切片机制备组织切片,厚度为4-5μm。

2、免疫组织化学染色(IHC)(1)蜡块切片去蜡:将切片放置在60°C烘箱中30分钟,然后使用三聚氟乙烯蜡溶解剂去除蜡块。

(2)抗原修复:将切片放入0:01M缓冲液中进行抗原修复,时间和温度根据使用的修复液而定。

(3)抗体标记:将切片与特异性抗体孵育,可以使用荧光标记的二抗或者酶标记的二抗。

(4)显色反应:使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶进行显色,观察免疫染色结果。

三、乳腺癌常用的免疫组化指标1、雌激素受体(ER)雌激素受体的阳性表达与乳腺癌患者的预后和治疗反应密切相关。

2、孕激素受体(PR)孕激素受体的表达状态对于乳腺癌的治疗和预后有一定的指导意义。

3、人类表皮生长因子受体2(HER2)HER2的阳性表达与乳腺癌的侵袭性和复发风险增加有关,是乳腺癌治疗中重要的预测指标。

4、Ki-67Ki-67是一种细胞周期相关蛋白,其高表达与乳腺癌的恶性程度和预后密切相关。

5、p53P53蛋白的异常表达与乳腺癌的发生和发展有关,是乳腺癌诊断和预后评估的重要标志物。

四、附件本文档所涉及的附件包括乳腺癌免疫组化的典型图片和相关文献资料。

五、法律名词及注释1、福尔马林:一种用于组织标本固定的化学物质,具有防腐和杀菌作用。

2、免疫组化:通过特异性抗体的作用,对组织标本中的蛋白进行检测和定位的一种方法。

3、ER:雌激素受体,对雌激素的结合和信号转导起调节作用的蛋白。

4、PR:孕激素受体,对孕激素的结合和信号转导起调节作用的蛋白。

MUM1抗体试剂(免疫组织化学)说明书

MUM1抗体试剂(免疫组织化学)说明书

MUM1抗体试剂(免疫组织化学)说明书【产品名称】通用名称:MUM1抗体试剂(免疫组织化学)英文名称:FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human MUM1 Protein, Clone MUM1p, Ready-to-Use(Link)【包装规格】40-60测试/盒【预期用途】体外诊断用途。

在常规染色(如:HE染色)基础上进行免疫组织化学染色,为医师提供诊断的辅助信息。

MUM1抗体试剂(免疫组织化学),预期与Autostainer Link免疫组化染色设备配合使用,进行免疫组化(IHC)分析。

该抗体可标记MUM1蛋白,MUM1蛋白表达于生发中心明区的B细胞亚群(代表B细胞分化晚期)、浆细胞和活化T细胞。

其染色结果可辅助血液淋巴肿瘤的分类以及淋巴系统恶性肿瘤的亚型分类(1,2)。

该抗体与其他相关抗体联合使用有助于疾病的鉴别诊断。

临床上解释任何染色或其缺失都应辅以使用适当对照的形态学研究,并应由有资质的病理医师结合患者临床病史和其他诊断检测进行评价。

该抗体预期在使用非免疫组化法的常规病理学染色对肿瘤进行初步诊断的基础上使用。

【检验原理】抗原别名:IRF4(干扰素调节因子4)、ICSAT(活化T细胞的干扰素保守序列结合蛋白)和PIP(PU.1相关元件)(3)。

MUM1蛋白(多发性骨髓瘤癌基因-1)是一种由MUM1基因编码的50 kDa蛋白,在多发性骨髓瘤(MM)中观察到其参与的罕见t(6;14)(p25;q32)易位,导致MUM1基因与Ig重链基因座并置,由此被发现(4,5)。

MUM1-蛋白缺陷小鼠无法形成生发中心,脾和固有层缺乏浆细胞,从而血清免疫球蛋白水平显著降低,无法产生可检测的抗体应答、T淋巴细胞毒性或抗肿瘤应答(1)。

MUM1蛋白的表达不依赖于t (6;14)(p25;q32)易位,可在多发性骨髓瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和激活T细胞中检测到。

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免疫组织化学抗体手册目录中间丝细胞角蛋白AE1/AE3Cam5.2MNF-11634βE12CK5/6常见肿瘤中的特殊角蛋白CK1CK7CK8CK13CK14CK18CK19CK20TTF-1,CK7和CK20的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌Vimentin(波形蛋白)Desmin(结蛋白)GFAP(胶质纤维酸性蛋白)Neurofilament proteins(神经细丝蛋白)Acid phosphatase(酸性磷酸酶)Actins(肌动蛋白)Muscle-specific actin(HHF35)肌肉特异性肌动蛋白(MSA)Smooth muscle actin(SMA)平滑肌肌动蛋白α-actinin(α-肌动蛋白)NPM/ALK(间变性淋巴瘤激酶)AAT、AACT (α1-抗胰蛋白酶、α1-抗糜蛋白酶)AFP (甲胎蛋白)α-lactalbumin (α-乳清蛋白)Angiotensin-converting enzyme(血管紧素-转换酶)Anti- Mullerian hormone(AMH),Mullerian-抑制因子Cyclin D1(PRAD-1,bcl-1,CCND1)细胞周期蛋白D1bcl-2Bcl-6Ber-EP4Ca15.3B72.3 (BRST-3)BCA-225CA125CA19.9CEA(CD66e)CadherinsCalcitoninh-CaldesmonS-100CalponinCalretininCD1CD2CD3CD4CD5CD7CD8CD9(运动相关蛋白,MRP-1)CD10(CALLA,NEP)CD11CD13CD14CD15(LeuM1)CD16CD19CD20CD21CD22CD23CD25CD30(Ki-1)CD31CD33CD34CD35CD38CD43CD44CD45 (白细胞共同抗原,LCA)CD45RA(4KB5,MB1,KiB3,MT2)CD45RO(UCHL1,A6,OPD4)CD56(神经细胞粘附分子,NCAM,Leu19)CD57(Leu 7)CD68(Kp1,PG-M1)CD74CDw75CD79aCD99(MIC2)CD101CD117(c-kit癌基因)黑色素瘤细胞粘附分子,Mel-CAM,CD146Chromogranin(嗜铬蛋白)C-mycCAN.42Collagen (胶原)DBA44DesmoplakinEndosialin (FB5)Endothelin (ET-1)上皮膜抗原(EMA、MUC1)Oestrogen Receptor(ER)Factor VIII-related antigen(von willibranel factor ,VWF)Factor XIII aFascinFerritinFli-1Glucose-transporter-4, GLUT-4HBME-1Hep par 1 , Hepatocyte paraffin 1HLA-DRHMB-45(anti-gp100)Human chorionic gonadotrophin(hCG)Human placental lactogen(hPL)α-InhibinInvolucrinKi-67Ki-S2Laminin(层粘连蛋白)MAC387(巨噬细胞标志物)Melan-A(一种黑色素细胞分化标志物)Microphthalmia transcrftion Factor (mitf)MOC-31MucinsMyogenin和Myo-D1MyoglobinLow-affinity Nerve goowth Factor receptor低亲和力神经生长因子受体 (P75NGFR)NSEOsteocalcin and other putative markers of ostoblastic differantiationgu g 骨钙蛋白和成骨细胞分化其它标志物Osteonectin(SPARC, BM-40)P504SParathyroid hormore-related peptide (PTHrP) 甲状旁腺激素相关肽Pax gene products (Pax 基因产物)Proliferatiny Cell Nucrear Antigen(PCNA)增殖细胞核抗原Placental alkaline phosphataseProgesterone receptor(孕酮受体)Prostate-specific antigen(PSA) 前列腺特异抗原Prostatic acid phosphatase(PAP) 前列腺酸性磷酸酶Protein gene Product 9.5(PGP9.5)蛋白基因产物P53P63Renal cell careinoma marker(RCC Ma)肾细胞癌标志物Rb2/P130Sarcomeric contractile proteins肌肉收缩蛋白Sialosy1-TNSurfactant proteins表面活性蛋白TauSynaptophysin(突触素)Telomerase reverse transcriptase , TERT端粒酶逆转录因子Tenascin-CTerminal deoxynuckotide transferase(TdT)末端脱氧核苷酸转移酶Thrombomodulin血栓调节蛋白Thyroglobulin甲状腺球蛋白Thyroid transcription factor-1甲状腺转录因子-1Tyrosinase酪氨酸酶VS38Wilms tumor gene ,WT1中间丝这是一组构成细胞骨架的蛋白质,它们形成直径8~10nm的胞浆细丝。

其中有一个由310个氨基酸残基构成的中心”柱”区域,两侧连接头部和尾部区域,标志着该中间丝的特殊性及具有免疫原性。

中间丝之间氨基酸顺序排列的同源性显示出用单克隆抗体测定时存在交叉反应的潜在性,另外这些细丝在各种细胞系中常为优势表达,共表达在肿瘤中也较常见。

中间丝目前被分成6类:☆ Acidic cytokeratin(酸性细胞角蛋白)☆ Basic cytokeratin(碱性细胞角蛋白)☆ Vimentin(波形蛋白)、Desmin(结蛋白)、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、Peripherin(外周蛋白)☆ Neurofilaments(神经细丝)☆ Nuclear laminin proteins(核层粘连蛋白)☆ Nestin(网状蛋白)中间丝的最初作用被认为是构成细胞骨架,然而现在我们知道它们可包绕于核酸外,与钙调节蛋白激酶及一磷酸腺苷环化酶(cAMP)作用有关。

当前的观点是它们可调节细胞间的相互作用。

细胞角蛋白细胞角蛋白作为一种中间丝,存在于所有上皮细胞及部分非上皮细胞。

事实上,几乎所有肿瘤类型中都被证实存在角蛋白,包括子宫平滑肌瘤、大部分软组织肉瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤、浆细胞瘤和某些淋巴瘤。

它们分成两组:I型:酸性细胞角蛋白(Moll数为 9~20)。

II型:碱性细胞角蛋白(Moll 数为1~8)。

每种I型角蛋白和II型角蛋白形成一对,所有上皮细胞包括至少两种角蛋白。

角蛋白19是个例外,它以非配对形式存在,I型角蛋白通常和一种大其9KD的II型角蛋白配对。

角蛋白也可以分成低分子量型(通常为8,18和19)和高分子量型(通常为1,5,10,14)。

诊断应用:1.癌的鉴别2.显示不同上皮样分化肉瘤的鉴别☆滑膜肉瘤☆上皮样肉瘤3.肉瘤中的异常染色可为间皮瘤、黑色素瘤、平滑肌肉瘤和皮细胞肿瘤的诊断提供线索,仅仅只有CK8和CK18(被Cam5.2和35BH11证明)表达阳性,这两种存在于所有组织中的原始角蛋白胚胎源性表达也许可以解释CK8和CK18的异位性表达。

4.在小细胞癌中可以看到细胞核周“圆点状”染色,如麦克尔细胞癌、肉瘤及髓细胞瘤可显示异常免疫反应性。

5.许多儿童的小兰圆细胞肿瘤表达角蛋白,包括尤文氏肉瘤/PNET、横纹肌肉瘤、肾母细胞瘤和促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤。

现在有特异的单克隆抗体可应用于石蜡包埋的组织,由于细胞角蛋白之间的同源性,单抗需十分仔细地筛选以避免交叉反应。

抗原决定簇在某些情况下可以被遮蔽,可能反应发生在免疫印迹上而不是在组织切片。

正常上皮组织中的角蛋白上皮组织分成如下几类:1.“单层”:所有非复层上皮组织2.“复层扁平”:包括角化的复层鳞状上皮和非角化的复层鳞状上皮3.“复合”:所有其他复层和假复层上皮所有单层、复层和假复层上皮均表达CK8和CK18,复层上皮表达CK8和CK18并不明确,“分层角蛋白”包括CK1~CK6和CK10~CK17。

CK5和CK14/15在基底部表达,其他类型角蛋白根据不同上皮类型在基底以上部份表达。

CK1/2和CK10与角化有关,脏表面的复层扁平上AE1/AE3这两种抗体组成的混合物主要用于由福尔马林固定,石蜡包埋的组织。

免疫组化表达AE1可和大多数酸性细胞角蛋白(I型)发生反应,AE3识别所有已知的碱性细胞角蛋白(II型)。

这种抗体混合物几乎可与所有的上皮组织发生反应,和其它中间丝无交叉反应。

1.鳞状细胞癌(包括梭形细胞变异体)2.腺癌●肾上腺样瘤●肝细胞癌3.移行细胞癌4.小细胞癌5.类癌6.多形性腺瘤(上皮成分)7.胸腺瘤8.间皮瘤(包括肉瘤成分)9.脊索瘤10.胚胎细胞肿瘤,除外精原细胞瘤11.滑膜肉瘤12.上皮样肉瘤13.平滑肌肉瘤可能阳性Cam5.2免疫组化表达人类细胞角蛋白中分子量为45kD(Moll数为18)和52kD(Moll数为8),它和正常的具有分泌功能的上皮发生反应,但不和复层鳞状上皮反应。

诊断应用通常在下列细胞中表达:1.腺癌2.鳞状细胞癌包括梭形细胞癌,在宫颈、阴道及食道鳞状细胞癌中可能呈阴性反应。

3.肾细胞癌4.肝细胞癌5.胆管癌6.神经分泌细胞癌,包括小细胞癌(可能呈圆点状阳性)和麦克尔细胞癌7.间皮瘤:间皮瘤通常比腺癌染色更深,间皮瘤的纤维细胞表达比腺癌更普遍8.胚胎细胞肿瘤,除外精原细胞瘤9.滑膜肉瘤10.上皮样肉瘤11.胸腺瘤上皮细胞12.平滑肌和平滑肌肿瘤13.一些乳腺肿瘤14.脑膜瘤15.神经母细胞瘤16.间变性B细胞淋巴瘤(WHO将其归入弥漫性大B细胞淋巴瘤)17.灶状阳性染色在黑色素瘤中达10%以上。

MNF-116这种抗体作用于福尔马林固定石蜡包埋的组织,它可检测许多角蛋白的表面抗原(Moll数5,6,8,17,也可能19)免疫组化表达1.上皮,包括复层鳞状上皮和单层腺上皮2.平滑肌3.淋巴结树突状细胞4.合胞体滋养层5.一些皮层神经6.浆细胞7.癌,包括:●鳞状细胞●鼻咽部●小细胞,核周圆点状强染色●肉瘤样/梭形细胞●腺癌8.间皮瘤,包括上皮样和肉瘤样9.滑膜肉瘤(梭形细胞成分显示灶状染色)10.血管肿瘤●海绵状血管皮细胞瘤●鼻窦部海棉状血管皮细胞瘤●上皮样血管肉瘤11.促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤12.脊索瘤13.肾外横纹肌样肿瘤14.肌上皮瘤15.卵黄囊肿瘤16.平滑肌肿瘤17.浆细胞瘤18.原始神经外胚层肿瘤(通常灶状阳性)诊断应用作为上皮性肿瘤的一线标志物,由于其它大部分肿瘤可能表达阳性而具有局限性,如上面所列的肿瘤。

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